การทดสอบการแพร่กระจายของดิสก์

Q: ข้อมูลสำคัญเกี่ยวกับ การทดสอบการแพร่กระจายของดิสก์

การทดสอบการแพร่กระจายของแผ่นดิสก์ (หรือที่รู้จักกันในชื่อการทดสอบการแพร่กระจายของวุ้น , การทดสอบ Kirby - Bauer , การทดสอบความไวต่อยาปฏิชีวนะแบบแพร่กระจายของแผ่นดิสก์ ,

Q: วิธีการมาตรฐาน

การทดสอบ Kirby–Bauer มาตรฐาน: วางแผ่นดิสก์สีขาวที่มีสารปฏิชีวนะลงบนจานเพาะเชื้อแบคทีเรีย บริเวณวงกลมที่มีการเจริญเติบโตของแบคทีเรียต่ำจะปรากฏล้อมรอบแผ่นดิสก์บางแผ่น ซึ่งบ่งชี้ว่าแบคทีเรียไวต่อสารปฏิชีวนะนั้น

การทดสอบการแพร่กระจายของแผ่นดิสก์ (หรือที่รู้จักกันในชื่อการทดสอบการแพร่กระจายของวุ้น , การทดสอบ Kirby - Bauer , การทดสอบความไวต่อยาปฏิชีวนะแบบแพร่กระจายของแผ่นดิสก์ , การทดสอบความไวต่อยาปฏิชีวนะแบบแพร่กระจายของแผ่นดิสก์และการทดสอบ KB ) เป็นการ ทดสอบ ทาง จุลชีววิทยาแบบ ใช้การเพาะเลี้ยง ที่ใช้ใน ห้องปฏิบัติการ วินิจฉัยและ การค้นพบ ยาในห้องปฏิบัติการวินิจฉัย การทดสอบนี้ใช้เพื่อกำหนดความไวของแบคทีเรียที่แยกได้จากการติดเชื้อของผู้ป่วยต่อยาปฏิชีวนะที่ได้รับการอนุมัติทางการแพทย์ ซึ่งช่วยให้แพทย์สามารถสั่งยาปฏิชีวนะที่เหมาะสมที่สุดได้^{[ 1 ]}^{[ 2 ]}^{[ 4 ]}^{[ 5 ]} ในห้องปฏิบัติการค้นพบยา โดยเฉพาะอย่างยิ่ง ห้องปฏิบัติการ สำรวจทางชีวภาพการทดสอบนี้ใช้เพื่อคัดกรองวัสดุชีวภาพ (เช่น สารสกัดจากพืช น้ำหมักแบคทีเรีย) และยาที่อาจมีฤทธิ์ต้านแบคทีเรีย เมื่อทำการสำรวจทางชีวภาพ การทดสอบสามารถทำได้โดยใช้แบคทีเรียสายพันธุ์คู่กันเพื่อให้ได้การแยกตัวและระบุกลไกการออกฤทธิ์ ต้านแบคทีเรีย เบื้องต้น^{[ 6 ]}^{[ 7 ]}

