การตรวจเลือดด้วยกล้องจุลทรรศน์หรือ ที่เรียกว่า การตรวจเลือดจากหลอดเลือดส่วนปลายหรือฟิล์มเลือดคือ การนำ เลือดมาป้ายลงบนแผ่นกระจกสำหรับกล้องจุลทรรศน์แล้วย้อมสีเพื่อให้สามารถมองเห็นเซลล์เม็ดเลือดต่างๆ ได้ด้วยกล้องจุลทรรศน์ การตรวจเลือดด้วยกล้องจุลทรรศน์นั้นใช้ในการวินิจฉัย โรค ทางโลหิตวิทยาและใช้เป็นประจำในการตรวจหาปรสิต ในเลือด เช่น ปรสิตที่ก่อให้ เกิด โรคมาลาเรียและโรคเท้าช้าง

การเตรียมสไลด์เลือดทำได้โดยการหยดเลือดลงบนปลายด้านหนึ่งของสไลด์ แล้วใช้เครื่องมือช่วยกระจายเลือด (spreader slide)เพื่อกระจายเลือดไปทั่วความยาวของสไลด์ จุดประสงค์คือเพื่อให้ได้บริเวณที่เรียกว่าชั้นเซลล์เดียว (monolayer) ซึ่งเซลล์จะอยู่ห่างกันมากพอที่จะนับและแยกแยะได้ ชั้นเซลล์เดียวนี้จะพบได้ใน "ขอบที่แผ่กระจาย" (feathered edge) ที่เกิดจากเครื่องมือช่วยกระจายเลือดขณะที่มันดึงเลือดไปข้างหน้า

ไม่เปื้อน

ย้อมสีไรท์-จีมซา

ภาพระยะใกล้ของขอบที่ดูฟูของรอยเลือด แถบสีอ่อนตรงกลางของไล่ระดับสีคือชั้นโมโนเลเยอร์

ปล่อยให้สไลด์แห้งในอากาศ จากนั้นจึงนำเลือดไปแช่ในเมทานอล สักครู่เพื่อ ตรึง เลือดไว้กับสไลด์ สารตรึงเลือดมีความสำคัญต่อการย้อมสีที่ดีและการแสดงรายละเอียดของเซลล์ หลังจากตรึงเลือดแล้ว จึง ย้อมสีสไลด์เพื่อแยกแยะเซลล์ออกจากกัน

การวิเคราะห์เลือดตามปกติในห้องปฏิบัติการทางการแพทย์มักทำโดยการย้อมฟิล์มเลือดด้วยสีย้อมแบบโรมานอฟสกีเช่น สีย้อมไรท์ สีย้อมจีม ซา หรือ สีย้อมดิฟ-ค วิกสีย้อมผสมไรท์-จีมซาก็เป็นที่นิยมเช่นกัน สีย้อมเหล่านี้ช่วยในการตรวจหาความผิดปกติ ของ เม็ดเลือดขาวเม็ดเลือดแดงและเกล็ดเลือดนักพยาธิวิทยาโลหิตมักใช้สีย้อมเฉพาะทางอื่นๆ เพื่อช่วยในการวินิจฉัยแยกโรคของความผิดปกติของเลือด

หลังจากย้อมสีแล้ว จะทำการตรวจสอบชั้นโมโนเลเยอร์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์โดยใช้กำลังขยายสูงสุด 1,000 เท่า ตรวจสอบเซลล์แต่ละเซลล์ และบันทึกลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์เหล่านั้น^{[ 1 ] [ 2 ]}

ภาพด้านซ้ายแสดงภาพฟิล์มเลือดของผู้ใหญ่ปกติที่ได้จากกล้องจุลทรรศน์ ส่วนภาพด้านขวาแสดงฟิล์มเลือดของผู้ป่วยที่เป็นมะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดเรื้อรัง (Chronic Myeloid Leukemia )

