สเปกโทรสโกปีรามานแบบกระตุ้น
สเปกโทรสโกปีรามานแบบกระตุ้นหรือที่เรียกว่าการกระเจิงรามานแบบกระตุ้น ( SRS ) เป็นรูปแบบหนึ่งของสเปกโทรสโกปีที่ใช้ในฟิสิกส์ เคมี ชีววิทยา และสาขาอื่นๆ กลไกพื้นฐานคล้ายกับสเปกโทรสโกปีรามานแบบเกิดขึ้นเองคือ โฟตอนกระตุ้นที่มีความถี่เชิงมุมอนุภาคที่กระเจิงโดยโมเลกุลนั้น มีโอกาสเล็กน้อยที่จะเหนี่ยวนำให้เกิดการเปลี่ยนสถานะแบบสั่น (หรือหมุน) บางอย่าง ซึ่งแตกต่างจากการเหนี่ยวนำให้เกิดการเปลี่ยนสถานะแบบเรย์ลีอย่างง่าย ทำให้โมเลกุลปล่อยโฟตอนออกมาที่ความถี่ที่เปลี่ยนไป อย่างไรก็ตาม SRS (Spontaneous Raman Spectroscopy) แตกต่างจากสเปกโทรสโกปีรามานแบบเกิดขึ้นเอง (Spontaneous Raman Spectroscopy) ตรงที่เป็น ปรากฏการณ์ ไม่เชิงเส้น อันดับสาม ที่เกี่ยวข้องกับโฟตอนตัวที่สอง คือ โฟตอนสโตกส์ (Stokes photon) ที่มีความถี่เชิงมุม—ซึ่งกระตุ้นให้เกิดการเปลี่ยนแปลงเฉพาะ เมื่อความแตกต่างของความถี่ระหว่างโฟตอนทั้งสอง () มีลักษณะคล้ายกับการเปลี่ยนสถานะการสั่นสะเทือน (หรือการหมุน) เฉพาะอย่าง () การเกิดของการเปลี่ยนผ่านนี้ได้รับการเสริมแรงด้วยการสั่นพ้อง ใน SRS สัญญาณจะเทียบเท่ากับการเปลี่ยนแปลงความเข้มของลำแสงปั๊มและลำแสงสโตกส์ โดยทั่วไปสัญญาณจะมีค่าค่อนข้างต่ำ อยู่ในระดับส่วนหนึ่งในดังนั้นจึงจำเป็นต้องใช้เทคนิคการถ่ายโอนการมอดูเลชัน: ลำแสงหนึ่งถูกมอดูเลตในแอมพลิจูด และสัญญาณจะถูกตรวจจับบนลำแสงอีกอันผ่านเครื่องขยายสัญญาณแบบล็อคอินการใช้ลำแสงเลเซอร์ปั๊มที่มีความถี่คงที่และลำแสงเลเซอร์สโตกส์ที่มีความถี่ที่สแกน (หรือในทางกลับกัน) ช่วยให้สามารถไขปริศนาสเปกตรัมของโมเลกุลได้ ปริศนาสเปกตรัมนี้แตกต่างจากที่ได้จากวิธีการทางสเปกโทรสโกปีอื่นๆ เช่น การกระเจิงของเรย์ลี เนื่องจากทรานซิชันรามานมีกฎการยกเว้นที่แตกต่างจากที่ใช้กับทรานซิชันเรย์ลี
ประวัติศาสตร์
ปรากฏการณ์ SRS ถูกค้นพบโดยบังเอิญโดย Woodbury และ Ng ในปี 1962 [ 1 ]ในการทดลอง พวกเขานำเซลล์ Kerr ที่มีไนโตรเบนซีนเข้าไปใน โพรง เลเซอร์ทับทิมเพื่อศึกษา กระบวนการ Q-switchingซึ่งส่งผลให้เกิดการปล่อยแสงอย่างรุนแรงที่ความยาวคลื่นในย่านอินฟราเรดที่ไม่สามารถเชื่อมโยงกับความยาวคลื่นลักษณะเฉพาะของตัวกลางขยายทับทิมได้ ในตอนแรก