กลับไปหน้าบทความ

อ่าน 3 นาที

มินิเซอร์เคิล

มินิเซอร์เคิลเป็นรีพลิคอน วงกลม ขนาดเล็ก (~4 กิโลเบส ) เกิดขึ้นตามธรรมชาติในจีโนม ของ ออร์แกเนลล์ยูคาริโอต บางชนิด ใน คิเนโตพลาสต์ที่ได้มาจาก...

มินิเซอร์เคิล

การเตรียมมินิเซอร์เคิลจากพลาสมิดต้นแบบ พลาสมิดต้นแบบมีไซต์เป้าหมายของรีคอมบิเนสสองไซต์ (ลูกศรครึ่งวงกลมสีดำ) การรีคอมบิเนชันระหว่างไซต์เหล่านี้จะสร้างมินิเซอร์เคิลที่ต้องการ (ด้านล่างขวา) พร้อมกับมินิพลาสมิด (ด้านล่างซ้าย) ตะขอที่อยู่บนส่วนแทรกสีแดงของมินิเซอร์เคิลแสดงถึงบริเวณยึดเกาะกับเมทริกซ์โครงสร้าง ( S/MAR-Element ) ซึ่งช่วยให้เกิดการจำลองตัวเองอย่างอิสระในเซลล์ผู้รับ

มินิเซอร์เคิลเป็นรีพลิคอน วงกลม ขนาดเล็ก (~4 กิโลเบส ) เกิดขึ้นตามธรรมชาติในจีโนม ของ ออร์แกเนลล์ยูคาริโอต บางชนิด ใน คิเนโตพลาสต์ที่ได้มาจาก ไมโตคอนเดรียของไทรพาโนโซมมินิเซอร์เคิลจะเข้ารหัสRNA นำทางสำหรับ การ แก้ไขRNA [ 1 ]ในแอมฟิดิเนียม จีโนม ของคลอโรพลาส ต์ ประกอบด้วยมินิเซอร์เคิลที่เข้ารหัสโปรตีนของคลอโรพลาสต์[ 2 ] [ 3 ]

มินิเซอร์เคิลที่ได้จากการทดลองในหลอดทดลอง

มินิเซอร์เคิลเป็นอนุพันธ์ของ พลาสมิดรูปวงกลมขนาดเล็ก (~4 กิโลเบส) ที่ถูกแยกออกจาก ส่วนประกอบของ เวกเตอร์โปรคาริโอต ทั้งหมด แล้ว มีการนำมาประยุกต์ ใช้เป็น พาหะนำ ส่งยีน ดัดแปลงพันธุกรรมในเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม โดยมีข้อดีคือ เนื่องจากไม่มี ลำดับ ดีเอ็นเอ ของแบคทีเรีย จึงมีโอกาสน้อยที่จะถูกมองว่าเป็นสิ่งแปลกปลอมและถูกทำลาย (วิธีการนำส่งยีนดัดแปลงพันธุกรรมแบบทั่วไปมักใช้พลาสมิด ซึ่งมีดีเอ็นเอแปลกปลอมอยู่) ขนาดที่เล็กกว่าของมินิเซอร์เคิลยังช่วยเพิ่ม ศักยภาพ ในการโคลนนิ่งและอำนวยความสะดวกในการนำส่งเข้าสู่เซลล์ อีกด้วย

โดยปกติการเตรียมการของพวกเขาจะดำเนินการตามขั้นตอนสองขั้นตอน: [ 4 ] [ 5 ]

