อ่าน 14 นาที
เอนไซม์คาตาเลส
เอนไซม์ คาตาเลส เป็น เอนไซม์ทั่วไปที่พบในสิ่งมีชีวิตเกือบทั้งหมดที่สัมผัสกับออกซิเจน (เช่นแบคทีเรียพืช และสัตว์) ซึ่งเร่งปฏิกิริยาการสลายตัวของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ ให้
เอนไซม์คาตาเลส
| เอนไซม์คาตาเลส | |||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| ตัวระบุ | |||||||
| เครื่องหมาย | เอนไซม์คาตาเลส | ||||||
| พีแฟม | PF00199 | ||||||
| อินเตอร์โปร | IPR011614 | ||||||
| โปรไซต์ | PDOC00395 | ||||||
| สโคป2 | 7cat / SCOPe / SUPFAM | ||||||
| ซูเปอร์แฟมิลี OPM | 370 | ||||||
| โปรตีน OPM | 3e4w | ||||||
| ซีดีดี | ซีดี00328 | ||||||
| |||||||
| เอนไซม์คาตาเลส | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| ตัวระบุ | |||||||||
| หมายเลข EC | 1.11.1.6 | ||||||||
| หมายเลข CAS | 9001-05-2 | ||||||||
| ฐานข้อมูล | |||||||||
| อินท์เอ็นซ์ | มุมมองของ IntEnz | ||||||||
| เบรนด้า | เบรนด้าเข้าร่วม | ||||||||
| เอ็กซ์แพซี่ | มุมมองของ NiceZyme | ||||||||
| เคกก์ | รายการ KEGG | ||||||||
| เมตาไซค์ | วิถีการเผาผลาญ | ||||||||
| ไพรแอม | ประวัติโดยย่อ | ||||||||
| โครงสร้างPDB | RCSB PDB PDBe PDBsum | ||||||||
| ออนโทโลยีของยีน | อามิโก้ / ควิกโก้ | ||||||||
| |||||||||
| แมว | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ตัวระบุ | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ชื่อเรียกอื่น | CAT , เอนไซม์คาตาเลส | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| รหัสภายนอก | โอมิม : 115500 ; เอ็มจีไอ : 88271 ; โฮโมโลยีน : 55514 ; GeneCards : CAT ; OMA : CAT - ออร์โธโลจี | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| วิกิดาต้า | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
เอนไซม์ คาตาเลส เป็น เอนไซม์ทั่วไปที่พบในสิ่งมีชีวิตเกือบทั้งหมดที่สัมผัสกับออกซิเจน (เช่นแบคทีเรียพืช และสัตว์) ซึ่งเร่งปฏิกิริยาการสลายตัวของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ ให้ กลายเป็นน้ำและออกซิเจน[ 5 ]เป็นเอนไซม์ที่สำคัญมากในการปกป้องเซลล์จากความเสียหายจากออกซิเดชันโดยสารออกซิเจนที่ว่องไว (ROS) คาตาเลสมี อัตราการหมุนเวียนสูงที่สุดในบรรดาเอนไซม์ทั้งหมด โมเลกุลคาตาเลสหนึ่งโมเลกุลสามารถเปลี่ยนโมเลกุลไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์หลายล้านโมเลกุลให้เป็นน้ำและออกซิเจนได้ในแต่ละวินาที[ 6 ]
