การทดสอบความมีชีวิตเป็นการทดสอบที่สร้างขึ้นเพื่อกำหนดความสามารถของอวัยวะเซลล์หรือเนื้อเยื่อในการรักษาหรือฟื้นฟูสภาพการมีชีวิต^{[ 2 ]} ความมีชีวิตสามารถแยกแยะได้จากสถานะชีวิต และความตายแบบทั้งหมดหรือไม่มีเลยโดยใช้ดัชนีเชิงปริมาณที่มีช่วงระหว่างจำนวนเต็ม 0 ถึง 1 หรือหากเข้าใจได้ง่ายกว่าคือช่วง 0% ถึง 100% ^{[ 3 ]}ความมีชีวิตสามารถสังเกตได้จากคุณสมบัติทางกายภาพของเซลล์ เนื้อเยื่อ และอวัยวะ บางส่วนได้แก่ กิจกรรมเชิงกล การเคลื่อนที่ เช่นอสุจิและเม็ดเลือดขาวการหดตัวของเนื้อเยื่อกล้ามเนื้อหรือเซลล์ กิจกรรมไมโทซิสในหน้าที่ของเซลล์ และอื่นๆ^{[ 3 ]}การทดสอบความมีชีวิตให้พื้นฐานที่แม่นยำยิ่งขึ้นสำหรับการวัดระดับความมีชีวิตชีวาของสิ่งมีชีวิต

การทดสอบความมีชีวิตสามารถนำไปสู่การค้นพบที่มากกว่าแค่ความแตกต่างระหว่างสิ่งมีชีวิตกับสิ่งไม่มีชีวิต เทคนิคเหล่านี้สามารถใช้เพื่อประเมินความสำเร็จของเทคนิคการเพาะเลี้ยงเซลล์ เทคนิค การแช่แข็งความเป็นพิษของสาร หรือประสิทธิภาพของสารในการบรรเทาผลกระทบของสารพิษ^{[ 4 ]}

แม้ว่าเทคนิคการสังเกตด้วยสายตาอย่างง่าย ๆ จะมีประโยชน์ แต่การวัดความมีชีวิตของสิ่งมีชีวิต/ส่วนใดส่วนหนึ่งของสิ่งมีชีวิตอย่างละเอียดโดยอาศัยเพียงการสังเกตคุณสมบัติทางกายภาพนั้นอาจทำได้ยาก อย่างไรก็ตาม มีวิธีการทั่วไปหลายวิธีที่ใช้ในการสังเกตความมีชีวิตเพิ่มเติมโดยใช้การทดสอบ

• การลดเทตราโซเลียม: วิธีที่มีประโยชน์วิธีหนึ่งในการระบุและวัดความมีชีวิตคือการทำการทดสอบการลดเทตราโซเลียม ส่วนประกอบของเทตราโซเลียมในการทดสอบนี้ ซึ่งใช้ทั้งประจุบวกและประจุลบในสูตร ส่งเสริมการแยกแยะความมีชีวิตของเซลล์ในตัวอย่าง^{[ 5 ]}

• การลดรีซาซูริน: การทดสอบการลดรีซาซูรินทำงานใกล้เคียงกับการทดสอบเทตราโซเลียมมาก ยกเว้นว่าการทดสอบเหล่านี้ใช้พลังของปฏิกิริยารีดอกซ์เพื่อขับเคลื่อนความสามารถในการแสดงถึงความมีชีวิตของเซลล์^{[ 5 ]}

• ตัวบ่งชี้ความมีชีวิตของโปรตีเอส: สามารถตรวจสอบการทำงานของโปรตีเอสในตัวอย่างได้หากต้องการกำหนดเป้าหมายความมีชีวิตของเซลล์ การปฏิบัติในงานวิจัยนี้เรียกว่า "แนวคิดการทดสอบตัวบ่งชี้ความมีชีวิตของโปรตีเอส" การทำงานของโปรตีเอสจะหยุดลงเมื่อเซลล์ตาย ดังนั้นจึงสามารถกำหนดความมีชีวิตของเซลล์ได้อย่างชัดเจนเมื่อใช้วิธีการนี้^{[ 5 ]}

• ATP: ATP เป็นโมเลกุลพลังงานทั่วไปที่นักวิจัยหลายคนมีความรู้มากมาย ดังนั้นจึงสามารถนำไปสู่ความเข้าใจเกี่ยวกับการทดสอบความมีชีวิตได้ แนวคิดการทดสอบ ATP เป็นเทคนิคที่รู้จักกันดีในการกำหนดความมีชีวิตของเซลล์โดยใช้การประเมิน ATP และวิธีการที่เรียกว่า "firefly luciferase" ^{[ 5 ]}

• อัตราส่วนโซเดียม-โพแทสเซียม: การทดสอบอีกประเภทหนึ่งใช้การตรวจสอบอัตราส่วนของโพแทสเซียมต่อโซเดียมในเซลล์เพื่อใช้เป็นดัชนีบ่งชี้ความมีชีวิต หากเซลล์ไม่มีโพแทสเซียมภายในเซลล์สูง และหากโซเดียมภายในเซลล์ต่ำ (1) เยื่อหุ้มเซลล์อาจไม่สมบูรณ์ และ/หรือ (2) ปั๊มโซเดียม-โพแทสเซียมอาจทำงานได้ไม่ดี^{[ 6 ] [ 7 ]}  

