วิกิพีเดียภาษาไทย
กลับไปหน้าบทความ

อ่าน 10 นาที

การย้อมสี H&E

การย้อมสีฮีมาทอกซิลินและอีโอซิน ( หรือการย้อมสีฮีมาทอกซิลินและอีโอซินหรือการย้อมสีฮีมาทอกซิลิน-อีโอ ซิน ; มักย่อว่าการย้อมสี H&Eหรือการย้อมสี HE ) เป็นหนึ่งในการย้อมสี...

การย้อมสี H&E

ประเภทหลักของการย้อมสี H&E คือ สารที่ชอบสีเบส (Basophilic) ซึ่งหมายถึงสารที่ชอบสีเฮมาทอกซี (Hematoxyphilic) (เป็นสีย้อมพื้นฐาน) ส่วนสารที่ไม่ชอบสี (Chromophobic) จะไม่ติดสีกับสารทั้งสองชนิดนี้
เรตินา (ส่วนหนึ่งของดวงตา ) ย้อมด้วยฮีมาทอกซิลินและอีโอซินนิวเคลียสของเซลล์ย้อมติดสีน้ำเงินม่วง และสารนอกเซลล์ย้อมติดสีชมพู

การย้อมสีฮีมาทอกซิลินและอีโอซิน ( หรือการย้อมสีฮีมาทอกซิลินและอีโอซินหรือการย้อมสีฮีมาทอกซิลิน-อีโอ ซิน ; มักย่อว่าการย้อมสี H&Eหรือการย้อมสี HE ) เป็นหนึ่งในการย้อมสี เนื้อเยื่อหลัก ที่ใช้ในทางจุลพยาธิวิทยา[ 1 ] [ 2 ] [ 3 ]เป็นการย้อมสีที่ใช้กันอย่างแพร่หลายที่สุดในการวินิจฉัยทางการแพทย์[ 1 ]และมักเป็นมาตรฐานทองคำ [ 4 ] ตัวอย่างเช่น เมื่อพยาธิแพทย์ตรวจชิ้นเนื้อจากผู้ป่วย ที่สงสัยว่าเป็น มะเร็งส่วนเนื้อเยื่อทางจุลพยาธิวิทยามักจะถูกย้อมด้วย H&E

H&E คือการรวมกันของสีย้อมทางเนื้อเยื่อวิทยา 2 ชนิด ได้แก่ฮีมาทอกซิลินและอีโอซินฮีมาทอก ซิลินจะย้อม นิวเคลียส ของเซลล์ให้เป็นสี ม่วงอมน้ำเงิน และอีโอซินจะย้อมเมทริกซ์นอก เซลล์ และไซโตพลาซึมให้เป็นสีชมพู โดยโครงสร้างอื่นๆ จะมีเฉดสี โทนสี และการผสมผสานของสีเหล่านี้ที่แตกต่างกัน[ 5 ] [ 6 ]ดังนั้น พยาธิแพทย์จึงสามารถแยกแยะระหว่างส่วนนิวเคลียสและไซโตพลาซึมของเซลล์ได้อย่างง่ายดาย และนอกจากนี้ รูปแบบโดยรวมของสีจากการย้อมยังแสดงให้เห็นถึงเค้าโครงและการกระจายตัวโดยทั่วไปของเซลล์ และให้ภาพรวมทั่วไปของโครงสร้างของตัวอย่างเนื้อเยื่อ[ 7 ]ดังนั้น การจดจำรูปแบบ ทั้งโดยผู้เชี่ยวชาญที่เป็นมนุษย์เองและโดยซอฟต์แวร์ที่ช่วยผู้เชี่ยวชาญเหล่านั้น (ในพยาธิวิทยาดิจิทัล ) จึงให้ข้อมูลทางเนื้อเยื่อวิทยา

การผสมสีนี้ได้รับการแนะนำในปี พ.ศ. 2420 โดยนักเคมีNicolaus Wissozkyที่มหาวิทยาลัยจักรวรรดิคาซานในรัสเซีย[ 7 ] [ 8 ]