ในห้องปฏิบัติการวินิจฉัยโรค การทดสอบจะทำโดยการเพาะเชื้อแบคทีเรียที่แยกได้จากการติดเชื้อของผู้ป่วยลงบนพื้นผิวของจานวุ้น จากนั้นจึงนำแผ่นกระดาษที่มีสารปฏิชีวนะมาวางลงบนวุ้นและนำไปบ่ม หากสารปฏิชีวนะสามารถยับยั้งการเจริญเติบโตของแบคทีเรียหรือฆ่าแบคทีเรียได้จะมีบริเวณรอบๆ แผ่นกระดาษที่แบคทีเรียเจริญเติบโตไม่มากพอที่จะมองเห็นได้ บริเวณนี้เรียกว่าโซนยับยั้ง ความไวของแบคทีเรียที่แยกได้ต่อสารปฏิชีวนะแต่ละชนิดสามารถวัดได้แบบกึ่งปริมาณโดยการเปรียบเทียบขนาดของโซนยับยั้งเหล่านี้กับฐานข้อมูลของข้อมูลเกี่ยวกับแบคทีเรียที่ไวต่อสารปฏิชีวนะ ไวปานกลาง และดื้อต่อสารปฏิชีวนะ ด้วยวิธีนี้จึงสามารถระบุสารปฏิชีวนะที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการรักษาการติดเชื้อของผู้ป่วยได้^{[ 1 ]}^{[ 2 ]} แม้ว่าการทดสอบการแพร่กระจายของแผ่นดิสก์จะไม่สามารถใช้แยกความแตกต่างระหว่างฤทธิ์ยับยั้งการเจริญเติบโตของแบคทีเรียและฤทธิ์ฆ่าแบคทีเรียได้ แต่ก็สะดวกกว่าวิธีการทดสอบความไวต่อยาอื่นๆ เช่นการเจือจางในน้ำซุป^{[ 4 ]}

ในห้องปฏิบัติการค้นคว้ายา การทดสอบการแพร่กระจายของแผ่นดิสก์จะดำเนินการแตกต่างจากในห้องปฏิบัติการวินิจฉัยเล็กน้อย ในการตั้งค่านี้ ไม่ใช่สายพันธุ์แบคทีเรียที่ต้องระบุลักษณะ แต่เป็นสารสกัดที่ใช้ทดสอบ (เช่น สารสกัดจากพืชหรือจุลินทรีย์) ดังนั้นจึงมีการเพาะเชื้อแบคทีเรียสายพันธุ์ที่มีฟีโนไทป์ที่ทราบ (มักจะเป็น สายพันธุ์ ATCCหรือNCTC ) ลงบนจานวุ้น และวางแผ่นดิสก์ที่มีสารสกัดที่ใช้ทดสอบลงบนพื้นผิว (ดูด้านล่าง ) ^{[ 6 ]} ขนาดของโซนยับยั้งไม่สามารถใช้เป็นมาตรวัดกึ่งปริมาณของศักยภาพต้านเชื้อแบคทีเรียได้ เนื่องจากสารสกัดที่แตกต่างกันมีโมเลกุลที่มีลักษณะการแพร่กระจายที่แตกต่างกัน (ขนาดโมเลกุล ความชอบน้ำ ฯลฯ ที่แตกต่างกัน) อย่างไรก็ตาม ขนาดของโซนยับยั้งสามารถใช้เพื่อวัตถุประสงค์ในการลดความซ้ำซ้อนได้ ซึ่งทำได้โดยการทดสอบสารสกัดแต่ละชนิดกับแบคทีเรียสายพันธุ์คู่ (เช่น สายพันธุ์ที่ไวต่อสเตรปโตมัยซินและสายพันธุ์ที่ดื้อต่อสเตรปโตมัยซินเพื่อระบุสารสกัดที่มีสเตรปโตมัยซิน) สายพันธุ์ที่จับคู่กัน (เช่น สายพันธุ์ป่าและ สายพันธุ์ที่แสดงออกเกิน เป้าหมาย ) ยังสามารถใช้ในการระบุกลไกการออกฤทธิ์ต้านแบคทีเรียได้อีกด้วย^{[ 6 ]}^{[ 7 ]}

