อ่าน 2 นาที
IMViC
การ ทดสอบ IMViC เป็นกลุ่มของการทดสอบแต่ละรายการที่ใช้ในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยาเพื่อระบุจุลินทรีย์ใน กลุ่มโคลิฟอร์ม โคลิฟอร์มเป็นแบคทีเรีย แกรมลบ รูป แท่ง...
IMViC
การ ทดสอบ IMViCเป็นกลุ่มของการทดสอบแต่ละรายการที่ใช้ในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยาเพื่อระบุจุลินทรีย์ในกลุ่มโคลิฟอร์มโคลิฟอร์มเป็นแบคทีเรีย แกรมลบ รูป แท่ง เจริญเติบโตได้ในสภาวะที่ มีออกซิเจนหรือ ไม่มีออกซิเจน ก็ได้และผลิตก๊าซจากแลคโตสภายใน 48 ชั่วโมง การตรวจพบโคลิฟอร์มบางชนิดบ่งชี้ถึงการปนเปื้อนจากอุจจาระ
คำว่า "IMViC" เป็นคำย่อของชุดทดสอบแต่ละชุด "I" ย่อมาจากการทดสอบอินโดล (Indole Test ) "M" ย่อมาจาก การทดสอบเมทิลเรด (Methyl Red Test ) "V" ย่อมาจาก การทดสอบโวเกส -โพรสเคาเออร์ (Voges-Proskauer Test) และ "C" ย่อมาจากการทดสอบซิเตรต (Citrate Test ) ตัวอักษร "i" ตัวเล็กหมายถึง "ใน" เนื่องจากชุดทดสอบซิเตรตต้องการให้ตัวอย่างโคลิฟอร์มถูกวางไว้ "ในซิเตรต"
การทดสอบเหล่านี้มีประโยชน์ในการจำแนกแบคทีเรียในกลุ่ม Enterobacteriaceae

การทดสอบอินโดล
ในการทดสอบนี้ จุลินทรีย์ที่กำลังพิจารณาจะถูกเพาะเลี้ยงในน้ำซุปเปปโตนวอเตอร์ซึ่งประกอบด้วยทริปโต เฟน โดยทริปโตเฟนจะถูกเปลี่ยนเป็นโมเลกุล อินโดลไพรูเวต และแอมโมเนียมโดยเอนไซม์ทริปโตเฟเนส จากนั้นจึงสกัดอินโดลออกจากน้ำซุปโดยใช้ไซลีน น้ำซุปจะถูกฆ่าเชื้อเป็นเวลา 15 นาทีที่อุณหภูมิประมาณ 121 องศาเซลเซียส เพื่อทดสอบการผลิตอินโดลในน้ำซุป จะใช้ สารละลาย โคแวก (Kovac's reagent ) สารละลายโคแวกประกอบด้วยอะมิลแอลกอฮอล์ พารา-ไดเมทิลอะมิโนเบนซาลดีไฮด์ และกรดไฮโดรคลอริก เข้มข้น สารละลายโคแวกใช้เพื่อตรวจสอบความสามารถของจุลินทรีย์ในการแยกอินโดลออกจากกรดอะมิโนทริปโตเฟน โดยจะเติมหลังจากบ่มแล้ว ผลลัพธ์ที่เป็นบวกจะแสดงโดยการเกิดชั้นสีชมพู/แดงบนผิวของเหลว
การทดสอบเมทิลเรดและโวเกส-โปรสเคาเออร์
การทดสอบทั้งสองวิธีนี้ใช้สารละลายเพาะเลี้ยงแบคทีเรียชนิดเดียวกัน สารละลายนี้เรียกว่า MR-VP broth หลังจากที่แบคทีเรียเจริญเติบโตแล้ว จะแยกสารละลายออกเป็นสองหลอด หลอดหนึ่งสำหรับทดสอบเมทิลเรด (MR)และอีกหลอดหนึ่งสำหรับ ทดสอบโวเกส-โพรสเคาเออ ร์ (VP)