แคตาเลสเป็นเทตราเมอร์ของสายโพลีเปปไทด์สี่สาย แต่ละสายมีความยาว มากกว่า 500 กรดอะมิโน[ 7 ]ประกอบด้วย กลุ่ม ฮีม ที่มีธาตุเหล็กสี่กลุ่ม ที่ทำให้เอนไซม์สามารถทำปฏิกิริยากับไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ได้ค่า pH ที่เหมาะสมที่สุด สำหรับแคตาเลสของมนุษย์อยู่ที่ประมาณ 7 [ 8 ]และมีช่วงสูงสุดที่ค่อนข้างกว้าง: อัตราการเกิดปฏิกิริยาไม่เปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญระหว่าง pH 6.8 และ 7.5 [ 9 ]ค่า pH ที่เหมาะสมที่สุดสำหรับแคตาเลสชนิดอื่น ๆ จะแตกต่างกันไประหว่าง 4 ถึง 11 ขึ้นอยู่กับสายพันธุ์[ 10 ]อุณหภูมิที่เหมาะสมที่สุดก็แตกต่างกันไปตามสายพันธุ์เช่นกัน[ 11 ]
โครงสร้าง
เอนไซม์คาตาเลสของมนุษย์ก่อตัวเป็นเทตราเมอร์ที่ประกอบด้วยซับยูนิต สี่หน่วย ซึ่งแต่ละหน่วยสามารถแบ่งออกเป็นสี่โดเมน ได้ [ 12 ] แกนกลางที่กว้างขวางของแต่ละซับยูนิตถูกสร้างขึ้นโดย เบต้าบาร์เรลแบบขนานแปดสาย(β1-8) โดยมีการเชื่อมต่อเพื่อนบ้านที่ใกล้ที่สุดซึ่งปิดด้วยลูปเบต้าบาร์เรลด้านหนึ่งและลูป α9 อีกด้านหนึ่ง[ 12 ]โดเมนเกลียวที่ด้านหนึ่งของเบต้าบาร์เรลประกอบด้วยเกลียวปลาย C สี่เกลียว (α16, α17, α18 และ α19) และเกลียวสี่เกลียวที่ได้มาจากสารตกค้างระหว่าง β4 และ β5 (α4, α5, α6 และ α7) [ 12 ]การสไปลซิงทางเลือกอาจส่งผลให้เกิดโปรตีนรูปแบบต่างๆ กัน
ประวัติศาสตร์
เอนไซม์คาตาเล สถูกค้นพบครั้งแรกในปี ค.ศ. 1818 โดยหลุยส์ ฌาคส์ เธนาร์ดผู้ค้นพบไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ (H₂O₂ ) เธนาร์ดเสนอว่าการสลายตัวของเอนไซม์นี้เกิดจากสารที่ไม่ทราบชนิด ในปี ค.ศ. 1900 ออสการ์ โลว์เป็นคนแรกที่ตั้งชื่อเอนไซม์นี้ว่าคาตาเลส และพบว่าเอนไซม์นี้มีอยู่ในพืชและสัตว์หลายชนิด[ 13 ] ในปี ค.ศ. 1937 เจมส์ บี. ซัมเนอร์และอเล็กซานเดอร์ ดันซ์ได้ตกผลึกคาตาเลสจากตับวัว[ 14 ]และวัดน้ำหนักโมเลกุลได้ในปี ค.ศ. 1938 [ 15 ]
ลำดับกรดอะมิโนของ เอนไซม์คาตาเลส จากวัวได้รับการกำหนดในปี พ.ศ. 2512 [ 16 ]และโครงสร้างสามมิติในปี พ.ศ. 2524 [ 17 ]
การทำงาน
กลไกโมเลกุล
แม้ว่ากลไกที่สมบูรณ์ของคาตาเลสจะยังไม่เป็นที่ทราบในปัจจุบัน[ 18 ]แต่เชื่อว่าปฏิกิริยาจะเกิดขึ้นในสองขั้นตอน :
- H 2 O 2 + เฟ(III)-E → H 2 O + O=เฟ(IV)-E(.+)
- H 2 O 2 + O=เฟ(IV)-E(.+) → H 2 O + เฟ(III)-E + O 2 [ 18 ]
ในที่นี้ Fe()-E แทน ศูนย์กลาง เหล็กของ กลุ่ม ฮีมที่ติดอยู่กับเอนไซม์ Fe(IV)-E(.+) เป็นรูปแบบเมโซเมอริกของ Fe(V)-E ซึ่งหมายความว่าเหล็กไม่ได้ถูกออกซิไดซ์อย่างสมบูรณ์เป็น +V แต่ได้รับความหนาแน่นของอิเล็กตรอนที่ช่วยให้เสถียรจากลิแกนด์ฮีม ซึ่งแสดงเป็นไอออนบวกแบบอนุมูลอิสระ (.+)
