กลับไปหน้าบทความ

อ่าน 11 นาที

โพลีฟีนอลออกซิเดส

โพลีฟีนอลออกซิเดส ( PPO ; หรือโพลีฟีนอลออกซิเดส i, คลอโรพลาสต์ ) ซึ่ง เป็น เอนไซม์ที่เกี่ยวข้องกับการเกิดสีน้ำตาลในผลไม้เป็นเตตระเมอร์ที่มีอะตอมทองแดงสี่อะตอมต่อโมเลกุล

โพลีฟีนอลออกซิเดส

โพลีฟีนอลออกซิเดส ( PPO ; หรือโพลีฟีนอลออกซิเดส i, คลอโรพลาสต์ ) ซึ่ง เป็น เอนไซม์ที่เกี่ยวข้องกับการเกิดสีน้ำตาลในผลไม้เป็นเตตระเมอร์ที่มีอะตอมทองแดงสี่อะตอมต่อโมเลกุล[ 1 ]

PPO อาจยอมรับโมโนฟีนอลและ/หรือโอ-ไดฟีนอลเป็นสารตั้งต้น[ 2 ]เอนไซม์ทำงานโดยการเร่งปฏิกิริยาโอ - ไฮดรอกซิเลชันของโมเลกุลโมโน ฟีนอล ซึ่งวงแหวนเบนซีน มีหมู่ ไฮด รอกซิล เพียงหมู่เดียวไปเป็นโอ -ไดฟีนอล ( โมเลกุลฟีนอ ลที่มีหมู่ ไฮดรอกซิลสองหมู่ที่ตำแหน่ง 1, 2 โดยไม่มีคาร์บอนอยู่ระหว่างกลาง) [ 3 ]นอกจากนี้ยังสามารถเร่งปฏิกิริยาออกซิเดชันของโอ -ไดฟีนอลเพื่อผลิตโอ -ควิโนนได้ อีกด้วย [ 4 ​​] PPO เร่งปฏิกิริยาพอ ลิเมอไรเซชันอย่างรวดเร็ว ของโอ-ควิโนนเพื่อผลิตเม็ดสีสีดำ น้ำตาล หรือแดง ( โพลีฟีนอล ) ที่ทำให้ผลไม้เปลี่ยนเป็นสีน้ำตาล

กรดอะมิโนไทโรซีนมีวงแหวนฟีนอลเดี่ยวที่อาจถูกออกซิไดซ์โดยการทำงานของ PPO เพื่อสร้างo -quinone ดังนั้น PPO จึงอาจถูกเรียกว่าไทโรซิเนสได้ เช่นกัน [ 5 ]

อาหารทั่วไปที่ผลิตเอนไซม์นี้ได้แก่เห็ด ( Agaricus bisporus ) [ 6 ] [ 7 ]แอปเปิล ( Malus domestica ) [ 8 ] [ 9 ]อะโวคาโด ( Persea americana ) กล้วย ( Musa (genus) ) [ 10 ]และผักกาดหอม ( Lactuca sativa ) [ 11 ] ผลไม้ที่มี ฟลาแวน-3-ออลสูงแต่มี PPO ต่ำ (โดยเฉพาะเบอร์รี่ ) มักจะนำมาผสมกับกล้วยในสมูทตี้ส่งผลให้การดูดซึมฟลาแวน-3-ออลและโพลีฟีนอลอื่น ๆ ลดลง [ 10 ]

โครงสร้างและหน้าที่

PPO ถูกจัดอยู่ในกลุ่มมอร์ฟีอินซึ่งเป็นโปรตีนที่สามารถสร้างโฮโมโอลิโกเมอร์ (รูปแบบมอร์ฟีอิน) ที่แตกต่างกันได้สองแบบขึ้นไป แต่ต้องแยกออกจากกันและเปลี่ยนรูปร่างเพื่อแปลงระหว่างรูปแบบต่างๆ มันมีอยู่เป็นโมโนเมอร์ไตรเมอร์เตตระเมอร์ออกตาเมอร์หรือโดเดคาเมอร์ [ 12 ] [ 13 ] ซึ่งสร้างฟังก์ชันที่หลากหลาย[ 14 ]