ประวัติศาสตร์

การแพร่กระจายของอะการ์ถูกใช้ครั้งแรกโดยMartinus Beijerinckในปี 1889 เพื่อศึกษาผลของออกซินต่อการเจริญเติบโตของแบคทีเรีย อย่างไรก็ตาม วิธีนี้ได้รับการพัฒนา ปรับปรุง และกำหนดมาตรฐานโดยนักวิทยาศาสตร์และองค์กรทางวิทยาศาสตร์หลายแห่งตลอดหลายปีที่ผ่านมา รวมถึง George F. Reddish, Norman Heatley , James G. Vincent, ^{[ 8 ]} Alfred W. Bauer, William MM Kirby, John C. Sherris , ^{[ 4 ]}^{[ 5 ]} Hans Martin Ericsson, องค์การอนามัยโลก , สถาบันมาตรฐานทางคลินิกและห้องปฏิบัติการ , กลุ่มอ้างอิงยาปฏิชีวนะของสวีเดน, สถาบันมาตรฐานแห่งเยอรมนี , สมาคมเคมีบำบัดต้านจุลชีพแห่งอังกฤษและอื่นๆ^{[ 8 ]}

หลักการ

นำเชื้อแบคทีเรียบริสุทธิ์มาแขวนลอยในน้ำเกลือ ปรับความขุ่นให้ได้มาตรฐาน แล้วป้ายลงบนจานวุ้นอย่างสม่ำเสมอ จากนั้นวางแผ่นกระดาษกรองที่ชุบด้วยยาปฏิชีวนะหรือสารสกัดลงบนพื้นผิววุ้น สารประกอบในแผ่นกระดาษกรองจะแพร่กระจายเข้าไปในวุ้น ความเข้มข้นของสารประกอบเหล่านี้จะสูงที่สุดใกล้กับแผ่นกระดาษกรองและจะลดลงเมื่อระยะห่างจากแผ่นกระดาษกรองเพิ่มขึ้น หากยาปฏิชีวนะหรือสารสกัดมีประสิทธิภาพต่อแบคทีเรียที่ความเข้มข้นระดับหนึ่ง จะไม่มีโคโลนีเจริญเติบโตในบริเวณที่ความเข้มข้นในวุ้นมากกว่าหรือเท่ากับความเข้มข้นที่มีประสิทธิภาพ นี่คือบริเวณยับยั้ง โดยทั่วไป บริเวณยับยั้งที่ใหญ่กว่าจะสัมพันธ์กับความเข้มข้นต่ำสุดที่ยับยั้งการเจริญเติบโต (MIC) ของยาปฏิชีวนะหรือสารสกัดที่ต่ำกว่าสำหรับสายพันธุ์แบคทีเรียนั้น^{[ 1 ]} ข้อยกเว้นคือเมื่อโมเลกุลของยาปฏิชีวนะหรือสารสกัดมีขนาดใหญ่หรือมีคุณสมบัติไม่ชอบน้ำ เนื่องจากโมเลกุลเหล่านี้จะแพร่กระจายผ่านวุ้นได้ช้า^{[ 6 ]}

วิธีการมาตรฐาน

การเตรียมจานวุ้นและเชื้อเริ่มต้น

ทุกแง่มุมของขั้นตอน Kirby–Bauer ได้รับการกำหนดมาตรฐานเพื่อให้มั่นใจได้ว่าผลลัพธ์มีความสม่ำเสมอและแม่นยำ ด้วยเหตุนี้ ห้องปฏิบัติการจึงต้องปฏิบัติตามมาตรฐานเหล่านี้ สื่อที่ใช้ในการทดสอบ Kirby – Bauer ต้องเป็นวุ้น Mueller–Hintonที่มีความลึกเพียง 4 มม. เทลงใน จานเพาะเชื้อ ขนาด 100 มม. หรือ 150 มม. ระดับ pHของวุ้นต้องอยู่ระหว่าง 7.2 ถึง 7.4 การเตรียมเชื้อแบคทีเรียทำได้โดยการเจือจางวัฒนธรรมในน้ำซุปให้ตรงกับมาตรฐานความขุ่น 0.5 McFarlandซึ่งเทียบเท่ากับเซลล์ประมาณ 150 ล้านเซลล์ต่อมิลลิลิตร^[¹^]