  • การสร้าง 'พลาสมิดต้นแบบ' (พลาสมิดของแบคทีเรียที่มี ส่วนแทรก ของยูคาริโอต ) ในE. coli
  • การเหนี่ยวนำรีคอมบิเนสเฉพาะตำแหน่งในตอนท้ายของกระบวนการนี้ แต่ยังคงอยู่ในแบคทีเรีย ขั้นตอนเหล่านี้ตามมาด้วย
    • การตัดส่วนของเวกเตอร์โปรคาริโอตออกโดยใช้ลำดับเป้าหมายรีคอมบิเนสสองลำดับที่ปลายทั้งสองข้างของส่วนแทรก
    • การแยกมินิเซอร์เคิลที่ได้ (ซึ่งเป็นพาหะสำหรับการดัดแปลงเซลล์ผู้รับอย่างมีประสิทธิภาพสูง) และมินิพลาสมิดโดยใช้เจลอิเล็กโทรโฟเรซิสแบบเส้นเลือดฝอย (CGE)

มินิเซอร์เคิลที่บริสุทธิ์แล้วสามารถถ่ายโอนไปยังเซลล์ผู้รับได้โดยวิธีการทรานสเฟคชั่นหรือไลโปเฟคชั่นและไปยังเนื้อเยื่อที่แตกต่างกันได้โดยวิธีการฉีดแบบเจ็ทเป็นต้น

มินิเซอร์เคิลแบบดั้งเดิมไม่มีจุดเริ่มต้นของการจำลองแบบดังนั้นจึงไม่จำลองแบบภายในเซลล์เป้าหมาย และยีนที่เข้ารหัสจะหายไปเมื่อเซลล์แบ่งตัว (ซึ่งอาจเป็นข้อดีหรือข้อเสียก็ได้ ขึ้นอยู่กับว่าการใช้งานต้องการการแสดงออกที่คงอยู่หรือชั่วคราว) สิ่งใหม่ที่เพิ่มเข้ามาในสาขานี้คือ มินิเซอร์เคิล ที่จำลอง แบบได้เองโดยไม่ใช้ไวรัส ซึ่งคุณสมบัตินี้เกิดจากการมีS/MAR-Elementมินิเซอร์เคิลที่จำลองแบบได้เองนั้นมีศักยภาพอย่างมากสำหรับการดัดแปลงเซลล์ต้นกำเนิดอย่างเป็นระบบ และจะขยายศักยภาพของรูปแบบสารตั้งต้นพลาสมิด ("พลาสมิดต้นแบบ") อย่างมีนัยสำคัญ โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อความเป็นไปได้หลักของวิธีการดังกล่าวได้รับการพิสูจน์แล้วสำหรับรูปแบบสารตั้งต้นพลาสมิด[ 6 ] [ 7 ] [ 8 ] [ 9 ]

ดูเพิ่มเติม

  • อีพิโซม  – พลาสมิดชนิดหนึ่ง
ดึงข้อมูลมาจาก " https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Minicircle&oldid=1317771957 "

สรุปเนื้อหา

ข้อมูลสำคัญจากบทความ

ข้อมูลสำคัญเกี่ยวกับ มินิเซอร์เคิล

มินิเซอร์เคิลเป็นรีพลิคอน วงกลม ขนาดเล็ก (~4 กิโลเบส ) เกิดขึ้นตามธรรมชาติในจีโนม ของ ออร์แกเนลล์ยูคาริโอต บางชนิด ใน คิเนโตพลาสต์ที่ได้มาจาก...

มินิเซอร์เคิลที่ได้จากการทดลอง ในหลอดทดลอง

มินิเซอร์เคิลเป็นอนุพันธ์ของ พลาสมิดรูป วงกลมขนาดเล็ก (~4 กิโลเบส) ที่ถูกแยกออกจาก ส่วนประกอบของ เวกเตอร์ โปรคาริโอต ทั้งหมด แล้ว มีการนำมา ประยุกต์ ใช้เป็น พาหะนำ ส่งยีน ดัดแปลงพันธุกรรม ในเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม โดยมีข้อดีคือ เนื่องจากไม่มี ลำดับ ดีเอ็นเอ...

ดูเพิ่มเติม

อีพิโซม – พลาสมิดชนิดหนึ่ง หน้าเว็บที่แสดงคำอธิบายสั้น ๆ ของเป้าหมายการเปลี่ยนเส้นทาง ดึงข้อมูลมาจาก " https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Minicircle&oldid=1317771957 "