ในพืช PPO เป็น เอนไซม์ ในพลาสติดที่มีการสังเคราะห์และหน้าที่ที่ไม่ชัดเจน ในคลอโรพลาสต์ที่มีฟังก์ชันการทำงาน อาจเกี่ยวข้องกับเคมีของออกซิเจน เช่น การเป็นตัวกลางของโฟโตฟอสโฟรีเลชันแบบซูโดไซคลิก[ 15 ]

การตั้งชื่อเอนไซม์แยกความแตกต่างระหว่างเอนไซม์โมโนฟีนอลออกซิเดส ( ไทโรซิเนส ) และ เอนไซม์ โอ -ไดฟีนอล:ออกซิเจนออกซิโดรีดักเทส ( คาเทคอลออกซิเดส ) ความชอบของสารตั้งต้น ของ ไทโรซิเนสและคาเทคอลออกซิเดสถูกควบคุมโดยกรดอะมิโน รอบ ไอออนทองแดง สองตัวในบริเวณออกฤทธิ์[ 16 ]

การจัดจำหน่ายและการใช้งาน

เอนไซม์โมโนฟีนอลออกซิเดสและคาเทคอลออกซิเดสผสมกันมีอยู่ในเนื้อเยื่อพืชเกือบทั้งหมด และยังพบได้ในแบคทีเรีย สัตว์ และเชื้อรา ในแมลงจะมีโพลีฟีนอลออกซิเดสในคิวติเคิล[ 17 ]และผลิตภัณฑ์ของเอนไซม์เหล่านี้มีส่วนรับผิดชอบต่อความทนทานต่อการขาดน้ำ

ผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาขององุ่น (กรด 2-S กลูตาไธโอนิลแคฟทาริก) เป็นสารประกอบออกซิเดชันที่เกิดจากการทำงานของเอนไซม์ PPO ต่อกรดแคฟทาริกและพบได้ในไวน์ การเกิดสารประกอบนี้เป็นสาเหตุที่ทำให้ไวน์ขาวบางชนิดมีสีน้ำตาลเข้มลดลง

พืชใช้โพลีฟีนอลออกซิเดสเป็นหนึ่งในกลไกป้องกันทางเคมีหลายอย่างเพื่อต่อต้านปรสิต[ 18 ]

สารยับยั้ง

สารยับยั้ง PPO มีสองประเภท ได้แก่ สารที่แข่งขันกับออกซิเจนในตำแหน่งทองแดงของเอนไซม์ และสารที่แข่งขันกับฟีนอล เทนทอกซินยังถูกนำมาใช้ในการวิจัยล่าสุดเพื่อกำจัดกิจกรรม PPO จากต้นกล้าของพืชชั้นสูง[ 19 ]โทรโพโลนเป็นสารยับยั้ง โพลีฟีนอลออกซิเดสขององุ่น [ 20 ]สารยับยั้งเอนไซม์นี้อีกชนิดหนึ่งคือโพแทสเซียมเมตาไบซั ล ไฟต์[ 21 ]กิจกรรม PPO ของรากกล้วยถูกยับยั้งอย่างรุนแรงโดยไดไทโอไทรทอลและโซเดียมเมตาไบซัลไฟต์ [ 22 ] เช่นเดียวกับ PPO ของผลกล้วยที่ถูกยับยั้งโดยสารประกอบที่มีกำมะถัน คล้ายกัน ได้แก่ โซเดียมไดไทโอไนต์และซิสเตอีนรวมถึงกรดแอสคอร์บิก (วิตามินซี) [ 23 ]