การปลูกเชื้อและการฟักตัว

โดยใช้เทคนิคปลอดเชื้อ จะทำการเก็บ ตัวอย่าง เพาะเลี้ยง เชื้อ ของจุลินทรีย์ชนิดใดชนิดหนึ่งโดยใช้สำลีปลอด เชื้อ ในกรณีของแบคทีเรียแกรมลบจะต้องกำจัดของเหลวส่วนเกินออกจากสำลีโดยการกดหรือหมุนเบาๆ กับด้านในของหลอดทดลอง จากนั้นจึงนำสำลีไปป้ายลงบนจานวุ้น Mueller–Hinton เพื่อสร้างแผ่นแบคทีเรีย เพื่อให้ได้การเจริญเติบโตที่สม่ำเสมอ ให้ป้ายสำลีลงบนจานวุ้นในทิศทางเดียว หมุน 120° แล้วป้ายอีกครั้ง หมุนอีก 120° แล้วป้ายอีกครั้ง จากนั้นใช้เครื่องจ่ายแผ่นยาปฏิชีวนะ วางแผ่นยาปฏิชีวนะชนิดใดชนิดหนึ่งลงบนจาน ต้องทำภายใน 15 นาทีหลังจากการเพาะเชื้อ ใช้แหนบที่ผ่านการฆ่าเชื้อด้วยเปลวไฟกดแผ่นยาปฏิชีวนะแต่ละแผ่นลงบนวุ้นเบาๆ เพื่อให้แน่ใจว่าติดแน่น จากนั้นนำจานไปบ่มข้ามคืน โดยปกติที่อุณหภูมิ 35 °C ต้องบ่มจานภายใน 15 นาทีหลังจากวางแผ่นยาปฏิชีวนะ^[¹^]

ทดสอบการดัดแปลงสื่อ

แบคทีเรียบางชนิดต้องการการเติมสารละลายเลือดม้าที่ผ่านการกำจัดไฟบรินด้วยกลไก 5% และβ-NAD (MH-F agar) ^{[ 1 ]}ตารางต่อไปนี้แสดงข้อกำหนดของอาหารเลี้ยงเชื้อสำหรับจุลินทรีย์ที่ทดสอบโดยทั่วไป:

ข้อกำหนดสื่อกระจายดิสก์^{[ 1 ]}
อาหารเลี้ยงเชื้อ MH มาตรฐาน	เอ็มเอช-เอฟ อะการ์
เอนเทอโรแบคทีเรียเลส สกุลPseudomonas สเตโนโทรโฟโมนาส มอลโทฟิเลีย อะซิเนโตแบคเตอร์ spp. สแตฟิโลค็อกคัส spp. เอ็นเทอโรค็อกคัส spp. แอโรโมนาส spp. อะโครโมแบคเตอร์ ไซโลออกซิแดนส์ สกุลVibrio แบคทีเรีย สกุลBacillus Burkholderia pseudomallei	แบคทีเรียกลุ่ม สเตรปโตค็อกคัสกลุ่ม A, B, C, G สเตรปโตค็อกคัส นิวโมเนีย กลุ่มStreptococcus viridans ฮีโมฟิลัส อินฟลูเอนซา มอแรกเซลลา แคทาร์ราลิส ลิสเตอเรีย โมโนไซโตจีนส์ ปาสเตอเรลลา มัลโตซิดา แคมปิโลแบคเตอร์ เจจูนีและซี. โคไล คอรีเนแบคทีเรียม Aerococcus sanguinicolaและA. urinae Kingella kingae บรูเซลลา เมลิเทนซิส