การใช้งาน

ขั้นตอนการย้อมสี H&E เป็นวิธีการย้อมสีหลักในเนื้อเยื่อวิทยา[ 3 ] [ 7 ] [ 2 ] [ 5 ]ส่วนหนึ่งเป็นเพราะสามารถทำได้อย่างรวดเร็ว[ 7 ]ไม่แพง และย้อมเนื้อเยื่อในลักษณะที่ทำให้เห็นกายวิภาคระดับจุลภาค จำนวนมาก [ 9 ] [ 10 ] [ 7 ] [ 5 ] [ 4 ] และสามารถใช้ในการวินิจฉัย โรคทางพยาธิวิทยาได้หลากหลาย[ 8 ]ผลลัพธ์จากการย้อมสี H&E ไม่ได้ขึ้นอยู่กับสารเคมีที่ใช้ในการตรึงเนื้อเยื่อหรือความไม่สอดคล้องกันเล็กน้อยในโปรโตคอลของห้องปฏิบัติการ มากนัก [ 11 ]และปัจจัยเหล่านี้มีส่วนทำให้มีการใช้เป็นประจำในเนื้อเยื่อวิทยา[ 7 ]

การย้อมสี H&E ไม่ได้ให้ความคมชัดเพียงพอที่จะแยกแยะเนื้อเยื่อ โครงสร้างเซลล์ หรือการกระจายตัวของสารเคมีทั้งหมดเสมอไป[ 9 ]และในกรณีเหล่านี้จะใช้สีย้อมและวิธีการที่เฉพาะเจาะจงมากขึ้น[ 10 ] [ 7 ]

วิธีการใช้งาน

นำแผ่นสไลด์ออกจากอ่างย้อมสีฮีมาทอกซิลิน

มีหลายวิธีในการเตรียมสารละลายฮีมาทอกซิลิน (สูตร) ​​ที่ใช้ในขั้นตอน H&E [ 11 ] [ 12 ] [ 6 ]นอกจากนี้ยังมีโปรโตคอลในห้องปฏิบัติการ มากมาย สำหรับการผลิตสไลด์ที่ย้อมด้วย H&E [ 9 ]ซึ่งบางส่วนอาจเป็นเฉพาะสำหรับห้องปฏิบัติการบางแห่ง[ 7 ]แม้ว่าจะไม่มีขั้นตอนมาตรฐาน[ 11 ] [ 9 ] แต่ โดยทั่วไปแล้วผลลัพธ์จะมีความสอดคล้องกันในระดับหนึ่ง คือ นิวเคลียสของเซลล์จะถูกย้อมเป็นสีน้ำเงิน และไซโตพลาสซึมและเมทริกซ์นอก เซลล์ จะถูกย้อมเป็นสีชมพู[ 7 ]ห้องปฏิบัติการด้านเนื้อเยื่อวิทยาอาจปรับปริมาณหรือชนิดของการย้อมสีสำหรับพยาธิแพทย์เฉพาะทางได้เช่นกัน[ 7 ]

หลังจากเก็บเนื้อเยื่อ (มักจะเป็นชิ้นเนื้อ จากการตรวจชิ้นเนื้อ ) และตรึงไว้แล้ว โดยทั่วไปจะทำการกำจัดน้ำออกและฝังในขี้ผึ้งพาราฟิน ที่หลอมเหลว จากนั้นจึงนำบล็อกที่ได้ไปติดบนไมโครโทมและตัดเป็นชิ้นบางๆ[ 6 ]ชิ้นเนื้อจะถูกติดลงบนสไลด์กล้องจุลทรรศน์ จากนั้นจึงนำขี้ผึ้งออกด้วยตัวทำละลาย และชิ้นเนื้อที่ติดอยู่บนสไลด์จะถูกทำให้ชุ่มชื้นอีกครั้งและพร้อมสำหรับการย้อมสี[ 6 ]หรืออีกทางเลือกหนึ่ง การย้อมสี H&E เป็นการย้อมสีที่ใช้มากที่สุดในการผ่าตัด Mohsซึ่งโดยทั่วไปเนื้อเยื่อจะถูกแช่แข็ง ตัดบนไครโอสแตท (ไมโครโทมที่ตัดเนื้อเยื่อแช่แข็ง) ตรึงด้วยแอลกอฮอล์ แล้วจึงย้อมสี[ 9 ]