สิ่งนี้ถูกอธิบายว่าเป็นปรากฏการณ์การเรืองแสงต่อมาจึงได้รับการตีความอย่างถูกต้องว่าเป็นการสังเกตการณ์เชิงทดลองครั้งแรกของ SRS หนึ่งปีต่อมา Garmire และคณะ[ 1 ]ได้นำเสนอกรอบการทำงานการผสมคลื่นสองคลื่นเพื่ออธิบาย SRS งานบุกเบิกเหล่านี้ได้เปิดเส้นทางใหม่ของการวิจัยและตามมาด้วยงานทางทฤษฎีและเชิงทดลองมากมายในสาขา SRS
หลักการ

คำอธิบายเชิงคุณภาพ
หลักการของ SRS สามารถเข้าใจได้โดยสัญชาตญาณโดยใช้คำอธิบายทางกลศาสตร์ควอนตัมของระดับพลังงานของโมเลกุล ในขั้นต้น โมเลกุลอยู่ในสถานะพื้นฐาน ซึ่งเป็น ระดับพลังงานอิเล็กตรอนต่ำสุด จากนั้น โมเลกุลจะดูดซับทั้งโฟตอนปั๊มและโฟตอนสโตกส์พร้อมกัน ซึ่งทำให้เกิดการเปลี่ยนสถานะการสั่น (หรือการหมุน) ด้วยความน่าจะเป็นบางอย่าง การเปลี่ยนสถานะนี้สามารถคิดได้ว่าเป็นการเปลี่ยนสถานะสองขั้นตอน โดยในขั้นตอนแรก โมเลกุลจะถูกกระตุ้นโดยโฟตอนปั๊มไปยังสถานะเสมือนและในขั้นตอนที่สอง มันจะผ่อนคลายไปยังสถานะการสั่น (หรือการหมุน) อื่นที่ไม่ใช่สถานะพื้นฐาน สถานะเสมือน ซึ่งเป็นการซ้อนทับของส่วนหางความน่าจะเป็นของสถานะจริง ไม่สามารถถูกครอบครองโดยโมเลกุลได้ อย่างไรก็ตาม การดูดซับโฟตอนสองตัวพร้อมกันอาจเป็นเส้นทางเชื่อมต่อระหว่างสถานะเริ่มต้นและสถานะสุดท้าย เมื่อความแตกต่างของพลังงานระหว่างโฟตอนปั๊มและโฟตอนสโตกส์ตรงกับความแตกต่างของพลังงานระหว่างสถานะการสั่น (หรือการหมุน) บางสถานะกับสถานะพื้นฐาน ความน่าจะเป็นสำหรับการเปลี่ยนสถานะเนื่องจากกระบวนการกระตุ้นนี้จะเพิ่มขึ้นหลายเท่า
คำอธิบายเชิงปริมาณ
โฟตอนแต่ละตัวที่เกิดปรากฏการณ์ SRS จะเปลี่ยนสีจากสีของลำแสงปั๊มไปเป็นสีของลำแสงสโตกส์ ดังนั้น สัญญาณ SRS จึงเป็นสัดส่วนกับการลดลงหรือเพิ่มขึ้นของความเข้มของลำแสงปั๊มหรือลำแสงสโตกส์ตามลำดับ สมการอัตราต่อไปนี้อธิบายการเปลี่ยนแปลงความเข้มของลำแสงเหล่านี้
ที่ไหน,และคือความเข้มของลำแสงปั๊มและลำแสงสโตกส์ ตามลำดับและคือความถี่เชิงมุมของปั๊มและสโตกส์ ตามลำดับคือพิกัดที่ลำแสงแพร่กระจายไปคือค่าสัมประสิทธิ์การขยายสัญญาณรามาน และคือค่าสัมประสิทธิ์การสูญเสีย ค่าสัมประสิทธิ์การสูญเสียเป็นค่าสัมประสิทธิ์ที่มีประสิทธิภาพซึ่งอาจอธิบายถึงการสูญเสียเนื่องจากกระบวนการต่างๆ เช่นการกระเจิงของเรย์ลี