ในปี ค.ศ. 1606 อาณานิคมอังกฤษได้ออกเดินทางโดยได้รับใบอนุญาตจากบริษัทลอนดอนเพื่อก่อตั้งอาณานิคมในโลกใหม่ กองเรือประกอบด้วยเรือSusan Constant , DiscoveryและGodspeedซึ่งทั้งหมดอยู่ภายใต้การนำของกัปตันคริสโตเฟอร์ นิวพอร์ตพวกเขาเดินทางไกลถึงสี่เดือน โดยแวะพักที่หมู่เกาะคานารี [ ^{11 ] [ 12 ] ใน}สเปนและต่อมาที่เปอร์โตริโกและในที่สุดก็ออกเดินทางไปยังแผ่นดินใหญ่ของอเมริกาในวันที่ 10 เมษายน ค.ศ. 1607

คณะสำรวจขึ้นฝั่งเมื่อวันที่ 26 เมษายน ค.ศ. 1607 ณ สถานที่ซึ่งพวกเขาตั้งชื่อว่าแหลมเฮนรีภายใต้คำสั่งให้เลือกสถานที่ที่ปลอดภัยกว่า พวกเขาจึงเริ่มสำรวจสิ่งที่ปัจจุบันคือแฮมป์ตันโรดส์และทางออกสู่อ่าวเชซาพีคซึ่งพวกเขาตั้งชื่อว่าแม่น้ำเจมส์เพื่อเป็นเกียรติแก่พระเจ้า เจมส์ ที่1 แห่งอังกฤษ^{[ 13 ]}กัปตันเอ็ดเวิร์ด มาเรีย วิงฟิลด์ได้รับเลือกเป็นประธานสภาปกครองเมื่อวันที่ 25 เมษายน ค.ศ. 1607 ในวันที่ 14 พฤษภาคม เขาได้เลือกที่ดินผืนหนึ่งบนคาบสมุทรขนาดใหญ่ซึ่งอยู่ห่างจากมหาสมุทรแอตแลนติกไปทางบกประมาณ40 ไมล์ (64 กิโลเมตร)เป็นทำเลที่ดีเยี่ยมสำหรับการตั้งถิ่นฐานที่มีป้อมปราการ ช่องทางแม่น้ำเป็นจุดยุทธศาสตร์ที่สามารถป้องกันได้เนื่องจากแม่น้ำมีลักษณะโค้ง และอยู่ใกล้กับแผ่นดิน ทำให้สามารถเดินเรือได้และมีพื้นที่เพียงพอสำหรับสร้างท่าเรือหรือท่าเทียบเรือในอนาคต^{[ 14 ]}บางทีข้อดีที่สุดของสถานที่แห่งนี้คือไม่มีผู้คนอาศัยอยู่ เนื่องจากผู้นำของชนพื้นเมือง ที่อยู่ใกล้เคียง ^{[ 15 ]}พิจารณาว่าสถานที่แห่งนี้ยากจนและห่างไกลเกินไปสำหรับการทำการเกษตร [ ^{16 ] เกาะ}แห่งนี้เป็นพื้นที่ชื้นแฉะและโดดเดี่ยว มีพื้นที่จำกัด มีแมลงยุงชุกชุม และมีเพียง น้ำ กร่อยจากแม่น้ำขึ้นลงที่ไม่เหมาะสำหรับการดื่ม 

จากการศึกษาวิจัยที่ดำเนินการโดยทีมประเมินทางโบราณคดีเจมส์ทาวน์ (JAA) ในช่วงทศวรรษ 1990 พบว่า ผู้ตั้งถิ่นฐานเจมส์ทาวน์เดินทางมาถึงเวอร์จิเนียในช่วงที่เกิดภัยแล้งอย่างรุนแรง JAA ได้วิเคราะห์ข้อมูลจากการศึกษาที่ดำเนินการในปี 1985 โดยเดวิด สตาห์ลและคณะ ซึ่งได้ภาพวาดต้นสนไซเปรสหัวโล้น อายุ 800 ปี ตาม แนวแม่น้ำ นอตทาเวย์และแบล็กวอเตอร์อายุขัยของต้นไม้เหล่านี้ยาวนานถึง 1,000 ปี และวงปีของต้นไม้ยังบ่งบอกถึงปริมาณน้ำฝนรายปีของพื้นที่ได้ดี การเจาะสำรวจเผยให้เห็นว่าภัยแล้งที่รุนแรงที่สุดในรอบ 700 ปีเกิดขึ้นระหว่างปี 1606 ถึง 1612 ภัยแล้งที่รุนแรงนี้ส่งผลกระทบต่อความสามารถของชาวอาณานิคมเจมส์ทาวน์และ ชนเผ่า โพวาตันในการผลิตอาหารและจัดหาน้ำที่ปลอดภัย^{[ 17 ]}