วิธีการย้อมสี H&E เกี่ยวข้องกับการใช้ฮีมาทอกซิลินผสมกับเกลือโลหะหรือมอร์แดน ท์ ซึ่งมักจะตามด้วยการล้างในสารละลายกรดอ่อนเพื่อขจัดคราบสีส่วนเกิน ( การแยกความแตกต่าง ) ตามด้วยการย้อมสีน้ำเงินในน้ำด่าง อ่อนๆ [ 13 ] [ 8 ] [ 14 ]หลังจากใช้ฮีมาทอกซิลินแล้ว เนื้อเยื่อจะถูกย้อมสีเพิ่มเติมด้วยอีโอซิน (โดยทั่วไปคืออีโอซิน Y ) [ 6 ] [ 8 ] [ 7 ]

ผลลัพธ์

ฮีมาทอกซิลินส่วนใหญ่จะย้อมนิวเคลียสของเซลล์ ให้ เป็นสีน้ำเงินหรือม่วงเข้ม[ 6 ] [ 15 ] [ 14 ]พร้อมกับเนื้อเยื่ออื่นๆ อีกเล็กน้อย เช่น เม็ดเครา โทไฮอาลินและ วัสดุ ที่เกิดการตกตะกอนของแคลเซียมอีโอซินจะย้อมไซโตพลาสซึมและโครงสร้างอื่นๆ รวมถึงเมทริกซ์นอกเซลล์เช่นคอลลาเจน [ 5 ] [ 7 ] [ 14 ] ให้เป็นสีชมพูได้ถึงห้าเฉดสี[ 8 ] โครงสร้าง อีโอซิโนฟิลิก ( สารที่ถูกย้อมด้วยอีโอซิน) [ 5 ]โดยทั่วไปประกอบด้วยโปรตีน ภายในเซลล์หรือภายนอก เซลล์ เลวีบอดี้และมัลลอรีบอดี้ เป็นตัวอย่างของโครงสร้างอีโอซิโนฟิลิก ไซโตพลาสซึมส่วนใหญ่เป็นอีโอซิโนฟิลิกและมีสีชมพู[ 10 ] [ 15 ]เซลล์เม็ดเลือดแดงจะถูกย้อมเป็นสีแดงเข้ม

กลไกการออกฤทธิ์

แม้ว่าเฮมาทีนซึ่งเป็น รูปแบบ ออกซิไดซ์ของเฮมาทอกซิลิน[ 5 ] [ 16 ] [ 14 ]จะเป็นสารให้สีที่ออกฤทธิ์ (เมื่อรวมกับสารช่วยยึดสี) แต่สีย้อมนี้ก็ยังคงถูกเรียกว่าเฮมาทอกซิลิน [ 8 ] [ 13 ] เฮมาทอกซิลิน เมื่อรวมกับสารช่วยยึดสี (โดยทั่วไปคืออะลูมิเนียมอะลัม ) มักถูกพิจารณาว่า "คล้ายคลึง" [ 10 ] กับ สีย้อมพื้นฐานที่มีประจุบวกหรือแคตไอออน[ 5 ]อีโอซินเป็น สี ย้อม แอนไอออนิก (มีประจุลบ) และเป็นกรด[ 5 ] [ 10 ]การย้อมนิวเคลียสด้วยเฮมาลัม (การรวมกันของไอออนอะลูมิเนียมและเฮมาทีน) [ 14 ]โดยปกติเกิดจากการจับกันของสารเชิงซ้อนของสีย้อมกับโลหะกับ DNA แต่การย้อมนิวเคลียสสามารถทำได้หลังจากสกัด DNA [ 14 ]จากส่วนของเนื้อเยื่อ กลไกนี้แตกต่างจากการย้อมนิวเคลียสด้วยสีย้อมพื้นฐาน (ประจุบวก) เช่นไทโอนีนหรือ โทลูอิดีน บลู[ 10 ]การย้อมด้วยสีย้อมพื้นฐานเกิดขึ้นเฉพาะจากสารละลายที่มีความเป็นกรดน้อยกว่าเฮมาลัม และถูกป้องกันโดยการสกัดกรดนิวคลีอิกด้วยสารเคมีหรือเอนไซม์ก่อนหน้านี้ มีหลักฐานบ่งชี้ว่าพันธะโคออร์ดิเนต คล้ายกับพันธะที่ยึดอะลูมิเนียมและเฮมาทีนเข้าด้วยกัน จะยึดคอมเพล็กซ์เฮมาลัมเข้ากับ DNA และกลุ่มคาร์บอกซิลของโปรตีนในโครมาติน ของ นิวเคลียส