การดูดกลืนเป็นต้นสมการอัตราแรกอธิบายการเปลี่ยนแปลงความเข้มของลำแสงสโตกส์ตามความยาวปฏิสัมพันธ์ SRS พจน์แรกทางด้านขวามือเทียบเท่ากับปริมาณความเข้มที่ลำแสงสโตกส์ได้รับเนื่องจาก SRS เนื่องจาก SRS เกี่ยวข้องกับลำแสงทั้งสอง พจน์นี้จึงขึ้นอยู่กับทั้งและพจน์ที่สองเทียบเท่ากับปริมาณความเข้มที่สูญเสียไป ดังนั้นจึงขึ้นอยู่กับเท่านั้นสมการอัตราที่สองอธิบายถึงการเปลี่ยนแปลงความเข้มของลำแสงปั๊ม รูปแบบของมันคล้ายกับสมการแรก พจน์แรกทางด้านขวามือของสมการที่สองเท่ากับพจน์ที่สอดคล้องกันจากสมการแรกโดยมีตัวคูณอยู่ด้วยปัจจัยนี้สะท้อนให้เห็นว่าโฟตอนแต่ละตัว (ตรงข้ามกับหน่วยความเข้ม) ที่สูญเสียไปจากลำแสงปั๊มเนื่องจาก SRS นั้น จะถูกชดเชยด้วยลำแสงสโตกส์
ในกรณีส่วนใหญ่ เงื่อนไขการทดลองสนับสนุนสมมติฐานที่เรียบง่ายสองประการ: (1) การสูญเสียโฟตอนตามความยาวปฏิสัมพันธ์ของรามานมีค่าเล็กน้อยมากจนสามารถละเลยได้ ในทางคณิตศาสตร์ ค่านี้สอดคล้องกับ
และ (2) การเปลี่ยนแปลงความเข้มของลำแสงเป็นแบบเชิงเส้น ในทางคณิตศาสตร์ สิ่งนี้สอดคล้องกับ
- .
ดังนั้น สัญญาณ SRS ซึ่งก็คือการเปลี่ยนแปลงความเข้มของลำแสงปั๊มและลำแสงสโตกส์ จึงสามารถประมาณได้โดย
ที่ไหนและโดยที่ คือความเข้มของลำแสงปั๊มและลำแสงสโตกส์เริ่มต้น ตามลำดับ ส่วนความยาวของการปฏิสัมพันธ์แบบรามานนั้น ในหลายกรณี สามารถประเมินความยาวนี้ได้ในลักษณะเดียวกับการประเมินความยาวของเรย์ลีดังนี้
- .
ที่นี่,และโดยที่ ค่าดัชนีหักเห เฉลี่ย และขนาดลำแสงเฉลี่ยคือค่าดังกล่าว และและโดยที่ คือความยาวคลื่นของปั๊มและสโตกส์ ตามลำดับ
โมเลกุลทุกชนิดมีค่าการเลื่อนของรามานที่เป็นลักษณะเฉพาะ ซึ่งเกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนสถานะการสั่น (หรือการหมุน) ที่เฉพาะเจาะจง ความสัมพันธ์ระหว่างค่าการเลื่อนของรามานและความยาวคลื่นของโฟตอนปั๊มและสโตกส์จะกำหนดโดย
เมื่อความแตกต่างของความยาวคลื่นระหว่างเลเซอร์ทั้งสองใกล้เคียงกับการเปลี่ยนผ่านแบบรามาน ค่าสัมประสิทธิ์การขยายแบบรามานก็จะสูงขึ้นได้รับค่าตามลำดับของส่งผลให้ได้ SRS ที่มีประสิทธิภาพ เมื่อความแตกต่างนี้เริ่มแตกต่างจากการเปลี่ยนผ่านของรามานที่เฉพาะเจาะจง ค่าสัมประสิทธิ์การขยายของรามานจะลดลง และกระบวนการจะยิ่งมีประสิทธิภาพน้อยลงและตรวจจับได้ยากขึ้น
