อ่าน 5 นาที
โครโมโปรตีน
เม็ดสีชีวภาพ/ข้อผิดพลาด CS1: วันที่ ISBN/โปรตีน
โครโมโปรตีนคือโปรตีนคอนจูเกตที่มีกลุ่มโปรสเตติกที่มีเม็ดสี (หรือโคแฟคเตอร์) ตัวอย่างที่พบได้ทั่วไปคือฮีโมโกลบินซึ่งมี โคแฟคเตอร์ ฮีมซึ่งเป็น โมเลกุลที่มีธาตุ เหล็กที่ทำให้ เลือด...
โครโมโปรตีน
โครโมโปรตีนคือโปรตีนคอนจูเกตที่มีกลุ่มโปรสเตติกที่มีเม็ดสี (หรือโคแฟคเตอร์) ตัวอย่างที่พบได้ทั่วไปคือฮีโมโกลบินซึ่งมี โคแฟคเตอร์ ฮีมซึ่งเป็น โมเลกุลที่มีธาตุ เหล็กที่ทำให้ เลือด ที่มีออกซิเจน ปรากฏเป็นสีแดง ตัวอย่างอื่นๆ ของโครโมโปรตีน ได้แก่ ฮีโมโครมอื่นๆไซโตโครมไฟโตโครมและฟลาโวโปรตีน[ 1 ]
ในฮีโมโกลบินมีโครโมโปรตีน ( เทตราเมอร์ น้ำหนักโมเลกุล: 4 x 16.125 = 64.500) ซึ่งก็คือฮีม ประกอบด้วย Fe++ และวงแหวน ไพร์โรล สี่วง
โครโมโปรตีนตัวเดียวสามารถทำหน้าที่ได้ทั้งไฟโตโครมและโฟโตโทรปินเนื่องจากการมีอยู่และการประมวลผลของโครโมฟอร์หลายตัว ไฟโตโครมในเฟิร์นประกอบด้วยPHY3ซึ่งมีโฟโตรีเซปเตอร์ที่ผิดปกติที่มีช่องสัญญาณคู่ซึ่งมีทั้งไฟโตโครม (รับรู้แสงสีแดง) และโฟโตโทรปิน (รับรู้แสงสีน้ำเงิน) และสิ่งนี้ช่วยให้พืชเฟิร์นเจริญเติบโตได้ในแสงแดดน้อย[ 2 ]
โปรตีน ตระกูล GFPประกอบด้วยทั้งโปรตีนเรืองแสงและโครโมโปรตีนที่ไม่เรืองแสง โครโมโปรตีนที่ไม่เรืองแสงสามารถเปลี่ยนเป็นโครโมโปรตีนเรืองแสงได้โดยการกลายพันธุ์หรือการฉายรังสี[ 3 ] ตัวอย่างของโครโมโปรตีนที่เปลี่ยนรูปดังกล่าวคือ "โปรตีนเรืองแสงแบบจุดประกาย" หรือ KFP1 ซึ่งเปลี่ยนจากโครโมโปรตีน Anemonia sulcataที่ไม่เรืองแสงซึ่งกลายพันธุ์เป็นโครโมโปรตีนเรืองแสง[ 4 ]
ดอกไม้ทะเลมีโครโมโปรตีนสีม่วง shCP ที่มีโครโมฟอร์คล้าย GFP ในรูปแบบทรานส์โครโมฟอร์นี้ได้มาจาก Glu-63, Tyr-64 และ Gly-65 และกลุ่มฟีนอลของ Tyr-64 มีบทบาทสำคัญในการสร้างระบบคอนจูเกตกับ หมู่ไอ มีดาโซลิโดนส่งผลให้มีการดูดกลืนแสงสูงในสเปกตรัมการดูดกลืนแสงของโครโมโปรตีนในสถานะกระตุ้น การแทนที่ไทโรซีนด้วยกรดอะมิโนอื่นๆ นำไปสู่การเปลี่ยนแปลงคุณสมบัติทางแสงและไม่เป็นระนาบของโครโมโปรตีน โปรตีนเรืองแสง เช่น โครโมโปรตีนของแอนโทรซัว ปล่อยคลื่นความยาวคลื่นยาว[ 4 ]
โครโมโปรตีน 14 ชนิดได้รับการออกแบบให้แสดงออกในE. coliสำหรับชีววิทยาเชิงสังเคราะห์ [ 5 ] อย่างไรก็ตามโครโมโปรตีนก่อให้เกิดความเป็นพิษสูงต่อ โฮสต์ E. coliส่งผลให้สูญเสียสี mRFP1 ซึ่งเป็นโปรตีนเรืองแสงสีแดง แบบโมโนเมอ ร์[ 6 ]ซึ่งแสดงสีที่แตกต่างกันภายใต้แสงโดยรอบ พบว่ามีความเป็นพิษน้อยกว่า[ 7 ]การกลายพันธุ์ที่เปลี่ยนสีบนกรดอะมิโน 64–65 ของฟลูออโรฟอร์ mRFP1 ได้ทำเพื่อให้ได้สีที่แตกต่างกัน
