เมทิลีนบลูใช้ในการรักษาภาวะเมทฮีโมโกลบิน ในเลือดสูง โดยการลดธาตุเหล็กเฟอร์ริกในฮีโมโกลบินให้เป็นธาตุเหล็กเฟอร์รัสด้วยกระบวนการทางเคมี [ 5 ] [ 2 ]ภาวะ^{เมทฮีโมโกลบิน} ในเลือดสูง อาจเกิดขึ้นจากการรับประทานยาบางชนิดสารพิษหรือถั่วปากอ้าในผู้ที่มีความเสี่ยง^{[ 13 ]}โดยเฉพาะอย่างยิ่ง จะใช้ในการรักษาภาวะที่มีระดับเมทฮีโมโกลบินสูงกว่า 30% หรือมีอาการแม้จะได้รับการบำบัดด้วยออกซิเจน แล้ว ^{[ 2 ]}โดยปกติเมทฮีโมโกลบินจะถูกลดกลับไปเป็นฮีโมโกลบินผ่านเอนไซม์เมทฮีโมโกลบินรีดักเทสที่ขึ้นอยู่ กับ NADHหรือNADPHเมื่อมีเมทฮีโมโกลบินในปริมาณมากเนื่องจากสารพิษ เอนไซม์เมทฮีโมโกลบินรีดักเทสจะทำงานไม่ไหว เมทิลีนบลู เมื่อฉีดเข้าทางหลอดเลือดดำเป็นยาแก้พิษ จะถูกลดลงเป็นลิวโคเมทิลีนบลูเสียก่อน จากนั้นจึงลด กลุ่ม ฮีมจากเมทฮีโมโกลบิน กลับ ไปเป็น ฮีโม โกลบิน เมทิลีนบลูสามารถลดครึ่งชีวิตของเมทฮีโมโกลบินจากหลายชั่วโมงเหลือเพียงไม่กี่นาที^{[ 14 ]}อย่างไรก็ตาม ในปริมาณสูง เมทิลีนบลูจะกระตุ้นให้เกิดเมทฮีโมโกลบินในเลือด ซึ่งเป็นการย้อนกลับของกระบวนการนี้^{[ 14 ]}

เมทิลีนบลูใช้สำหรับรักษาอาการได้รับโซเดียมไนไตรต์เกินขนาด โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อใช้โซเดียมไนไตรต์เป็นส่วนหนึ่งของการพยายามฆ่าตัวตาย^{[ 15 ] [ 16 ] [ 17 ]}

เนื่องจากศักยภาพในการลดของมันคล้ายกับของออกซิเจนและสามารถลดลงได้โดยส่วนประกอบของห่วงโซ่การขนส่งอิเล็กตรอน เม ทิลีนบลูในปริมาณมากจึงถูกใช้เป็นยาแก้พิษสำหรับพิษไซยาไนด์ซึ่งเป็นวิธีการที่ได้รับการทดสอบสำเร็จครั้งแรกในปี 1933 โดยMatilda Moldenhauer Brooksในซานฟรานซิสโก^{[ 22 ]}แม้ว่าจะได้รับการสาธิตครั้งแรกโดย Bo Sahlin จากมหาวิทยาลัย Lundในปี 1926 ก็ตาม ^{[ 22 ] [ 23 ]}

เมทิลีนบลูทำให้ความดันโลหิตเพิ่มขึ้นในผู้ป่วยที่มีภาวะหลอดเลือดขยายตัวผิดปกติ (ภาวะช็อกจากการกระจายตัวของเลือด) แต่ไม่ช่วยเพิ่มการส่งออกซิเจนไปยังเนื้อเยื่อหรือลดอัตราการเสียชีวิต^{[ 24 ] [ 25 ]}

เมทิลีนบลูถูกนำมาใช้ใน การรักษาพิษจากยา ปิดกั้นช่องแคลเซียมโดยอาจเป็นการบำบัดฉุกเฉินสำหรับภาวะช็อกจากการกระจายตัวที่ไม่ตอบสนองต่อยาหลัก จากการทบทวนในปี 2024 ซึ่งจำกัดอยู่เพียงรายงานกรณีศึกษา พบว่าหลักฐานคุณภาพต่ำที่บ่งชี้ว่าเมทิลีนบลูอาจช่วยลดอัตราการเสียชีวิตในระยะสั้น ระยะเวลาที่ต้องใช้ยาเพิ่มความดันโลหิต และระยะเวลาการนอนโรงพยาบาล^{[ 26 ]}