การทดสอบเมทิลเรดใช้ตรวจจับการผลิตกรดที่เกิดขึ้นระหว่างกระบวนการเมตาบอลิซึมโดยใช้กระบวนการหมักกรดผสม โดยใช้ ไพรูเวทเป็นสารตั้งต้น โดยเติมเมทิลเรดซึ่งเป็นตัวบ่งชี้ค่า pH ลงในหลอดทดลองหนึ่งหลอด หากค่า pH ต่ำกว่า 4.2 จะปรากฏสีแดง แสดงว่าผลการทดสอบเป็นบวก (ใช้กระบวนการหมักกรดผสม) ส่วนหากสารละลายยังคงเป็นสีเหลือง (pH = 6.2 หรือสูงกว่า) แสดงว่าผลการทดสอบเป็นลบ (หมายความว่าใช้ กระบวนการหมักบิวเทนไดออล )
การทดสอบ VP ใช้แอลฟา-แนฟทอลและโพแทสเซียมไฮดรอกไซด์เพื่อตรวจสอบการมีอยู่ของอะเซทิลเมทิลคาร์บินอล (อะเซโทอิน) ซึ่งเป็นสารตัวกลางในกระบวนการหมัก 2,3-บิวเทนไดออล หลังจากเติมสารเคมีทั้งสองชนิดแล้ว ให้เขย่าหลอดทดลองอย่างแรง จากนั้นทิ้งไว้ 5-10 นาที หากพบสีชมพูอมแดง แสดงว่าผลการทดสอบเป็นบวก หมายความว่ามีการใช้กระบวนการหมัก 2,3-บิวเทนไดออล
การทดสอบซิเตรต
ในช่วงทศวรรษ 1930 SA Koser ได้ทำการทดลองเพื่อศึกษาการสลายตัวของกรดอินทรีย์โดยแบคทีเรีย[ 1 ] Koser พบว่าการเผาผลาญซิเตรตสามารถเป็นตัวบ่งชี้สำหรับแบคทีเรียที่พบในสภาพแวดล้อมทางธรรมชาติ นอกจากนี้ ซิเตรตยังสามารถใช้ในการแยกแยะแบคทีเรียโคลิฟอร์มที่พบในดินและสภาพแวดล้อมทางน้ำ เช่นEnterobacteriaceaeและโคลิฟอร์มที่มีการปนเปื้อนอุจจาระ พบว่าโคลิฟอร์มที่ไม่มีการปนเปื้อนอุจจาระสามารถเจริญเติบโตได้ ในขณะที่โคลิฟอร์มที่มีการปนเปื้อนอุจจาระไม่สามารถเจริญเติบโตได้
การทดสอบนี้ใช้Simmon's citrate agarเพื่อตรวจสอบความสามารถของจุลินทรีย์ในการใช้ซิเตรตเป็นแหล่งคาร์บอนและพลังงานเพียงอย่างเดียว วุ้นประกอบด้วยซิเตรตและไอออนแอมโมเนียม (แหล่งไนโตรเจน) และโบรโมไทมอลบลู (BTB) เป็นตัวบ่งชี้ค่า pH [ 2 ]โบรโมไทมอลบลูถูกเติมเพื่อลดผลบวกปลอม วุ้นซิเตรตจะมีสีเขียวก่อนการเพาะเชื้อ และเปลี่ยนเป็นสีน้ำเงินเนื่องจาก BTB เป็นตัวบ่งชี้การทดสอบเชิงบวก ซึ่งหมายความว่ามีการใช้ซิเตรต การทดสอบยังเตรียมบนอาหารเลี้ยงเชื้อแบบเอียงเพื่อเพิ่มการเจริญเติบโตของแบคทีเรียให้สูงสุดเพื่อบ่งชี้การใช้ซิเตรตได้ดียิ่งขึ้น
การใช้งาน
