การส่องกล้องแบบคอนโฟคอล
ปลายสอดของกล้องเอนโดสโคป

การส่องกล้องแบบคอนโฟคอลหรือการส่องกล้องแบบเลเซอร์คอนโฟคอล ( CLE ) เป็น เทคนิค การถ่ายภาพสมัยใหม่ที่ช่วยให้สามารถตรวจสอบ ลักษณะ ทางจุลภาคและเนื้อเยื่อวิทยาภายในร่างกายแบบเรียลไทม์ได้ ในคำว่า "endomicroscopy" นั้น endo- หมายถึง "ภายใน" และ -skopein หมายถึง "ดูหรือสังเกต" CLE หรือที่รู้จักกันในชื่อ "การตรวจชิ้นเนื้อด้วยแสง" สามารถวิเคราะห์ ลักษณะ ทางเนื้อเยื่อวิทยาและเซลล์วิทยาของเนื้อเยื่อ ซึ่งโดยปกติแล้วจะทำได้เฉพาะ การ ตรวจชิ้นเนื้อ เท่านั้น คล้ายกับการส่องกล้องแบบคอนโฟคอลเลเซอร์ใน CLE ที่กรองด้วยรูเล็กๆจะกระตุ้น สีย้อม เรืองแสงผ่านตัวแยกแสงและเลนส์ วัตถุ จาก นั้นการปล่อยแสงเรืองแสงจะเดินทางตามเส้นทางที่คล้ายกันไปยังตัวตรวจจับ รูเล็กๆ ถูกใช้เพื่อเลือกการปล่อยแสงจากระนาบโฟกัส ที่ต้องการ CLE มีสองประเภท ได้แก่ แบบใช้โพรบ (pCLE) และการส่องกล้องแบบใช้เอนโดสโคปี (eCLE) ซึ่งพบได้น้อยกว่า^{[ 1 ]}

CLE สามารถสอดท่อเข้าไปเพื่อศึกษาทางเดินอาหาร (GI)และอวัยวะย่อยอาหารเสริมด้วยสีย้อมเรืองแสงโรคต่างๆ รวมถึงโรคลำไส้อักเสบ (IBD) และหลอดอาหารบาร์เร็ตต์สามารถวินิจฉัยได้ด้วยภาพที่ขยายและละเอียดมากขึ้นเมื่อใช้ร่วมกับการส่องกล้อง แบบดั้งเดิม ^{[ 2 ]}

CLE สามารถระบุรอยโรคด้วยความลึกในการมองเห็น ที่น้อย กว่าใต้เนื้อเยื่อ ซึ่งแตกต่างจากระดับพื้นผิวในการส่องกล้องแบบดั้งเดิม[ 3 ^{]นอกจากนี้}ยังช่วยให้แพทย์สามารถแยกแยะ รอยโรค ที่ไม่ร้ายแรงหรือร้ายแรงได้ด้วยการวินิจฉัยทางเนื้อเยื่อวิทยาแบบเรียลไทม์ โดยการเปิดเผยคุณสมบัติของแผ่นเนื้อเยื่อในระดับเซลล์^{[ 3 ] [ 4 ]}

ตัวอย่างหนึ่งคือโรควิปเปิล [ ^{5 ] การ}ส่องกล้องแบบดั้งเดิมแสดงให้เห็นเยื่อบุลำไส้เล็กส่วนต้น ที่มีลวดลายสีขาว ในทางกลับกัน CLE สร้างภาพสองภาพ –– ภาพผิวเผินแสดงการรั่วไหลของเส้นเลือดฝอยในเยื่อบุลำไส้เล็กส่วนต้น ในขณะที่ภาพลึกแสดงเซลล์ของเยื่อบุลำไส้เล็กส่วนต้น รวมถึงเซลล์โกเบล็ตและมาโครฟาจที่มีฟองในชั้นลามินาโพรเพรียเมื่อเปรียบเทียบกับ การตรวจ ทางเนื้อเยื่อวิทยา ของบริเวณ ลำไส้เล็กส่วนต้นเดียวกันหลังจากการย้อมสีด้วยกรดเพอร์ออกซิแอซิด-ชิฟฟ์ CLE ระบุรูปแบบที่คล้ายกันของเซลล์โกเบล็ตและมาโครฟาจที่มีฟอง^{[ 5 ]}