• การสลายตัวของเซลล์หรือการรั่วไหลของเยื่อหุ้มเซลล์: หมวดหมู่นี้รวมถึง การทดสอบ แลคเตทดีไฮโดรจีเนส การทดสอบประเภทนี้ใช้เอนไซม์ที่เสถียรซึ่งพบได้ทั่วไปในทุกเซลล์ และสามารถตรวจจับได้ง่ายเมื่อเยื่อหุ้มเซลล์ไม่สมบูรณ์ ตัวอย่างของการทดสอบประเภทนี้ ได้แก่โพรพิเดียมไอโอไดด์ ไตรแพนบลูและ7-อะมิโนแอคติโนไมซิน ดี (7-AAD)

• กิจกรรมของไมโตคอนเดรียหรือแคสเปส: รีซาซูรินและฟอร์มาซาน ( MTT /XTT) สามารถใช้ตรวจวัดขั้นตอนต่างๆ ใน กระบวนการ อะพอพโทซิสซึ่งเป็นสัญญาณบ่งบอกถึงการตายของเซลล์ได้

• การทำงาน: การทดสอบการทำงานของเซลล์จะมีความเฉพาะเจาะจงสูงกับชนิดของเซลล์ที่ทำการทดสอบ ตัวอย่างเช่นการเคลื่อนที่ถูกใช้กันอย่างแพร่หลายในการทดสอบการทำงานของเซลล์อสุจิ การอยู่รอดของเซลล์ สืบพันธุ์โดยทั่วไปสามารถใช้ในการทดสอบความสามารถใน การสืบพันธุ์ ได้เซลล์เม็ดเลือดแดงได้รับการทดสอบในแง่ของความยืดหยุ่น ความเปราะ บางจาก แรงดัน ออสโมติกการแตกตัวของเม็ดเลือดแดงระดับATPและปริมาณฮีโมโกลบิน^{[ 9 ]}สำหรับอวัยวะที่สามารถปลูกถ่ายได้การทดสอบขั้นสุดท้ายคือความสามารถในการดำรงชีวิตหลังการปลูกถ่าย ซึ่งเป็นการทดสอบที่ไม่เป็นประโยชน์ในการป้องกันการปลูกถ่ายอวัยวะที่ไม่ทำงาน^{[ 10 ]}

• จีโนมิกส์และโปรตีโอมิกส์: สามารถตรวจสอบการทำงานของเซลล์ที่เกี่ยวข้องกับความเครียดได้โดยใช้ไมโครอาร์เรย์ดีเอ็นเอและชิปโปรตีน

• โฟลว์ไซโตเมทรี: ระบบอัตโนมัติช่วยให้สามารถวิเคราะห์เซลล์ได้หลายพันเซลล์ต่อวินาที^{[ 11 ]}

เช่นเดียวกับการทดสอบความมีชีวิตหลายประเภท การวัดเชิงปริมาณของการทำงานทางสรีรวิทยาไม่ได้บ่งชี้ว่าการซ่อมแซมความเสียหายและการฟื้นตัวเป็นไปได้หรือไม่^{[ 12 ]}การทดสอบความสามารถของสายเซลล์ในการยึดเกาะและแบ่งตัวอาจบ่งชี้ถึงความเสียหายในระยะเริ่มต้นได้มากกว่าความสมบูรณ์ของเยื่อหุ้มเซลล์^{[ 13 ]}

"Frogging" เป็นวิธีการทดสอบความมีชีวิตชนิดหนึ่งที่ใช้จานวุ้นเป็นสภาพแวดล้อม และประกอบด้วยการเพาะเชื้อที่เจือจางเป็นลำดับโดยการปักหมุดหลังจากที่เจือจางในของเหลวแล้ว ข้อจำกัดบางประการของวิธีนี้ ได้แก่ ไม่สามารถวัดความมีชีวิตทั้งหมดได้ และไม่ไวต่อการทดสอบความมีชีวิตต่ำเป็นพิเศษ อย่างไรก็ตาม วิธีนี้เป็นที่รู้จักในด้านความรวดเร็ว^{[ 1 ]} "Tadpoling" ซึ่งเป็นวิธีการที่ใช้หลังจากพัฒนา "frogging" นั้น คล้ายกับวิธี "frogging" แต่เซลล์ทดสอบจะถูกเจือจางในของเหลวแล้วเก็บไว้ในของเหลวตลอดกระบวนการตรวจสอบ วิธี "tadpoling" สามารถใช้ในการวัดความมีชีวิตของวัฒนธรรมได้อย่างแม่นยำ ซึ่งเป็นสิ่งที่แสดงให้เห็นถึงความแตกต่างหลักจาก "frogging" ^{[ 1 ]}

• แคลซีน เอเอ็ม
• การทดสอบโคลโนเจนิค
• การทดสอบโฮโมไดเมอร์ของเอทิเดียม
• อีแวนส์บลู
• การไฮโดรไลซิสฟลูออเรสซีนไดอะซิเตต / การย้อมสี โพรพิเดียมไอโอไดด์ (การย้อมสี FDA/PI)
• การวิเคราะห์เซลล์ด้วยเครื่องฟลูออโรไซโตเมตรี
• การทดสอบโดยใช้ ฟอร์มาซาน ( MTT /XTT)
• โปรตีนเรืองแสงสีเขียว
• แลคเตทดีไฮโดรจีเนส (LDH)
• เมทิลไวโอเลต
• การดูดซับ สีแดงกลาง ( การย้อมสีมีชีวิต )
• โพรพิเดียมไอ โอได ด์ เป็นสีย้อมดีเอ็นเอที่สามารถแยกแยะ เซลล์ ที่ตายแบบเนโครซิ ส เซลล์ที่ตายแบบ อะพอพโทซิสและเซลล์ ปกติ ได้
• เรซาซูริน
• การทดสอบ TUNEL

• ความเป็นพิษต่อเซลล์
• คราบสำคัญ