อีเทสต์
Etest (เดิมเรียกว่าการทดสอบ Epsilometer ) เป็นวิธีการกำหนดความไวต่อยาต้านจุลชีพโดยการวางแถบที่ชุบด้วยยาต้านจุลชีพลงบนจานวุ้นสายพันธุ์ของแบคทีเรียหรือเชื้อราจะไม่เจริญเติบโตใกล้กับความเข้มข้นของยาปฏิชีวนะหรือยาต้านเชื้อราหากมีความไว สำหรับบางคู่ของจุลชีพและยาต้านจุลชีพ ผลลัพธ์สามารถใช้เพื่อกำหนดความเข้มข้นต่ำสุดที่ยับยั้งการเจริญเติบโต (MIC) Etest เป็นระบบที่เป็นกรรมสิทธิ์ที่ผลิตโดยbioMérieuxเป็นการทดสอบในห้องปฏิบัติการที่ใช้ในสถานพยาบาลเพื่อช่วยแนะนำแพทย์โดยระบุว่าความเข้มข้นของยาต้านจุลชีพใดที่สามารถใช้รักษาการติดเชื้อของผู้ป่วยได้อย่างมีประสิทธิภาพ[ 1 ]
ใช้
Etest เป็นเทคนิคเชิงปริมาณสำหรับ การกำหนดค่า MIC ของจุลินทรีย์ ใช้สำหรับแบคทีเรียแกรมลบและแกรมบวกหลายชนิด เช่นPseudomonas [ 2 ] [ 3 ] Staphylococcus [ 4 ]และEnterococcus species [ 5 ]รวมถึงแบคทีเรียที่ต้องการสารอาหารเฉพาะ เช่นNeisseriaและStreptococcus pneumoniae [ 1 ] นอกจากนี้ยังสามารถใช้เพื่อกำหนดค่า MIC ต่อเชื้อราบางชนิดได้อีกด้วย[ 6 ] [ 7 ]
Etest เป็นแถบรีเอเจนต์พลาสติกที่ไม่เป็นรูพรุนที่เตรียมไว้ล่วงหน้าพร้อมการไล่ระดับความเข้มข้นของยาปฏิชีวนะที่กำหนดไว้ล่วงหน้า ครอบคลุมช่วงความเข้มข้นต่อเนื่อง[ 8 ]นำไปวางบนพื้นผิวของจานวุ้นที่เพาะเชื้อสายพันธุ์ทดสอบ ซึ่งจะมีการปลดปล่อยการไล่ระดับความเข้มข้นของสารต้านจุลชีพจากตัวพาพลาสติกไปยังวุ้นเพื่อสร้างการไล่ระดับความเข้มข้นที่เสถียรและต่อเนื่องใต้และบริเวณใกล้เคียงกับแถบ
ระยะเวลาที่ใช้ในการเตรียมจานเพาะเชื้อขึ้นอยู่กับเชื้อที่กำลังทดสอบและสภาวะของจานเพาะเชื้อค่าความชันของ Etest ที่กำหนดไว้ล่วงหน้าจะคงที่อย่างน้อย 18 ถึง 24 ชั่วโมง ซึ่งเป็นระยะเวลาที่ครอบคลุมช่วงเวลาที่สำคัญของจุลินทรีย์หลายชนิด ทั้งที่ต้องการสภาพแวดล้อมเฉพาะและไม่ต้องการสภาพแวดล้อมเฉพาะ
หลังจากทำการทดสอบแล้ว จะเห็นการเจริญเติบโตของแบคทีเรียหลังจากบ่ม และจะเห็นวงรีที่สมมาตรซึ่งอยู่ตรงกลางของแถบทดสอบ ค่า MIC จะอ่านได้จากมาตราส่วนในหน่วย μg/mL โดยอ่านจากจุดที่ขอบของวงรีตัดกับแถบทดสอบ หลังจากระยะเวลาการบ่มที่กำหนดแล้ว ค่า MIC จะอ่านได้จากจุดที่ขอบของวงรีตัดกับด้านข้างของแถบทดสอบ ไม่ควรทำการอ่านผลการทดสอบหากเชื้อมีลักษณะปนกัน หรือหากการเจริญเติบโตของเชื้อเบาบางหรือหนาแน่นเกินไป
โดยทั่วไปแล้วจุดสิ้นสุด MIC ของ Etest จะชัดเจน แม้ว่ารูปแบบการเจริญเติบโต/การยับยั้งที่แตกต่างกันอาจพบได้ขึ้นอยู่กับยาต้านเชื้อราหรือยาปฏิชีวนะที่ใช้[ 7 ]
การคัดเลือกอาหารเลี้ยงเชื้ออะการ์
Etest สามารถใช้ได้กับอาหารเลี้ยงเชื้อ AST หลายชนิด ตราบใดที่อาหารเลี้ยงเชื้อนั้นเอื้อต่อการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ที่ทดสอบ และไม่รบกวนการทำงานของสารต้านจุลินทรีย์ อย่างไรก็ตาม เพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่แม่นยำสูงสุด อาหารเลี้ยงเชื้อที่เลือกควรมีคุณสมบัติตรงตามข้อกำหนดพื้นฐานสำหรับอาหารเลี้ยงเชื้อทดสอบความไวต่อยาต้านจุลินทรีย์ อาหารเลี้ยงเชื้อ AST ที่แนะนำให้ใช้กับ Etest มีดังต่อไปนี้:
- Aerobes: วุ้น Mueller Hinton เช่น MHE (bioMérieux)
- แบคทีเรียไม่ใช้ออกซิเจน: วุ้นเลือดบรูเซลลาที่มีสารเสริมที่เหมาะสม