การควบคุมคุณภาพ

เพื่อให้มั่นใจในความถูกต้องของผลการทดสอบ ต้องใช้วิธี การควบคุมคุณภาพในการตรวจสอบประสิทธิภาพของการทดสอบ จะใช้สายพันธุ์แบคทีเรียพิเศษเป็นตัวควบคุมเชิงบวกหรือเชิงลบ เมื่อทดสอบประสิทธิภาพของ β-lactamase จะใช้สายพันธุ์พิเศษที่แสดงความต้านทานต่อ β-lactam นอกจากนี้ ยังใช้สื่อเฉพาะเพื่อทดสอบยาปฏิชีวนะบางชนิด ตัวอย่างเช่น เมื่อทดสอบ ความไวต่อ co-trimoxazoleแนะนำให้ ใช้ สื่อที่มีไทมีนและไทมิดีน มากเกินไป ^{[ 1 ]}ตารางต่อไปนี้แสดงรายการสายพันธุ์ควบคุมคุณภาพที่ใช้กันทั่วไปในวิธีดิสก์ดิฟฟิวชั่น:

สายพันธุ์ควบคุมคุณภาพ (ณ เดือนมกราคม พ.ศ. 2568) ^{[ 1 ]}
แบคทีเรีย	ความเครียด						คำอธิบาย	ยาปฏิชีวนะที่ผ่านการทดสอบ
แบคทีเรีย	เอทีซีซี	NCTC ^{[ 9 ]}	CIP ^{[ 10 ]}	DSM ^{[ 11 ]}	CCUG ^{[ 12 ]}	CECT ^{[ 13 ]}	คำอธิบาย	ยาปฏิชีวนะที่ผ่านการทดสอบ
อี. โคไล	25922 ^{[ 14 ]}	12241	76.24	1103	17620	434	ไวต่อโรค (ชนิดปกติ)	นีโอไมซิน , โคลิสติน , คานามัย ซิน^,เซฟาเล็กซิน , เจนตา มัยซิน , เซฟาแมนโดล , เซฟาโลติ น , เตตราไซคลิน , เซฟา โลกลิ น , เซฟาโลริดีน , นาลิดิกซิก แอซิด, คลอ แรมเฟนิคอล [ ¹⁴^]
	35218 ^{[ 15 ]}	11954	102181	5923	30600	943	ผลิตเอนไซม์TEM-1 β-lactamase ที่ทนต่อแอมพิซิลลิน (ใช้ตรวจสอบส่วนประกอบ β-lactamase ของแผ่นทดสอบยาปฏิชีวนะกลุ่ม β-lactam)
	-	13353 ^{[ 16 ]}	-	-	-	-	ผลิตCTX-M-15และOXA-1 (ใช้ตรวจสอบส่วนประกอบ β-lactamase ของแผ่นทดสอบยาปฏิชีวนะกลุ่ม β-lactam)	เซโฟแทกซิม^{[ 16 ]}
เคล็บซิเอลลา นิวโมเนีย	700603 ^{[ 17 ]}^{[หมายเหตุ 1 ]}	13368	-	-	45421	7787	ผลิตเอนไซม์SHV-18 (เบต้า-แลคตาเมสชนิดออกฤทธิ์กว้าง ใช้ตรวจสอบส่วนประกอบเบต้า-แลคตาเมสในแผ่นทดสอบยาปฏิชีวนะกลุ่มเบต้า-แลคแทม)
เคล็บซิเอลลา นิวโมเนีย	BAA-2814 ^{[ 18 ]}	-	-	-	-	-	ผลิตKPC-3 , SHV-11, TEM-1 (ใช้ตรวจสอบส่วนประกอบเบต้า-แลคตาเมสของแผ่นทดสอบยาปฏิชีวนะกลุ่มเบต้า-แลคแทม)	การผสมผสานตัวยับยั้งβ-lactam/β-lactamase ใหม่ (เช่นmeropenem/vaborbactam ) ^{[ 18 ]}
เชื้อ Pseudomonas aeruginosa	27853 ^{[ 19 ]}	12903	76.110	1117	17619	108	ไวต่อโรค (ชนิดปกติ)
เชื้อสแตฟิโลค็อกคัส ออเรียส	29213 ^{[ 20 ]}	12973	103429	2569	15915	794	สร้างเอนไซม์เบต้า-แลคตาเมส (ชนิดอ่อน)
เชื้อสแตฟิโลค็อกคัส ออเรียส	-	12493 ^{[ 21 ]}	-	-	67181		MRSA ( มีพลาสมิด mecA )	เมธิซิลลินและยาปฏิชีวนะอื่นๆ ได้รับผลกระทบจากสายพันธุ์ MRSA ^{[ 21 ]}
เอ็นเทอโรค็อกคัส เฟคาลิส	29212 ^{[ 22 ]}	12697	103214	2570	9997	795	ไวต่อโรค (ชนิดปกติ)
เอ็นเทอโรค็อกคัส เฟคาลิส	51299 ^{[ 23 ]}	13379	104676	12956	34289	-	HLAR (เอนไซม์ดัดแปลงอะมิโนไกลโคไซด์) ดื้อต่อแวนโคไมซิน ( มีพลาสมิด vanB )	เจนตามัยซินสเตรปโตมัยซิน^{[ 23 ]}
สเตรปโตค็อกคัส นิวโมเนีย	49619 ^{[ 24 ]}	12977	104340	11967	33638	-	ดื้อต่อเบนซิลเพนิซิลลิน
ฮีโมฟิลัส อินฟลูเอนซา	49766 ^{[ 25 ]}	12975	103570	11970	29539	-	ไวต่อโรค (ชนิดปกติ)
ฮีโมฟิลัส อินฟลูเอนซา	49247 ^{[ 26 ]}	12699	104604	9999	26214	-	ความไวต่อยาปฏิชีวนะกลุ่มเบตา-แลคแทมลดลง (แสดงโปรตีนที่จับกับเพนิซิลลิน ที่เปลี่ยนแปลงไป )
แคมปิโลแบคเตอร์ เจจูนี	33560 ^{[ 27 ]}	11351	70.2 ตัน	4688	11284	-	ไวต่อโรค (สายพันธุ์ปกติ) ต้องการสภาพแวดล้อมที่มีออกซิเจนต่ำและอุณหภูมิในการฟักไข่ที่สูงขึ้น (41±1°C)