มีการคิดค้น CLE ขึ้นมา 2 ประเภท ได้แก่ CLE แบบใช้หัวตรวจ (pCLE) และ CLE แบบใช้กล้องเอนโดสโคป (eCLE)

pCLE ซึ่งพัฒนาโดยMauna Kea Technologiesเป็นชุดไฟเบอร์ที่ส่งผ่านช่องทำงานขนาด 2.8 มม. (รูกลวง) ของเอนโดสโคป มาตรฐาน เข้าไปในระบบทางเดินอาหาร^{[ 1 ]}ด้วยระนาบการถ่ายภาพคงที่ ไฟเบอร์แต่ละเส้นทำหน้าที่เป็นรูเล็กๆ เพื่อกรองสัญญาณรบกวนที่ไม่ต้องการอัตราเฟรมอยู่ระหว่าง 9 ถึง 12 ภาพต่อวินาที^{[ 1 ]}

eCLE ซึ่งพัฒนาโดยPentaxเป็นกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลที่ติดตั้งอยู่ที่ปลายท่อเอนโดสโคป เครื่อง eCLE มีขนาดเส้นผ่านศูนย์กลางใหญ่กว่า pCLE ทำให้การสอดท่อ เอนโดสโคปเข้าไปในทางเดินอาหาร ทำได้ยากขึ้น eCLE ได้หยุดจำหน่ายในเชิงพาณิชย์เนื่องจากความไม่ยืดหยุ่นของกล้อง^{[ 1 ]}

CLE มีประสิทธิภาพในการตรวจหารอยโรคก่อนมะเร็งรวมถึง หลอดอาหาร บาร์เร็ตต์และ รอยโรค ที่เป็นมะเร็งในทางเดินอาหารส่วนบน^{[ 3 ] [ 6 ] [ 7 ]}การเปลี่ยนแปลงของเยื่อบุที่แสดงในพยาธิวิทยาซึ่งเป็นดัชนีของมะเร็งสามารถระบุได้ภายใต้ CLE เช่นภาวะดิสพลาเซีย ระดับสูง CLE ยังสามารถนำมาใช้ในการอ้างอิงถึงการรักษาหลอดอาหารบาร์เร็ตต์โดยการวัดขอบเขตด้านข้างของเนื้องอกได้^{[ 3 ] [ 7 ]}

การจำแนกประเภทไมอามีเป็นระบบที่นิยมใช้มากที่สุดในการวินิจฉัย CLE ของหลอดอาหาร^{[ 6 ] [ 8 ]}

เช่นเดียวกับหลอดอาหาร CLE สามารถตรวจพบมะเร็งกระเพาะอาหาร ระยะเริ่มต้น รวมถึงภาวะก่อนเป็นมะเร็ง เช่นโรคกระเพาะอักเสบและ ภาวะเมตาพลาเซี ยของลำไส้^{[ 1 ] [ 2 ] [ 6 ]} CLE สามารถตรวจจับและแยกแยะรูปแบบหลุมในกระเพาะอาหารเพื่อระบุโรคตามการจำแนกประเภทของไมอามี ซึ่งได้รับการปรับปรุงในปี 2016 ให้รวมทั้งรูปแบบหลุมและโครงสร้างของหลอดเลือด^{[ 1 ] [ 2 ] [ 8 ] [ 9 ]}การจำแนกประเภทที่ได้รับการปรับปรุงนี้ช่วยให้แพทย์สามารถแยกแยะระหว่างรอยโรคที่เป็นเนื้องอกและไม่ใช่เนื้องอกได้^{[ 9 ]}

การมีอยู่ของHelicobacter pyloriสามารถระบุได้โดยใช้ CLE โดยการสังเกตการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาในเนื้อเยื่อ^{[ 10 ] [ 11 ]}