ผู้ตั้งถิ่นฐานมาถึงช้าเกินไปในปลายปีจึงไม่สามารถปลูกพืชผลได้^{[ 18 ]}หลายคนในกลุ่มเป็นสุภาพบุรุษหรือคนรับใช้ของพวกเขา ซึ่งทั้งสองกลุ่มไม่คุ้นเคยกับการใช้แรงงานหนักที่จำเป็นในการสร้างอาณานิคมที่ยั่งยืน^{[ 18 ]}หนึ่งในนั้นคือโรเบิร์ต ฮันต์อดีตบาทหลวงแห่งเรคัลเวอร์ประเทศอังกฤษ ผู้ประกอบพิธีศีลมหาสนิท แองกลิกันครั้งแรก ในดินแดนของสหรัฐอเมริกาในอนาคตเมื่อวันที่ 21 มิถุนายน ค.ศ. 1607 ^{[ 19 ]}

สองในสามของผู้ตั้งถิ่นฐานเสียชีวิตก่อนที่เรือจะมาถึงในปี 1608 พร้อมเสบียงและช่างฝีมือชาวเยอรมันและโปแลนด์^{[ 20 ] [ 21 ] [ 22 ]}ซึ่งช่วยก่อตั้งโรงงานแห่งแรกในอาณานิคม ส่งผลให้เครื่องแก้วกลายเป็นผลิตภัณฑ์อเมริกันที่สำคัญที่สุดที่ส่งออกไปยังยุโรปในเวลานั้นไม้กระดานได้ถูกส่งกลับไปยังอังกฤษแล้วตั้งแต่เรือลำแรกที่เดินทางกลับมา

การส่งเสบียงในปี 1608 ใน ภารกิจ ส่งเสบียงครั้งแรกและครั้งที่สองของกัปตันนิวพอร์ตได้เพิ่มจำนวนผู้ตั้งถิ่นฐานที่หิวโหยขึ้น ในเวลานั้นดูเหมือนว่าอาณานิคมที่เจมส์ทาวน์จะประสบชะตากรรมเดียวกับความพยายามของชาวอังกฤษในการตั้งถิ่นฐานในอเมริกาเหนือในอดีต โดยเฉพาะอย่างยิ่งอาณานิคมโรอาโนก (อาณานิคมที่สาบสูญ) และอาณานิคมป็อปแฮมเว้นแต่จะมีการช่วยเหลือครั้งใหญ่ ชาวเยอรมันที่มาถึงพร้อมกับเสบียงครั้งที่สองและคนอื่นๆ อีกเล็กน้อยได้แปรพักตร์ไปอยู่กับชาวพาวฮาตันพร้อมกับอาวุธและอุปกรณ์^{[ 23 ]}ชาวเยอรมันยังวางแผนที่จะเข้าร่วมการโจมตีอาณานิคมของสเปนตามข่าวลือและกระตุ้นให้ชาวพาวฮาตันเข้าร่วมด้วย^{[ 24 ]}ชาวสเปนถูกขับไล่ออกไปโดยการมาถึงอย่างทันท่วงทีในเดือนกรกฎาคม 1609 ของกัปตันซามูเอล อาร์กัลล์ในเรือแมรีแอนด์จอห์นซึ่งเป็นเรือที่ใหญ่กว่าเรือลาดตระเวนของสเปนลา อัสซุนซิออน เดอ คริสโต [ ^{25 ] การ}เดินทางของอาร์กัลล์ยังช่วยป้องกันไม่ให้ชาวสเปนรู้ถึงจุดอ่อนของอาณานิคมดอนเปโดร เด ซูนิกาทูตสเปนประจำอังกฤษ พยายามอย่างยิ่งที่จะหาข้อมูลนี้พร้อมกับสายลับ เพื่อโน้มน้าวให้พระเจ้าฟิลิปที่ 3 อนุญาตให้โจมตีอาณานิคม^{[ 26 ]}