วิธีการทางเลือก

มีการพัฒนาวิธีการแพร่แบบดิสก์หลายรูปแบบ รวมถึงวิธีถ้วยเพนิซิลลินออกซ์ฟอร์ดและ วิธี Etestที่ใช้ในห้องปฏิบัติการวินิจฉัยโรคในโรงพยาบาล^{[ 28 ]}^{[ 29 ]}และวิธีแพร่แบบหลุม วิธีแพร่แบบทรงกระบอก และวิธีไบโอออโตกราฟีที่ใช้ในห้องปฏิบัติการค้นพบและพัฒนายา^{[ 6 ]}^{[ 30 ]}

วิธีถ้วยเพนิซิลลินของอ็อกซ์ฟอร์ด

วางแผ่นดิสก์ที่มีความเข้มข้นของยาปฏิชีวนะเพิ่มขึ้นลงบนพื้นผิววุ้นที่เพาะเชื้อแบคทีเรียไว้ แล้วนำจานเพาะเชื้อไปบ่ม วัดขนาดของโซนจากขอบของแผ่นดิสก์ไปจนถึงปลายโซนใส การตีความจะซับซ้อนมากขึ้นในประชากรที่มีความไวต่อยาปฏิชีวนะต่างกัน โดยจะพล็อตค่าเหล่านี้เป็นมิติเชิงเส้นหรือกำลังสองของระยะทางเป็นฟังก์ชันของลอการิทึมธรรมชาติของความเข้มข้นของยาปฏิชีวนะในแผ่นดิสก์ ค่า MIC จะถูกกำหนดจากจุดตัดศูนย์ของการถดถอยเชิงเส้นที่เหมาะสมกับข้อมูล^{[ 31 ]} จุดตัดนั้นคือลอการิทึมของ MIC ความชันของเส้นถดถอยมีความสัมพันธ์กับสัมประสิทธิ์การแพร่กระจายของยาปฏิชีวนะชนิดนั้นในวุ้น^{[ 28 ]}

