ลำดับการจำลองตัวเองแบบอัตโนมัติ
ลำดับการจำลองตัวเองแบบอิสระ ( ARSหรือars [ 1 ] ) ประกอบด้วยต้นกำเนิดการจำลองในจีโนม ของ ยีสต์ ARS ของS. cerevisiaeมีความยาวขั้นต่ำ 125 bp และประกอบด้วยสี่ภูมิภาค (A, B1, B2 และ B3) ซึ่งตั้งชื่อตามลำดับผลกระทบต่อ ความเสถียร ของพลาสมิดโดเมน A มีการอนุรักษ์สูง การกลายพันธุ์ใดๆ จะทำให้การทำงานของต้นกำเนิดหายไป การกลายพันธุ์ใน B1, B2 และ B3 จะทำให้การทำงานของต้นกำเนิดลดลง แต่จะไม่ทำให้การทำงานหยุดชะงัก
องค์ประกอบ A มีการอนุรักษ์ไว้อย่างสูง โดยประกอบด้วยลำดับคอนเซนซัส:
5'- T/ATTTAYRTTTT/A -3'
(โดยที่YคือไพริมิดีนและRคือพิวรีน ) เมื่อองค์ประกอบนี้เกิดการกลายพันธุ์ ARS จะสูญเสียการทำงานทั้งหมด
ดังที่เห็นข้างต้น ARS มีปริมาณ AT สูงมาก ซึ่งทำให้โปรตีนที่เกี่ยวข้องกับการจำลองแบบสามารถทำลายพันธะไฮโดรเจนในบริเวณนั้นได้ง่าย โปรตีนคอมเพล็กซ์ ORC ( origin recognition complex ) จะจับอยู่ที่ ARS ตลอดวงจรเซลล์ทำให้โปรตีนที่เกี่ยวข้องกับการจำลองแบบสามารถเข้าถึง ARS ได้
การวิเคราะห์การกลายพันธุ์ขององค์ประกอบ ARS ในยีสต์แสดงให้เห็นว่า การกลายพันธุ์ใดๆ ในบริเวณ B1, B2 และ B3 ส่งผลให้การทำงานขององค์ประกอบ ARS ลดลง ส่วนการกลายพันธุ์ในบริเวณ A ส่งผลให้สูญเสียการทำงานโดยสมบูรณ์
การหลอมละลายของ DNA เกิดขึ้นภายในโดเมน B2 ซึ่งถูกกระตุ้นโดยการยึดเกาะของปัจจัยการจับ ARS 1 กับ B3 โดเมน A1 และ B1 จับกับคอมเพล็กซ์การจดจำต้นกำเนิด
เพื่อระบุลำดับเหล่านี้[ 2 ]ยีสต์กลายพันธุ์ที่ไม่สามารถสังเคราะห์ฮิสติดีนได้ถูกแปลงสภาพด้วยพลาสมิดที่มียีน His และชิ้นส่วนแบบสุ่มของจีโนมยีสต์ หากชิ้นส่วนจีโนมมีต้นกำเนิดของการจำลองแบบ เซลล์จะสามารถเจริญเติบโตได้ในอาหารเลี้ยงเชื้อที่ขาดฮิสติดีน ลำดับเหล่านี้เรียกว่าลำดับที่จำลองแบบได้เอง เนื่องจากพวกมันถูกจำลองแบบและสืบทอดโดยลูกหลานโดยไม่ต้องรวมเข้ากับโครโมโซม ของ โฮสต์