นักลงทุนของบริษัทเวอร์จิเนียแห่งลอนดอนคาดหวังว่าจะได้รับผลตอบแทนจากการลงทุนเก็งกำไรของพวกเขา เมื่อมีการส่งเสบียงครั้งที่สอง พวกเขาแสดงความไม่พอใจและเรียกร้องต่อผู้นำของเจมส์ทาวน์เป็นลายลักษณ์อักษร พวกเขาเรียกร้องอย่างเฉพาะเจาะจงให้ผู้ตั้งถิ่นฐานส่งสินค้าที่เพียงพอต่อค่าใช้จ่ายในการเดินทาง ทองคำก้อนหนึ่ง การรับรองว่าพวกเขาได้ค้นพบทะเลใต้ และสมาชิกหนึ่งคนจากอาณานิคมโรอาโนกที่สูญหายกัปตันจอห์น สมิธ ประธานสภาคนที่สาม มีหน้าที่ ต้องส่งสัญญาณเตือนที่กล้าหาญและจำเป็นอย่างยิ่งเพื่อตอบสนองต่อนักลงทุนในลอนดอน โดยเรียกร้องแรงงานและช่างฝีมือที่สามารถช่วยทำให้อาณานิคมมีความพึ่งพาตนเองได้มากขึ้น^{[ 27 ]}

หลังจากที่สมิธถูกบังคับให้กลับไปอังกฤษเนื่องจากการระเบิดที่ทำให้เขาได้รับบาดเจ็บจากการถูกไฟไหม้อย่างรุนแรงระหว่างการเดินทางค้าขาย^{[ 28 ]}อาณานิคมจึงอยู่ภายใต้การนำของจอร์จ เพอร์ซีซึ่งพิสูจน์แล้วว่าไร้ความสามารถในการเจรจากับชนเผ่าพื้นเมือง มีข้อบ่งชี้ว่าผู้คนในลอนดอนเข้าใจและยอมรับข้อความของสมิธ ภารกิจส่งเสบียงครั้งที่สามในปี 1609 เป็นภารกิจที่ใหญ่ที่สุดและมีอุปกรณ์ครบครันที่สุด พวกเขายังมีเรือธงที่สร้างขึ้นใหม่โดยเฉพาะชื่อSea Ventureซึ่งสร้างและมอบหมายให้คริสโตเฟอร์ นิวพอร์ต ผู้ที่มีประสบการณ์มากที่สุดเป็นผู้บังคับการ

เมื่อวันที่ 2 มิถุนายน ค.ศ. 1609 เรือ Sea Ventureออกเดินทางจากพลีมัธ ประเทศอังกฤษในฐานะเรือธงของกองเรือ 7 ลำ (ลากเรือพินเนสอีก 2 ลำ ) ที่มุ่งหน้าไปยังเจมส์ทาวน์ ซึ่งเป็นส่วนหนึ่งของภารกิจส่งเสบียงครั้งที่ 3 โดยบรรทุกผู้ตั้งถิ่นฐาน 214 คน^{[ 29 ]}เมื่อวันที่ 24 กรกฎาคม กองเรือประสบกับพายุรุนแรง ซึ่งน่าจะเป็นพายุเฮอริเคนและเรือต่างๆ ก็แยกจากกัน แม้ว่าเรือบางลำจะไปถึงเจมส์ทาวน์ได้ แต่ผู้นำและเสบียงส่วนใหญ่อยู่บนเรือSea Ventureซึ่งต่อสู้กับพายุเป็นเวลา 3 วัน ก่อนที่พลเรือเอกของบริษัท เซอร์จอร์จ ซอมเมอร์สจะจงใจขับเรือไปชนแนวปะการังของเบอร์มูดาเพื่อป้องกันไม่ให้เรืออับปาง ซึ่งทำให้ทุกคนบนเรือสามารถขึ้นฝั่งได้อย่างปลอดภัย^{[ 30 ]}ผู้รอดชีวิต (รวมถึงพลโทเซอร์โทมัส เกตส์ , กัปตันคริสโตเฟอร์ นิวพอร์ต, ซิลเวสเตอร์ จอร์เดน , สตีเฟน ฮอปกินส์ — ซึ่งต่อมา อยู่บนเรือ เมย์ฟลาวเวอร์ —และเลขานุการวิลเลียม สแตรชี ) ติดอยู่บนเกาะเบอร์มูดาเป็นเวลาประมาณเก้าเดือน ในช่วงเวลานั้น พวกเขาสร้างเรือใหม่สองลำ คือเรือพินเนสชื่อ เดลิเว อแรนซ์และเพเชียนซ์แผนเดิมคือสร้างเรือเพียงลำเดียวคือเดลิเวอแรนซ์แต่ในไม่ช้าก็เห็นได้ชัดว่าเรือลำนั้นจะไม่ใหญ่พอที่จะบรรทุกผู้ตั้งถิ่นฐานและอาหารทั้งหมด (หมูเค็ม) ที่หาได้จากบนเกาะ^{[ 31 ]}

