การทดสอบการตรึงคอมพลีเมนต์ (Complement fixation test ) เป็นการ ทดสอบ ทางการแพทย์ทางภูมิคุ้มกันวิทยา ที่สามารถใช้ตรวจหาการมีอยู่ของแอนติบอดี จำเพาะ หรือแอนติเจน จำเพาะใน ซีรั่มของผู้ป่วยโดยพิจารณาจาก การเกิด การตรึงคอมพลีเมนต์การทดสอบนี้เคยใช้กันอย่างแพร่หลายในการวินิจฉัยการติดเชื้อ โดยเฉพาะอย่างยิ่งจุลินทรีย์ที่ไม่สามารถตรวจพบได้ง่ายด้วยวิธีการเพาะเลี้ยง และในโรคไขข้อ อย่างไรก็ตาม ในห้องปฏิบัติการวินิจฉัยทางคลินิก การทดสอบนี้ถูกแทนที่ด้วยวิธีการทางซีรั่มวิทยาอื่นๆ เช่นELISAและวิธีการตรวจหาเชื้อโรคโดยใช้ดีเอ็นเอ โดยเฉพาะอย่างยิ่งPCRเป็น ส่วนใหญ่

ระบบคอมพลีเมนต์เป็นระบบของโปรตีนในซีรั่มที่ทำปฏิกิริยากับสารเชิงซ้อนแอนติเจน-แอนติบอดี หากปฏิกิริยานี้เกิดขึ้นบนพื้นผิวเซลล์ จะส่งผลให้เกิดการสร้างรูพรุนข้ามเยื่อหุ้มเซลล์และทำให้เซลล์ถูกทำลาย ขั้นตอนพื้นฐานของการทดสอบการตรึงคอมพลีเมนต์มีดังนี้: ^{[ 1 ]}

1. แยกซีรั่มออกจากผู้ป่วย
2. โดยธรรมชาติแล้วผู้ป่วยแต่ละรายจะมีระดับโปรตีนคอมพลีเมนต์ในซีรั่มแตกต่างกัน เพื่อลดผลกระทบใดๆ ที่อาจเกิดขึ้นกับการทดสอบ โปรตีนคอมพลีเมนต์ในซีรั่มของผู้ป่วยจะต้องถูกทำลายและแทนที่ด้วยโปรตีนคอมพลีเมนต์มาตรฐานในปริมาณที่ทราบแน่ชัด
   1. เซรั่มจะถูกให้ความร้อนในลักษณะที่โปรตีนคอมพลีเมนต์ทั้งหมดถูกทำลาย แต่แอนติบอดีจะไม่ถูกทำลาย (ซึ่งเป็นไปได้เพราะโปรตีนคอมพลีเมนต์ไวต่อการถูกทำลายด้วยความร้อนมากกว่าแอนติบอดีมาก)
   2. มีการเติมโปรตีนคอมพลีเมนต์มาตรฐานในปริมาณที่ทราบแล้วลงในซีรั่ม (โปรตีนเหล่านี้มักได้มาจากซีรั่มของหนูตะเภา)
3. เติมแอนติเจนที่สนใจลงในซีรั่ม
4. เซลล์เม็ดเลือดแดงของแกะ(sRBCs) ^{[ 2 ]}ซึ่งถูกจับกับแอนติบอดี anti-sRBC ไว้ล่วงหน้าจะถูกเติมลงในซีรั่ม การทดสอบจะถือว่าให้ผลลบหากสารละลายเปลี่ยนเป็นสีชมพู (กล่าวคือ เกิดภาวะเม็ดเลือดแดงแตก ) ในขั้นตอนนี้ และให้ผลบวกในกรณีอื่น ๆ

หากซีรั่มของผู้ป่วยมีแอนติบอดีต่อแอนติเจนที่สนใจ แอนติบอดีเหล่านั้นจะจับกับแอนติเจนในขั้นตอนที่ 3 เพื่อสร้างสารเชิงซ้อนแอนติเจน-แอนติบอดี โปรตีนคอมพลีเมนต์จะทำปฏิกิริยากับสารเชิงซ้อนเหล่านี้และถูกกำจัดออกไป ดังนั้นเมื่อเติมสารเชิงซ้อน sRBC-แอนติบอดีในขั้นตอนที่ 4 จะไม่มีคอมพลีเมนต์เหลืออยู่ในซีรั่ม อย่างไรก็ตาม หากไม่มีแอนติบอดีต่อแอนติเจนที่สนใจ คอมพลีเมนต์จะไม่ถูกกำจัดออกไปและจะทำปฏิกิริยากับสารเชิงซ้อน sRBC-แอนติบอดีที่เติมในขั้นตอนที่ 4 ทำให้ sRBC แตกตัวและปล่อยสารภายในออกมาในสารละลาย ส่งผลให้สารละลายเปลี่ยนเป็นสีชมพู^{[ 1 ]}

แม้ว่าการตรวจหาแอนติบอดีจะเป็นรูปแบบการทดสอบที่พบได้บ่อยที่สุด แต่ก็สามารถทดสอบการมีอยู่ของแอนติเจนได้เช่นกัน ในกรณีนี้ จะมีการเติมแอนติบอดีจำเพาะลงในซีรั่มของผู้ป่วยเพื่อกระตุ้นให้เกิดการสร้างสารเชิงซ้อน จากนั้นจึงเติมคอมพลีเมนต์และเม็ดเลือดแดงตัวบ่งชี้ (sRBC) เช่นเดียวกับที่กล่าวมาข้างต้น

สามารถทำการทดสอบเชิงปริมาณได้โดยการเตรียมซีรั่มของผู้ป่วยในระดับความเจือจางต่างๆ และหาค่าความเจือจางสูงสุดที่ยังคงให้ผลการทดสอบ CF เป็นบวก ค่าความเจือจางนี้สอดคล้องกับค่าไท เตอร์

• การทดสอบการตรึงคอมพลีเมนต์ ใน หัวข้อทางการ แพทย์ (MeSH) ของหอสมุดแห่งชาติสหรัฐอเมริกา