การทดสอบ

มีการพัฒนาการทดสอบหลายวิธีเพื่อตรวจสอบกิจกรรมของโพลีฟีนอลออกซิเดสและเพื่อประเมินศักยภาพในการยับยั้งของสารยับยั้งโพลีฟีนอลออกซิเดส โดยเฉพาะอย่างยิ่ง การทดสอบโดยใช้สเปกโทรโฟโตเมตรีแบบ อัลตราไวโอเลต/วิสิเบิล (UV/Vis)ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลาย[ 24 ]การทดสอบสเปกโทรโฟโตเมตรี UV/Vis ที่พบได้บ่อยที่สุดเกี่ยวข้องกับการตรวจสอบการก่อตัวของo -quinonesซึ่งเป็นผลิตภัณฑ์ของปฏิกิริยาที่เร่งปฏิกิริยาโดยโพลีฟีนอลออกซิเดส หรือการบริโภคสารตั้งต้น[ 25 ] นอกจากนี้ยังมีการใช้ วิธีสเปกโทรโฟโตเมตรีทางเลือกที่เกี่ยวข้องกับการจับคู่ของo- quinonesกับรีเอเจนต์นิวคลีโอฟิลิกเช่น 3-methyl-2-benzothiazolinonehydrazone hydrochloride (MBTH) [ 26 ]เทคนิคอื่นๆ เช่น การทดสอบการย้อมสีกิจกรรมโดยใช้ เจลอิเล็กโทรโฟเรซิ โพลีอะคริลาไมด์ [ 27 ]การทดสอบกัมมันตรังสีที่ใช้ทริเทียม[ 28 ]การทดสอบการบริโภคออกซิเจน[ 29 ]และ การทดสอบที่ใช้ เรโซแนนซ์แม่เหล็กนิวเคลียร์ (NMR) ก็ได้รับการรายงานและใช้งานเช่นกัน[ 30 ]

การเกิดสีน้ำตาลจากเอนไซม์

โพลีฟีนอลออกซิเดสเป็นเอนไซม์ที่พบได้ทั่วไปในอาณาจักรพืชและสัตว์[ 31 ]รวมถึงผลไม้และผักส่วนใหญ่[ 32 ] PPO มีความสำคัญต่ออุตสาหกรรมอาหารเนื่องจากเป็นตัวเร่งปฏิกิริยาการเกิดสีน้ำตาลจากเอนไซม์เมื่อเนื้อเยื่อได้รับความเสียหายจากการฟกช้ำ การบีบอัด หรือรอยบุ๋ม ทำให้ผลผลิตขายได้ยากขึ้นและก่อให้เกิดความสูญเสียทางเศรษฐกิจ[ 31 ] [ 32 ] [ 33 ]การเกิดสีน้ำตาลจากเอนไซม์เนื่องจาก PPO ยังอาจนำไปสู่การสูญเสียสารอาหารในผลไม้และผัก ทำให้มูลค่าลดลงไปอีก[ 11 ] [ 31 ] [ 32 ]

เนื่องจากสารตั้งต้นของปฏิกิริยา PPO เหล่านี้ตั้งอยู่ในแวคิวโอลของเซลล์พืชที่เสียหายส่วนใหญ่เกิดจากการเก็บเกี่ยว ที่ไม่เหมาะสม PPO จึงเริ่มต้นห่วงโซ่ของปฏิกิริยาการเปลี่ยนสีเป็นสีน้ำตาล[ 33 ] [ 34 ]การสัมผัสกับออกซิเจนเมื่อหั่นหรือบดละเอียดก็ทำให้เกิดการเปลี่ยนสีเป็นสีน้ำตาลโดยเอนไซม์ PPO ในผลไม้และผักเช่นกัน[ 32 ]ตัวอย่างที่ปฏิกิริยาการเปลี่ยนสีเป็นสีน้ำตาลที่เร่งปฏิกิริยาโดย PPO อาจเป็นที่ต้องการ ได้แก่ อะโวคาโด ลูกพรุน องุ่นซุลตานา ชาดำ และเมล็ดกาแฟเขียว[ 11 ] [ 32 ]

