กลับไปหน้าบทความ

อ่าน 2 นาที

พื้นที่จำกัด

ใน ชีววิทยาโมเลกุล ตำแหน่ง การตัด หรือ ตำแหน่งการจดจำการตัด คือบริเวณของ โมเลกุล DNA ที่มีลำดับนิว คลีโอไท ด์ที่เฉพาะเจาะจง ( ความยาว 4-8 คู่เบส [ 1 ] ) ซึ่ง เอนไซม์ตัดจำเพาะ...

พื้นที่จำกัด

ในชีววิทยาโมเลกุลตำแหน่งการตัดหรือตำแหน่งการจดจำการตัดคือบริเวณของ โมเลกุล DNAที่มีลำดับนิวคลีโอไท ด์ที่เฉพาะเจาะจง ( ความยาว 4-8 คู่เบส[ 1 ] ) ซึ่ง เอนไซม์ตัดจำเพาะจะจดจำและตัด DNA ที่ตำแหน่งนั้นหรือใกล้เคียง โดยทั่วไปแล้วลำดับเหล่านี้จะเป็นลำดับพาลินโดรม[ 2 ] (เนื่องจากเอนไซม์ตัดจำเพาะมักจะจับกันเป็นโฮโมไดเมอร์ ) และเอนไซม์ตัดจำเพาะชนิดหนึ่งอาจตัดลำดับระหว่างนิวคลีโอไทด์สองตัวภายในตำแหน่งการจดจำ หรือบริเวณใกล้เคียง

การทำงาน

ตัวอย่างเช่น เอนไซม์จำกัดEcoRI ทั่วไป จะจดจำลำดับพาลินโดรม GAATTC และตัดระหว่าง G และ A บนทั้งสายบนและสายล่าง ทำให้เกิดส่วนที่ยื่นออกมา (ส่วนปลายของ สาย DNAที่ไม่มีคู่สมติดอยู่) ที่เรียกว่าปลายเหนียว[ 2 ]ที่ปลายแต่ละด้านของ AATT (AATTC เช่น TTAAC) จากนั้นสามารถใช้ส่วนที่ยื่นออกมานี้เพื่อเชื่อมต่อ (ดูDNA ligase ) ชิ้นส่วนของ DNA ที่มีส่วนยื่นที่เสริมกัน (เช่น ชิ้นส่วนที่ถูกตัดโดย EcoRI อีกชิ้นหนึ่ง)

เอนไซม์จำกัดบางชนิดตัด DNA ที่ไซต์จำกัดในลักษณะที่ไม่เหลือส่วนที่ยื่นออกมา เรียกว่าปลายทู่[ 2 ]ปลายทู่มีโอกาสน้อยมากที่จะถูกเชื่อมต่อโดย DNA ligase เนื่องจากปลายทู่ไม่มีคู่เบสที่ยื่นออกมาซึ่งเอนไซม์สามารถจดจำและจับคู่กับคู่ที่เสริมกันได้[ 3 ]อย่างไรก็ตาม ปลายเหนียวของ DNA มีแนวโน้มที่จะจับกับ DNA ligase ได้สำเร็จมากกว่าเนื่องจากมีนิวคลีโอไทด์ที่เปิดเผยและไม่มีคู่กัน ตัวอย่างเช่น ปลายเหนียวที่ลงท้ายด้วย AATTG มีแนวโน้มที่จะจับกับ ligase ได้มากกว่าปลายทู่ที่ทั้งสาย DNA 5' และ 3' จับคู่กัน ในกรณีตัวอย่าง AATTG จะมีคู่ที่เสริมกันคือ TTAAC ซึ่งจะลดการทำงานของเอนไซม์ DNA ligase [ 4 ]

