แท็กความสัมพันธ์ที่เข้ารหัสด้วยไอโซโทป ( ICAT ) เป็น วิธี การติดฉลากไอโซโทปในหลอดทดลอง ที่ใช้สำหรับ โปรตีโอ มิกส์เชิงปริมาณโดย ใช้ แมสสเปกโทรเมตรีซึ่งใช้ สาร เคมีในการติดฉลาก^{[ 1 ] [ 2 ] [ 3 ]}โพรบเคมีเหล่านี้ประกอบด้วยองค์ประกอบสามส่วน ได้แก่ กลุ่มปฏิกิริยาสำหรับติดฉลาก โซ่ข้าง ของกรดอะมิโน (เช่น ไอโอโดอะซีตาไมด์เพื่อปรับเปลี่ยน หมู่ ซิสเท อีน ) ตัวเชื่อมที่เข้ารหัสด้วยไอโซโทป และแท็ก (เช่นไบโอติน ) สำหรับการแยกโปรตีน/เปปไทด์ที่ติดฉลากด้วยความสัมพันธ์ ตัวอย่างจะถูกรวมเข้าด้วยกันแล้วแยกออกจากกันผ่านโครมาโทกราฟี จากนั้นส่งผ่านแมสสเปกโทรเมตรีเพื่อกำหนดอัตราส่วนมวลต่อประจุระหว่างโปรตีน สามารถวิเคราะห์ได้เฉพาะเปปไทด์ที่มีซิสเทอีนเท่านั้น เนื่องจากวิเคราะห์ได้เฉพาะเปปไทด์ที่มีซิสเทอีนเท่านั้น การดัดแปลงหลังการแปลจึงมักจะสูญหายไป^{[ 4 ]}

แท็กดั้งเดิมได้รับการพัฒนาโดยใช้ดิวเทอเรียมแต่ต่อมากลุ่มเดียวกันได้ออกแบบแท็กใหม่โดยใช้13Cแทนเพื่อหลีกเลี่ยงปัญหาการแยกพีคระหว่างโครมาโทกราฟีของเหลวเนื่องจากดิวเทอเรียมทำปฏิกิริยากับเฟสคงที่ของคอลัมน์^{[ 5 ]}

สำหรับการเปรียบเทียบเชิงปริมาณของโปรตีนสองตัวอย่าง ตัวอย่างหนึ่งจะถูกติดฉลากด้วยโพรบไอโซโทปเบา (d0) และอีกตัวอย่างหนึ่งจะถูกติดฉลากด้วยโพรบไอโซโทปหนัก (d8) เพื่อลดข้อผิดพลาด ตัวอย่างทั้งสองจะถูกรวมเข้าด้วยกัน จากนั้นย่อยด้วยเอนไซม์โปรตีเอส (เช่นทริปซิน ) และนำไปผ่าน กระบวนการ โครมาโทกราฟีแบบ อาศัยความสัมพันธ์กับ อะวิดิน เพื่อแยกเปปไทด์ที่ติดฉลากด้วยสารติดแท็กไอโซโทป จากนั้นเปปไทด์เหล่านี้จะถูกวิเคราะห์โดยโครมาโทกราฟีของเหลว-แมสสเปกโทรเมตรี (LC-MS) อัตราส่วนของความเข้มของสัญญาณของคู่เปปไทด์ที่มีมวลต่างกันจะถูกวัดปริมาณเพื่อกำหนดระดับสัมพัทธ์ของโปรตีนในตัวอย่างทั้งสอง