เมทิลีนบลูใช้ในการตัดติ่งเนื้อ ด้วยกล้อง เอนโดสโคป ร่วมกับน้ำเกลือหรืออะดรีนาลินและใช้ฉีดเข้าไปในชั้นใต้เยื่อบุรอบติ่งเนื้อที่จะตัดออก วิธีนี้ช่วยให้สามารถระบุระนาบเนื้อเยื่อใต้เยื่อบุได้หลังจากตัดติ่งเนื้อออก ซึ่งมีประโยชน์ในการพิจารณาว่าจำเป็นต้องตัดเนื้อเยื่อออกเพิ่มเติมหรือไม่ หรือมีความเสี่ยงสูงต่อการทะลุหรือไม่ เมทิลีนบลูยังใช้เป็นสีย้อมในโครโมเอนโดสโคปีและพ่นลงบนเยื่อบุของทางเดินอาหารเพื่อระบุภาวะดิสพลาเซียหรือรอยโรคก่อนเป็นมะเร็ง เมทิลีนบลูที่ฉีดเข้าทางหลอดเลือดดำจะถูกขับออกทางปัสสาวะได้ง่าย^{[ 27 ]}

ในการผ่าตัด เช่น การตัด ต่อมน้ำเหลืองเซนติเนล เมทิลีนบลูสามารถใช้เพื่อติดตามการระบายน้ำเหลืองของเนื้อเยื่อที่ทำการทดสอบได้อย่างชัดเจน ในทำนองเดียวกัน เมทิลีนบลูถูกเติมลงในซีเมนต์กระดูกในการผ่าตัดกระดูกและข้อ เพื่อให้สามารถแยกแยะระหว่างกระดูกธรรมชาติและซีเมนต์ได้ง่าย นอกจากนี้ เมทิลีนบลูยังช่วยเร่งการแข็งตัวของซีเมนต์กระดูก ทำให้สามารถใช้ซีเมนต์กระดูกได้อย่างมีประสิทธิภาพมากขึ้น เมทิลีนบลูถูกใช้เป็นตัวช่วยในการมองเห็น/การกำหนดทิศทางในอุปกรณ์ทางการแพทย์หลายชนิด รวมถึงฟิล์มปิดผนึกทางการผ่าตัดนอกจากนี้ยังสามารถใช้ในระหว่างการผ่าตัดระบบทางเดินอาหาร (เช่นการตัดลำไส้หรือการผ่าตัดบายพาสกระเพาะอาหาร ) เพื่อตรวจสอบการรั่วไหล ได้อีกด้วย

บางครั้งใช้ในเซลล์พยาธิวิทยาในส่วนผสมที่รวมถึงWright-GiemsaและDiff-Quikมันให้สีน้ำเงินแก่ทั้งนิวเคลียสและไซโตพลาสซึม และทำให้นิวเคลียสมองเห็นได้ชัดเจนขึ้น^{[ 28 ]}เมื่อเมทิลีนบลู "มีสีหลายสี" (ออกซิไดซ์ในสารละลายหรือ "สุก" โดยกระบวนการเผาผลาญของเชื้อรา^{[ 29 ]}ดังที่ได้กล่าวไว้ในวิทยานิพนธ์ของดร. DL Romanowskyในช่วงปี 1890) มันจะถูกกำจัดหมู่เมทิลออกไปทีละหมู่และก่อตัวเป็นสารตัวกลางแบบไตรเมทิล ไดเมทิล โมโนเมทิล และไม่มีเมทิล ซึ่งได้แก่Azure B , Azure A , Azure Cและไทโอนีนตามลำดับ^{[ 30 ]}นี่คือพื้นฐานของส่วนเบโซฟิลิกของสเปกตรัมของ เอฟเฟกต์ Romanowski-Giemsa หาก ใช้เฉพาะ Azure B และEosin Y สังเคราะห์ ก็สามารถใช้เป็น สีย้อม Giemsa มาตรฐาน ได้ แต่หากไม่มีเมทิลีนบลู เม็ดเลือดขาวชนิดนิวโทรฟิลปกติมักจะย้อมสีเข้มเกินไปและดูเหมือนเม็ดเลือดขาวชนิดนิวโทรฟิลที่เป็นพิษ ในทางกลับกัน หากใช้เมทิลีนบลู อาจช่วยให้เม็ดเลือดขาวชนิดนิวโทรฟิลมีลักษณะปกติ และอาจช่วยเพิ่มการย้อมสีของนิวคลีโอลัสและเม็ดเลือดแดงชนิดโพลีโครมาโทฟิลิก (เรติคิวโลไซต์) ได้อีกด้วย^{[ 31 ]}