ชุดอุปกรณ์ทดลอง SRS ประกอบด้วยลำแสงเลเซอร์สองลำ (โดยปกติจะอยู่ในแนวเดียวกัน) ที่มีโพลาไรเซชันเดียวกัน ลำหนึ่งใช้เป็นลำแสงกระตุ้น (pump) และอีกหนึ่งใช้เป็นลำแสงสโตกส์ (Stokes) โดยทั่วไปแล้ว อย่างน้อยหนึ่งในเลเซอร์จะเป็นแบบพัลส์ การปรับความเข้มของเลเซอร์นี้ช่วยในการตรวจจับสัญญาณ นอกจากนี้ยังช่วยเพิ่มแอมพลิจูดของสัญญาณ ซึ่งช่วยในการตรวจจับเช่นกัน ในการออกแบบชุดอุปกรณ์ทดลองนั้น ผู้ทดลองมีอิสระอย่างมากในการเลือกเลเซอร์กระตุ้นและเลเซอร์สโตกส์ เนื่องจากเงื่อนไขรามาน (แสดงในสมการข้างต้น) ใช้ได้เฉพาะกับความแตกต่างของความยาวคลื่นเท่านั้น
การเปรียบเทียบกับวิธีการสเปกโทรสโกปีรามานแบบอื่นๆ
เนื่องจาก SRS เป็นกระบวนการที่ได้รับการเสริมประสิทธิภาพด้วยการสั่นพ้อง สัญญาณของมันจึงมีความแรงสูงกว่าการกระเจิงรามานแบบธรรมชาติหลายเท่า ทำให้เป็นเครื่องมือทางสเปกโทรสโกปีที่มีประสิทธิภาพมากกว่ามาก นอกจากนี้ ความเข้มของสัญญาณ SRS ยังสูงกว่าสเปกโทรสโกปีอีกประเภทหนึ่งที่นิยมใช้กันอย่างแพร่หลาย นั่นคือสเปกโทรสโกปีรามานแบบโคเฮเรนต์แอนติสโตกส์ (Coherent Anti-Stokes Raman Spectroscopy ) หลายเท่า SRS เกี่ยวข้องกับโฟตอนเพียงสองตัว ในขณะที่แบบหลังเกี่ยวข้องกับสามตัว ดังนั้น การเกิด SRS จึงมีโอกาสเกิดขึ้นมากกว่าและส่งผลให้ได้สัญญาณที่สูงกว่า นอกจากนี้ยังมีสเปกโทรสโกปีรามานแบบธรรมชาติอีกสองรูปแบบที่โดดเด่น คือสเปกโทรสโกปีรามานแบบเสริมประสิทธิภาพบนพื้นผิว (Surface-enhanced Raman Spectroscopy ) และสเปกโทรสโกปีรามานแบบสั่นพ้อง (Resonance Raman Spectroscopy ) แบบแรกใช้สำหรับสเปกโทรสโกปีรามานของโมเลกุลที่ดูดซับอยู่บนพื้นผิวที่ขรุขระ เช่น พื้นผิวโลหะหรือโครงสร้างนาโน ซึ่งจะขยายสัญญาณรามานให้แรงขึ้นหลายเท่า[ 2 ]วิธีหลังนี้สอดคล้องกับกระบวนการกระเจิงรามานแบบเกิดขึ้นเองโดยเลเซอร์ที่มีความถี่ใกล้เคียงกับการเปลี่ยนสถานะอิเล็กตรอนของวัตถุที่กำลังศึกษา ซึ่งอาจขยายสัญญาณได้ อย่างไรก็ตาม วิธีนี้ต้องใช้เลเซอร์ UV หรือ X-ray ที่มีกำลังสูงมาก ซึ่งอาจทำให้เกิดการเสื่อมสภาพจากแสงและอาจทำให้เกิดการเรืองแสงได้
แอปพลิเคชัน