โครงสร้างไม่จำเป็นต้องมีฤทธิ์เป็นกรดหรือเบสจึงจะเรียกว่าเป็นเบโซฟิลิกและอีโอซิโนฟิลิกได้ คำศัพท์นี้ขึ้นอยู่กับความสัมพันธ์ของส่วนประกอบในเซลล์กับสีย้อม สีอื่นๆ เช่น สีเหลืองและสีน้ำตาล อาจพบได้ในตัวอย่าง ซึ่งเกิดจากเม็ดสีภายใน เช่นเมลานินเยื่อฐานจำเป็นต้องย้อมด้วยสีย้อม PASหรือสีเงิน บางชนิด หากต้องการให้มองเห็นได้ชัดเจนเส้นใยร่างแหก็ต้องการสีเงินเช่นกัน โครงสร้างที่ไม่ชอบน้ำมักจะยังคงใสอยู่ โครงสร้างเหล่านี้มักอุดมไปด้วยไขมัน เช่นเซลล์ไขมันไมอีลินรอบแกน ประสาท และเยื่อหุ้มเครื่องมือก็อลจิ

ตัวอย่างเนื้อเยื่อที่ย้อมด้วย H&E

  1. 1 2 Titford, M. (2005). "ประวัติศาสตร์อันยาวนานของฮีมาทอกซิลิน". Biotechnic & Histochemistry . 80 (2): 73– 80. doi : 10.1080/10520290500138372 . PMID 16195172 . S2CID 20338201 .  
  2. 1 2 Smith C (2006). "หนี้บุญคุณของเราต่อต้นล็อกวูด: ประวัติของฮีมาทอกซิลิน" MLO Med Lab Obs . 38 (5): 18, 20– 2. PMID 16761865 . 
  3. 1 2 Dapson RW, Horobin RW (2009). "สีย้อมจากมุมมองของศตวรรษที่ 21" Biotech Histochem . 84 (4): 135– 7. doi : 10.1080/10520290902908802 . PMID 19384743 . S2CID 28563610 .  
  4. 1 2 Rosai J (2007). "เหตุใดกล้องจุลทรรศน์จึงยังคงเป็นรากฐานสำคัญของพยาธิวิทยาทางศัลยกรรม" Lab Invest . 87 (5): 403– 8. doi : 10.1038/labinvest.3700551 . PMID 17401434 . 
  5. 1 2 3 4 5 6 7 8 Chan JK (2014). "สีสันอันน่าทึ่งของการย้อมฮีมาทอกซิลิน-อีโอซินในการวินิจฉัยพยาธิวิทยาทางศัลยกรรม" Int J Surg Pathol . 22 (1): 12– 32. doi : 10.1177/1066896913517939 . PMID 24406626 . S2CID 26847314 .  
  6. 1 2 3 4 5 6 Stevens, Alan (1982). "The Haematoxylins". ใน Bancroft, John; Stevens, Alan (บรรณาธิการ). ทฤษฎีและการปฏิบัติของเทคนิคทางจุลพยาธิวิทยา ( ฉบับที่ 2). Longman Group Limited. หน้า109.  
  7. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Wittekind D (2003). "การย้อมสีแบบดั้งเดิมสำหรับการวินิจฉัยทางพยาธิวิทยาตามปกติ รวมถึงบทบาทของกรดแทนนิก 1. คุณค่าและข้อจำกัดของการย้อมสีฮีมาทอกซิลิน-อีโอซิน" Biotech Histochem . 78 (5): 261– 70. doi : 10.1080/10520290310001633725 . PMID 14989644 . S2CID 10563849 .  