CLE เผยให้เห็น "รูปแบบคล้ายลูกฟุตบอล" ของเส้นเลือดฝอยที่แคบลงในมะเร็งต่อมน้ำเหลือง; โครงสร้างที่บิดเบี้ยวและการรั่วไหลของฟลูออเรสซีนจากช่องภายในในมะเร็งต่อมอะเดโนคาร์ซิโนมาของลำไส้ใหญ่; และวิลลัสและคริปต์ที่มีรูปร่างทู่และลิมโฟไซต์ภายในเยื่อบุผิวที่เพิ่มขึ้นในโรคเซลิแอค^{[ 1 ] [ 2 ] [ 12 ]}

CLE สามารถนำมาใช้เพื่อระบุอะดีโนมาและเนื้องอกในติ่งเนื้อ และรอยโรคในลำไส้ใหญ่ และทวารหนักได้^{[ 13 ] [ 14 ]}การจำแนกประเภทไมอามีให้แนวทางสำหรับแพทย์ในการแยกแยะ รอยโรค ที่เป็นเนื้องอกและไม่ใช่เนื้องอก^{[ 8 ]}

CLE สามารถใช้ในการระบุ IBD และชนิดย่อย ( โรคโครห์นและลำไส้ใหญ่อักเสบ ) โดยอาศัยการสังเกตลักษณะทางสัณฐานวิทยา เช่น การบิดเบี้ยวของโครงสร้าง ความหนาแน่น ของต่อม ลดลง ความไม่สม่ำเสมอของต่อม และความหนาแน่นของช่องว่างเยื่อบุผิวที่ สูง ผิด ปกติ ^{[ 1 ] [ 2 ] [ 15 ]}การทำนายการลุกลามของ IBD บนเยื่อบุผิวที่ไม่เกิดการอักเสบก็สามารถทำได้เช่นกัน ทำให้เกิดแนวทางการรักษาแบบใหม่ที่ "รักษาตามเป้าหมาย" ^{[ 1 ] [ 2 ]}

การใช้ EUS ร่วมกับ CLE สามารถวินิจฉัยรอยโรคถุงน้ำในตับอ่อน ได้อย่างแม่นยำ รวมถึง รอยโรค ชนิดเมือกและไม่ใช่เมือก^{[ 2 ] [ 16 ]}มีการใช้เข็มพิเศษเพื่อเก็บของเหลวและเนื้อเยื่อผนังถุงน้ำเพื่อทำการทดสอบ^{[ 16 ]} นอกจากนี้ยังสามารถมองเห็น มะเร็งท่อตับอ่อน (PDAC) ได้ด้วย CLE ^{[ 4 ]}การสังเกตรอยโรคถุงน้ำและ PDAC ช่วยให้แพทย์สามารถระบุภาวะตับอ่อนอักเสบเรื้อรัง ในระยะเริ่มต้น และกำหนดความร้ายแรงของรอยโรคได้^{[ 4 ]}

สามารถมองเห็นภาวะตีบตันของท่อน้ำดี ได้ด้วย CLE ^{[ 1 ]}การจัดประเภทไมอามีและปารีสสามารถปรับใช้เพื่อแยกแยะสาเหตุของมะเร็งและการอักเสบได้^{[ 17 ]}

การแยกแยะการอักเสบและ เนื้องอก ร้ายในปอดและระบบทางเดินปัสสาวะอาจทำได้โดยใช้ CLE ซึ่งขณะนี้อยู่ระหว่างการวิจัย^{[ 10 ] [ 18 ]}มีการเสนอการใช้งานบางอย่าง เช่น การวินิจฉัยมะเร็งในช่องปากและมะเร็งบริเวณศีรษะและลำคอ^{[ 19 ] [ 20 ]}

แอนติบอดีของเป้าหมายระดับโมเลกุลใช้ในการวินิจฉัยโรคทางเดินอาหารโดยการตรวจเนื้อเยื่อ^{[ 21 ] [ 22 ]} CLE จับแสงฟลูออเรสเซนต์ที่เกิดจากแอนติบอดีจำเพาะที่จับกับปัจจัยการเจริญเติบโตของหลอดเลือด (VEGF) เมื่อเปรียบเทียบความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในความแรงของแสงฟลูออเรสเซนต์ แพทย์สามารถแยกแยะเนื้อเยื่อ ปกติและเนื้อเยื่อ มะเร็ง ได้ การถ่ายภาพระดับโมเลกุลด้วยแอนติบอดีอาจนำมาใช้กับ CLE เป็น เกณฑ์มาตรฐาน ในการวินิจฉัยเนื่องจากมีความสัมพันธ์สูงกับการตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์นอกร่างกาย^{[ 21 ]}