การประยุกต์ใช้เมทิลีนบลูแบบดั้งเดิมคือการย้อมเส้นใยประสาทแบบอินทราไวทัลหรือซูพราไวทัล ซึ่งเป็นผลที่พอล เออร์ลิช อธิบายไว้เป็นครั้งแรก ในปี พ.ศ. 2430 ^{[ 32 ]}สารละลายเจือจางของสีย้อมจะถูกฉีดเข้าไปในเนื้อเยื่อหรือทาลงบนชิ้นส่วนเล็กๆ ที่เพิ่งตัดออกมา สีน้ำเงินที่เกิดขึ้นอย่างเลือกสรรจะพัฒนาขึ้นเมื่อสัมผัสกับอากาศ (ออกซิเจน) และสามารถตรึงไว้ได้โดยการแช่ตัวอย่างที่ย้อมแล้วในสารละลายแอมโมเนียมโมลิบเดต เมทิลีนบลูแบบไวทัลเคยถูกนำมาใช้มากในการตรวจสอบการทำงานของเส้นประสาทในกล้ามเนื้อ ผิวหนัง และอวัยวะภายใน^{[ 33 ] [ 34 ] [ 35 ]}กลไกการดูดซึมสีย้อมแบบเลือกสรรยังไม่เป็นที่เข้าใจอย่างสมบูรณ์ การย้อมเส้นใยประสาทแบบไวทัลในผิวหนังถูกยับยั้งโดยโอวาเบนซึ่งเป็นยาที่ยับยั้ง Na/K-ATPase ของเยื่อหุ้มเซลล์^{[ 36 ]}

เมทิลีนบลูถูกใช้เป็นยาหลอกแพทย์จะบอกผู้ป่วยให้คาดหวังว่าปัสสาวะจะเปลี่ยนสีและถือว่านี่เป็นสัญญาณว่าอาการของพวกเขาดีขึ้น^{[ 37 ]} ผลข้างเคียงเดียวกันนี้ทำให้การใช้เมทิลีนบลูใน การศึกษาทางคลินิกแบบควบคุมด้วยยาหลอกแบบดั้งเดิมทำได้ยากรวมถึงการทดสอบประสิทธิภาพของมันในฐานะการรักษา วิธีหนึ่งคือการใช้ในปริมาณต่ำ เพียงพอที่จะทำให้ปัสสาวะเปลี่ยนเป็นสีน้ำเงิน เพื่อใช้เป็นกลุ่มยาหลอก^{[ 38 ]}อย่างไรก็ตาม ปริมาณต่ำไม่ได้รับประกันว่าจะไม่มีผลใดๆ^{[ 39 ]}

สารประกอบนี้เตรียมได้จากการออกซิเดชันของ 4-อะมิโนไดเมทิลอะนิลีนในที่ที่มีโซเดียมไทโอซัลเฟตเพื่อให้ได้กรดควิโนนไดมิโนไทโอซัลโฟนิก ทำปฏิกิริยากับไดเมทิลอะนิลีน ออกซิเดชันเป็นอินดามีน และไซคลิเซชันเพื่อให้ได้ไทอะซีน: ^{[ 47 ]}

มีการเสนอขั้นตอนทางเคมีไฟฟ้าสีเขียวโดยใช้เพียงไดเมทิล-4-ฟีนิลีนไดอะมีน และไอออนซัลไฟด์ ^{[ 48 ]}