โดยปกติการตรวจเลือดด้วยกล้องจุลทรรศน์จะทำควบคู่กับการตรวจนับเม็ดเลือดครบถ้วนเพื่อตรวจสอบผลลัพธ์ที่ผิดปกติหรือยืนยันผลลัพธ์ที่เครื่องวิเคราะห์อัตโนมัติระบุว่าไม่น่าเชื่อถือ^{[ 3 ]}

การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์เกี่ยวกับรูปร่าง ขนาด และสีของเซลล์เม็ดเลือดแดงมีประโยชน์ในการระบุสาเหตุของโรคโลหิตจาง ความผิดปกติ เช่นโรคโลหิตจางจากการขาดธาตุเหล็กโรคโลหิตจางเคียว โรคโลหิตจางเมกะโลบลา สติก และโรคโลหิตจางเม็ดเลือดแดงแตกจากหลอดเลือดฝอยขนาดเล็กส่งผลให้เกิดความผิดปกติเฉพาะบนฟิล์มเลือด^{[ 2 ]}

สัดส่วนของเม็ดเลือดขาว ชนิดต่างๆ สามารถกำหนดได้จากสเมียร์เลือด ซึ่งเรียกว่าการจำแนกเม็ดเลือดขาว แบบแมนนวล การจำแนกเม็ดเลือดขาวสามารถเปิดเผยความผิดปกติในสัดส่วนของเม็ดเลือดขาวชนิดต่างๆ เช่นภาวะนิวโทรฟิเลียและอีโอซิโนฟิเลียรวมถึงการมีอยู่ของเซลล์ที่ผิดปกติ เช่นเซลล์บลาสท์ ที่หมุนเวียนอยู่ในกระแสเลือด ที่พบในโรคมะเร็งเม็ดเลือด ขาว เฉียบพลัน^{[ 4 ]} ความผิดปกติเชิงคุณภาพของเม็ดเลือดขาว เช่นแกรนูเลชันที่เป็นพิษก็สามารถมองเห็นได้ในสเมียร์เลือดเช่นกัน เครื่องวิเคราะห์นับเม็ดเลือดครบถ้วนสมัยใหม่สามารถให้การจำแนกเม็ดเลือดขาวแบบอัตโนมัติได้ แต่มีความสามารถจำกัดในการแยกแยะเซลล์ที่ยังไม่เจริญเต็มที่และเซลล์ที่ผิดปกติ ดังนั้นการตรวจสเมียร์เลือดแบบแมนนวลจึงมักมีความจำเป็น^{[ 5 ] [ 6 ]}

การตรวจเลือดด้วยกล้องจุลทรรศน์เป็นวิธีการวินิจฉัยที่นิยมสำหรับโรคติดเชื้อปรสิตบางชนิด เช่น มาลาเรียและบาบีซิโอซิส [ ^{7 ] ใน}บางกรณีอาจพบแบคทีเรียบนฟิล์มเลือดในผู้ป่วยที่มีภาวะติดเชื้อในกระแสเลือดอย่าง รุนแรง ^{[ 8 ]}

วิธีการวินิจฉัยโรคมาลาเรียที่นิยมและน่าเชื่อถือที่สุดคือการตรวจเลือดด้วยกล้องจุลทรรศน์ เนื่องจากปรสิตหลักทั้งสี่ชนิดมีลักษณะเฉพาะที่แตกต่างกัน โดยทั่วไปจะใช้การตรวจเลือดสองแบบ^{[ 9 ]}

• การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบบางนั้นคล้ายกับการตรวจเลือดแบบปกติ และช่วยในการระบุชนิดของปรสิตได้ เนื่องจากลักษณะของปรสิตจะถูกรักษาไว้ได้ดีที่สุดในรูปแบบการเตรียมนี้
• ฟิล์มหนาช่วยให้นักจุลทรรศน์สามารถตรวจสอบเลือดปริมาณมากได้ และมีความไวมากกว่าฟิล์มบางประมาณ 11 เท่า ดังนั้นการตรวจพบการติดเชื้อในระดับต่ำจึงทำได้ง่ายกว่าในฟิล์มหนา แต่ลักษณะของปรสิตจะบิดเบี้ยวมากขึ้น ดังนั้นการแยกแยะระหว่างสายพันธุ์ต่างๆ จึงอาจทำได้ยากกว่ามาก^{[ 10 ] [ 9 ]}