เทคนิคการถ่ายภาพระดับโมเลกุลสามารถใช้ในลักษณะเดียวกันในการตรวจสอบมะเร็งศีรษะและลำคอโดยใช้ CLE แม้ว่าเป้าหมายการวินิจฉัยอาจแตกต่างจากในระบบทางเดินอาหารก็ตาม^{[ 20 ] [ 23 ]}

เลเซอร์ที่ปล่อยออกมาจาก CLE ผ่านรูเล็กๆจะสะท้อนโดยตัวแยกแสงหรือกระจกไดโครอิกและโฟกัสโดยเลนส์ วัตถุ สีย้อมเรืองแสงในเนื้อเยื่อเป้าหมายจะถูกกระตุ้นและปล่อยคลื่นความยาว เฉพาะ การปล่อยแสงจากระนาบโฟกัสของเนื้อเยื่อจะถูกรวบรวมโดยเลนส์วัตถุและตัวแยกแสง ในที่สุดเลเซอร์จะถูกกรองโดยรูเล็กๆ เพื่อลด สัญญาณรบกวนนอกโฟกัสก่อนที่จะเข้าสู่ตัวตรวจจับหรือหลอดโฟโตมัลติพลายเออร์ [ ^{1 ] โดย}การรวมเฉพาะแสงที่สะท้อนจากระนาบโฟกัสเดียวกันและไม่รวมการกระเจิงสะท้อนอื่นๆ ระบบจะจับภาพส่วนเล็กๆ ที่มีรายละเอียดสูงของเนื้อเยื่อ กระบวนการส่องสว่างและการตรวจจับนี้จะทำซ้ำทั่วทั้งตัวอย่างเนื้อเยื่อเพื่อสร้างภาพที่สมบูรณ์ การจำกัดระนาบโฟกัสในลักษณะนี้ช่วยให้สามารถตัดภาพด้วยแสงซึ่งช่วยลดความพร่ามัวที่สังเกตได้ในกล้องจุลทรรศน์แสงมาตรฐาน

ครีซิลไวโอเลตและอะคริฟลาวีนสามารถใช้เป็นสีย้อมเฉพาะที่ได้ ครีซิลไวโอเลตเป็นสีย้อมที่ใช้กันทั่วไปในทางจุลพยาธิวิทยาสำหรับส่วนตัดของกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง โดยเฉพาะอย่างยิ่ง ส่วนตัด ของสมองใน CLE มันสามารถเพิ่มความชัดเจนในการมองเห็นไซโตพลาสซึม ได้ แต่จำกัดการแทรกซึมของเนื้อเยื่อและไม่แสดงอะไรเกี่ยวกับหลอดเลือดอะคริฟลาวีนเป็นทั้ง ยา ฆ่าเชื้อและสีย้อม ใน CLE มันสามารถย้อมนิวเคลียส ของเซลล์ เยื่อบุผิวของทางเดินอาหารได้อย่างไรก็ตาม มันมี คุณสมบัติเป็นพิษ ต่อเซลล์และก่อให้เกิดการกลายพันธุ์นอกเหนือจากผลข้างเคียงทั่วไปของการระคายเคือง^{[ 1 ]}

