กลับไปหน้าบทความ

อ่าน 2 นาที

วิธีของกอลกี

CS1 maint: หลายชื่อ: รายชื่อผู้แต่ง/เทคนิคทางพันธุศาสตร์/ประวัติความเป็นมาของประสาทวิทยา/ประสาทวิทยา/การย้อมสี/ลิงก์ย้อนกลับเทมเพลต Webarchive

วิธีของกอลจิเป็น เทคนิค การย้อมสีเงินที่ใช้ในการมองเห็นเนื้อเยื่อประสาทภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง วิธีนี้ถูกค้นพบโดยคามิลโล กอลจิแพทย์และนักวิทยาศาสตร์ชาวอิตาลี...

วิธีของกอลกี

ภาพ เซลล์ประสาทพีระมิดในเปลือกสมองส่วนหน้าของมนุษย์ที่ย้อมสีด้วยเทคนิคกอลจิ สังเกตเห็นเดนไดรต์ส่วนปลายที่ยื่นออกมาในแนวตั้งเหนือตัวเซลล์ และเดนไดรต์ส่วนฐานจำนวนมากที่แผ่กระจายออกไปด้านข้างจากฐานของตัวเซลล์ ภาพถ่ายโดย บ็อบ เจคอบส์, วิทยาลัยโคโลราโด
ภาพวาดโดย Camillo Golgi แสดงส่วนฮิปโปแคมปัสที่ย้อมด้วยวิธีซิลเวอร์ไนเตรต
ภาพวาดเซลล์ Purkinjeในเปลือกสมอง ส่วนซีรีเบลลั มโดย Santiago Ramón y Cajal แสดงให้เห็นอย่างชัดเจนถึงประสิทธิภาพของวิธีการย้อมสีแบบ Golgi ในการเผยรายละเอียดเล็กๆ น้อยๆ

วิธีของกอลจิเป็น เทคนิค การย้อมสีเงินที่ใช้ในการมองเห็นเนื้อเยื่อประสาทภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง วิธีนี้ถูกค้นพบโดยคามิลโล กอลจิแพทย์และนักวิทยาศาสตร์ชาวอิตาลี ซึ่งตีพิมพ์ภาพแรกที่ทำด้วยเทคนิคนี้ในปี 1873 [ 1 ] ในตอนแรกกอลจิเรียกมันว่าปฏิกิริยาสีดำ ( la reazione nera ) แต่ต่อมาเป็นที่รู้จักกันดีในชื่อการย้อมสีของกอลจิหรือวิธีของกอลจิ กอลจิค้นพบสิ่งนี้โดยการนำโพแทสเซียมและโซเดียมเข้าไปในตัวอ่อนไก่

การย้อมสีแบบกอลจิถูกนำมาใช้โดยนักประสาทกายวิภาคชาวสเปนซานติอาโก รามอน อี กาฮาล (ค.ศ. 1852–1934) เพื่อค้นพบข้อเท็จจริงใหม่ๆ เกี่ยวกับการจัดระเบียบของระบบประสาท ซึ่งเป็นแรงบันดาลใจให้เกิดทฤษฎีเซลล์ประสาทขึ้นมา ในที่สุด รามอน อี กาฮาลได้ปรับปรุงเทคนิคนี้โดยใช้วิธีที่เขาเรียกว่า "การย้อมสีแบบสองชั้น" เทคนิคการย้อมสีของรามอน อี กาฮาล ซึ่งยังคงใช้กันอยู่จนถึงปัจจุบัน เรียกว่า การย้อมสีของกาฮาล

กลไก

เซลล์ในเนื้อเยื่อประสาทมีความหนาแน่นสูง และจะได้รับข้อมูลเกี่ยวกับโครงสร้างและการเชื่อมต่อระหว่างเซลล์ได้น้อยมากหากย้อมสีเซลล์ทั้งหมด นอกจากนี้ ส่วนขยายที่เป็นเส้นใยบางๆ ของเซลล์ประสาท รวมถึงแอกซอนและเดนไดรต์ของเซลล์ประสาทนั้นบางและโปร่งใสเกินกว่าจะมองเห็นได้ด้วยเทคนิคการย้อมสีแบบปกติ วิธีการของ Golgi จะย้อมเซลล์จำนวนจำกัดแบบสุ่มทั้งเซลล์ กลไกที่ทำให้เกิดสิ่งนี้ยังคงไม่เป็นที่รู้จักมากนัก[ 2 ]เดนไดรต์ เช่นเดียวกับโซมาของเซลล์ จะถูกย้อมเป็นสีน้ำตาลและดำอย่างชัดเจน และสามารถติดตามได้ตลอดความยาว ซึ่งทำให้นักกายวิภาคศาสตร์ระบบประสาทสามารถติดตามการเชื่อมต่อระหว่างเซลล์ประสาทและทำให้มองเห็นโครงสร้างเครือข่ายที่ซับซ้อนของหลายส่วนของสมองและไขสันหลังได้