เมื่อไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์เข้าสู่บริเวณออกฤทธิ์มันจะทำปฏิกิริยากับกรดอะมิโน Asn148 ( แอสปาราจีนที่ตำแหน่ง 148) และHis75ทำให้โปรตอน ( ไอออน ไฮโดรเจน ) ถ่ายโอนระหว่างอะตอมออกซิเจน อะตอมออกซิเจนอิสระจะประสานงาน ทำให้โมเลกุลน้ำที่เกิดขึ้นใหม่และ Fe(IV)=O เป็นอิสระ Fe(IV)=O ทำปฏิกิริยากับโมเลกุลไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ตัวที่สองเพื่อสร้าง Fe(III)-E ขึ้นใหม่และผลิตน้ำและออกซิเจน[ 18 ]ปฏิกิริยาของศูนย์กลางเหล็กอาจได้รับการปรับปรุงโดยการมีอยู่ของลิแกนด์ฟีนอลเลตของTyr358ในตำแหน่งการประสานงานที่ห้า ซึ่งสามารถช่วยในการออกซิเดชันของ Fe(III) เป็น Fe(IV) ประสิทธิภาพของปฏิกิริยาอาจได้รับการปรับปรุงโดยปฏิสัมพันธ์ของ His75 และ Asn148 กับตัวกลางของปฏิกิริยา[ 18 ]การสลายตัวของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์โดยคาตาเลสดำเนินไปตามจลนศาสตร์อันดับหนึ่ง โดยอัตราจะแปรผันตรงกับความเข้มข้นของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์[ 19 ]
เอนไซม์คาตาเลสยังสามารถเร่งปฏิกิริยาออกซิเดชันของสารเมตาบอไลต์และสารพิษต่างๆ โดยใช้ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ รวมถึงฟอร์มาลดีไฮด์กรดฟอร์มิกฟีนอล อะเซทัลดีไฮด์และแอลกอฮอล์โดยมีปฏิกิริยาดังต่อไปนี้:
- ชม2 O 2 + ชม2 R → 2H 2 O + อาร์
ยังไม่ทราบกลไกที่แน่ชัดของปฏิกิริยานี้
ไอออนโลหะหนักใดๆ (เช่น แคตไอออนทองแดงในคอปเปอร์(II) ซัลเฟต ) สามารถทำหน้าที่เป็นตัวยับยั้งแบบไม่แข่งขันของคาตาเลสได้ อย่างไรก็ตาม “การขาดทองแดงอาจนำไปสู่การลดลงของกิจกรรมคาตาเลสในเนื้อเยื่อ เช่น หัวใจและตับ” [ 20 ]นอกจากนี้ สารพิษไซยาไนด์ยังเป็นตัวยับยั้งแบบไม่แข่งขัน[ 21 ]ของคาตาเลสที่ความเข้มข้นสูงของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ [ 22 ] อาร์เซเนตทำหน้าที่เป็นตัวกระตุ้น [ 23 ] โครงสร้างโปรตีน สามมิติของสารตัวกลางคาตาเลสที่ถูกเปอร์ออกซิไดซ์มีอยู่ในProtein Data Bank
บทบาทของเซลล์
ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์เป็นผลพลอยได้ที่เป็นอันตรายจาก กระบวนการ เผาผลาญ ปกติหลายอย่าง เพื่อป้องกันความเสียหายต่อเซลล์และเนื้อเยื่อ จึงต้องเปลี่ยนไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ให้เป็นสารอื่นที่มีอันตรายน้อยกว่าอย่างรวดเร็ว ด้วยเหตุนี้ เซลล์จึงมักใช้เอนไซม์คะตาเลสเพื่อเร่งการสลายตัว ของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ให้กลายเป็น ออกซิเจนในรูปก๊าซ และโมเลกุลน้ำที่มีปฏิกิริยาน้อยกว่า[ 24 ]
หนูที่ได้รับการดัดแปลงพันธุกรรมให้ขาดเอนไซม์คาตาเลสในตอนแรกจะมีลักษณะทางฟีโนไทป์ปกติ[ 25 ] อย่างไรก็ตามการขาดเอนไซม์คาตาเลสในหนูอาจเพิ่มโอกาสในการเกิดโรคอ้วนตับไขมัน[ 26 ]และโรคเบาหวานชนิดที่ 2 [ 27 ]มนุษย์บางคนมีระดับเอนไซม์คาตาเลสต่ำมาก ( ภาวะขาดเอนไซม์คาตาเลส ) แต่กลับแสดงอาการเจ็บป่วยเพียงเล็กน้อย