อาหารเลี้ยงเชื้อเหล่านี้อาจต้องการสารอาหารเสริมเพื่อให้จุลินทรีย์ที่ต้องการสารอาหารเฉพาะเจาะจง เช่น นิวโมค็อกซี ส เต รปโตค็อกซี อะบิโอโทรเฟีย ฮีโมฟิลัส โก โนค็อก ซี เมนิงโกค็อกซี และ แคม ปิโลแบคเตอร์ เจริญเติบโตได้ดีขึ้น โดยทั่วไปแล้ว อาหารเลี้ยงเชื้อที่แนะนำโดยสถาบันมาตรฐานทางคลินิกและห้องปฏิบัติการ (CLSI) และคณะกรรมการยุโรปด้านการทดสอบความไวต่อยาต้านจุลชีพ (EUCAST) ถือว่าเหมาะสมสำหรับ Etest
อุปกรณ์ทดสอบ Etest
เครื่องมือในกลุ่ม Etest ถูกออกแบบมาเพื่อลดความซับซ้อนในการใช้งาน Etest ในแต่ละวัน Simplex C76, Nema C88 และ Retro C80 ใช้งานง่าย ลดความเหนื่อยล้าของผู้ปฏิบัติงาน ประหยัดเวลา และปรับปรุงคุณภาพของผลลัพธ์โดยการเพิ่มความสามารถในการทำซ้ำ Etest และเครื่องมือที่เกี่ยวข้องนำเสนอวิธีการที่มีประสิทธิภาพที่สุดวิธีหนึ่งในการสร้างค่า MIC ในระดับความเข้มข้นที่ใกล้เคียงกันถึง 15 ระดับ สำหรับการทดสอบความไวต่อยาและเชื้อโรคหลากหลายชนิด รวมถึงจุลินทรีย์ที่เจริญเติบโตยาก
- เครื่อง Simplex C76ช่วยให้การวางแถบ Etest จำนวน 1 ถึง 6 แถบเป็นไปโดยอัตโนมัติ เพื่อลดความยุ่งยากในการจัดเตรียมแผง MIC การติดแถบได้สูงสุด 6 แถบสำหรับจานเพาะเชื้อขนาดใหญ่ หรือสูงสุด 2 แถบสำหรับจานขนาดเล็ก ใช้เวลาน้อยกว่า 12 วินาที
- Retro C80เป็นเครื่องเพาะเชื้อแบบหมุนที่ช่วยลดความซับซ้อนและทำให้การเพาะเชื้อลงบนจานวุ้นขนาดเล็กและขนาดใหญ่เป็นมาตรฐานเดียวกัน ทำให้ Etest® อ่านผลได้ง่ายกว่าเมื่อเทียบกับการขีดเส้นด้วยมือ
- Nema C88เป็นปากกาดูดสุญญากาศที่ช่วยให้การใช้แถบทดสอบ Etest® ง่ายขึ้น วิธีการใช้งานคือ จับอุปกรณ์เหมือนปากกา และใช้นิ้วปิดรูดูดเพื่อสร้างแรงดูด จากนั้นวางตัวดูดลงบนแถบทดสอบเพื่อยกขึ้น แล้ววางลงบนพื้นผิววุ้น เมื่อแถบทดสอบหลุดออก ให้ปล่อยนิ้วออกจากรูดูด
ประวัติศาสตร์
แถบ Etest ได้รับการอธิบายครั้งแรกในปี 1988 และเปิดตัวในเชิงพาณิชย์ในปี 1991 โดย AB BIODISK [ 5 ] bioMérieux เข้าซื้อกิจการ AB BIODISK ในปี 2008 และยังคงผลิตและทำการตลาดผลิตภัณฑ์กลุ่มนี้ภายใต้เครื่องหมายการค้า Etest ต่อไป
ในช่วงทศวรรษ 1950 ฮันส์ เอริคสัน (ศาสตราจารย์ด้านจุลชีววิทยาที่โรงพยาบาลคาโรลินสกาและสถาบันคาโรลินสกา สตอกโฮล์ม) ผู้ก่อตั้งทางวิทยาศาสตร์ของบริษัท AB BIODISK ได้พัฒนาวิธีการมาตรฐานสำหรับการทดสอบการแพร่กระจายของยาบนแผ่นดิสก์และปรับปรุงความสามารถในการทำซ้ำและความน่าเชื่อถือสำหรับการทำนายความไวต่อยาทางคลินิกขนาดของโซนยับยั้งจากผลการทดสอบแผ่นดิสก์ถูกนำมาเปรียบเทียบกับค่า MIC โดยอิงจากวิธีการเจือจางในวุ้นที่เป็นวิธีอ้างอิงจากนั้นจึงประเมินความสัมพันธ์ระหว่างขนาดของโซนและค่า MIC โดยใช้การวิเคราะห์การถดถอย และใช้เส้นถดถอยในการประมาณค่าขอบเขตการตีความของโซนที่สอดคล้องกับค่าจุดแบ่ง MIC ที่กำหนดผลลัพธ์แบบไวต่อยา ปานกลาง และดื้อยา
Etest ถูกนำเสนอครั้งแรกในการประชุม Interscience Conference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy (ICAAC) ที่ลอสแอนเจลิสในปี 1988 ในฐานะแนวคิดการไล่ระดับความเข้มข้นแบบใหม่สำหรับการกำหนดค่า MIC ในเดือนกันยายนปี 1991 Etest ได้เปิดตัวสู่ตลาดโลกในฐานะผลิตภัณฑ์ MIC หลังจากได้รับการอนุมัติจากสำนักงานคณะกรรมการอาหารและยาแห่งสหรัฐอเมริกา (FDA)
ดูเพิ่มเติม