ฟลูออเรสซีนเป็น สีย้อม IV ที่ได้รับความนิยมมากที่สุด สำหรับ CLE ฟลูออเรสซีนเป็น สีย้อมที่ได้รับการอนุมัติ จาก FDAซึ่งใช้ใน คลินิก จักษุวิทยาเป็นประจำ เนื่องจากปรากฏเป็นสีเขียวภายใต้แสงโคบอลต์บลู^{[ 12 ]}โดยทั่วไปจะใช้ทาเฉพาะที่เพื่อระบุโรคของกระจกตา ด้วย กล้องจุลทรรศน์แบบส่องไฟ รวม ถึงรอยถลอกของกระจกตาแผลและการติดเชื้อหรือฉีดเข้าเส้นเลือดเพื่อระบุ โรค ของจอประสาท ตา ด้วยการตรวจหลอดเลือดรวมถึงภาวะจอประสาทตาเสื่อมและโรคเบาหวานขึ้นจอ ประสาทตา ใน CLE มักจะให้ฉีดเข้าเส้นเลือดทันทีก่อนการใส่ ท่อ เอนโดสโคปมีรายงานว่าการเรืองแสงจะเด่นชัดที่สุดตั้งแต่ไม่กี่วินาทีถึง 8 นาที^{[ 1 ]} ฟลูออเรสซีนจะ ถูกกำจัดออกไปอย่างช้าๆดังนั้นการเรืองแสงจะค่อยๆ ลดลงจนถึงระดับที่ตรวจจับได้น้อยที่สุดหลังจาก 1 ชั่วโมง ทำให้แพทย์มีช่วงเวลาในการตรวจสอบ^{[ 1 ]}

ขอบเขตการมองเห็นที่แคบของ CLE ทำให้แพทย์ระบุตำแหน่งและเส้นทางของโพรบได้ยาก ทำให้การจับคู่ภาพที่ได้กับ ตำแหน่งและทิศทาง ของรอยโรค ทำได้ยาก งานวิจัยได้เสนออัลกอริทึมการจดจำคริ ปต์ ซึ่งทำนายการเคลื่อนที่ของพิกเซลตามมุมและระยะทางที่เคลื่อนที่ การฟื้นฟูเส้นทางการสำรวจของ CLE ช่วยให้แพทย์สามารถระบุตำแหน่งที่สนใจและปรับปรุงประสิทธิภาพการวินิจฉัย ได้ ^{[ 24 ]}

ความละเอียดของภาพที่ได้นั้นถูกกำหนดโดยค่ารูรับแสงเชิงตัวเลข (NA) ของเลนส์วัตถุ ดัชนีหักเหของตัวกลางโดยรอบ (η) ความยาวคลื่นของแสง (λ) และขนาดของรูเข็ม ความยาวคลื่นที่สั้นกว่าจะช่วยให้สามารถแยกแยะรายละเอียดที่เล็กกว่าได้ และค่า NA ที่สูงขึ้นจะช่วยให้ระบบรวบรวมแสงได้มากขึ้นและแยกแยะรายละเอียดที่ละเอียดกว่าได้ ในทำนองเดียวกัน รูเข็มที่เล็กกว่าสามารถปิดกั้นแสงที่กระเจิงได้ แม้ว่าหากเล็กเกินไปอาจลดความเข้มของสัญญาณได้ ดัชนีหักเหของตัวกลางที่อยู่รอบเนื้อเยื่อยังมีผลต่อคุณภาพของภาพสุดท้ายโดยมีอิทธิพลต่อวิธีการโฟกัสแสงเลเซอร์ ในที่สุด ความละเอียดในแนวด้านข้างและแนวแกนสามารถกำหนดได้โดย:

R _{ด้านข้าง} = 0.4λ / NA ^{[ 25 ]}

R _{ตามแนวแกน} = 1.4แลม / (NA) ^{2 [ 25 ]}

งานวิจัยได้เสนอวิธีการประเมินใหม่สำหรับการกรองภาพที่ได้จาก CLE เนื่องจาก CLE มักพบการบิดเบือนของ ภาพ คุณภาพของภาพ ลดลง และข้อมูลภาพสูญหาย ซึ่งในที่สุดจะทำให้ การวินิจฉัยที่แม่นยำทำได้ยากขึ้น[ ^{26 ] การ}ประเมินคุณภาพของภาพ (IQA) แบบใหม่ที่ใช้กฎของ Weber และตัวอธิบายเฉพาะที่ จะประเมินคุณภาพและกรองภาพที่มีคุณค่าในการวินิจฉัยต่ำ^{[ 26 ]}