ชุดทดสอบความไวต่อยาปฏิชีวนะแบบรวดเร็วของ EUCAST (RAST)

วิธี RAST เป็นวิธีการตรวจสอบความไวต่อยาปฏิชีวนะที่รวดเร็ว และถูกสร้างขึ้นเพื่อเป็นการดัดแปลงจากการทดสอบการแพร่กระจายของแผ่นดิสก์แบบคลาสสิก วิธีนี้ช่วยลดระยะเวลาการบ่มเพาะเหลือเพียง 16-20 ชั่วโมง ผลการทดสอบจะถูกอ่านหลังจาก 4, 6, 8 และ 16-20 ชั่วโมง เมื่อเปรียบเทียบกับวิธีมาตรฐาน RAST จะไม่แสดงโซนการยับยั้งที่ชัดเจนภายในช่วงเวลาสั้นๆ ดังกล่าว (แบคทีเรียทั้งหมด ยกเว้นS. pneumoniaeมีโอกาสที่จะอ่านผลได้หลังจาก 6 ชั่วโมงมากกว่า 90%) สำหรับสายพันธุ์ควบคุมคุณภาพ จะถูกเจือจาง 1:1,000,000 และเติมเลือดม้าหรือแกะที่กำจัดไฟบรินแล้ว ควรใช้ตารางจุดตัด RAST พิเศษเมื่อตีความผลลัพธ์เนื่องจากความแตกต่างของการสอบเทียบวิธีการ^{[ 32 ]}

สายพันธุ์ควบคุมคุณภาพที่ผ่านการตรวจสอบ ได้แก่E. coli ATCC 25922, P. aeruginosa ATCC 27853, S. aureus ATCC 29213, E. faecalis ATCC 29212, S. pneumoniae ATCC 49619 ^{[ 33 ]}

การตรวจคัดกรองกลไกการดื้อยาปฏิชีวนะใน RAST

RAST ช่วยให้สามารถระบุความต้านทานยาปฏิชีวนะที่อาจเกิดขึ้นในวัฒนธรรมที่ทดสอบได้อย่างรวดเร็ว ช่วยให้ตรวจสอบE. coliและK. pneumoniae ที่ผลิต ESBL และ/หรือคาร์บาเพเนมเมสได้ โดยใช้เซโฟแทกซิม/เซฟทาซิดิม (หลังจาก 4 ชั่วโมง) และเมโรเพเนม (หลังจาก 6 ชั่วโมง) ตามลำดับ อย่างไรก็ตาม ผลลัพธ์เหล่านี้ไม่ใช่เชิงปริมาณและควรใช้สำหรับการคัดกรองในการทดสอบทางการแพทย์ตามปกติเท่านั้น^{[ 34 ]}^{[ 35 ]}ในการทดลองทางคลินิก วิธี RAST นำไปสู่การปรับปรุงอย่างมีนัยสำคัญในการทำนายประสิทธิภาพของการรักษาด้วยยาปฏิชีวนะ^{[ 36 ]}

วิธีการแพร่กระจายล่วงหน้าของดิสก์

วางแผ่นดิสก์ที่มียาปฏิชีวนะลงบนจานวุ้น Mueller-Hinton ที่ไม่ได้เพาะเชื้อ และบ่มเป็นเวลา 2 ชั่วโมง จากนั้น นำแผ่นดิสก์ออก และเติมสารละลายแบคทีเรียที่เตรียมไว้ก่อนหน้านี้โดยใช้วิธีเจือจางในน้ำซุปแบบไมโคร แล้ววางแผ่นดิสก์ที่มียาปฏิชีวนะชนิดอื่นลงในตำแหน่งเดิม หลังจากบ่มเป็นเวลา 16-20 ชั่วโมง ให้เปรียบเทียบผลลัพธ์กับค่า MIC ของยาปฏิชีวนะตัวแรก ตัวอย่างของวิธีการแพร่กระจายล่วงหน้าคือการทดสอบ ประสิทธิภาพ ในหลอดทดลองของ ceftazidime/avibactam (แผ่นดิสก์หลัก) ในแง่ของ aztreonam (แผ่นดิสก์รอง) ^{[ 37 ]}