โครโมโปรตีนมีคุณค่าในชีววิทยาเชิงสังเคราะห์ วิศวกรรมพันธุกรรม และเทคโนโลยีชีวภาพในฐานะเครื่องหมายที่มองเห็นได้สำหรับการติดตามการแสดงออกของยีน การทดสอบการทำงานของเซลล์ และการสร้างไบโอเซนเซอร์ที่มีสีสัน[ 8 ] [ 9 ]
โครงสร้าง
โครโมโปรตีนแสดงแถบการดูดกลืนอิเล็กตรอนอย่างสม่ำเสมอในช่วงสเปกตรัมใกล้รังสีอินฟราเรด ใกล้รังสีอัลตราไวโอเลต หรือช่วงที่มองเห็นได้[ 10 ]แถบเหล่านี้เกิดจากการถ่ายโอนประจุของไอออนโลหะหรือ การเปลี่ยนกลุ่มโปรสเตติกπ → π * [ 10 ]นี่คือเหตุผลที่พวกมันทำหน้าที่เป็นตัวรับแสงในพืช เอนไซม์ หรือโปรตีนถ่ายโอนอิเล็กตรอน[ 10 ]รงควัตถุสังเคราะห์แสงและตัวรับแสงประกอบด้วยโครโมฟอร์ที่ยึดติดกับเตตระไพร์โรลเชิงเส้นหรือแบบวงจรด้วยพันธะโควาเลนต์ และโรดอปซินประกอบด้วยโครโมฟอร์ที่ยึดติดกับอะโปโปรตีนด้วยพันธะโควาเลนต์[ 10 ]โครโมฟอร์ยึดติดเนื่องจากทำหน้าที่เป็นเบสชิฟฟ์[ 10 ]โดยส่วนใหญ่ประกอบด้วยโครงสร้างเบต้าบาร์เรล 11 แผ่นและโครโมฟอร์ในอัลฟาเฮลิกซ์ ซึ่งโดยทั่วไปเกิดจากการโต้ตอบของกรดอะมิโน 3 ตัวที่นำไปสู่ส่วนประกอบอิมิดาโซลิดีน[ 11 ]โครโมโปรตีนหลายชนิดมีอายุยืนยาวภายในเซลล์และมีความเสถียรต่อความร้อนอันเป็นผลมาจากโครงสร้างเตตระเมอร์[ 11 ]
ตัวอย่าง
โรดอปซินเป็นโครโมโปรตีนที่พบในแบคทีเรียและสัตว์มีกระดูกสันหลัง ประกอบด้วยออปซินและ 11- ซิส -เรตินัล[ 12 ]สำหรับหลายสปีชีส์รวมถึงมนุษย์ โรดอปซินมีความสำคัญต่อการมองเห็นที่เพียงพอ เนื่องจากช่วยให้มองเห็นได้ในสภาพแสงน้อย[ 12 ]เมื่อสัมผัสกับแสง 11- ซิส-เรตินัลจะถูกเปลี่ยนเป็นออล-ท รานส์- เรตินัล ซึ่งจะเปลี่ยนโครงสร้างของโมเลกุลและเริ่มต้นกระบวนการเปลี่ยนแสงเป็นข้อมูลที่ส่งผ่านเส้นประสาทตา และออล-ท รานส์- เรตินัลจะถูกเปลี่ยนกลับเป็น 11- ซิส -เรตินัลหรือเก็บไว้เพื่อนำกลับมาใช้ใหม่[ 12 ]
ฮีโมโครมเป็นกลุ่มฮีมของฮีโมโกลบินและเป็นสาเหตุที่ทำให้เลือดที่มีออกซิเจนเป็นสีแดง[ 13 ]
ไซโตโครมมีหน้าที่ในการขนส่งอิเล็กตรอนในสัตว์ พืช และจุลินทรีย์แบบใช้ออกซิเจน รวมถึงปฏิกิริยารีดอกซ์[ 14 ]พบได้เป็นหลักในไมโทคอนเดรีย และมีการจัดประเภทมากมาย (ประเภท a, ประเภท b, ประเภท c และประเภท d) โดยอิงจากกลุ่มโปรสเตติกฮีม[ 14 ]ไซโตโครมประเภท c ใช้ในอะพอพโทซิส (การตายของเซลล์ตามโปรแกรม) และพบในยูคาริโอตทั้งหมด[ 14 ]นอกจากนี้ยังพบในโปรคาริโอต ซึ่งเชื่อกันว่าใช้ในการหายใจและการสังเคราะห์แสง[ 14 ]