ความหลากหลายของ สภาวะ ทางพยาธิวิทยาที่สามารถระบุได้ด้วย CLE นั้นมีจำกัด^{[ 3 ]}การ วินิจฉัย ทางเนื้อเยื่อวิทยาจำกัดอยู่เฉพาะรอยโรคที่เป็นมะเร็งและการอักเสบซึ่งจำนวนโรคเฉพาะที่สามารถระบุได้นั้นมีไม่มากนัก ยิ่งไปกว่านั้น การใช้งาน CLE และการตีความภาพ CLE อย่างถูกต้องนั้นต้องอาศัยการฝึกอบรมเฉพาะทาง ซึ่งทักษะเหล่านี้มักไม่ค่อยได้ใช้โดยผู้เชี่ยวชาญด้านการส่องกล้อง^{[ 10 ] [ 14 ]}เนื่องจากขอบเขตการมองเห็น ที่แคบ การใช้งาน CLE อาจถูกจำกัด^{[ 1 ]}การวินิจฉัยด้วยคอมพิวเตอร์โดย ใช้เทคโนโลยี AIอาจเป็นประโยชน์ในการวินิจฉัยภาพ CLE ^{[ 2 ]}

ฟลูออเรสซีนเป็นสีย้อมที่ปลอดภัยเพียงชนิดเดียวที่ได้รับการอนุมัติ ในขณะที่เครซิลไวโอเลตและอะคริฟลาวีนเป็นสารที่ใช้กันทั่วไป การขาดตัวเลือกของสารเพิ่มความคมชัดอาจจำกัดการใช้งานของ CLE ^{[ 2 ]}ตัวอย่างเช่น ผู้ป่วยที่แพ้ฟลูออเรสซีนไม่ควรเข้ารับการตรวจ CLE ที่เกี่ยวข้องกับการใช้สีย้อมฉีดเข้าเส้นเลือดดำนี้^{[ 4 ]}

ระบบออปติกประกอบด้วยเครื่องมือออปติก ขนาดเล็กที่ซับซ้อน ซึ่งยากต่อการผลิตและประกอบ^{[ 2 ]}ดังนั้นเครื่องมือนี้จึงมีราคาแพง^{[ 3 ]}

CLE ส่วนใหญ่ใช้ร่วมกับเทคนิคอื่นๆ แทนที่จะใช้แทนการส่องกล้องตรวจชิ้นเนื้อแบบดั้งเดิม^{[ 7 ]} CLE สามารถใช้เป็นการเสริมการตรวจชิ้นเนื้อแบบดั้งเดิมได้เท่านั้น โดยการใช้ช่องทางการทำงานเดียวกัน การตรวจชิ้นเนื้อแบบดั้งเดิมและ CLE สามารถทำสลับกันได้ด้วยการสอดท่อ เพียง ครั้ง เดียว ^{[ 2 ]}

โดยทั่วไป CLE ถือเป็นเทคนิคการถ่ายภาพที่ปลอดภัยเนื่องจากเลเซอร์กำลังต่ำและโพรบที่รุกรานน้อยที่สุด เลเซอร์ที่ใช้เป็นแสงสีฟ้าที่มองเห็นได้ซึ่งไม่ก่อให้เกิดไอออนและจะไม่ทำให้เนื้อเยื่อเสียหาย นอกจากนี้ ขั้นตอนต่างๆ ยังเกี่ยวข้องกับเวลาในการสัมผัสที่สั้นมาก ทำให้เทคนิคนี้ได้รับการยอมรับเป็นอย่างดีและปลอดภัยสำหรับการใช้งานซ้ำ คุณสมบัติที่ก่อให้เกิดอาการแพ้ของฟลูออเรสซีน ซึ่งเป็นสี ย้อมเรืองแสงที่ใช้ฉีดเข้าเส้นเลือดดำทั่วไปสำหรับ CLE เป็นสาเหตุหลักของผลข้างเคียงเล็กน้อย^{[ 13 ]}