ในมะม่วง

ในมะม่วง การเกิดสีน้ำตาลจากเอนไซม์ที่เร่งปฏิกิริยาโดย PPO ส่วนใหญ่เกิดจากการไหม้ของน้ำเลี้ยงซึ่งนำไปสู่การเปลี่ยนสีของเปลือกเป็นสี น้ำตาล PPO ชนิด แคทเทคอลออกซิเดสตั้งอยู่ในคลอโรพลาสต์ของเซลล์เปลือกมะม่วงและสารตั้งต้นฟีนอลอยู่ในแวคิวโอล ดังนั้นการไหม้ของน้ำเลี้ยงจึงเป็นเหตุการณ์เริ่มต้นของ PPO ในเปลือกมะม่วง เนื่องจากมันทำลายส่วนประกอบของเซลล์[ 34 ] PPO พบได้ในเปลือก น้ำเลี้ยง และเนื้อของมะม่วง โดยมีระดับกิจกรรมสูงสุดในเปลือก[ 32 ]

ในอะโวคาโด

PPO ในอะโวคาโดทำให้เกิดการเปลี่ยนสีอย่างรวดเร็วเมื่อสัมผัสกับออกซิเจน[ 11 ]ซึ่งเป็นกระบวนการหลายขั้นตอนที่เกี่ยวข้องกับปฏิกิริยาออกซิเดชันของทั้งโมโนฟีนอลและโพลีฟีนอล ส่งผลให้เกิด ผลิตภัณฑ์ โอ-ควิโนน ซึ่งต่อมาถูกแปลงเป็น เม็ดสีพอลิเม อร์สีน้ำตาล ( เมลานิน ) อย่างถาวร[ 35 ]

ในแอปเปิล

PPO พบได้ในคลอโรพลาสต์และไมโตคอนเดรียของทุกส่วนของแอปเปิล[ 32 ] และเป็นเอนไซม์หลักที่ทำให้เกิดการเปลี่ยนสีเป็นสีน้ำตาลจากเอนไซม์ในแอปเปิล [ 36 ]เนื่องจากการเพิ่มขึ้นของความต้องการของผู้บริโภคสำหรับผลไม้และผักที่เตรียมไว้ล่วงหน้า การแก้ปัญหาการเปลี่ยนสีเป็นสีน้ำตาลจากเอนไซม์จึงเป็นเป้าหมายของการวิจัยและการพัฒนาผลิตภัณฑ์ใหม่[ 37 ]ตัวอย่างเช่น แอปเปิลหั่นแล้วเป็นผลิตภัณฑ์ที่ดึงดูดใจผู้บริโภค แต่การหั่นแอปเปิลจะกระตุ้นการทำงานของ PPO ทำให้เกิดการเปลี่ยนสีเป็นสีน้ำตาลบนพื้นผิวที่หั่นและลดคุณภาพด้านความสวยงามลง[ 37 ]การเปลี่ยนสีเป็นสีน้ำตาลยังเกิดขึ้นในน้ำแอปเปิลและน้ำแอปเปิลบดเมื่อมีการจัดการหรือแปรรูปที่ไม่เหมาะสม[ 38 ]

แอปเปิ้ลอาร์กติกซึ่งเป็นตัวอย่างของผลไม้ดัดแปลงพันธุกรรมที่ออกแบบมาเพื่อลดกิจกรรมของ PPO เป็น แอปเปิ้ล ที่มีเครื่องหมายการค้าซึ่งมีคุณสมบัติไม่เปลี่ยนสีเป็นสีน้ำตาลที่ได้มาจากการปิดกั้นยีนเพื่อยับยั้งการแสดงออกของ PPO จึงยับยั้งการเปลี่ยนสีของผลไม้เป็นสีน้ำตาล[ 39 ]

ในแอปริคอต

แอปริคอตเป็นผลไม้ที่สุกงอมอย่างรวดเร็วหลังการเก็บเกี่ยวรูปแบบ PPO ที่แฝงอยู่สามารถเปิดใช้งานได้เองในช่วงสัปดาห์แรกของการเก็บรักษา ทำให้เกิดเอนไซม์ที่ออกฤทธิ์ซึ่งมีน้ำหนักโมเลกุล 38 kDa [ 40 ] การผสมผสานระหว่างกรด แอสคอร์บิกและโปรตีเอสถือเป็นวิธีการป้องกันการเปลี่ยนสีที่น่าสนใจ เนื่องจาก แอ ปริคอต บดที่ผ่านการบำบัดแล้ว ยังคงรักษาสี ไว้ ได้[ 41 ]