ในขณะที่เสบียงชุดที่สามติดอยู่ที่เบอร์มูดา อาณานิคมที่เจมส์ทาวน์กลับอยู่ในสภาพที่ย่ำแย่ยิ่งกว่า ผู้ตั้งถิ่นฐานต้องเผชิญกับความอดอยากอย่างรุนแรงเนื่องจากขาดเสบียงเพิ่มเติม ในช่วงเวลานี้ การขาดแคลนอาหารทำให้ผู้คนต้องกินงูและถึงกับต้มหนังจากรองเท้าเพื่อประทังชีวิต^{[ 32 ]}มีผู้ตั้งถิ่นฐานดั้งเดิมที่เจมส์ทาวน์เพียง 60 คนจากทั้งหมด 214 คนเท่านั้นที่รอดชีวิต^{[ 29 ]}มีหลักฐานทางประวัติศาสตร์และวิทยาศาสตร์ที่บ่งชี้ว่าผู้ตั้งถิ่นฐานที่เจมส์ทาวน์หันมากินเนื้อคนในช่วงเวลาที่อดอยาก^{[ 33 ] [ 34 ] [ 35 ]}

เรือจากเบอร์มูดามาถึงเจมส์ทาวน์ในวันที่ 23 พฤษภาคม ค.ศ. 1610 ^{[ 36 ] [ 37 ] [ 38 ]}ผู้ตั้งถิ่นฐานที่รอดชีวิตจำนวนมากอยู่ในสภาพใกล้ตาย และเจมส์ทาวน์ถูกตัดสินว่าไม่สามารถดำรงอยู่ได้ ทุกคนถูกพาขึ้นเรือDeliveranceและPatienceซึ่งออกเดินทางไปยังอังกฤษ อย่างไรก็ตาม ในวันที่ 10 มิถุนายน ค.ศ. 1610 การมาถึงอย่างทันท่วงทีของกองเรือช่วยเหลืออีกกองหนึ่งซึ่งบรรทุกผู้ว่าการโทมัส เวสต์ บารอนเดอลาวาร์ที่ 3 (ซึ่งต่อมาได้ตั้งชื่ออาณานิคมเดลาแวร์ ตามชื่อของเขา ) ซึ่งได้พบกับเรือทั้งสองลำขณะที่พวกเขากำลังล่องลงมาตามแม่น้ำเจมส์ ทำให้เจมส์ทาวน์รอดพ้นจากภัยพิบัติ ผู้ตั้งถิ่นฐานเรียกเหตุการณ์นี้ว่าวันแห่งพระพรกองเรือนำเสบียงและผู้ตั้งถิ่นฐานเพิ่มเติมมาด้วย^{[ 39 ]}ผู้ตั้งถิ่นฐานทั้งหมดกลับไปยังอาณานิคม แม้ว่าจะยังคงขาดแคลนอาหารอย่างรุนแรง

ความสัมพันธ์ระหว่างชาวอาณานิคมและชาวเผ่าโพวาตันเสื่อมลงอย่างรวดเร็วหลังจากการมาถึงของเดอ ลา วาร์ จนในที่สุดก็นำไปสู่ความขัดแย้งสงครามแองโกล-โพวาตันกินเวลานานจนกระทั่งซามูเอล อาร์กอลจับตัว มาโตอาคา ลูกสาว ของวาฮุนเซ นาคาวห์ ซึ่งเป็นที่รู้จักกันดีในชื่อเล่นว่าโพคาฮอนทัสหลังจากนั้นหัวหน้าเผ่าจึงยอมรับสนธิสัญญาสันติภาพ

