การทดสอบการเจือจาง
โดยทั่วไปแล้ว คำว่า การทดสอบแบบ เจือจาง (dilution assay)ใช้เพื่อระบุการทดสอบทางชีวภาพ ชนิดพิเศษ ซึ่งมีการให้สารเตรียมหนึ่งชนิดหรือมากกว่า (เช่น ยา) แก่หน่วยทดลองในระดับขนาดยาที่แตกต่างกัน เพื่อกระตุ้นให้เกิดการตอบสนองทางชีวภาพที่สามารถวัดได้ ระดับขนาดยาจะถูกเตรียมโดยการเจือจางในตัวทำละลายที่ไม่ทำปฏิกิริยากับการตอบสนอง หน่วยทดลองอาจเป็นเซลล์เพาะเลี้ยง เนื้อเยื่อ อวัยวะ หรือสัตว์มีชีวิตก็ได้ การตอบสนองทางชีวภาพอาจเป็นแบบควอนตัม (เช่น บวก/ลบ) หรือแบบเชิงปริมาณ (เช่น การเจริญเติบโต) เป้าหมายคือการหาความสัมพันธ์ระหว่างการตอบสนองกับขนาดยา โดยปกติจะใช้ เทคนิค การประมาณ ค่า และในหลายกรณีเพื่อแสดงศักยภาพ/ฤทธิ์ของสารเตรียมที่ทดสอบเทียบกับมาตรฐานที่มีศักยภาพ/ฤทธิ์ที่ทราบแล้ว
การทดสอบการเจือจางสามารถทำได้ทั้งแบบตรงและแบบอ้อม ในการทดสอบการเจือจางแบบตรงจะวัดปริมาณยาที่จำเป็นในการทำให้เกิดการตอบสนองที่เฉพาะเจาะจง (คงที่) ดังนั้นปริมาณยาจึงเป็นตัวแปรสุ่มที่กำหนดการกระจายความทนทานในทางกลับกัน ในการทดสอบการเจือจางแบบอ้อมจะให้ยาในระดับปริมาณคงที่ ดังนั้นการตอบสนองจึงเป็นตัวแปรสุ่ม
ในการทดสอบบางอย่าง อาจมีเหตุผลที่น่าเชื่อถือได้ว่า ส่วนประกอบทั้งหมดของสารทดสอบ ยกเว้นส่วนประกอบเดียว ไม่มีผลต่อการตอบสนองที่ศึกษาของผู้ถูกทดสอบ การทดสอบสารทดสอบเทียบกับสารมาตรฐานของส่วนประกอบที่มีผล จึงเทียบเท่ากับการวิเคราะห์เพื่อหาปริมาณของส่วนประกอบนั้น ซึ่งอาจเรียกได้ว่าเป็นการทดสอบเจือจางเชิงวิเคราะห์
แบบจำลองทางสถิติ
สำหรับนิยามทางคณิตศาสตร์ของการทดสอบการเจือจาง พื้นที่การสังเกตถูกกำหนดและเป็นฟังก์ชันเพื่อให้ได้คำตอบ ถูกแมปไปยังเซตของจำนวนจริง ขณะนี้ถือว่าฟังก์ชันมีอยู่ซึ่งเกี่ยวข้องกับปริมาณยาต่อการตอบสนอง
ซึ่งเป็นพจน์ความคลาดเคลื่อนที่มีค่าเฉลี่ยเป็น 0โดยทั่วไปจะถือว่ามีความต่อเนื่องและเป็นไปในทิศทางเดียวในกรณีที่มีการเตรียมมาตรฐานไว้ด้วย ก็จะถือว่าการเตรียมการทดสอบนั้นมีความต่อเนื่องเช่นกัน มีลักษณะเหมือนการเจือจาง (หรือการเพิ่มความเข้มข้น) ของสารมาตรฐาน
- สำหรับทุกคน
ที่ไหนคือศักยภาพสัมพัทธ์ของนี่คือสมมติฐานพื้นฐานเกี่ยวกับความคล้ายคลึงกันของเส้นกราฟความสัมพันธ์ระหว่างขนาดยาและการตอบสนอง ซึ่งจำเป็นสำหรับการกำหนดความแรงสัมพัทธ์อย่างมีความหมายและไม่คลุมเครือ ในหลายกรณี การแปลงค่ากำลังเป็นวิธีที่สะดวกกว่ากับหรือการแปลงลอการิทึมกรณีหลังสามารถแสดงให้เห็นได้ว่าเป็นกรณีจำกัดของดังนั้นถ้าเขียนขึ้นสำหรับการแปลงลอการิทึม สมการข้างต้นสามารถกำหนดใหม่ได้ดังนี้
- สำหรับทุกคน.