ความเครียดออกซิเดชันที่เพิ่มขึ้นซึ่งเกิดขึ้นกับหนูที่แก่ตัวลง จะบรรเทาลงได้ด้วย การแสดงออกของเอนไซม์คาตาเลส มากเกินไป [ 28 ] หนูที่แสดงออกมากเกินไปจะไม่แสดงอาการสูญเสียเซลล์สเปิร์ม เซลล์สืบพันธุ์ใน อัณฑะ และเซลล์เซอร์โทลีที่เกี่ยวข้องกับอายุเหมือนในหนูปกติ ความเครียดออกซิเดชันในหนูปกติมักจะทำให้เกิดความเสียหายต่อดีเอ็นเอจากออกซิเดชัน( วัดเป็น8-oxodG ) ในสเปิร์มเมื่ออายุมากขึ้น แต่ความเสียหายเหล่านี้จะลดลงอย่างมีนัยสำคัญในหนูที่แสดงออกคาตาเลสมากเกินไปเมื่ออายุมากขึ้น[ 28 ] นอกจากนี้ หนูที่แสดงออกมากเกินไปเหล่านี้ยังไม่แสดงจำนวนลูกต่อครอกที่ลดลงตามอายุ การแสดงออกของคาตาเลสที่กำหนดเป้าหมายไปยังไมโทคอนเดรียจะช่วยยืดอายุขัยของหนู[ 29 ]
ในยูคาริโอต เอนไซม์คาตาเลสมักจะอยู่ในออร์แกเนลล์ ของเซลล์ ที่เรียกว่าเพอร์ออกซิโซม [ 30 ] เพอร์ออกซิโซมในเซลล์พืชมีส่วนเกี่ยวข้องกับการหายใจแสง (การใช้ออกซิเจนและการผลิตคาร์บอนไดออกไซด์) และการตรึงไนโตรเจน แบบพึ่งพาอาศัยกัน (การแยกไนโตรเจน ไดอะตอ มิก (N 2 ) ออกเป็นอะตอมไนโตรเจนที่ทำปฏิกิริยาได้) ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ถูกใช้เป็นสารต้านจุลชีพที่มีประสิทธิภาพเมื่อเซลล์ติดเชื้อจากเชื้อก่อโรค เชื้อก่อโรคที่มีคาตาเลสเป็นบวก เช่นMycobacterium tuberculosis , Legionella pneumophilaและCampylobacter jejuni จะสร้างคาตาเลสเพื่อยับยั้งอนุมูลเปอร์ออกไซด์ ทำให้พวกมันสามารถอยู่รอดได้ โดยไม่ได้รับอันตรายภายในโฮสต์[ 31 ]
เช่นเดียวกับแอลกอฮอล์ดีไฮโดรจีเนส แคตาเลสจะเปลี่ยนเอทานอลเป็นอะเซทัลดีไฮด์ และการศึกษาแบบดรอปเอาท์ในสัตว์ฟันแทะชี้ให้เห็นว่าอาจเป็นตัวการสำคัญในการเกิดปฏิกิริยานี้ในสมอง[ 32 ] [ 33 ]
การกระจายตัวในหมู่สิ่งมีชีวิต
สิ่งมีชีวิตส่วนใหญ่ที่รู้จักใช้คาตาเลสในทุกอวัยวะโดยเฉพาะอย่างยิ่งในตับของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม จะมีความเข้มข้นสูง [ 34 ]คาตาเลสพบได้เป็นหลักในเพอร์ออกซิโซมและไซโตซอลของเม็ดเลือดแดง (และบางครั้งก็พบในไมโตคอนเดรีย[ 35 ] )
จุลินทรีย์แอโรบิกเกือบทั้งหมดใช้คาตาเลส นอกจากนี้ยังพบในจุลินทรีย์แอนแอโรบิก บางชนิด เช่นMethanosarcina barkeri [ 36 ] คาตาเลสยังพบได้ทั่วไปในพืชและพบในเชื้อรา ส่วน ใหญ่[ 37 ]
การใช้คาตาเลสที่เป็นเอกลักษณ์อย่างหนึ่งเกิดขึ้นในด้วงบอมบาร์เดียร์ด้วงชนิดนี้มีของเหลวสองชุดที่เก็บแยกกันในต่อมคู่สองต่อม ต่อมที่ใหญ่กว่าซึ่งเป็นห้องเก็บหรืออ่างเก็บจะมีไฮโดรควินอนและไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ ในขณะที่ต่อมที่เล็กกว่าซึ่งเป็นห้องปฏิกิริยาจะมีคาตาเลสและเปอร์ออกซิเดสเพื่อกระตุ้นการพ่นพิษ ด้วงจะผสมเนื้อหาของทั้งสองช่อง ทำให้เกิดการปลดปล่อยออกซิเจนจากไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ ออกซิเจนจะออกซิไดซ์ไฮโดรควินอนและยังทำหน้าที่เป็นตัวขับดันอีกด้วย[ 38 ]ปฏิกิริยาออกซิเดชันเป็นปฏิกิริยาคายความร้อน สูงมาก (ΔH = −202.8 kJ/mol) และทำให้ส่วนผสมร้อนขึ้นอย่างรวดเร็วจนถึงจุดเดือด[ 39 ]