  8. 1 2 3 4 5 6 Titford, Michael (2009). " ความก้าวหน้าในการพัฒนาเทคนิคกล้องจุลทรรศน์สำหรับการวินิจฉัยทางพยาธิวิทยา"วารสารHistotechnology 32 (1): 9– 19. doi : 10.1179/his.2009.32.1.9 . ISSN 0147-8885 . S2CID 26801839 .  
  9. 1 2 3 4 5 Larson K, Ho HH, Anumolu PL, Chen TM (2011). "การย้อมเนื้อเยื่อด้วยฮีมาทอกซิลินและอีโอซินในการผ่าตัด Mohs micrographic: บทวิจารณ์" Dermatol Surg . 37 (8): 1089– 99. doi : 10.1111/j.1524-4725.2011.02051.x . PMID 21635628 . S2CID 2538853 .  {{cite journal}}: CS1 maint: multiple names: authors list ( link )
  10. 1 2 3 4 5 6 Ross, Michael H.; Pawlina, Wojciech (2016). Histology : a text and atlas : with correlated cell and molecular biology (7th ed.). Wolters Kluwer. 984 หน้า. ISBN     978-1451187427.
  11. 1 2 3 Schulte EK (1991). "การกำหนดมาตรฐานของสีย้อมและสารย้อมทางชีวภาพ: ข้อผิดพลาดและโอกาส" Histochemistry . 95 (4): 319– 28. doi : 10.1007/BF00266958 . PMID 1708749 . S2CID 29628388 .  
  12. ↑ Llewellyn BD (2009). "การย้อมนิวเคลียสด้วยอะลูมฮีมาทอกซิลิน". Biotech Histochem . 84 (4): 159– 77. doi : 10.1080/10520290903052899 . PMID 19579146 . S2CID 205713596 .  
  13. 1 2 Ortiz-Hidalgo C, Pina-Oviedo S (2019). "Hematoxylin: ของขวัญจากเมโสอเมริกาสู่พยาธิวิทยา Palo de Campeche (ต้นไม้ล็อกวูด) สมบัติที่โจรสลัดปรารถนามากที่สุด และสีย้อมเนื้อเยื่อที่หาที่เปรียบไม่ได้" Int J Surg Pathol . 27 (1): 4– 14. doi : 10.1177/1066896918787652 . PMID 30001639 . 
  14. 1 2 3 4 5 6 Kiernan JA (2018). "การย้อมนิวเคลียสแบบก้าวหน้าด้วยฮีมาลัม (อะลัมฮีมาทอกซิลิน) เกี่ยวข้องกับ DNA หรือไม่ และลักษณะของสารเชิงซ้อนระหว่างสีย้อมกับโครมาตินคืออะไร?" Biotech Histochem . 93 (2): 133– 148. doi : 10.1080/10520295.2017.1399466 . PMID 29320873 . S2CID 13481905 .  
  15. 1 2 Leeson, Thomas S.; Leeson, C. Roland (1981). Histology ( ฉบับที่สี่). WB Saunders Company. หน้า600. ISBN   978-0721657042.
  16. ↑ Kahr, Bart; Lovell, Scott; Subramony, Anand (1998). "ความก้าวหน้าของสารสกัดจากไม้ล็อกวูด" Chirality . 10 ( 1– 2): 66– 77. doi : 10.1002/chir.12 .