การดูดซับแสงสูงสุดอยู่ที่ประมาณ 670  นาโนเมตร ลักษณะเฉพาะของการดูดซับขึ้นอยู่กับหลายปัจจัย รวมถึงการโปรตอนการดูดซับไปยังวัสดุอื่น และเมตาโครมาซี ซึ่งเป็นการ ก่อตัวของไดเมอร์และสารประกอบรวมลำดับสูงกว่า ขึ้นอยู่กับความเข้มข้นและปฏิสัมพันธ์อื่นๆ: ^{[ 49 ]}

ภายใต้สภาวะรีดิวซ์ ไอออนบวกเมทิลีนบลูสีน้ำเงิน (MB ⁺ ) จะได้รับ 1H ⁺และ 2e ^{− เพื่อกลายเป็น} ลิวโคเมทิลีนบลู (LMB) ที่เป็นกลางทางไฟฟ้าและไม่มีสี^{[ 50 ]}ศักยภาพจุดกึ่งกลางรีดอกซ์ E ' คือ +0.01 V ^{[ 51 ]}

คุณสมบัติรีดอกซ์สามารถเห็นได้จากการสาธิตจลนศาสตร์ทางเคมี แบบคลาสสิก ในวิชาเคมีทั่วไป นั่นคือการทดลอง " ขวดสีน้ำเงิน " โดยทั่วไป สารละลายจะประกอบด้วยกลูโคส (เดกซ์โทรส) เมทิลีนบลู และโซเดียมไฮดรอกไซด์ เมื่อเขย่าขวดออกซิเจนจะออกซิไดซ์เมทิลีนบลู ทำให้สารละลายเปลี่ยนเป็นสีน้ำเงิน เดกซ์โทรสจะค่อยๆ ลดเมทิลีนบลูให้กลายเป็นรูปแบบที่ไม่มีสีและถูกรีดิวซ์ ดังนั้น เมื่อเดกซ์โทรสที่ละลายอยู่ถูกใช้หมด สารละลายก็จะเปลี่ยนเป็นสีน้ำเงินอีกครั้ง^{[ 52 ]}

ในห่วงโซ่การขนส่งอิเล็กตรอนของไมโตคอนเดรี ย เมทิลีนบลูที่ลดลง (MBH ) จะลดไซโตโครมซี โดยตรง แทนที่จะเปลี่ยนเป็นออกซิเจน ซึ่งจำกัดการก่อตัวของซูเปอร์ออกไซด์ [ ^{53 ] [ 54 ] มี} การแสดงให้เห็นว่าเมทิลีนบลูรับอิเล็กตรอนจาก^NADH , NADPH และ FADH 2 โดยตรง [ ^{54 ]}

เมทิลีนบลูถูกใช้กันอย่างแพร่หลายในฐานะตัวบ่งชี้รีดอกซ์ในเคมีวิเคราะห์ [ ^{52 ] [ 55 ] [ 56 ] สารละลาย}ของสารนี้จะมีสีน้ำเงินเมื่ออยู่ในสภาพแวดล้อมที่เป็นออกซิไดซ์ แต่จะเปลี่ยนเป็นไม่มีสีหากสัมผัสกับสารรีดิวซ์^{[ 57 ] [ 55 ]}

เมทิลีนบลูเป็นสารไวแสงที่ใช้ในการสร้างออกซิเจนซิงเกล็ตเมื่อสัมผัสกับทั้งออกซิเจนและแสง ในแง่นี้ เมทิลีนบลูถูกนำมาใช้ในการสร้างเปอร์ออกไซด์ อินทรีย์ โดย ปฏิกิริยา ดีลส์-อัลเดอร์ซึ่งเป็นปฏิกิริยาที่ถูกห้ามโดยสปินกับออกซิเจนทริปเล็ตใน บรรยากาศปกติ

ด้วยความช่วยเหลือของแสง เมทิลีนบลูสามารถใช้ฆ่าไวรัสและแบคทีเรียบางชนิดได้^{[ 58 ]}การฆ่าเชื้อด้วยแสงชนิดนี้ยังสามารถทำได้ภายในร่างกายมนุษย์ ( การบำบัดด้วยแสงต้านจุลชีพ ) ^{[ 59 ]}กระบวนการเดียวกันนี้ยังสามารถใช้ในการฆ่าเชื้อพลาสมาในเลือดได้อีกด้วย^{[ 60 ]}