ไฟโตโครมเป็นตัวรับแสงที่พบในพืชและจุลินทรีย์[ 15 ] [ 16 ]จุดประสงค์ของมันคือการวัดสัญญาณแสงและตอบสนองอย่างเหมาะสมโดยพิจารณาจากลักษณะ สี ความเข้ม และช่วงเวลาของแสง โดยคำนึงถึงความต้องการและระยะการพัฒนาของสิ่งมีชีวิต[ 16 ]นอกเหนือจากผลกระทบโดยตรงต่อการเจริญเติบโต การสืบพันธุ์ และโครงสร้างของพืชแล้ว ไฟโตโครมยังช่วยในกระบวนการที่เรียกว่าการหลีกเลี่ยงร่มเงา[ 16 ]การหลีกเลี่ยงร่มเงาเป็นกระบวนการที่ถูกกระตุ้นเมื่อความเข้มของแสงลดลงและสเปกตรัมของแสงเปลี่ยนแปลง ซึ่งมักเกิดจากพืชข้างเคียง[ 16 ]เมื่อไฟโตโครมตรวจพบการเปลี่ยนแปลงเหล่านี้ ทิศทางการเจริญเติบโตของพืชจะเปลี่ยนไปเพื่อเติบโตห่างจากทิศทางของการเปลี่ยนแปลงนี้ เพื่อให้พืชได้รับแสงมากขึ้น[ 16 ]
ฟลาโวโปรตีนเป็นลิแกนด์ที่มีฟลาวินนิวคลีโอไทด์อย่างน้อยหนึ่งตัวเป็นโคแฟคเตอร์รีดอกซ์หรือโคซับสเตรต[ 17 ]พวกมันมีส่วนเกี่ยวข้องในการซ่อมแซม DNA ที่เสียหาย การสังเคราะห์แสง และป้องกันความเครียดจากออกซิเดชันผ่านการกำจัดอนุมูลอิสระ พวกมันได้รับการวิจัยอย่างกว้างขวางและ 90% ของพวกมันทำปฏิกิริยารีดอกซ์[ 18 ]
โครโมโปรตีนในสิ่งมีชีวิตทางทะเล
แมงกะพรุน Cassiopea xamachana ปะการังหลายชนิด และดอกไม้ทะเลมีการแสดงออกของโครโมโปรตีน[ 9 ]พบว่า Cassiopea xamachana มีโครโมโปรตีนสีน้ำเงิน ในขณะที่ปะการังมีโครโมโปรตีนสีชมพู สีม่วง และสีน้ำเงิน[ 9 ]มีการคาดการณ์ว่าหน้าที่ของโครโมโปรตีนในปะการังคือการปกป้องปะการังจากรังสีแสงอาทิตย์โดยการสะท้อนทั้งแสงที่มองเห็นได้และแสงอินฟราเรดเมื่อกิจกรรมการสังเคราะห์แสงของความยาวคลื่นต่ำ ทำให้พลังงานส่วนเกินกระจายออกไป แต่ยังคงปล่อยให้ความยาวคลื่นที่มีกิจกรรมมากกว่าเข้าถึงซูแซนเทลลาของปะการังได้[ 9 ]นอกจากนี้ โครโมโปรตีนยังช่วยให้ปะการังต้านทานการสูญเสียซูแซนเทลลาที่เป็น symbiont เมื่อสัมผัสกับความเครียดจากความร้อน (ปะการังฟอกขาว) [ 9 ]ในดอกไม้ทะเล มีการคาดการณ์ว่าโครโมโปรตีนช่วยให้เลียนแบบหนอนแดงเพื่อดึงดูดปลาและพรางตัวจากผู้ล่า[ 9 ]
แอปพลิเคชัน
เรนโบว์สกรีน
วิธีการโคลนนิ่งทางพันธุกรรมที่รวมโครโมโปรตีนและ Gibson Assembly เพื่อทำเครื่องหมายและแยกแยะโคโลนีของ Eschericia coli ได้อย่างง่ายดาย[ 19 ] วิธี นี้ทำให้กระบวนการมีประสิทธิภาพมากขึ้น เนื่องจากไม่จำเป็นต้องมีการจัดการทางพันธุกรรมเพิ่มเติม และโครโมโปรตีนจะเปิดเผยโคโลนีปลอม[ 19 ]วิธีนี้ช่วยลดต้นทุนและเพิ่มประสิทธิภาพและความแม่นยำได้มากกว่า 80% [ 19 ]
การพัฒนาไบโอเซนเซอร์
โครโมโปรตีนสามารถใช้ในการพัฒนาไบโอเซนเซอร์ได้[ 20 ]ไบโอเซนเซอร์ใช้เพื่อวัตถุประสงค์หลายประการ รวมถึงการวินิจฉัยทางการแพทย์ การติดตามความคืบหน้าของโรค นิติวิทยาศาสตร์ การค้นพบยา การตรวจสอบสิ่งแวดล้อม และความปลอดภัยของอาหาร[ 20 ]โดยการสร้างสัญญาณที่เป็นสัดส่วนกับความเข้มข้นของสารวิเคราะห์ (สารที่กำลังวัด) ของปฏิกิริยา[ 20 ]
