เอฟเฟกต์ตะขอ
ปรากฏการณ์ฮุค ( Hook effect)หมายถึงปรากฏการณ์โปรโซน (Prozone phenomenon ) หรือที่รู้จักกันในชื่อภาวะแอนติบอดีเกิน (Antibody excess ) หรือปรากฏการณ์โพสต์โซน (Postzone phenomenon)หรือที่รู้จักกันในชื่อภาวะแอนติเจนเกิน (Antigen excess) เป็น ปรากฏการณ์ ทางภูมิคุ้มกันวิทยาที่ประสิทธิภาพของแอนติบอดีในการสร้างสารเชิงซ้อนภูมิคุ้มกันอาจลดลงเมื่อความเข้มข้นของแอนติบอดีหรือแอนติเจนสูงมาก การสร้างสารเชิงซ้อนภูมิคุ้มกันจะหยุดเพิ่มขึ้นเมื่อความเข้มข้นสูงขึ้น และจะลดลงเมื่อความเข้มข้นสูงมาก ทำให้เกิด รูปทรง ตะขอในกราฟการวัด ความสำคัญในทางปฏิบัติของปรากฏการณ์นี้คือเป็นรูปแบบหนึ่งของการรบกวนที่มักเกิดขึ้นกับวิธี การตรวจ วิเคราะห์ทางภูมิคุ้มกันและวิธีการตรวจวิเคราะห์แบบเนเฟโลเมตริก บางชนิด ส่งผลให้เกิดผลลบเท็จหรือผลลัพธ์ที่ต่ำกว่าความเป็นจริง การรบกวนรูปแบบอื่นๆ ที่พบบ่อย ได้แก่ การรบกวนจากแอนติบอดีปฏิกิริยาข้ามสายพันธุ์ และการรบกวนจากสัญญาณ ปรากฏการณ์นี้เกิดจากความเข้มข้นสูงมากของ สารวิเคราะห์หรือแอนติบอดีชนิดใดชนิดหนึ่ง และพบได้บ่อยที่สุดใน วิธีการตรวจวิเคราะห์ทางภูมิคุ้มกันแบบขั้นตอนเดียว (แซนด์วิช)
นอกจากนี้ แอนติบอดีที่ละลายน้ำได้ซึ่งรวมแอนติเจนที่ละลายน้ำได้เรียกว่าพรีซิพิติน ในขณะที่แอนติเจนที่ละลายน้ำได้ซึ่งกระตุ้นการก่อตัวของโครงสร้างตาข่าย การเชื่อมโยงข้าม เมื่อแอนติเจนและแอนติบอดีมีอยู่ในความเข้มข้นที่เหมาะสม[ 2 ] [ 3 ]
กลไกและความสำคัญในหลอดทดลอง
โปรโซน – แอนติบอดีส่วนเกิน
ใน การทดสอบ การจับกลุ่ม (agglutination test) เซรั่มของบุคคล(ซึ่งมีแอนติบอดี ) จะถูกเติมลงในหลอดทดลองที่มีแอนติเจน เฉพาะ หากแอนติบอดีทำปฏิกิริยากับแอนติเจนเพื่อสร้างสารเชิงซ้อนภูมิคุ้มกันที่เรียกว่าการจับกลุ่ม (agglutination) การทดสอบจะถูกตีความว่าเป็นบวก อย่างไรก็ตาม หากมีแอนติบอดีจำนวนมากเกินไปที่สามารถจับกับแอนติเจนได้ บริเวณแอนติเจนจะถูกเคลือบด้วยแอนติบอดี และแอนติบอดีที่มุ่งเป้าไปที่เชื้อโรคจะสามารถจับกับอนุภาคแอนติเจนได้มากกว่าหนึ่งอนุภาคเพียงเล็กน้อยหรือไม่มีเลย[ 4 ]เนื่องจากแอนติบอดีไม่ได้เชื่อมต่อระหว่างแอนติเจน จึงไม่เกิดการจับกลุ่ม ดังนั้นการทดสอบจึงถูกตีความว่าเป็นลบ ในกรณีนี้ ผลลัพธ์คือผลลบเท็จ ช่วงความเข้มข้นของแอนติบอดีที่ค่อนข้างสูงซึ่งไม่มีปฏิกิริยาเกิดขึ้นเรียกว่า prozone [ 5 ]
โพสต์โซน – แอนติเจนส่วนเกิน