เนื่องจาก ภูมิหลังของชนชั้น สูงของผู้ตั้งถิ่นฐานจำนวนมาก ภัยแล้งครั้งประวัติศาสตร์ และลักษณะงานที่ต้องแบ่งปันกัน ทำให้ความก้าวหน้าในช่วงสองสามปีแรกไม่สม่ำเสมอ ในปี ค.ศ. 1613 หกปีหลังจากก่อตั้งเจมส์ทาวน์ ผู้จัดตั้งและผู้ถือหุ้นของบริษัทเวอร์จิเนียต่างก็หมดหวังที่จะเพิ่มประสิทธิภาพและผลกำไรของอาณานิคมที่กำลังประสบปัญหา โดยไม่ได้รับความยินยอมจากผู้ถือหุ้น ผู้ว่าการเซอร์โทมัส เดลได้จัดสรร ที่ดิน ขนาด 3 เอเคอร์ (12,000 ^{ตาราง}เมตร)ให้กับ " ผู้ปลูกดั้งเดิม " และที่ดินขนาดเล็กกว่าให้กับผู้ตั้งถิ่นฐานที่มาถึงในภายหลัง ความก้าวหน้าทางเศรษฐกิจที่วัดได้เกิดขึ้น และผู้ตั้งถิ่นฐานเริ่มขยายการเพาะปลูกไปยังที่ดินที่เป็นของชนเผ่าพื้นเมืองในท้องถิ่น การที่การเปลี่ยนแปลงนี้เกิดขึ้นพร้อมกับการสิ้นสุดของภัยแล้งที่เริ่มต้นขึ้นในปีก่อนที่ผู้ตั้งถิ่นฐานชาวอังกฤษจะมาถึง อาจบ่งชี้ว่ามีหลายปัจจัยที่เกี่ยวข้องนอกเหนือจากความไม่ชำนาญของผู้ตั้งถิ่นฐาน^{[ 40 ]} 

ในบรรดาผู้ตั้งถิ่นฐานที่รอดชีวิตจากช่วงเวลาอดอยากนั้น มีจอห์น โรลฟ์ซึ่งพก เมล็ดพันธุ์ ยาสูบ ที่ยังไม่ได้ทดสอบ จากเบอร์มูดาติดตัวไปด้วย ซึ่งเมล็ดพันธุ์เหล่านั้นงอกขึ้นเองตามธรรมชาติหลังจากที่ชาวสเปนที่เรืออับปางปลูกไว้เมื่อหลายปีก่อน^{[ 41 ]}ในปี 1614 โรลฟ์เริ่มเก็บเกี่ยวใบยาสูบได้สำเร็จ^{[ 42 ]}เขามั่งคั่งและร่ำรวย จึงแต่งงานกับโปคาฮอนทัส ทำให้เกิดสันติภาพระหว่างชาวอังกฤษและชนพื้นเมืองเป็นเวลาหลายปี^{[ 43 ]}อย่างไรก็ตาม ในช่วงท้ายของการเดินทางเพื่อประชาสัมพันธ์ไปยังอังกฤษ โปคาฮอนทัสล้มป่วยและเสียชีวิตในวันที่ 21 มีนาคม 1617 ^{[ 44 ]} ในปีต่อมา บิดาของเธอก็เสียชีวิตเช่นกัน โอเปชันคาโนห์น้องชายของโพวาตัน นักรบผู้ดุร้าย ได้ขึ้นเป็นหัวหน้าของสมาพันธ์โพวาตันเมื่อชาวอังกฤษยึดครองที่ดินมากขึ้นเพื่อทำการเกษตรยาสูบ ความสัมพันธ์กับชนพื้นเมืองก็แย่ลง

เนื่องจากค่าใช้จ่ายในการเดินทางข้ามมหาสมุทรแอตแลนติกสูงในเวลานั้น ผู้ตั้งถิ่นฐานชาวอังกฤษจำนวนมากจึงเดินทางมายังเจมส์ทาวน์ในฐานะคนรับใช้ที่มีสัญญาจ้างงาน โดยแลกกับการเดินทาง ที่พัก อาหาร และคำสัญญาว่าจะได้รับที่ดินหรือเงิน ผู้อพยพเหล่านี้จะตกลงทำงานเป็นเวลาสามถึงเจ็ดปี ผู้อพยพจากทวีปยุโรป ส่วนใหญ่เป็นชาวเยอรมัน มักจะเป็นผู้ไถ่ถอน กล่าวคือ พวกเขาซื้อส่วนหนึ่งของการเดินทางด้วยเครดิต และเมื่อเดินทางมาถึง ก็จะกู้ยืมหรือทำสัญญาจ้างงานเพื่อชำระค่าใช้จ่ายในการเดินทางส่วนที่เหลือ^{[ 45 ]}