ข้อจำกัดของโครโมโปรตีน
อย่างไรก็ตาม ผู้เชี่ยวชาญมักใช้โปรตีนเรืองแสงชนิดอื่น เนื่องจากโครโมโปรตีนไม่มีลักษณะโครงสร้างที่เพียงพอ ซึ่งเป็นส่วนสำคัญของวิศวกรรมโปรตีน[ 20 ]โครโมโปรตีนที่ใช้ในการย้อมสีตัวอย่าง E. Coli ต้องมีการแสดงออกมากเกินไปจึงจะใช้งานได้ ส่งผลให้มีต้นทุนด้านความเหมาะสมสำหรับโครโมโปรตีนสีเข้มที่มีประสิทธิภาพมากที่สุด[ 7 ]พลาสมิดที่เข้ารหัสโครโมโปรตีนเหล่านี้ส่งผลให้สูญเสียสีเนื่องจากการกลายพันธุ์ในวัฒนธรรมของเหลว[ 7 ]พบว่าโปรตีนเรืองแสงสีแดงโมโนเมอร์ 1 (mRFP1) เป็นตัวทดแทนที่เหมาะสม เนื่องจากสามารถทำเครื่องหมาย E. Coli ได้อย่างมีประสิทธิภาพ แต่มีต้นทุนด้านความเหมาะสมน้อยที่สุด[ 7 ]ยีนโครโมโปรตีนใน E. Coli ยังส่งผลให้เกิดความเป็นพิษต่อเซลล์ ซึ่งบ่งชี้ถึงการรวมตัวของโปรตีนที่เป็นอันตราย ดังที่พบจากข้อมูลโอลิโกเมอไรเซชัน ระดับการแสดงออก และอินคลูชันบอดี้[ 7 ]ตัวแปรโมโนเมอร์ยังมีข้อได้เปรียบเหนือโครโมโปรตีนในการทดลองติดแท็กฟิวชั่น[ 7 ]การเกิดโอลิโกเมอไรเซชันของโครโมโปรตีนนำไปสู่การรวมกลุ่มของโปรตีนเมื่อมีการแสดงออกมากเกินไปในเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมและแบคทีเรียต่างชนิดกัน[ 11 ]
สรุปเนื้อหา
ข้อมูลสำคัญจากบทความ
ข้อมูลสำคัญเกี่ยวกับ โครโมโปรตีน
โครโมโปรตีนคือโปรตีนคอนจูเกตที่มีกลุ่มโปรสเตติกที่มีเม็ดสี (หรือโคแฟคเตอร์) ตัวอย่างที่พบได้ทั่วไปคือฮีโมโกลบินซึ่งมี โคแฟคเตอร์ ฮีมซึ่งเป็น โมเลกุลที่มีธาตุ เหล็กที่ทำให้ เลือด...
โครงสร้าง
โครโมโปรตีนแสดงแถบการดูดกลืนอิเล็กตรอนอย่างสม่ำเสมอในช่วงสเปกตรัมใกล้รังสีอินฟราเรด ใกล้รังสีอัลตราไวโอเลต หรือช่วงที่มองเห็นได้ [ 10 ] แถบเหล่านี้เกิดจากการถ่ายโอนประจุของไอออนโลหะหรือ การเปลี่ยนกลุ่มโปรสเตติก π → π * [ 10 ]...
ตัวอย่าง
โรดอปซิน เป็นโครโมโปรตีนที่พบในแบคทีเรียและสัตว์มีกระดูกสันหลัง ประกอบด้วยออปซินและ 11- ซิส -เรตินัล [ 12 ] สำหรับหลายสปีชีส์รวมถึงมนุษย์ โรดอปซินมีความสำคัญต่อการมองเห็นที่เพียงพอ เนื่องจากช่วยให้มองเห็นได้ในสภาพแสงน้อย [ 12 ] เมื่อสัมผัสกับแสง 11- ซิส-...
โครโมโปรตีนในสิ่งมีชีวิตทางทะเล
แมงกะพรุน Cassiopea xamachana ปะการังหลายชนิด และดอกไม้ทะเลมีการแสดงออกของโครโมโปรตีน [ 9 ] พบว่า Cassiopea xamachana มีโครโมโปรตีนสีน้ำเงิน ในขณะที่ปะการังมีโครโมโปรตีนสีชมพู สีม่วง และสีน้ำเงิน [ 9 ]...