ราชินี ปลวกReticulitermes speratusที่มีอายุยืนยาว จะมีระดับ ความเสียหายจากออกซิเดชันต่อ DNAต่ำกว่าตัวที่ไม่สามารถสืบพันธุ์ได้ (ปลวกงานและปลวกทหาร) อย่างมีนัยสำคัญ [ 40 ] ราชินีมีกิจกรรมของเอนไซม์ catalase สูงกว่าปลวกงานมากกว่าสองเท่า และมีระดับการแสดงออกของยีน catalase RsCAT1 สูงกว่าปลวกงานถึงเจ็ดเท่า[ 40 ] ดูเหมือนว่าความ สามารถ ในการต้านอนุมูลอิสระ ที่มีประสิทธิภาพ ของราชินีปลวกจะสามารถอธิบายได้บางส่วนว่าเหตุใดพวกมันจึงมีอายุยืนยาวขึ้น
เอนไซม์คาตาเลสจากสิ่งมีชีวิตชนิดต่างๆ มีอุณหภูมิที่เหมาะสมแตกต่างกันอย่างมาก โดยทั่วไปแล้วสัตว์เลือดอุ่น จะมีคาตาเลสที่มีอุณหภูมิที่เหมาะสมอยู่ในช่วง 15–25 °C (59–77 °F) ในขณะที่คาตาเลสของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมหรือนกอาจมีอุณหภูมิที่เหมาะสมสูงกว่า 35 °C (95 °F) [ 41 ] [ 42 ]และคาตาเลสจากพืชจะแตกต่างกันไปตามลักษณะการเจริญเติบโต[ 41 ]ในทางตรงกันข้าม คาตาเลสที่แยกได้จากอาร์เคียที่ทนความร้อนสูงPyrobaculum calidifontisมีอุณหภูมิที่เหมาะสมที่ 90 °C (194 °F) [ 43 ]
ความสำคัญและการประยุกต์ใช้ทางคลินิก

เอนไซม์คาตาเลสใช้ในอุตสาหกรรมอาหารเพื่อกำจัดไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ออกจากนมก่อนการผลิตชีส[ 44 ]การใช้งานอีกอย่างหนึ่งคือในบรรจุภัณฑ์อาหาร ซึ่งช่วยป้องกันไม่ให้อาหารเกิดการออกซิเดชัน[ 45 ]นอกจากนี้ เอนไซม์คาตาเลสยังใช้ใน อุตสาหกรรม สิ่งทอเพื่อกำจัดไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ออกจากผ้าเพื่อให้แน่ใจว่าวัสดุนั้นปราศจากเปอร์ออกไซด์[ 46 ]
การใช้งานเล็กน้อยคือใน ด้านสุขอนามัย ของคอนแทคเลนส์ – ผลิตภัณฑ์ทำความสะอาดเลนส์บางชนิดฆ่าเชื้อเลนส์โดยใช้สารละลายไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ จากนั้นจะใช้สารละลายที่มีคาตาเลสเพื่อสลายไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ก่อนที่จะนำเลนส์กลับมาใช้ใหม่[ 47 ]
การระบุชนิดของแบคทีเรีย (การทดสอบคาตาเลส)

การทดสอบคาตาเลสเป็นหนึ่งในสามการทดสอบหลักที่นักจุลชีววิทยาใช้ในการระบุชนิดของแบคทีเรีย หากแบคทีเรียมีคาตาเลส (กล่าวคือ เป็นคาตาเลสบวก) จะสังเกตเห็นฟองออกซิเจนเมื่อเติมแบคทีเรียที่แยกได้ ในปริมาณเล็กน้อย ลงในไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ การทดสอบคาตาเลสทำได้โดยการหยดไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ลงบนสไลด์กล้องจุลทรรศน์ใช้แท่งไม้แตะลงบนโคโลนีของแบคทีเรีย แล้วป้ายปลายแท่งไม้ลงบนหยดไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์