ในมันฝรั่ง

PPO พบในความเข้มข้นสูงใน เปลือก หัว มันฝรั่ง และเนื้อเยื่อชั้น นอกสุด 1–2 มม. PPO ถูกนำมาใช้ในมันฝรั่งเพื่อป้องกันการถูกแมลงทำลาย ทำให้เกิดการเปลี่ยนสีเป็นสีน้ำตาลจากความเสียหายของเนื้อเยื่อความเสียหายในเนื้อเยื่อผิวของหัวมันฝรั่งทำให้เกิดการรบกวนการแบ่งส่วนของเซลล์ ส่งผลให้เกิดการเปลี่ยนสีเป็นสีน้ำตาล เม็ดสีน้ำตาลหรือดำเกิดจากปฏิกิริยาของ ผลิตภัณฑ์ ควิโนน ของ PPO กับ กลุ่ม กรดอะมิโนในหัวมันฝรั่ง[ 33 ]ในมันฝรั่ง ยีน PPO ไม่เพียงแต่แสดงออกในหัวมันฝรั่งเท่านั้น แต่ยังแสดงออกในใบ ก้านใบดอก และรากด้วย[ 33 ]

ในวอลนัท

ในวอลนัท ( Juglans regia ) มีการระบุยีนที่แตกต่างกันสองยีน ( jr PPO1 และjr PPO2) ที่เข้ารหัสโพลีฟีนอลออกซิเดส ไอโซเอนไซม์ทั้งสอง ชอบสารตั้งต้นที่ แตกต่างกัน โดยjr PPO1 แสดงกิจกรรมที่สูงกว่าต่อโมโนฟีนอลในขณะที่jr PPO2 มีกิจกรรมมากกว่าต่อไดฟีนอ[ 42 ] [ 43 ]

ในต้นป็อปลาร์ดำ

เอนไซม์catechol oxidase แบบโมโนเมอร์ จากPopulus nigraจะเปลี่ยนกรดคาเฟอิกเป็นควิโนนและเมลานินในเซลล์ที่ได้รับบาดเจ็บ[ 44 ] [ 45 ]

โปรฟีนอลออกซิเดสเป็นรูปแบบที่ดัดแปลงของการตอบสนองของคอมพลีเมนต์ที่พบในสัตว์ไม่มีกระดูกสันหลังบางชนิด รวมถึงแมลงปูและหนอน[ 46 ]

เฮโมไซยานินมีความคล้ายคลึงกับฟีนอลออกซิเดส (เช่นไทโรซิเนส ) เนื่องจากเอนไซม์ทั้งสองชนิดมีการประสานงานของทองแดงที่ตำแหน่งออกฤทธิ์ เฮโมไซยานินยังแสดงกิจกรรม PPO แต่มีจลนศาสตร์ที่ช้าลงเนื่องจาก มวล เชิงสเตอริกที่ตำแหน่งออกฤทธิ์มากขึ้น การทำให้เสียสภาพบางส่วนช่วยเพิ่มกิจกรรม PPO ของเฮโมไซยานินโดยทำให้เข้าถึงตำแหน่งออกฤทธิ์ได้มากขึ้น[ 47 ]

เอนไซม์ Aureusidin synthaseมีความคล้ายคลึงกับเอนไซม์ polyphenol oxidase ในพืช แต่มีการดัดแปลงที่สำคัญบางประการ