การย้อมสีแบบกอลจิทำได้โดยการแช่เนื้อเยื่อประสาทที่ตรึงด้วยอัลดีไฮด์แล้วด้วยโพแทสเซียมไดโครเมตและซิลเวอร์ไนเตรตเซลล์ที่ถูกย้อมสีจะเต็มไปด้วยผลึกขนาดเล็กของซิลเวอร์โครเม

เทคนิค

ตามข้อมูลจาก SynapseWeb [ 3 ]นี่คือสูตรสำหรับเทคนิคการย้อมสีของ Golgi:

  1. นำชิ้นเนื้อสมองที่ผ่านการตรึงด้วย ฟอร์มาลดีไฮด์ (หรือ ผ่านการฉีดสารละลาย พาราฟอร์มาลดีไฮด์ - กลูตารัลดี ไฮด์) ขนาดประมาณ 10x5 มม. แช่ในสารละลายโพแทสเซียมไดโครเมต 2% เป็นเวลา 2 วัน
  2. ซับก้อนให้แห้งด้วยกระดาษกรอง สักครู่
  3. นำก้อนตัวอย่างไปแช่ในสารละลายซิลเวอร์ไนเตรต 2% เป็นเวลาอีก 2 วัน
  4. ตัดชิ้นส่วนให้ มีความหนาประมาณ 20–100  ไมโครเมตร
  5. ทำให้แห้งอย่างรวดเร็วในเอทานอล ใส และเตรียมสำหรับการตรวจสอบ (เช่น ใน Depex หรือ Enthalan)

เทคนิคนี้ได้รับการปรับปรุงแก้ไขในภายหลังเพื่อแทนที่ตะกอนเงินด้วยทองคำโดยการแช่ตัวอย่างในทองคลอไรด์จากนั้น ใน กรดออกซาลิกตามด้วยการกำจัดเงินโดยใช้โซเดียมไทโอซัลเฟตวิธีนี้ช่วยรักษาโครงสร้างละเอียดได้มากขึ้น โดยรายละเอียดโครงสร้างระดับอัลตราจะถูกทำเครื่องหมายด้วยอนุภาคทองคำขนาดเล็ก[ 4 ]

โดยทั่วไปแล้ว การย้อมสี Golgi จะทำบน ชิ้นส่วนที่เตรียมด้วย ไมโครโทมในขณะที่การใช้งานในการตัดชิ้นเนื้อแช่แข็งมีข้อจำกัด โปรโตคอล Golgi–Cox ที่ได้รับการดัดแปลงพร้อมการปกป้องเนื้อเยื่อที่ดีขึ้นได้รับการพัฒนาขึ้นเพื่ออำนวยความสะดวกในการใช้งานการตัดชิ้นเนื้อแช่แข็งโดยยังคงรักษาการมองเห็นโครงสร้างเซลล์ประสาทที่ละเอียดได้อย่างน่าเชื่อถือ[ 5 ]

อ้าง

Ramón y Cajal กล่าวถึงวิธีการ Golgi ว่า:

ผมได้แสดงความประหลาดใจที่ผมประสบเมื่อได้เห็นกับตาตัวเองถึงพลังการเปิดเผยอันน่าอัศจรรย์ของปฏิกิริยาโครม-เงิน และการที่ไม่มีความตื่นเต้นใดๆ เกิดขึ้นในวงการวิทยาศาสตร์ต่อการค้นพบนี้
Recuerdos de mi vida, ฉบับที่. 2, Historia de mi labor científica . มาดริด: Moya, 1917, p. 76.
ดึงข้อมูลมาจาก " https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Golgi%27s_method&oldid=1355225554 "

สรุปเนื้อหา

ข้อมูลสำคัญจากบทความ

ข้อมูลสำคัญเกี่ยวกับ วิธีของกอลกี

วิธีของกอลจิเป็น เทคนิค การย้อมสีเงินที่ใช้ในการมองเห็นเนื้อเยื่อประสาทภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง วิธีนี้ถูกค้นพบโดยคามิลโล กอลจิแพทย์และนักวิทยาศาสตร์ชาวอิตาลี...

กลไก

เซลล์ในเนื้อเยื่อประสาทมีความหนาแน่นสูง และจะได้รับข้อมูลเกี่ยวกับโครงสร้างและการเชื่อมต่อระหว่างเซลล์ได้น้อยมากหากย้อมสีเซลล์ทั้งหมด นอกจากนี้ ส่วนขยายที่เป็นเส้นใยบางๆ ของเซลล์ประสาท รวมถึง แอกซอน และ เดนไดรต์...

เทคนิค

ตามข้อมูลจาก SynapseWeb [ 3 ] นี่คือสูตรสำหรับเทคนิคการย้อมสีของ Golgi:

อ้าง

Ramón y Cajal กล่าวถึงวิธีการ Golgi ว่า: