โครมาโทกราฟีแบบกระดาษ
โครมาโทกราฟีแบบกระดาษเป็น วิธี การวิเคราะห์ที่ใช้ในการแยกสารเคมีหรือสารที่มีสี นอกจากนี้ยังสามารถใช้กับสารเคมีที่ไม่มีสีซึ่งสามารถระบุตำแหน่งได้ด้วยการย้อมสีหรือวิธีการมองเห็นอื่นๆ หลังจากการแยก[ 1 ]ปัจจุบันส่วนใหญ่ใช้เป็นเครื่องมือการสอน โดยถูกแทนที่ในห้องปฏิบัติการด้วยวิธีการโครมาโทกราฟีอื่นๆ เช่นโครมาโทกราฟีแบบแผ่นบาง (TLC)
วิธีการวิเคราะห์นี้ประกอบด้วยสามส่วน ได้แก่ เฟสเคลื่อนที่ เฟสคงที่ และตัวกลางรองรับ (กระดาษ) เฟสเคลื่อนที่โดยทั่วไปคือตัวทำละลายอินทรีย์ที่ไม่เป็นขั้ว ซึ่งใช้ละลายตัวอย่าง เฟสคงที่ประกอบด้วยโมเลกุลของน้ำ (ที่เป็นขั้ว) ซึ่งถูกผสมเข้าไปในกระดาษระหว่างกระบวนการผลิต เฟสเคลื่อนที่เคลื่อนที่ขึ้นไปตามเฟสคงที่โดยอาศัยแรงดึงดูดของเส้นเลือดฝอย โดย พาตัวอย่างไปด้วย ความแตกต่างระหว่างTLCและโครมาโทกราฟีบนกระดาษคือ เฟสคงที่ใน TLC เป็นชั้นของสารดูดซับ (โดยปกติคือซิลิกาเจลหรืออะลูมิเนียมออกไซด์ ) ในขณะที่เฟสคงที่ในโครมาโทกราฟีบนกระดาษเป็นกระดาษที่มีการดูดซับน้อยกว่า
โครมาโทกราฟีแบบ สองมิติซึ่งเป็นรูปแบบหนึ่งของโครมาโทกราฟีบนกระดาษเกี่ยวข้องกับการใช้ตัวทำละลายสองชนิดและหมุนกระดาษ 90° ระหว่างการเปลี่ยนตัวทำละลาย วิธีนี้มีประโยชน์สำหรับการแยกสารผสมที่ซับซ้อนของสารประกอบที่มีขั้วคล้ายกัน เช่นกรดอะมิโน
ค่า R , สารละลาย และตัวทำละลาย
ปัจจัยการหน่วง ( RF อาจกำหนดได้ว่าเป็นอัตราส่วนของระยะทางที่ตัวถูกละลายเคลื่อนที่ไปต่อระยะทางที่ตัวทำละลายเคลื่อนที่ไป ใช้ในการโครมาโทกราฟีเพื่อหาปริมาณการหน่วงของตัวอย่างในเฟสคงที่เมื่อเทียบกับเฟสเคลื่อนที่[ 2 ]มักแสดงเป็นเศษส่วนที่มีทศนิยมสองตำแหน่ง
- ถ้า ค่า R ของสารละลายเป็นศูนย์ สารละลายจะยังคงอยู่ในเฟสคงที่และไม่สามารถเคลื่อนที่ได้
- ถ้า ค่า R เท่ากับ 1 แสดงว่าสารละลายไม่มีความสัมพันธ์กับเฟสคงที่และเคลื่อนที่ไปพร้อมกับส่วนหน้าของตัวทำละลาย
ตัวอย่างเช่น ถ้าสารประกอบเคลื่อนที่ได้ 9.9 ซม. และตัวทำละลายเคลื่อนที่ได้ 12.7 ซม. ค่า R จะ เท่ากับ (9.9/12.7) = 0.779 หรือ 0.78 ค่า R ขึ้นอยู่กับอุณหภูมิและตัวทำละลายที่ใช้ในการทดลอง ดังนั้นตัวทำละลายหลายชนิดจึงให้ ค่า R ที่แตกต่างกัน สำหรับสารประกอบผสมเดียวกัน ตัวทำละลายในโครมาโทกราฟีคือของเหลวที่วางกระดาษไว้ และตัวถูกละลายคือหมึกที่กำลังถูกแยกออกจากกัน
เม็ดสีและขั้ว
โครมาโทกราฟีบนกระดาษเป็นวิธีหนึ่งในการทดสอบความบริสุทธิ์ของสารประกอบและระบุสารต่างๆ โครมาโทกราฟีบนกระดาษเป็นเทคนิคที่มีประโยชน์เพราะค่อนข้างรวดเร็วและต้องการปริมาณวัสดุเพียงเล็กน้อย การแยกสารในโครมาโทกราฟีบนกระดาษเกี่ยวข้องกับหลักการของการแบ่งส่วน ในโครมาโทกราฟีบนกระดาษ สารต่างๆ จะกระจายตัวอยู่ระหว่างเฟสคงที่และเฟสเคลื่อนที่ เฟสคงที่คือน้ำที่ถูกกักอยู่ระหว่างเส้นใยเซลลูโลสของกระดาษ เฟสเคลื่อนที่คือสารละลายที่ใช้ในการพัฒนาซึ่งเคลื่อนที่ขึ้นไปตามเฟสคงที่ โดยนำพาสารตัวอย่างไปด้วย ส่วนประกอบของสารตัวอย่างจะแยกออกจากกันได้ง่ายตามความแรงของการดูดซับบนเฟสคงที่เทียบกับความง่ายในการละลายในเฟสเคลื่อนที่