ตามทฤษฎีแล้ว เมทิลีนบลูยังสามารถนำไปใช้กับการบำบัดด้วยแสง แบบอื่นๆ ได้อีกด้วย เช่น การใช้ออกซิเจน แสง และสารไวแสงเพื่อฆ่าเซลล์ การวิจัยเกี่ยวกับการใช้เมทิลีนบลูเพื่อฆ่าเซลล์มะเร็งเฉพาะที่ยังอยู่ในขั้นก่อนการทดลองทางคลินิก^{[ 61 ]}ความเป็นพิษต่อเซลล์อาจเกี่ยวข้องกับความสามารถในการยับยั้งการพอลิเมอไรเซชันของทูบูลิน^{[ 62 ]}

การเกิดเมทิลีนบลูหลังจากปฏิกิริยาของไฮโดรเจนซัลไฟด์กับไดเมทิล-พี-ฟีนิลีนไดอะมีนและเหล็ก(III)ที่ pH  0.4  –  0.7 ใช้ในการกำหนด ความเข้มข้น ของซัลไฟด์ โดย การวัดด้วยโฟโตเมตริก ในช่วง 0.020 ถึง 1.50 มก./ลิตร (20 ppb ถึง 1.5 ppm) ^{[ 63 ]}การทดสอบนี้มีความไวสูงมาก และสีน้ำเงินที่เกิดขึ้นเมื่อสารรีเอเจนต์สัมผัสกับ H2S ที่ละลายอยู่คงตัวเป็นเวลา 60 นาที ชุดอุปกรณ์พร้อมใช้งาน เช่นการทดสอบซัลไฟด์Spectroquant ^{[ 64 ]}ช่วยอำนวยความสะดวกในการวิเคราะห์ประจำวัน การทดสอบซัลไฟด์ด้วยเมทิลีนบลูเป็นวิธีที่สะดวกซึ่งมักใช้ในจุลชีววิทยาของดินเพื่อตรวจจับกิจกรรมการเผาผลาญของแบคทีเรียลดซัลเฟต (SRB) ในน้ำได้อย่างรวดเร็ว ในการทดสอบแบบวัดสีนี้ เมทิลีนบลูเป็นผลิตภัณฑ์ที่เกิดขึ้นจากปฏิกิริยาและไม่ใช่สารรีเอเจนต์ที่เติมลงในระบบ^{[ 63 ]}    

บางครั้งมีการใช้ สารลดแรงที่แรงเช่นกรดแอสคอร์บิกลงในสารละลายที่มีซัลไฟด์เพื่อป้องกันการออกซิเดชันของซัลไฟด์จากออกซิเจนในบรรยากาศ แม้ว่าจะเป็นข้อควรระวังที่ดีสำหรับการหาปริมาณซัลไฟด์ด้วยอิเล็กโทรดแบบเลือกไอออนแต่ก็อาจขัดขวางการเกิดสีน้ำเงินได้ หากเมทิลีนบลูที่เกิดขึ้นใหม่ถูกรีดิวซ์ด้วยเช่นกัน ดังที่อธิบายไว้ข้างต้นในย่อหน้าเกี่ยวกับตัวบ่งชี้รีดอกซ์^{[ 55 ]}

เมทิลีนบลูเป็นสีย้อมที่ทำหน้าที่เป็นตัวบ่งชี้ปฏิกิริยาออกซิเดชัน-รีดักชันซึ่งมักใช้ในอุตสาหกรรมอาหารเพื่อทดสอบความสดของนมและผลิตภัณฑ์นม^{[ 5 ] [ 65 ]}หยดสารละลายเมทิลีนบลูสองสามหยดลงในตัวอย่างนมควรยังคงเป็นสีน้ำเงิน (รูปแบบออกซิไดซ์เมื่อมีO2 ละลายอยู่เพียงพอ) ฉะนั้น (การเปลี่ยนสีที่เกิดจากการลดลงของเมทิลีนบลูเป็นรูปแบบรีดิวซ์ที่ไม่มีสี) แสดงว่าความเข้มข้นของ O2 ละลายตัวอย่างนมต่ำ ซึ่งบ่งชี้ว่านมไม่สด (ถูกออกซิไดซ์โดย O2 ที่ไม่มีชีวิตแล้วความเข้มข้นในสารละลายลดลง) หรืออาจปนเปื้อนด้วยแบคทีเรีย ที่บริโภค O2 ใน บรรยากาศที่ละลายอยู่ในนม^{[ 65 ]}กล่าวอีกนัยหนึ่ง สภาวะ แอโรบิกควรมีอยู่ในนมสด และเมทิลีนบลูเป็นเพียงตัวบ่งชี้ของออกซิเจนที่ละลายอยู่ในนม^{[ 57 ]}