- หากส่วนผสมก่อให้เกิดฟองหรือฟองอากาศ สิ่งมีชีวิตนั้นจะถูกเรียกว่า 'catalase-positive' Staphylococci [ 48 ]และMicrococci [ 49 ]เป็น catalase-positive สิ่งมีชีวิตอื่นๆ ที่เป็น catalase-positive ได้แก่Listeria , Corynebacterium diphtheriae , Burkholderia cepacia , Nocardia , วงศ์Enterobacteriaceae ( Citrobacter , E. coli , Enterobacter , Klebsiella , Shigella , Yersinia , Proteus , Salmonella , Serratia ), Pseudomonas , Mycobacterium tuberculosis , Aspergillus , CryptococcusและRhodococcus equi
- ถ้าไม่เช่นนั้น สิ่งมีชีวิตนั้นจะเป็น 'catalase-negative' Streptococcus [ 50 ]และEnterococcus spp. เป็น catalase-negative
แม้ว่าการทดสอบเอนไซม์คะตาเลสเพียงอย่างเดียวจะไม่สามารถระบุจุลินทรีย์ชนิดใดชนิดหนึ่งได้ แต่ก็สามารถช่วยในการระบุได้เมื่อใช้ร่วมกับการทดสอบอื่นๆ เช่น การทดสอบความต้านทานต่อยาปฏิชีวนะ การมีอยู่ของเอนไซม์คะตาเลสในเซลล์แบคทีเรียขึ้นอยู่กับทั้งสภาวะการเจริญเติบโตและอาหารเลี้ยงเชื้อที่ใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์
อาจใช้ หลอดแคปิลลารีได้เช่นกัน โดยเก็บตัวอย่างแบคทีเรียเล็กน้อยไว้ที่ปลายหลอดแคปิลลารีโดยไม่ปิดกั้นหลอด เพื่อหลีกเลี่ยง ผล ลบเท็จจากนั้นจุ่มปลายอีกด้านลงในไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ ซึ่งจะถูกดูดเข้าไปในหลอดด้วยแรงดึงดูดของเส้นเลือดฝอยแล้วคว่ำหลอดลงเพื่อให้ตัวอย่างแบคทีเรียชี้ลงด้านล่าง จากนั้นใช้มือที่ถือหลอดเคาะลงบนโต๊ะเพื่อเลื่อนไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ลงมาจนสัมผัสกับแบคทีเรีย หากเกิดฟองขึ้นเมื่อสัมผัส แสดงว่าผลการทดสอบคาตาเลสเป็นบวก การทดสอบนี้สามารถตรวจจับแบคทีเรียคาตาเลสบวกได้ที่ความเข้มข้นสูงกว่าประมาณ 10⁵ เซลล์ /มล. [ 51 ]และใช้งานง่าย
ความรุนแรงของแบคทีเรีย
นิวโทรฟิลและฟาโกไซต์ อื่นๆ ใช้เปอร์ออกไซด์ในการฆ่าแบคทีเรีย เอนไซม์NADPH oxidaseสร้างซูเปอร์ออกไซด์ภายในฟาโกโซมซึ่งจะถูกเปลี่ยนผ่านไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ไปเป็นสารออกซิไดซ์อื่นๆ เช่นกรดไฮโปคลอรัสซึ่งจะฆ่าเชื้อโรคที่ถูกฟาโกไซโตซิส[ 52 ]ในบุคคลที่เป็นโรคแกรนูโลมาเรื้อรัง (CGD) การผลิตเปอร์ออกไซด์ของฟาโกไซต์จะบกพร่องเนื่องจากระบบ NADPH oxidase บกพร่อง การเผาผลาญของเซลล์ปกติจะยังคงผลิตเปอร์ออกไซด์ในปริมาณเล็กน้อย และเปอร์ออกไซด์นี้สามารถนำไปใช้ในการผลิตกรดไฮโปคลอรัสเพื่อกำจัดเชื้อแบคทีเรียได้ อย่างไรก็ตาม หากบุคคลที่เป็น CGD ติดเชื้อแบคทีเรียที่มีเอนไซม์คาตาเลส แบคทีเรียคาตาเลสสามารถทำลายเปอร์ออกไซด์ส่วนเกินก่อนที่จะถูกนำไปใช้ในการผลิตสารออกซิไดซ์อื่นๆ ในบุคคลเหล่านี้ เชื้อโรคจะรอดชีวิตและกลายเป็นการติดเชื้อเรื้อรัง การติดเชื้อเรื้อรังนี้มักจะถูกล้อมรอบด้วยแมโครฟาจเพื่อพยายามแยกการติดเชื้อ กำแพงของแมโครฟาจที่ล้อมรอบเชื้อโรคนี้เรียกว่า แกร นูโลมาแบคทีเรียหลายชนิดมีเอนไซม์คาตาเลสเป็นบวก แต่บางชนิดก็ผลิตเอนไซม์คาตาเลสได้ดีกว่าชนิดอื่น แบคทีเรียและเชื้อราบางชนิดที่มีเอนไซม์คาตาเลสเป็นบวก ได้แก่Nocardia , Pseudomonas , Listeria , Aspergillus , Candida , E. coli , Staphylococcus , Serratia , B. cepaciaและH. pylori [ 53 ]