การประมาณการของโดยทั่วไปแล้ว พารามิเตอร์มักถูกจำกัดให้เป็นสมาชิกของ กลุ่มฟังก์ชันพารา เมตริก ที่กำหนดไว้อย่างชัดเจนเช่น กลุ่มฟังก์ชันเชิงเส้นที่มีลักษณะเฉพาะด้วยจุดตัดแกนและค่าความชัน เทคนิคทางสถิติ เช่น การหาค่าเหมาะสมที่สุดโดยวิธีความน่าจะเป็นสูงสุดสามารถนำมาใช้คำนวณค่าประมาณของพารามิเตอร์ได้ ที่สำคัญอย่างยิ่งในเรื่องนี้คือทฤษฎีแบบจำลองเชิงเส้นทั่วไป (Generalized Linear Models)ซึ่งสามารถใช้สร้างแบบจำลองการทดสอบการเจือจางได้หลากหลายประเภท ค่าประมาณของอาจอธิบายได้ได้ผลอย่างน่าพอใจในช่วงปริมาณยาที่ทดสอบ แต่ไม่จำเป็นต้องอธิบายอย่างละเอียดเสมอไปนอกเหนือจากช่วงนั้นแล้ว อย่างไรก็ตาม นี่ไม่ได้หมายความว่าเส้นโค้งที่ไม่เหมือนกันจะถูกจำกัดให้อยู่ในช่วงที่พวกมันบังเอิญคล้ายกันเท่านั้น
ในทางปฏิบัติตัวมันเองนั้นแทบจะไม่น่าสนใจเลย สิ่งที่น่าสนใจมากกว่าคือการประมาณค่าของหรือเป็นการประมาณปริมาณยาที่ทำให้เกิดการตอบสนองเฉพาะอย่าง การประมาณค่าเหล่านี้เกี่ยวข้องกับการนำอัตราส่วนของการประมาณค่าพารามิเตอร์ที่มีความสัมพันธ์ทางสถิติมาใช้ทฤษฎีบทของฟีลเลอร์สามารถใช้ในการคำนวณช่วงความเชื่อมั่นของอัตราส่วนเหล่านี้ได้
มีบางกรณีพิเศษที่ควรกล่าวถึงเป็นพิเศษเนื่องจากมีการใช้งานอย่างแพร่หลาย: ถ้าเป็นเชิงเส้นและนี่เรียกว่าแบบจำลองอัตราส่วนความชันถ้า เป็นเชิงเส้นและนี่เรียกว่าแบบจำลองเส้นขนาน แบบจำลองที่ใช้กันทั่วไปอีกแบบหนึ่งคือแบบจำลองโพรบิตซึ่งคือฟังก์ชันการแจกแจงปกติ สะสมและเป็นไปตามการแจกแจงแบบทวินาม
ตัวอย่าง: การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาของยาปฏิชีวนะ
ยาปฏิชีวนะมาตรฐาน (แสดงด้วยสีแดง) และสารเตรียมทดสอบ (แสดงด้วยสีน้ำเงิน) ถูกนำไปใช้กับจุลินทรีย์ ที่ไวต่อยา ในจานเพาะเชื้อ ในสามระดับความเข้มข้น โดยใช้ยาในปริมาณที่สูงขึ้น จะทำให้บริเวณยับยั้งการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์มีขนาดใหญ่ขึ้น การตอบสนองทางชีวภาพในกรณีนี้คือบริเวณยับยั้งและเส้นผ่านศูนย์กลางของบริเวณนั้นสามารถใช้เป็นตัวชี้วัดการตอบสนองได้ ปริมาณยาถูกแปลงเป็นลอการิทึมและใช้วิธีการกำลังสองน้อยที่สุดในการลากเส้นขนานสองเส้นให้เข้ากับข้อมูล ระยะทางในแนวนอนช่องว่างระหว่างเส้นสองเส้น (แสดงด้วยสีเขียว) ใช้เป็นค่าประมาณของความแรง ของการเตรียมการทดสอบเมื่อเทียบกับมาตรฐาน
ซอฟต์แวร์
โปรแกรมซอฟต์แวร์ทางสถิติหลักๆ ส่วนใหญ่ไม่ได้รองรับการทดสอบการเจือจาง อย่างไรก็ตาม นักสถิติไม่น่าจะมีปัญหาในการเขียนสคริปต์หรือมาโครที่เหมาะสมสำหรับการทดสอบดังกล่าว มีโปรแกรมซอฟต์แวร์เฉพาะทางหลายโปรแกรมที่ใช้สำหรับการทดสอบการเจือจางอยู่แล้ว
ลิงก์ภายนอก
ซอฟต์แวร์สำหรับการทดสอบการเจือจาง:
- กองทัพปลดปล่อยประชาชน
- คอมบิสแตทส์
- ยูนิสแตท
- การทดสอบทางชีวภาพ