ในปี ค.ศ. 1619 สภาผู้แทนราษฎรแห่งแรกในอเมริกา หรือสภาสามัญ ได้ประชุมกันที่โบสถ์เจมส์ทาวน์ “เพื่อจัดตั้งรัฐบาลที่เท่าเทียมและเป็นเอกภาพทั่วทั้งเวอร์จิเนีย” ซึ่งจะจัดให้มี “กฎหมายที่เป็นธรรมเพื่อชี้นำและปกครองประชาชนที่อาศัยอยู่ที่นั่นอย่างมีความสุข” ในตอนแรก มีเพียงชายเชื้อสายอังกฤษเท่านั้นที่ได้รับอนุญาตให้ลงคะแนนเสียง ในวันที่ 30 มิถุนายน ค.ศ. 1619 ซึ่งเป็นการประท้วงครั้งแรกที่มีการบันทึกไว้ในอาณานิคมอเมริกาช่างฝีมือชาวโปแลนด์ได้ประท้วงและปฏิเสธที่จะทำงานหากไม่ได้รับอนุญาตให้ลงคะแนนเสียง^{[ 46 ] [ 47 ] [ 48 ]}ในวันที่ 21 กรกฎาคม ค.ศ. 1619 ศาลได้ให้สิทธิออกเสียง ที่เท่าเทียมกัน แก่ ชาวโปแลนด์ ^{[ 49 ]}หลังจากนั้น การประท้วงหยุดงานก็สิ้นสุดลง และช่างฝีมือก็กลับไปทำงานต่อ^{[ 48 ] [ 50 ] [ 51 ] [ 52 ]}การเป็นเจ้าของที่ดินส่วนบุคคลก็ได้รับการจัดตั้งขึ้นเช่นกัน และอาณานิคมถูกแบ่งออกเป็นสี่ "เขต" หรือ "เขตการปกครอง" ขนาดใหญ่ที่เรียกว่า "เมือง" โดยผู้ตั้งถิ่นฐาน เจมส์ทาวน์ตั้งอยู่ในเจมส์ซิตี้

ในบรรดาทาสชาวแอฟริกันกลุ่มแรกที่ได้รับการบันทึกไว้ซึ่งเดินทางมาถึงอเมริกาเหนือของอังกฤษบนเรือฟริเกตไวท์ไลออนในเดือนสิงหาคม ค.ศ. 1619 ^{[ 5 ]}คือชายและหญิงชาวแอฟริกัน ซึ่งต่อมาได้รับชื่อว่าแอนโทนีและอิซาเบลลา พวกเขาถูกบันทึกไว้ในสำมะโนประชากรปี ค.ศ. 1624 ในเวอร์จิเนีย และกลายเป็นครอบครัวชาวแอฟริกันครอบครัวแรกที่ได้รับการบันทึกไว้ในเจมส์ทาวน์^{[ 53 ]}ลูกของพวกเขาชื่อวิลเลียม ทักเกอร์ กลายเป็นเด็กชาวแอฟริกันคนแรกที่ได้รับการทำพิธีบัพติศมาในอเมริกาเหนือของอังกฤษ ทาสชาวแอฟริกันอีกคนหนึ่งที่ถูกซื้อในถิ่นฐานในช่วงแรกคือแองเจลาซึ่งทำงานให้กับกัปตันวิลเลียม เพียร์ซ^{[ 7 ]}

หลังจากอยู่ร่วมกันอย่างตึงเครียดมาหลายปี หัวหน้าเผ่าโอเปชันคาโนห์และกลุ่มพันธมิตรพาวฮาตันของเขาพยายามกำจัดอาณานิคมอังกฤษให้หมดสิ้นไป ในเช้าวันที่ 22 มีนาคม ค.ศ. 1622 พวกเขาโจมตีไร่และชุมชนรอบนอกตลอดแนวแม่น้ำเจมส์ ซึ่งต่อมาเป็นที่รู้จักในชื่อการสังหารหมู่ชาวอินเดียนแดงในปี ค.ศ. 1622มีผู้ตั้งถิ่นฐานเสียชีวิตมากกว่า 300 คนในการโจมตีครั้งนี้ ซึ่งคิดเป็นประมาณหนึ่งในสามของประชากรที่พูดภาษาอังกฤษของอาณานิคม^{[ 40 ]}การพัฒนาของเดลที่เฮนริคัสซึ่งจะมีวิทยาลัยเพื่อการศึกษาชาวพื้นเมือง และเมืองวอลสเตนโฮล์มที่มาร์ตินส์ฮันเดร็ดต่างก็ถูกทำลายไปเกือบหมด เจมส์ทาวน์รอดพ้นมาได้ก็เพราะการเตือนอย่างทันท่วงทีจากพนักงานชาวอินเดียนแดงของเวอร์จิเนีย ไม่มีเวลาเพียงพอที่จะกระจายข่าวไปยังด่านหน้า