อะคาตาลาเซีย
อะคาตาลาเซียเป็นภาวะที่เกิดจากการกลายพันธุ์แบบโฮโมไซกัสในยีน CAT ส่งผลให้ขาดเอนไซม์คาตาเลส อาการไม่รุนแรงและรวมถึงแผลในปาก การกลายพันธุ์แบบเฮเทอโรไซกัสของยีน CAT ส่งผลให้มีเอนไซม์คาตาเลสน้อยลง แต่ยังคงมีอยู่[ 54 ]
ผมหงอก
ระดับคาตาเลสที่ต่ำอาจมีบทบาทใน กระบวนการผม หงอกของมนุษย์ ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ถูกผลิตขึ้นตามธรรมชาติโดยร่างกายและถูกย่อยสลายโดยคาตาเลส ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์สามารถสะสมในรูขุมขน และหากระดับคาตาเลสลดลง การสะสมนี้อาจทำให้เกิดความเครียดจากออกซิเดชันและผมหงอกได้[ 55 ]ระดับคาตาเลสที่ต่ำเหล่านี้เกี่ยวข้องกับผู้สูงอายุ ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์รบกวนการผลิตเมลานินซึ่งเป็นเม็ดสีที่ให้สีแก่เส้นผม[ 56 ] [ 57 ]
ปฏิสัมพันธ์
พบว่าคาตาเลสมีปฏิสัมพันธ์กับยีนABL2 [ 58 ]และAbl [ 58 ] การติดเชื้อไวรัสลูคีเมียของหนูทำให้กิจกรรมของคาตาเลสลดลงในปอด หัวใจ และไตของหนู ในทางกลับกัน น้ำมันปลาในอาหารช่วยเพิ่มกิจกรรมของคาตาเลสในหัวใจและไตของหนู[ 59 ]
วิธีการตรวจวัดกิจกรรมของเอนไซม์คะตาเลส
ในปี พ.ศ. 2413 Schoenn ค้นพบการเกิดสีเหลืองจากปฏิกิริยาระหว่างไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์กับโมลิบเดต[ 60 ]จากนั้นตั้งแต่กลางศตวรรษที่ 20 ปฏิกิริยานี้เริ่มถูกนำมาใช้ในการหาปริมาณไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ที่ยังไม่ทำปฏิกิริยาโดยวิธีวัดสีในการทดสอบกิจกรรมของเอนไซม์คาตาเลส[ 61 ]ปฏิกิริยานี้ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายหลังจากมีการตีพิมพ์ผลงานของ Korolyuk et al. (1988) [ 62 ]และ Goth (1991) [ 63 ]บทความแรกอธิบายถึงการทดสอบคาตาเลสในซีรั่มโดยไม่มีบัฟเฟอร์ในตัวกลางปฏิกิริยา ส่วนบทความหลังอธิบายถึงขั้นตอนโดยใช้บัฟเฟอร์ฟอสเฟตเป็นตัวกลางปฏิกิริยา เนื่องจากไอออนฟอสเฟตทำปฏิกิริยากับแอมโมเนียมโมลิบเดต[ 63 ]การใช้บัฟเฟอร์ MOPS เป็นตัวกลางปฏิกิริยาจึงเหมาะสมกว่า[ 64 ]
การวัด UV โดยตรงของการลดลงของความเข้มข้นของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ยังถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายหลังจากมีการตีพิมพ์โดย Beers & Sizer [ 65 ]และ Aebi [ 66 ]
ดูเพิ่มเติม
ลิงก์ภายนอก
- "ข้อมูลจาก GenAge สำหรับ CAT (Homo sapiens)" . แหล่งข้อมูลด้านจีโนมเกี่ยวกับการสูงวัยของมนุษย์. สืบค้นเมื่อ2009-03-05 .