การดูดซับเมทิลีนบลูใช้เป็นตัวบ่งชี้ที่กำหนดความสามารถในการดูดซับของถ่านกัมมันต์แบบเม็ดในเครื่องกรองน้ำ การดูดซับเมทิลีนบลูคล้ายกับการดูดซับสารกำจัดศัตรูพืชจากน้ำ คุณสมบัตินี้ทำให้เมทิลีนบลูเป็นตัวบ่งชี้ที่ดีสำหรับคุณภาพการกรองของถ่านกัมมันต์ นอกจากนี้ยังเป็นวิธีที่รวดเร็วในการเปรียบเทียบถ่านกัมมันต์คุณภาพเดียวกันจากหลายล็อตการเกิดปฏิกิริยาสีในสารละลายเมทิลีนบลูที่เป็นกรดและมีคลอโรฟอร์ม เป็นส่วนประกอบ สามารถตรวจจับสารลดแรงตึงผิวประจุลบในตัวอย่างน้ำได้ การทดสอบดังกล่าวเรียกว่าการทดสอบ MBAS (การทดสอบสารออกฤทธิ์เมทิลีนบลู)

อย่างไรก็ตาม การทดสอบ MBAS ไม่สามารถแยกแยะความแตกต่างระหว่างสารลดแรงตึงผิวชนิดต่างๆ ได้ ตัวอย่างของสารลดแรงตึงผิวประจุลบ ได้แก่คาร์บอกซิเลต ฟอสเฟตซัลเฟตและซัลโฟเนต

ค่าเมทิลีนบลูถูกกำหนดให้เป็นจำนวนมิลลิลิตรของสารละลายเมทิลีนบลูมาตรฐานที่ทำให้ถ่านกัมมันต์  0.1 กรัม(บนพื้นฐานแห้ง) เปลี่ยนสี ^{[ 66 ]} ค่าเมทิลีนบลูสะท้อนถึงปริมาณแร่ดินเหนียวในตัวอย่างมวลรวม^{[ 67 ]}ใน วิทยาศาสตร์วัสดุ สารละลายเมทิลีนบลูจะถูกเติมลงในมวลรวมละเอียดที่กำลังกวนอยู่ในน้ำอย่างต่อเนื่อง สามารถตรวจสอบการมีอยู่ของสารละลายสีย้อมอิสระได้ด้วยการทดสอบคราบเปื้อนบนกระดาษกรอง^{[ 68 ]}

ในทางชีววิทยา เมทิลีนบลูถูกใช้เป็นสีย้อมในกระบวนการย้อมสีต่างๆ เช่นการย้อมสีของไรท์และการย้อมสีของเจนเนอร์เนื่องจากเป็นเทคนิคการย้อมสีชั่วคราว เมทิลีนบลูจึงสามารถใช้ตรวจสอบRNAหรือDNAภายใต้กล้องจุลทรรศน์หรือในเจลได้ ตัวอย่างเช่น สารละลายเมทิลีนบลูสามารถใช้ย้อม RNA บนเยื่อไฮบริดไดเซชันในการทำนอร์ เทิร์ นบลอตติ้งเพื่อตรวจสอบปริมาณกรดนิวคลีอิกที่มีอยู่ แม้ว่าเมทิลีนบลูจะไม่ไวเท่าเอทิเดียมโบร ไมด์ แต่ก็ มีความเป็นพิษน้อยกว่าและไม่แทรกตัวเข้าไปในสายโซ่กรดนิวคลีอิก จึงหลีกเลี่ยงการรบกวนการคงอยู่ของกรดนิวคลีอิกบนเยื่อไฮบริดไดเซชันหรือกระบวนการไฮบริดไดเซชันเอง