จากสเมียร์หนา นักจุลชีววิทยาผู้เชี่ยวชาญสามารถตรวจพบปรสิตทั้งหมดที่พบได้ การวินิจฉัยด้วยกล้องจุลทรรศน์อาจทำได้ยาก เนื่องจากโทรโฟซอยต์ระยะแรก ("รูปวงแหวน") ของทั้งสี่ชนิดมีลักษณะเหมือนกัน และไม่สามารถวินิจฉัยชนิดได้จากโทรโฟซอยต์รูปวงแหวนเพียงตัวเดียว การระบุชนิดจึงต้องอาศัยโทรโฟซอยต์หลายตัวเสมอ

ข้อผิดพลาดที่ใหญ่ที่สุดในห้องปฏิบัติการส่วนใหญ่ในประเทศที่พัฒนาแล้วคือ การปล่อยให้เวลาผ่านไปนานเกินไประหว่างการเก็บตัวอย่างเลือดและการทำสเมียร์เลือด เมื่อเลือดเย็นลงจนถึงอุณหภูมิห้อง เซลล์สืบพันธุ์เพศผู้จะแบ่งตัวและปล่อยไมโครแกมีต ออกมา ซึ่งเป็นโครงสร้างเส้นใยยาวคดเคี้ยวที่อาจถูกเข้าใจผิดว่าเป็นสิ่งมีชีวิตเช่นเชื้อ Borreliaหากเก็บเลือดไว้ในอุณหภูมิที่สูงกว่าสคิซอนต์จะแตกออกและเมโรโซอิตที่บุกรุกเม็ดเลือดแดงจะทำให้ดูเหมือนเชื้อPlasmodium falciparum ในรูปแบบ accolé หาก ทิ้ง เชื้อ Plasmodium vivaxหรือPlasmodium ovaleไว้ใน EDTA เป็นเวลาหลายชั่วโมง การสะสมของกรดในตัวอย่างจะทำให้เม็ดเลือดแดงที่ติดเชื้อหดตัวและปรสิตจะม้วนตัว ทำให้ดูเหมือนเชื้อPlasmodium malariaeปัญหานี้จะรุนแรงขึ้นหาก ใช้ สารกันเลือดแข็งเช่นเฮปารินหรือซิเตรตสารกันเลือดแข็งที่ก่อให้เกิดปัญหาน้อยที่สุดคือEDTAโดยทั่วไปจะใช้สีย้อมโรมานอฟสกีหรือสีย้อมที่คล้ายคลึงกัน ห้องปฏิบัติการบางแห่งใช้ค่า pH ในการย้อมที่ผิดพลาดเหมือนกับที่ใช้สำหรับฟิล์มเลือดทางโลหิตวิทยาตามปกติ ( pH 6.8) ฟิล์มเลือดสำหรับตรวจมาลาเรียต้องย้อมที่ pH 7.2 มิฉะนั้นจะไม่เห็นจุดของชูฟเนอร์และ จุด ของเจมส์

ขั้นตอนการจับอิ มมูโนโครมาโตกราฟี (การทดสอบวินิจฉัยอย่างรวดเร็ว เช่นการทดสอบการตรวจหาแอนติเจนมาลาเรีย ) เป็นตัวเลือกการวินิจฉัยที่ไม่ต้องใช้กล้องจุลทรรศน์สำหรับห้องปฏิบัติการที่อาจไม่มีความเชี่ยวชาญด้านกล้องจุลทรรศน์ที่เหมาะสม^{[ 11 ]}

• ภาพถ่ายจุลทรรศน์ของเลือด