- "คาตาเลส" . คำถามที่พบบ่อยของ MadSci . madsci.org. เก็บถาวรจากต้นฉบับเมื่อ 2009-03-09 . เรียกดูเมื่อ2009-03-05 .
- "วิดีโอทดสอบคาตาเลสและออกซิเดส" Regnvm Prokaryotae สืบค้นเมื่อ2009-03-05
- "EC 1.11.1.6 - แคตาเลส" Brenda: ระบบข้อมูลเอนไซม์แบบครบวงจรสืบค้นเมื่อ2009-03-05
- "PeroxiBase - ฐานข้อมูลเพอร์ออกซิเดส"สถาบันชีวสารสนเทศแห่งสวิตเซอร์แลนด์เก็บถาวรจากต้นฉบับเมื่อ 13 ตุลาคม 2551 เรียกดูเมื่อ5 มีนาคม 2552
- "ขั้นตอนการใช้เอนไซม์คาตาเลส" . MicrobeID.com . สืบค้นเมื่อ22 เมษายน 2552 .
- "โมเลกุลคาตาเลสประจำเดือน"ฐานข้อมูลโปรตีน (Protein Data Bank) เก็บถาวรจากต้นฉบับเมื่อ 11 พฤษภาคม 2556 เรียกดูเมื่อ 8 มกราคม2556
- ภาพรวมของข้อมูลโครงสร้างทั้งหมดที่มีอยู่ในPDBสำหรับUniProt : P04040 (Catalase) ที่PDBe- KB
สรุปเนื้อหา
ข้อมูลสำคัญจากบทความ
ข้อมูลสำคัญเกี่ยวกับ เอนไซม์คาตาเลส
เอนไซม์ คาตาเลส เป็น เอนไซม์ทั่วไปที่พบในสิ่งมีชีวิตเกือบทั้งหมดที่สัมผัสกับออกซิเจน (เช่นแบคทีเรียพืช และสัตว์) ซึ่งเร่งปฏิกิริยาการสลายตัวของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ ให้
โครงสร้าง
เอนไซม์คาตาเลสของมนุษย์ก่อตัวเป็น เทตราเมอร์ ที่ประกอบด้วยซับ ยูนิต สี่หน่วย ซึ่งแต่ละหน่วยสามารถแบ่งออกเป็นสี่โดเมน ได้ [ 12 ] แกนกลางที่กว้างขวางของแต่ละซับยูนิตถูกสร้างขึ้นโดย เบต้าบาร์เรล แบบขนานแปดสาย(β1-8)...
ประวัติศาสตร์
เอนไซม์คาตาเล สถูกค้นพบครั้งแรกในปี ค.ศ. 1818 โดย หลุยส์ ฌาคส์ เธนาร์ด ผู้ค้นพบ ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ (H₂O₂ ) เธ นาร์ดเสนอว่าการสลายตัวของเอนไซม์นี้เกิดจากสารที่ไม่ทราบชนิด ในปี ค.ศ.
กลไกโมเลกุล
แม้ว่ากลไกที่สมบูรณ์ของคาตาเลสจะยังไม่เป็นที่ทราบในปัจจุบัน [ 18 ] แต่ เชื่อว่าปฏิกิริยาจะเกิดขึ้นในสองขั้นตอน :