นอกจากนี้ยังสามารถใช้เป็นตัวบ่งชี้เพื่อตรวจสอบว่าเซลล์ยูคาริโอติก เช่น ยีสต์ มีชีวิตหรือตายแล้ว เมทิลีนบลูจะถูกรีดิวซ์ในเซลล์ที่มีชีวิต ทำให้เซลล์ไม่ติดสี อย่างไรก็ตาม เซลล์ที่ตายแล้วไม่สามารถรีดิวซ์เมทิลีนบลูที่ถูกออกซิไดซ์ได้ และเซลล์เหล่านั้นจะถูกย้อมเป็นสีน้ำเงิน เมทิลีนบลูอาจรบกวนการหายใจของยีสต์ เนื่องจากมันจะดูดซับไอออนไฮโดรเจนที่เกิดขึ้นในระหว่างกระบวนการ

• เมทิลีนบลูถูกนำมาใช้ในการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำและโดยนักเลี้ยงปลาสวยงามเขตร้อนเพื่อใช้รักษาการติดเชื้อรา^{[ 69 ]}ด้วยความช่วยเหลือของแสง มันยังมีประสิทธิภาพต่อแบคทีเรียและไวรัสอีกด้วย
• นอกจากนี้ยังสามารถมีประสิทธิภาพในการรักษาปลาที่ติดเชื้อปรสิตโปรโตซัวIchthyophthirius multifiliis (ich) ได้เช่นกัน แม้ว่าการใช้มาลาไคต์กรีน ร่วม กับฟอร์มาลดีไฮด์จะมีประสิทธิภาพมากกว่ามากก็ตาม^{[ 69 ]}
• เมทิลีนบลูยังใช้ได้ผลในการรักษาพิษจากไนไตรต์ เนื่องจากช่วยรักษาภาวะเมทฮีโมโกลบินในเลือดสูงที่เกิดขึ้นจากพิษดังกล่าว นอกจากนี้ ยังใช้รักษาพิษจากไซยาไนด์ได้เช่นกัน เหมือนกับในมนุษย์
• แหล่งข้อมูลที่ไม่ใช่ผู้เชี่ยวชาญยังอ้างว่าใช้ได้ผลกับพิษแอมโมเนีย^{[ 70 ]}แต่มีเอกสารทางการแพทย์น้อยมากที่จะสนับสนุนเรื่องนี้

โดยทั่วไปจะใช้เพื่อป้องกันไข่ปลาที่เพิ่งวางใหม่จากการติดเชื้อรา ซึ่งมีประโยชน์เมื่อนักเลี้ยงปลาต้องการฟักไข่ปลาด้วยวิธีเทียม^{[ 69 ]}สำหรับกรณีเป็นพิษ บาดเจ็บ (ป้องกันการติดเชื้อ) หรือเจ็บป่วย จะใช้เมทิลีนบลูเป็น "ยาสำหรับอาบน้ำ" ให้กับปลา

เมทิลีนบลูมีผลข้างเคียงต่อปลา^{[ 71 ]}

การใช้ยาต้านมาลาเรียได้รับการฟื้นฟูเมื่อเร็ว ๆ นี้ (2009) ^{[ 75 ]}โดยมีเป้าหมายพร้อมกันหลายกระบวนการทางชีวภาพในเชื้อก่อโรคอะพิคอมเพล็กซาน^{[ 76 ]} แม้ว่ากลไกหลักดูเหมือนจะเป็นการทำให้เกิดการหมุนเวียนรีดอกซ์ในปริมาณที่ร้ายแรง^{[ 45 ]}

การวิเคราะห์เชิงอภิมานในปี 2018 พบว่ามีประสิทธิภาพในการต่อต้านเชื้อP. falciparumในแอฟริกา ช่วยลดระดับของแกมเมโทไซต์ ในระยะการแพร่เชื้อได้อย่างมีประสิทธิภาพ และเสริมฤทธิ์กับการบำบัดแบบผสมผสานมาตรฐานที่ใช้สารอาร์เทมิซินิน (ACT) ผลกระทบต่อเชื้อมาลาเรียสายพันธุ์อื่นและ ประชากร P. falciparumในสถานที่อื่นๆ ยังไม่ชัดเจน^{[ 45 ]}