การทดสอบยาต้านเชื้อรา

สามารถใช้วิธีการแพร่กระจายแบบดิสก์เพื่อทดสอบความไวต่อยาต้านเชื้อราได้^{[ 38 ]}^{[ 39 ]}

ไบโอออโทกราฟี

เมื่อเปรียบเทียบกับวิธีการแบบดั้งเดิมที่ใช้แผ่นดิสก์ ไบโอออโทกราฟีใช้โครมาโทกราฟีแบบแผ่นบางเพื่อแยกส่วนประกอบของส่วนผสมที่ทดสอบ จากนั้น แผ่น TLC สามารถวางบนวุ้นที่เพาะเชื้อและปล่อยให้แพร่กระจายเข้าไป ( ไบโอออโทกราฟี แบบสัมผัส ) หรือคลุมด้วยน้ำซุปที่มีจุลินทรีย์ ( ไบโอออโทกราฟี แบบตรง ) จากนั้น นำตัวอย่างไปบ่มและวัดบริเวณยับยั้ง^{[ 41 ]}^{[ 42 ]}^{[ 40 ]}หรืออีกทางหนึ่ง แผ่น TLC สามารถคลุมด้วยวุ้นหลอมเหลวในไบโอออโทกราฟีแบบคลุมวุ้น^{[ 43 ]}

เพื่อแสดงภาพโซนการยับยั้งในไบโอออโตกราฟีโดยตรงจะใช้รีเอเจนต์ที่ตรวจจับกิจกรรมของดีไฮโดรจีเนส (เช่น เกลือเตตราโซเลียมซึ่งถูกแปลงโดยดีไฮโดรจีเนสของจุลินทรีย์เป็นฟอร์มาซาน โครโมเจนิค ) ^{[ 41 ]}

รูปภาพอื่นๆ

การแพร่กระจายของอะการ์ถูกนำมาใช้ครั้งแรกในปี พ.ศ. 2432 โดยMartinus Beijerinck ^{[ 8 ]}
ภาพถ่ายระยะใกล้แสดงผลลัพธ์ของการทดสอบการแพร่กระจายบนวุ้น
แผนภูมิแสดงความไวต่อยาปฏิชีวนะของเชื้อ Serratia marcescensแต่ละแผ่นจะมีฉลากระบุยาปฏิชีวนะที่บรรจุอยู่ (เช่น AMC30, อะม็อกซิซิลลิน/กรดคลาวูลานิก 30 ไมโครกรัม)
เครื่องอ่านจานเพาะเชื้ออัตโนมัติสำหรับวัดเส้นผ่านศูนย์กลางของบริเวณยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อ

ดูเพิ่มเติม

หมายเหตุ

↑ Klebsiella quasipneumoniae Brisse และคณะ

[18] Klebsiella quasipneumoniae Brisse และคณะ

[ 1 ]

[ 2 ]

[ 3 ]

[ 4 ]

[ 5 ]

[ 6 ]

[ 7 ]

[ 8 ]

[ 9 ]

[ 10 ]

[ 11 ]

[ 12 ]

[ 13 ]

[ 15 ]

[ 17 ]

[หมายเหตุ 1 ]

[ 19 ]

[ 20 ]

[ 22 ]

[ 24 ]

[ 25 ]

[ 26 ]

[ 27 ]

[ 28 ]

[ 29 ]

[ 30 ]

[ 31 ]

[ 32 ]

[ 33 ]

[ 34 ]

[ 35 ]

[ 36 ]

[ 37 ]

[ 38 ]

[ 39 ]

[ 42 ]

[ 43 ]