ออโรนซินเทส[ 48 ]เร่งปฏิกิริยาการสร้างออโรน ออโรนซินเทสที่บริสุทธิ์จากCoreopsis grandifloraแสดงกิจกรรมไทโรซิเนส ที่อ่อนแอต่อ ไอโซลิควีริติเจ นิน แต่เอนไซม์ไม่ทำปฏิกิริยากับสารตั้งต้นไทโรซิเนส แบบคลาสสิก l - ไทโรซีนและไทรามีนดังนั้นจึงต้องจัดอยู่ในประเภทคาเทโคลออกซิเด[ 49 ]

แลคเคสซึ่งเป็นออกซิเดสที่มีทองแดงหลายอะตอม มักถูกพิจารณาว่าเป็นคลาสย่อยของโพลีฟีนอลออกซิเดส[ 50 ]แลคเคสและโพลีฟีนอลออกซิเดสแตกต่างกันในประเภทของสารตั้งต้นที่พวกมันเร่งปฏิกิริยา แคตาโคลออกซิเดส (โพลีฟีนอลออกซิเดสชนิดหนึ่ง) เร่งปฏิกิริยาการออกซิเดชันของ ออ ร์โธ -ได ฟีนอลเป็น ออ ร์ โธ -ควิโนน ไทโรซิเนส (โพลีฟีนอลออกซิเดสอีกชนิดหนึ่ง) เร่งปฏิกิริยาทั้งการออกซิเดชันของโมโนฟีนอลเป็นออร์โธ -ได ฟีนอล และการออกซิเดชันของออร์โธ -ไดฟีนอลเป็น ออร์ โธ -ควิโนนในภายหลัง ในทางตรงกันข้าม แลคเคสเร่งปฏิกิริยาการออกซิเดชันของพารา -ไดฟีนอลเป็นพารา-ควิโนน[ 51 ]

ดูเพิ่มเติม

สรุปเนื้อหา

ข้อมูลสำคัญจากบทความ

ข้อมูลสำคัญเกี่ยวกับ โพลีฟีนอลออกซิเดส

โพลีฟีนอลออกซิเดส ( PPO ; หรือโพลีฟีนอลออกซิเดส i, คลอโรพลาสต์ ) ซึ่ง เป็น เอนไซม์ที่เกี่ยวข้องกับการเกิดสีน้ำตาลในผลไม้เป็นเตตระเมอร์ที่มีอะตอมทองแดงสี่อะตอมต่อโมเลกุล

โครงสร้างและหน้าที่

PPO ถูกจัดอยู่ในกลุ่ม มอร์ฟีอิน ซึ่งเป็นโปรตีนที่สามารถสร้างโฮโมโอลิโกเมอร์ (รูปแบบมอร์ฟีอิน) ที่แตกต่างกันได้สองแบบขึ้นไป แต่ต้องแยกออกจากกันและเปลี่ยนรูปร่างเพื่อแปลงระหว่างรูปแบบต่างๆ มันมีอยู่เป็น โมโนเมอร์ ไตรเมอร์ เตตระเมอร์ ออก ตาเมอร์ หรือ โดเดคาเมอร์...

การจัดจำหน่ายและการใช้งาน

เอนไซม์โมโนฟีนอลออกซิเดสและคาเทคอลออกซิเดสผสมกันมีอยู่ในเนื้อเยื่อพืชเกือบทั้งหมด และยังพบได้ในแบคทีเรีย สัตว์ และเชื้อรา ในแมลงจะมีโพลีฟีนอลออกซิเดสในคิวติเคิล [ 17 ] และผลิตภัณฑ์ของเอนไซม์เหล่านี้มีส่วนรับผิดชอบต่อ ความทนทานต่อการขาด น้ำ

สารยับยั้ง

สารยับยั้ง PPO มีสองประเภท ได้แก่ สารที่แข่งขันกับออกซิเจนในตำแหน่งทองแดงของเอนไซม์ และสารที่แข่งขันกับฟีนอล เท นทอกซิน ยังถูกนำมาใช้ในการวิจัยล่าสุดเพื่อกำจัดกิจกรรม PPO จากต้นกล้าของพืชชั้นสูง [ 19 ] โทรโพโลน เป็น สารยับยั้ง โพลีฟีนอลออกซิเดสขององุ่น [ 20 ]...