จากจำนวน 6,000 คนที่อพยพมายังถิ่นฐานระหว่างปี 1608 ถึง 1624 มีเพียง 3,400 คนเท่านั้นที่รอดชีวิต^{[ 40 ]}

ในปี ค.ศ. 1624 พระเจ้าเจมส์ที่ 1 ทรงเพิกถอนกฎบัตรของบริษัทเวอร์จิเนีย และเวอร์จิเนียกลายเป็นอาณานิคมของพระมหากษัตริย์แม้จะมีอุปสรรคมากมาย อาณานิคมก็ยังคงเติบโตต่อไป สิบปีต่อมา ในปี ค.ศ. 1634 ตามพระราชดำรัสของพระเจ้าชาร์ลส์ที่ 1อาณานิคมถูกแบ่งออกเป็น 8 เขตการปกครองดั้งเดิมของเวอร์จิเนียในลักษณะที่คล้ายคลึงกับที่ปฏิบัติกันในอังกฤษ เจมส์ทาวน์ตั้งอยู่ใน เขตการปกครอง เจมส์ซิตีซึ่งต่อมาเปลี่ยนชื่อเป็น "เคาน์ตีเจมส์ซิตี" หรือที่รู้จักกันดีในปัจจุบันในชื่อ เคาน์ ตีเจมส์ซิตี รัฐเวอร์จิเนียซึ่งเป็นเคาน์ตีที่เก่าแก่ที่สุดของประเทศ

การโจมตีครั้งใหญ่ของชาวอินเดียนแดงเกิดขึ้นอีกครั้งในปี 1644 ในปี 1646 โอเปชันคาโนห์ถูกจับ และในขณะที่เขาถูกคุมขัง ผู้เฝ้ายามที่ได้รับมอบหมายให้ดูแลเขาได้ยิงเขาจากด้านหลังโดยฝ่าฝืนคำสั่ง ต่อมา สมาพันธ์พาวฮาตันก็เริ่มเสื่อมถอยลง ผู้สืบทอดตำแหน่งของโอเปชันคาโนห์ได้ลงนามในสนธิสัญญาสันติภาพฉบับแรกระหว่างพาวฮาตันและผู้ตั้งถิ่นฐาน โดยกำหนดให้ฝ่ายแรกต้องจ่ายบรรณาการประจำปีให้แก่ฝ่ายหลังและถูกจำกัดให้อยู่ในเขตสงวน^{[ 54 ]}

หนึ่งชั่วอายุคนต่อมา ในช่วงการกบฏของเบคอนในปี 1676 เจมส์ทาวน์ถูกเผาและในที่สุดก็ได้รับการสร้างใหม่ ในระหว่างการฟื้นฟู สภานิติบัญญัติเวอร์จิเนียได้ประชุมกันครั้งแรกที่ไร่กรีนสปริงของ ผู้ว่าการ วิลเลียม เบิร์กลีย์ ที่อยู่ใกล้เคียง และต่อมาที่ไร่มิดเดิลซึ่งเริ่มต้นในปี 1632 ในฐานะชุมชนที่มีป้อมปราการอยู่ภายในแผ่นดินบนคาบสมุทรเวอร์จิเนียห่างออกไปประมาณ8 ไมล์ (13 กม.) ^{[ 55 ]}เมื่ออาคารรัฐสภาถูกไฟไหม้อีกครั้งในปี 1698 คราวนี้เป็นอุบัติเหตุ สภานิติบัญญัติจึงย้ายไปที่ไร่มิดเดิลเป็นการชั่วคราวอีกครั้ง และสามารถประชุมได้ในอาคารใหม่ของวิทยาลัยวิลเลียมแอนด์แมรีซึ่งก่อตั้งขึ้นหลังจากได้รับพระราชบัญญัติในปี 1693 แทนที่จะสร้างใหม่ที่เจมส์ทาวน์อีกครั้ง เมืองหลวงของอาณานิคมถูกย้ายอย่างถาวรไปยังไร่มิดเดิลในปี 1699 เมืองนี้ได้รับการเปลี่ยนชื่อเป็นวิลเลียมส์เบิร์กเพื่อเป็นเกียรติแก่พระมหากษัตริย์ผู้ครองราชย์ พระเจ้าวิลเลียม ที่3อาคารรัฐสภาและ "พระราชวังผู้ว่าการ" ถูกสร้างขึ้นที่นั่นในอีกหลายปีต่อมา 