การใช้เมทิลีนบลูอีกอย่างหนึ่งคือการรักษาภาวะพิษต่อระบบประสาทจากไอโฟสฟาไม ด์ มีการรายงานการใช้เมทิลีนบลูในการรักษาและป้องกันภาวะพิษต่อระบบประสาทและจิตใจจากไอโฟสฟาไมด์ครั้งแรกในปี 1994 เมตาโบไลต์ที่เป็นพิษของไอโฟสฟาไมด์คือ คลอ โรอะเซทัลดี ไฮด์ (CAA) จะรบกวนห่วงโซ่การหายใจ ของไมโทคอนเดรีย ทำให้เกิดการสะสมของ นิโคตินาไมด์อะดีนีนไดนิวคลีโอไทด์ไฮโดรเจน (NADH) เมทิลีนบลูทำหน้าที่เป็นตัวรับอิเล็กตรอน ทางเลือก และย้อนกลับการยับยั้งของ NADH ต่อการสร้างกลูโคส ในตับ ในขณะเดียวกันก็ยับยั้งการเปลี่ยนคลอโรเอทิลอะมีนเป็นคลอโรอะเซทัลดีไฮด์ และยับยั้งกิจกรรมของเอนไซม์อะมีนออกซิเดสหลายชนิด ป้องกันการก่อตัวของ CAA ^{[ 77 ] [ 78 ]}

ปริมาณการใช้เมทิลีนบลูในการรักษาภาวะพิษต่อระบบประสาทจากไอโฟสฟาไมด์นั้นแตกต่างกันไป ขึ้นอยู่กับการใช้พร้อมกันเป็นยาเสริมในการให้ไอโฟสฟาไมด์ หรือการใช้เพื่อบรรเทาอาการทางจิตเวชที่ปรากฏขึ้นหลังจากการให้ไอโฟสฟาไมด์เสร็จสิ้น รายงานระบุว่าเมทิลีนบลูในปริมาณสูงสุดหกครั้งต่อวัน ส่งผลให้อาการดีขึ้นภายใน 10 นาทีถึงหลายวัน^{[ 79 ]}หรืออีกทางหนึ่ง มีการแนะนำให้ใช้เมทิลีนบลูทางหลอดเลือดดำทุกหกชั่วโมงเพื่อป้องกันในระหว่างการรักษาด้วยไอโฟสฟาไมด์ในผู้ที่มีประวัติภาวะพิษต่อระบบประสาทและจิตใจจากไอโฟสฟาไมด์^{[ 80 ]}การให้เมทิลีนบลูเพื่อป้องกันในวันก่อนเริ่มการรักษาด้วยไอโฟสฟาไมด์ และวันละสามครั้งในระหว่างการรักษาด้วยเคมีบำบัดไอโฟสฟาไมด์ ได้รับการแนะนำเพื่อลดการเกิดภาวะพิษต่อระบบประสาทจากไอโฟสฟาไมด์^{[ 81 ]}

เมทิลีนบลูจะยับยั้งโมโนอะมีนออกซิเดสยับยั้ง ระบบ กลูตาเมอร์จิก (ผ่านการยับยั้งNO ซินเทสและ กัว นิเลตไซเคลสที่ละลายได้ ) ปรับการทำงานของไมโทคอนเดรีย (โดยทำหน้าที่เป็นตัวรับอิเล็กตรอน) และลดการกระตุ้นของอินฟลามาโซมNLRP3และNLRC4ดังนั้นจึงถือว่ามีประโยชน์ในการรักษาโรคทางจิตเวชในมนุษย์ได้มีการทดลองใช้ (เรียงลำดับตามคุณภาพของหลักฐานจากมากไปน้อย): โรคอารมณ์สองขั้ว ( โดยเฉพาะ อาการ ซึมเศร้า ) โรคอัลไซเมอร์ โรคกลัวที่แคบ โรคสมองอักเสบจากไอโฟสฟาไมด์ และโรคจิตเภทสำหรับเมทิลีนบลู ปริมาณที่สูงกว่าไม่ได้หมายความว่าจะได้ผลดีกว่าปริมาณที่ต่ำกว่าเสมอไป^{[ 39 ]}