อ่านเพิ่มเติม

  • Kiernan JA (2008) วิธีการทางเนื้อเยื่อวิทยาและเคมีเนื้อเยื่อ: ทฤษฎีและการปฏิบัติ ฉบับที่ 4 บล็อกซ์แฮม สหราชอาณาจักร: Scion
  • Lillie RD, Pizzolato P, Donaldson PT (1976) การย้อมนิวเคลียสด้วยสีย้อมเมตาโครมมอร์แดนท์เลคที่ละลายได้ ผลของปฏิกิริยาการปิดกั้นหมู่ปลายทางเคมีและการนำหมู่กรดเข้าสู่เนื้อเยื่อโดยเทียม Histochemistry 49: 23–35
  • Llewellyn BD (2009) การย้อมนิวเคลียสด้วยอะลูม-ฮีมาทอกซิลิน Biotech. Histochem. 84: 159–177.
  • Puchtler H, Meloan SN, Waldrop FS (1986) การประยุกต์ใช้แนวคิดทางเคมีในปัจจุบันกับการย้อมโลหะ-ฮีมาทีนและ -บราซิลลีน ฮิสโตเคมี 85: 353–364
  • คู่มือข้อมูลเบื้องต้นเกี่ยวกับ SIGMA-ALDRICH H&E

โปรโตคอล

  • ภาพย้อมสีฮีมาทอกซิลินและอีโอซิน (H&E) ของเมเยอร์ ( เก็บถาวรเมื่อ 2 มิถุนายน 2023 ที่Wayback Machine)
  • ขั้นตอนการย้อมสีฮีมาทอกซิลินและอีโอซิน (H&E)
  • (ห้องปฏิบัติการโรเซน ภาควิชาชีววิทยาโมเลกุลและเซลล์ วิทยาลัยแพทยศาสตร์เบย์เลอร์) ขั้นตอนการปฏิบัติทีละขั้นตอน
  • คราบ HE
ดึงข้อมูลมาจาก " https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=H%26E_stain&oldid=1310157478 "

สรุปเนื้อหา

ข้อมูลสำคัญจากบทความ

ข้อมูลสำคัญเกี่ยวกับ การย้อมสี H&E

การย้อมสีฮีมาทอกซิลินและอีโอซิน ( หรือการย้อมสีฮีมาทอกซิลินและอีโอซินหรือการย้อมสีฮีมาทอกซิลิน-อีโอ ซิน ; มักย่อว่าการย้อมสี H&Eหรือการย้อมสี HE ) เป็นหนึ่งในการย้อมสี...

การใช้งาน

ขั้นตอนการย้อมสี H&E เป็นวิธีการย้อมสีหลักในเนื้อเยื่อวิทยา [ 3 ] [ 7 ] [ 2 ] [ 5 ] ส่วนหนึ่งเป็นเพราะสามารถทำได้อย่างรวดเร็ว [ 7 ] ไม่แพง และย้อมเนื้อเยื่อในลักษณะที่ทำให้เห็น กายวิภาคระดับจุลภาค จำนวนมาก [ 9 ] [ 10 ] [ 7 ] [ 5 ] [ 4 ]...

วิธีการใช้งาน

มีหลายวิธีในการเตรียมสารละลายฮีมาทอกซิลิน (สูตร) ​​ที่ใช้ในขั้นตอน H&E [ 11 ] [ 12 ] [ 6 ] นอกจากนี้ยังมี โปรโตคอลในห้องปฏิบัติการ มากมาย สำหรับการผลิตสไลด์ที่ย้อมด้วย H&E [ 9 ] ซึ่งบางส่วนอาจเป็นเฉพาะสำหรับห้องปฏิบัติการบางแห่ง [ 7 ]...

ผลลัพธ์

ฮีมาทอกซิลินส่วนใหญ่จะย้อม นิวเคลียส ของ เซลล์ ให้ เป็นสีน้ำเงินหรือม่วงเข้ม [ 6 ] [ 15 ] [ 14 ] พร้อมกับเนื้อเยื่ออื่นๆ อีกเล็กน้อย เช่น เม็ดเครา โทไฮอาลิน และ วัสดุ ที่เกิดการตกตะกอนของแคลเซียม อีโอซินจะย้อมไซ โตพลาสซึม และโครงสร้างอื่นๆ รวมถึง...