เมื่อ นำ ตัวอย่างสารเคมี ที่มีสี มาวางบนกระดาษกรอง เราสามารถแยกสีได้โดยการจุ่มปลายด้านหนึ่งของกระดาษลงในตัวทำละลายตัวทำละลายจะแพร่กระจายขึ้นไปบนกระดาษละลายโมเลกุลต่างๆ ในตัวอย่างตามขั้วของโมเลกุลและตัวทำละลาย หากตัวอย่างมีสีมากกว่าหนึ่งสี นั่นหมายความว่าต้องมีโมเลกุลมากกว่าหนึ่งชนิด เนื่องจากโครงสร้างทางเคมีที่แตกต่างกันของโมเลกุลแต่ละชนิด โมเลกุลแต่ละชนิดจะมีขั้วที่แตกต่างกันอย่างน้อยเล็กน้อย ทำให้โมเลกุลแต่ละชนิดมีความสามารถในการละลายในตัวทำละลายแตกต่างกัน ความสามารถในการละลายที่ไม่เท่ากันนี้ทำให้โมเลกุลสีต่างๆ เคลื่อนที่ด้วยอัตราที่แตกต่างกันเมื่อตัวทำละลายพาพวกมันขึ้นไปบนกระดาษ โมเลกุลที่ละลายได้ดีกว่าจะเคลื่อนที่ขึ้นไปบนกระดาษได้เร็วกว่า หากสารเคมีไม่มีขั้วมาก มันจะไม่ละลายเลยในตัวทำละลายที่มีขั้วสูงมาก และเช่นเดียวกันสำหรับสารเคมีที่มีขั้วสูงมากและตัวทำละลายที่ไม่มีขั้วมาก
ประเภท

ลง
การสร้างโครมาโทแกรมทำได้โดยการปล่อยให้ตัวทำละลายไหลลงมาตามกระดาษ โดยวางตัวทำละลายไว้ในภาชนะบรรจุตัวทำละลายที่ด้านบน วางตัวอย่างไว้ที่ด้านบน และตัวทำละลายจะไหลลงมาตามกระดาษจากด้านบน
ขึ้นไป
ในที่นี้ ตัวทำละลายจะเคลื่อนที่ขึ้นไปตามกระดาษโครมาโทกราฟี ทั้งโครมาโทกราฟีแบบกระดาษลงและแบบกระดาษขึ้นใช้สำหรับการแยกสารอินทรีย์และสารอนินทรีย์ ตัวอย่างและตัวทำละลายเคลื่อนที่ขึ้นไปด้านบน
วิธีการขึ้นและลง
นี่คือการผสมผสานเทคนิคทั้งสองข้างต้นเข้าด้วยกัน ส่วนบนของโครมาโทกราฟีแบบขึ้นสามารถพับทับแท่งได้ เพื่อให้กระดาษเปลี่ยนเป็นแบบลงหลังจากผ่านแท่งนั้นไปแล้ว
โครมาโทกราฟีแบบวงกลม
นำกระดาษกรองทรงกลมมาวางตัวอย่างไว้ตรงกลางกระดาษ หลังจากทำให้แห้งแล้ว นำกระดาษกรองไปผูกในแนวนอนบนจานเพาะเชื้อที่มีตัวทำละลาย เพื่อให้ปลายกระดาษจุ่มลงในตัวทำละลาย ตัวทำละลายจะไหลขึ้นไปตามปลายกระดาษ และส่วนประกอบต่างๆ จะแยกตัวออกเป็นวงแหวนซ้อนกัน
สองมิติ
ในเทคนิคนี้จะใช้กระดาษสี่เหลี่ยมจัตุรัสหรือสี่เหลี่ยมผืนผ้า โดยนำตัวอย่างไปติดที่มุมใดมุมหนึ่งของกระดาษ และทำการล้างภาพในทิศทางตั้งฉากกับทิศทางการล้างครั้งแรก
ประวัติความเป็นมาของโครมาโทกราฟีบนกระดาษ
การค้นพบโครมาโทกราฟีบนกระดาษในปี พ.ศ. 2486 โดยมาร์ตินและซิงจ์ทำให้มีวิธีการสำรวจส่วนประกอบของพืชและการแยกและการระบุส่วนประกอบเหล่านั้นเป็นครั้งแรก[ 3 ]เออร์วิน ชาร์กาฟฟ์ อ้างถึงบทความปี พ.ศ. 2487 โดยคอนสเดน กอร์ดอน และมาร์ติน ในประวัติของเวนทราอับ[ 4 ] [ 5 ]มีกิจกรรมมากมายในสาขานี้หลังจากปี พ.ศ. 2488 [ 3 ]
บรรณานุกรม
- Block, Richard J.; Durrum, Emmett L.; Zweig, Gunter (1955). คู่มือการแยกสารด้วยโครมาโทกราฟีบนกระดาษและการแยกสารด้วยไฟฟ้าบนกระดาษ . Elsevier. หน้า 4. ISBN 978-1-4832-7680-9–ผ่านทาง Google Books
{{cite book}}: ความไม่เข้ากันของหมายเลข ISBN / วันที่ ( ขอความช่วยเหลือ )