ผลกระทบนี้อาจเกิดขึ้นได้เนื่องจากแอนติเจนมีมากเกินไป เมื่อทั้งแอนติบอดีจับและแอนติบอดีตรวจจับอิ่มตัวด้วยความเข้มข้นของสารวิเคราะห์ที่สูง ในกรณีนี้ จะไม่สามารถเกิดโครงสร้างแบบแซนด์วิชระหว่างแอนติบอดีจับ แอนติเจน และแอนติบอดีตรวจจับได้ ในกรณีนี้ แอนติเจนอิสระจะแข่งขันกับแอนติเจนที่ถูกจับเพื่อแย่งจับกับแอนติบอดีตรวจจับ[ 6 ]การเติมแอนติเจนและแอนติบอดีตามลำดับ ควบคู่กับการล้างอย่างเข้มงวด สามารถป้องกันผลกระทบนี้ได้ เช่นเดียวกับการเพิ่มความเข้มข้นสัมพัทธ์ของแอนติบอดีต่อแอนติเจน ซึ่งจะช่วยลดผลกระทบดังกล่าวได้
ตัวอย่างเช่น ระดับ แอนติบอดี ซิฟิลิส สูง ใน ผู้ป่วย เอชไอวีหรือระดับแอนติเจนคริปโตค็อกคัสสูงที่นำไปสู่การทดสอบผลลบเท็จในตัวอย่างที่ไม่เจือจาง[ 7 ] [ 8 ]ปรากฏการณ์นี้ยังพบได้ในการทดสอบทางซีรั่มวิทยาสำหรับโรคบรูเซลโลซิสอาจพบได้ในปฏิกิริยาการตกตะกอน แอนติบอดีที่ไม่ทำปฏิกิริยาเรียกว่าแอนติบอดีที่ปิดกั้นและป้องกันไม่ให้แอนติบอดีที่ทำให้เกิดการตกตะกอนจับกับแอนติเจน ดังนั้นปฏิกิริยาการตกตะกอนที่เหมาะสมจึงไม่เกิดขึ้น อย่างไรก็ตาม เมื่อซีรั่มถูกเจือจาง แอนติบอดีที่ปิดกั้นก็จะถูกเจือจางลงด้วย และความเข้มข้นของมันจะลดลงมากพอที่จะทำให้เกิดปฏิกิริยาการตกตะกอนที่เหมาะสมได้[ 9 ]
การสังเกตในร่างกายจริง
ลูอิส โทมัสบรรยายถึงการทดลองทางสรีรวิทยาในปี 1941 ในบันทึกความทรงจำของเขา ซึ่งเขาได้สังเกตปรากฏการณ์ prozone effect ในร่างกาย : ภูมิคุ้มกันในกระต่ายต่อ เชื้อ เมนิงโกค็อกคัสซึ่งมีความแข็งแรง กลับลดลงอย่างไม่คาดคิดเมื่อใช้การสร้างภูมิคุ้มกัน เพื่อกระตุ้นให้เกิดการตอบสนองของแอนติบอดีที่สูงขึ้น [ 10 ]กล่าวอีกนัยหนึ่ง การทำให้ร่างกายของกระต่ายผลิตแอนติบอดีต่อแบคทีเรียชนิดนี้มากขึ้น กลับมีผลตรงกันข้าม คือทำให้ภูมิคุ้มกันต่อแบคทีเรียชนิดนี้ลดลง จากมุมมองของแนวคิดที่เรียบง่ายเกินไปเกี่ยวกับความสัมพันธ์ระหว่างแอนติบอดี/แอนติเจน สิ่งนี้ดูเหมือนจะขัดแย้งกันแม้ว่าจะดูสมเหตุสมผลอย่างชัดเจนจากมุมมองที่ได้รับข้อมูลอย่างถูกต้องจากชีววิทยาโมเลกุลในปัจจุบัน โทมัสสนใจที่จะทำการวิจัยทางสรีรวิทยานี้ต่อไป และยังคงสนใจอยู่เป็นเวลาหลายทศวรรษหลังจากนั้น แต่เส้นทางอาชีพของเขาพาเขาไปในทิศทางอื่น และเขาไม่ทราบว่ามีใครทำการวิจัยนี้ต่อในช่วงเวลาที่เขาเขียนบันทึกความทรงจำ[ 10 ]ความเกี่ยวข้องประเภทหนึ่งที่เขาตั้งสมมติฐานไว้สำหรับ แนวคิด แอนติบอดีบล็อก ในร่างกายนี้ คือเป็นตัวขับเคลื่อนความไวของมนุษย์ต่อโรคติดเชื้อบางชนิด[ 10 ]ในช่วงหลายทศวรรษที่ผ่านมา แนวคิดนี้ยังพบว่ามีความเกี่ยวข้องทางคลินิกในการบำบัดภูมิแพ้ด้วยภูมิคุ้มกันโดยที่แอนติบอดีบล็อกสามารถรบกวนแอนติบอดีอื่นๆ ที่เกี่ยวข้องกับภาวะภูมิไวเกิน และด้วยเหตุนี้จึงช่วยปรับปรุงการรักษาโรคภูมิแพ้[ 11 ]