แอปพลิเคชัน

ตำแหน่งตัดจำเพาะของเอนไซม์ตัดจำเพาะสามารถนำไปใช้ประโยชน์ได้หลายอย่างในชีววิทยาระดับโมเลกุล เช่น การระบุความแตกต่างของความยาวชิ้นส่วนดีเอ็นเอที่ได้จากการตัดด้วยเอนไซม์ตัดจำเพาะ ( RFLPs ) นอกจากนี้ ตำแหน่งตัดจำเพาะยังเป็นสิ่งสำคัญที่ควรคำนึงถึงเมื่อออกแบบพลาสมิดด้วย

ฐานข้อมูล

มีฐานข้อมูลหลายแห่งสำหรับไซต์จำกัดและเอนไซม์ ซึ่งฐานข้อมูลที่ไม่ใช่เชิงพาณิชย์ที่ใหญ่ที่สุดคือ REBASE [ 5 ] [ 6 ]เมื่อเร็วๆ นี้ ได้มีการแสดงให้เห็นว่านัลโลเมอร์ ที่มีนัยสำคัญทางสถิติ (เช่น มอติฟที่ขาดหายไปสั้นๆ ซึ่งคาดว่าจะมีอยู่สูง) ในจีโนมของไวรัสเป็นไซต์จำกัด ซึ่งบ่งชี้ว่าไวรัสอาจกำจัดมอติฟเหล่านี้เพื่ออำนวยความสะดวกในการบุกรุกโฮสต์แบคทีเรีย[ 7 ]ฐานข้อมูลนัลโลเมอร์ประกอบด้วยแคตตาล็อกที่ครอบคลุมของมอติฟที่ขาดหายไปขั้นต่ำ ซึ่งหลายรายการอาจเป็นมอติฟจำกัดที่ยังไม่เป็นที่รู้จัก

ดูเพิ่มเติม

ดึงข้อมูลมาจาก " https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Restriction_site&oldid=1317229169 "

สรุปเนื้อหา

ข้อมูลสำคัญจากบทความ

ข้อมูลสำคัญเกี่ยวกับ พื้นที่จำกัด

ใน ชีววิทยาโมเลกุล ตำแหน่ง การตัด หรือ ตำแหน่งการจดจำการตัด คือบริเวณของ โมเลกุล DNA ที่มีลำดับนิว คลีโอไท ด์ที่เฉพาะเจาะจง ( ความยาว 4-8 คู่เบส [ 1 ] ) ซึ่ง เอนไซม์ตัดจำเพาะ...

การทำงาน

ตัวอย่างเช่น เอนไซม์จำกัด EcoRI ทั่วไป จะจดจำลำดับพาลินโดรม GAATTC และตัดระหว่าง G และ A บนทั้งสายบนและสายล่าง ทำให้เกิดส่วนที่ยื่นออกมา (ส่วนปลายของ สาย DNA ที่ไม่มีคู่สมติดอยู่) ที่เรียกว่าปลายเหนียว [ 2 ] ที่ปลายแต่ละด้านของ AATT (AATTC เช่น TTAAC)...

แอปพลิเคชัน

ตำแหน่งตัดจำเพาะของเอนไซม์ตัดจำเพาะสามารถนำไปใช้ประโยชน์ได้หลายอย่างในชีววิทยาระดับโมเลกุล เช่น การระบุความแตกต่างของความยาวชิ้นส่วนดีเอ็นเอที่ได้จากการตัดด้วยเอนไซม์ตัดจำเพาะ ( RFLPs ) นอกจากนี้ ตำแหน่งตัดจำเพาะยังเป็นสิ่งสำคัญที่ควรคำนึงถึงเมื่อออกแบบ...

ฐานข้อมูล

มีฐานข้อมูลหลายแห่งสำหรับไซต์จำกัดและเอนไซม์ ซึ่งฐานข้อมูลที่ไม่ใช่เชิงพาณิชย์ที่ใหญ่ที่สุดคือ REBASE [ 5 ] [ 6 ] เมื่อเร็วๆ นี้ ได้มีการแสดงให้เห็นว่า นัลโลเมอร์ ที่มีนัยสำคัญทางสถิติ (เช่น มอติฟที่ขาดหายไปสั้นๆ ซึ่งคาดว่าจะมีอยู่สูง)...