SRS ถูกนำไปใช้ในแอปพลิเคชันต่างๆ ในหลากหลายสาขา โดยแอปพลิเคชันทั้งหมดใช้ประโยชน์จากความสามารถของ SRS ในการตรวจจับสัญญาณสเปกตรัมการสั่น (หรือการหมุน) ของสิ่งที่ศึกษา ตัวอย่างเช่น:
การศึกษาโครงสร้างเชิงโครงสร้างระดับโมเลกุล
งานในสาขานี้ดำเนินการทั้งในกลุ่ม Cina [ 3 ]และ Bar [ 4 ] [ 5 ]คอนฟอร์เมอร์แต่ละตัวเกี่ยวข้องกับลายเซ็นสเปกตรัม SRS ที่แตกต่างกันเล็กน้อย การตรวจจับภูมิทัศน์ที่แตกต่างกันเหล่านี้บ่งชี้ถึงโครงสร้างคอนฟอร์เมชันที่แตกต่างกันของโมเลกุลเดียวกัน
การวิเคราะห์องค์ประกอบของวัสดุ
ในที่นี้ จะใช้ประโยชน์จากความสัมพันธ์ของสัญญาณ SRS กับความเข้มข้นของวัสดุ การวัดสัญญาณ SRS ที่แตกต่างกันซึ่งเกี่ยวข้องกับวัสดุต่างๆ ในองค์ประกอบ จะช่วยให้สามารถกำหนดความสัมพันธ์เชิงสัดส่วนขององค์ประกอบนั้นได้
กล้องจุลทรรศน์
กล้องจุลทรรศน์แบบการกระเจิงรามานแบบกระตุ้น (SRS)ช่วยให้สามารถสร้างภาพในเนื้อเยื่อที่มีชีวิตได้โดยไม่ต้องใช้ฉลากและไม่รุกราน ในวิธีนี้ ซึ่งริเริ่มโดยกลุ่มของ Xie [ 6 ]จะมีการสร้างภาพโดยการวัด SRS บนตารางกริด โดยการวัดแต่ละครั้งจะเพิ่มพิกเซลให้กับภาพ
กล้องจุลทรรศน์ความเร็วสูงพิเศษ
การใช้พัลส์เลเซอร์เฟมโตวินาที ดังที่ทำในกลุ่ม Katz, Silberberg [ 7 ]และ Xie [ 8 ]ช่วยให้สามารถสร้างส่วนสำคัญของสัญญาณสเปกตรัมได้ทันทีด้วยพัลส์เลเซอร์เพียงพัลส์เดียว สัญญาณที่กว้างเกิดจากความกว้างของแถบเลเซอร์ตามที่กำหนดโดยหลักการความไม่แน่นอนซึ่งกำหนดสัดส่วนผกผันระหว่างความไม่แน่นอนในเวลาและความถี่ วิธีนี้เร็วกว่าวิธีการกล้องจุลทรรศน์แบบดั้งเดิมมาก เนื่องจากไม่ต้องเสียเวลาในการสแกนความถี่เป็นเวลานาน
ดูเพิ่มเติม
อ่านเพิ่มเติม
- Kazzaz, A.; Ruschin, S.; Shoshan, I.; Ravnitsky, G. (1994). "การกระเจิงรามานแบบกระตุ้นในมีเทน - การเพิ่มประสิทธิภาพเชิงทดลองและแบบจำลองเชิงตัวเลข" IEEE Journal of Quantum Electronics . 30 (12): 3017−3024. Bibcode : 1994IJQE...30.3017K . doi : 10.1109/3.362703 .
- Tipping, WJ; Lee, M.; Serrels, A.; Brunton, VG; Hulme, AN (2016). "กล้องจุลทรรศน์การกระเจิงรามานแบบกระตุ้น: เครื่องมือใหม่สำหรับการค้นพบยา" . Chem. Soc. Rev . 45 (8): 2075– 2089. doi : 10.1039/c5cs00693g . PMC 4839273 . PMID 26839248 .