การทดสอบ IMViC เหล่านี้มีประโยชน์ในการจำแนกกลุ่มแบคทีเรียในวงศ์Enterobacteriaceaeโดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อใช้ร่วมกับการทดสอบยูรีเอส
ผลลัพธ์ IMViC ของสายพันธุ์สำคัญบางสายพันธุ์แสดงไว้ด้านล่าง[ 3 ]
| สายพันธุ์ | อินโดล | เมทิลเรด | โวเกส-โปรสเคาเออร์ | ซิเตรต |
|---|---|---|---|---|
| เอสเชอริเชีย โคลี | เชิงบวก | เชิงบวก | เชิงลบ | เชิงลบ |
| เชื้อสแตฟิโลค็อกคัส ออเรียส | เชิงลบ | เชิงบวก | เชิงบวก | เชิงลบ |
| ชิเกลลาสป. [ 4 ] | เชิงลบ | เชิงบวก | เชิงลบ | เชิงลบ |
| เชื้อซัลโมเนลลา spp. | เชิงลบ | เชิงบวก | เชิงลบ | เชิงบวก |
| เคล็บซิเอลลาสกุล | เชิงลบ | เชิงลบ | เชิงบวก | เชิงบวก |
| Proteus vulgaris [ 5 ] | เชิงบวก | เชิงบวก | เชิงลบ | เชิงลบ |
| โปรเตอุส มิราบิลิส | เชิงลบ | เชิงบวก | เชิงลบ | เชิงบวก |
| ซิโตรแบคเตอร์ เฟรนดี | เชิงลบ | เชิงบวก | เชิงลบ | เชิงบวก |
| เอ็นเทอโรแบคเตอร์ แอโรจีนส์ | เชิงลบ | เชิงลบ | เชิงบวก | เชิงบวก |
สรุปเนื้อหา
ข้อมูลสำคัญจากบทความ
ข้อมูลสำคัญเกี่ยวกับ IMViC
การ ทดสอบ IMViC เป็นกลุ่มของการทดสอบแต่ละรายการที่ใช้ในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยาเพื่อระบุจุลินทรีย์ใน กลุ่มโคลิฟอร์ม โคลิฟอร์มเป็นแบคทีเรีย แกรมลบ รูป แท่ง...
การทดสอบอินโดล
ในการทดสอบนี้ จุลินทรีย์ที่กำลังพิจารณาจะถูกเพาะเลี้ยงในน้ำซุปเปปโตนวอเตอร์ซึ่งประกอบด้วยทริป โต เฟน โดยทริปโตเฟนจะถูกเปลี่ยนเป็นโมเลกุล อินโดล ไพรูเวต และแอมโมเนียมโดยเอนไซม์ทริปโตเฟเนส จากนั้นจึงสกัดอินโดลออกจากน้ำซุปโดยใช้ไซลีน น้ำซุปจะถูกฆ่าเชื้อเป็นเวลา...
การทดสอบเมทิลเรดและโวเกส-โปรสเคาเออร์
การทดสอบทั้งสองวิธีนี้ใช้สารละลายเพาะเลี้ยงแบคทีเรียชนิดเดียวกัน สารละลายนี้เรียกว่า MR-VP broth หลังจากที่แบคทีเรียเจริญเติบโตแล้ว จะแยกสารละลายออกเป็นสองหลอด หลอดหนึ่งสำหรับ ทดสอบเมทิลเรด (MR) และอีกหลอดหนึ่งสำหรับ ทดสอบโวเกส-โพรสเคาเออ ร์ (VP)
การทดสอบซิเตรต
ในช่วงทศวรรษ 1930 SA Koser ได้ทำการทดลองเพื่อศึกษาการสลายตัวของกรดอินทรีย์โดยแบคทีเรีย [ 1 ] Koser พบว่าการเผาผลาญซิเตรตสามารถเป็นตัวบ่งชี้สำหรับแบคทีเรียที่พบในสภาพแวดล้อมทางธรรมชาติ นอกจากนี้...