CLE เช่นเดียวกับ เทคนิค การส่องกล้องตรวจวินิจฉัย อื่นๆ อาจทำให้เกิดตับอ่อนอักเสบ ได้ เมื่อใช้ในการตรวจตับอ่อน^{[ 13 ] [ 27 ]}โอกาสที่จะเกิดตับอ่อนอักเสบนั้นสูงเป็นพิเศษใน CLE ที่ใช้เข็ม การเกิดโรคสามารถลดลงได้โดยการลดเวลาการตรวจและหลีกเลี่ยงการเคลื่อนเข็มมากเกินไปภายในผนังถุงน้ำในตับอ่อน^{[ 13 ]}

ผลข้างเคียงเล็กน้อยซึ่งพบได้ยาก ได้แก่^{[ 1 ]}

• อาการคลื่นไส้
• อาเจียน ร่วมกับ ปวดท้องส่วนบนเล็กน้อย
• ผื่นขึ้น บริเวณ ที่ฉีด
• ความดันโลหิตต่ำชั่วคราวโดยไม่มีภาวะช็อก
• ผื่นแดงกระจาย

ผลกระทบเหล่านี้สามารถจัดการได้ เว้นแต่ผู้ป่วยจะมีประสบการณ์มาก่อน^{[ 1 ]}

มีรายงาน กรณีของภาวะanaphylaxisจากการใช้ฟลูออเรสซีนในทางจักษุวิทยาการใช้ยาแก้แพ้เพื่อป้องกันสามารถลดโอกาสการเกิดปฏิกิริยาแพ้หรือการทดสอบภูมิแพ้ทางผิวหนังสามารถระบุความเสี่ยงของการเกิดปฏิกิริยาแพ้ได้^{[ 1 ]}

อะคริฟลาวีน ซึ่งเป็นสารเพิ่มความคมชัดอีกชนิดหนึ่งสำหรับ CLE อาจเป็นสารก่อมะเร็งในมนุษย์ได้เนื่องจากทราบกันดีว่า มีฤทธิ์ ก่อกลายพันธุ์ดังนั้นสีย้อมชนิดนี้จึงไม่ได้รับการอนุมัติจาก FDA ^{[ 13 ]}

ปัจจุบัน CLE อยู่ภายใต้การกำกับดูแลทั้งในสหรัฐอเมริกาและยุโรปเพื่อให้มั่นใจในความปลอดภัยและประสิทธิภาพทางคลินิก ในสหรัฐอเมริกา องค์การอาหารและยา (FDA) ได้อนุมัติระบบ CLE สองประเภทหลัก โดยหนึ่งในนั้นคือซีรีส์ Cellvizio จาก Mauna Kea Technologies ผ่านกระบวนการ 510(k) ^{[ 28 ]}ซึ่งรวมถึงระบบทั้งแบบใช้โพรบและแบบใช้เอนโดสโคป โดยมีวัตถุประสงค์เพื่อถ่ายภาพโครงสร้างจุลภาคภายในของเนื้อเยื่อที่เข้าถึงได้ในระหว่างขั้นตอนการส่องกล้องมาตรฐาน การอนุมัติของ FDA ครอบคลุมโพรบขนาดเล็กต่างๆ สำหรับข้อบ่งชี้ทางกายวิภาคเฉพาะ และการอัปเดตล่าสุดได้ขยายการอนุมัติไปยังรุ่นใหม่ๆ และการใช้สารเพิ่มความคมชัดเพิ่มเติม

นอกจากนี้ ในยุโรป อุปกรณ์ CLE (รวมถึงระบบ Cellvizio และมินิโพรบที่เกี่ยวข้อง) จะถูกควบคุมเป็นอุปกรณ์ทางการแพทย์ประเภท IIa และต้องมีเครื่องหมาย CE เพื่อจำหน่ายและใช้ในทางคลินิก^{[ 29 ]}

CLE เป็นการ ดัดแปลงกล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอลแบบ อินวิโว สมัยใหม่ ซึ่งเป็นเทคนิคกล้องจุลทรรศน์ที่คิดค้นโดยMarvin Minskyในปี พ.ศ. 2490 ^{[ 10 ]}

ตั้งแต่ปี พ.ศ. 2547 CLE ได้ถูกนำมาใช้เพื่อสังเกตการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิวิทยาในเนื้อเยื่อทางเดินอาหาร^{[ 10 ]}

• กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอล
• การส่องกล้อง
• สารเพิ่มความคมชัด