ในช่วงสงครามกลางเมืองอเมริกาในปี ค.ศ. 1861 วิลเลียม อัลเลนฝ่ายสัมพันธมิตร ซึ่งเป็นเจ้าของเกาะเจมส์ทาวน์ ได้เข้ายึดครองเจมส์ทาวน์ด้วยกองทหารที่เขาระดมพลด้วยค่าใช้จ่ายของตนเอง โดยมีเจตนาที่จะปิดล้อมแม่น้ำเจมส์และริชมอนด์จากกองทัพเรือฝ่ายสหภาพ^{[ 56 ]}เขาได้รับการสนับสนุนจากร้อยโทเคทส์บี อัป โรเจอร์ โจนส์ผู้ซึ่งกำกับการสร้างป้อมปืนและทำการทดสอบอาวุธยุทโธปกรณ์และเกราะสำหรับเรือรบหุ้มเกราะลำ แรกของฝ่ายสัมพันธมิตร คือCSS Virginiaซึ่งอยู่ระหว่างการก่อสร้างที่อู่ต่อเรือกอสพอร์ตในพอร์ตสมัธในช่วงปลายปี ค.ศ. 1861 และต้นปี ค.ศ. 1862 ^{[ 56 ]}เจมส์ทาวน์มีกำลังพลสูงสุด 1,200 นาย^{[ 56 ]}

ระหว่างการรณรงค์คาบสมุทรซึ่งเริ่มต้นในฤดูใบไม้ผลิปีนั้น กองกำลังสหภาพภายใต้การนำของนายพลจอร์จ บี. แมคเคลแลนได้เคลื่อนพลขึ้นไปตามคาบสมุทรจากป้อมมอนโรเพื่อพยายามยึดเมืองริชมอนด์ เมืองหลวงของฝ่ายสัมพันธมิตร^{[ 56 ]}กองกำลังสหภาพยึดเมืองยอร์กทาวน์ ได้ ในเดือนเมษายน พ.ศ. 2405 และ มีการสู้รบ ที่วิลเลียมส์เบิร์กในเดือนถัดมา^{[ 56 ]}ด้วยเหตุการณ์เหล่านี้ ฝ่ายสัมพันธมิตรจึงละทิ้งเจมส์ทาวน์และแม่น้ำเจมส์ตอนล่าง^{[ 56 ]}กองกำลังบางส่วนจากเจมส์ทาวน์และลูกเรือของเวอร์จิเนียได้ย้ายไปที่ดรูว์รีส์บลัฟฟ์ซึ่งเป็นตำแหน่งป้อมปราการและยุทธศาสตร์ที่สูงเหนือแม่น้ำประมาณ8 ไมล์ (13 กิโลเมตร)ทางใต้ของริชมอนด์ ที่นั่นพวกเขาได้สกัดกั้นกองทัพเรือสหภาพไม่ให้เข้าถึงเมืองหลวงของฝ่ายสัมพันธมิตรได้สำเร็จ 

เมื่อเจมส์ทาวน์ตกอยู่ ภายใต้การควบคุมของรัฐบาลกลาง เจมส์ทาวน์ก็กลายเป็นสถานที่นัดพบของทาสที่หลบหนี ซึ่งได้เผาบ้านแอมเบลอร์ บ้านไร่สมัยศตวรรษที่ 18 ซึ่งเป็นหนึ่งในไม่กี่สิ่งที่หลงเหลืออยู่ของเจมส์ทาวน์เก่า ร่วมกับโบสถ์เก่า^{[ 56 ]}เมื่ออัลเลนส่งคนไปประเมินความเสียหายในช่วงปลายปี 1862 พวกเขาก็ถูกอดีตทาสฆ่าตาย^{[ 56 ]}หลังจากการยอมจำนนของฝ่ายสัมพันธมิตรที่ศาลแอปโปแมททอกซ์ อดีตทหารฝ่ายสัมพันธมิตรที่เจมส์ทาวน์ได้กล่าวคำปฏิญาณตน^{[ 56 ]}

ในช่วงหลายปีหลังสงครามกลางเมือง เจมส์ทาวน์ก็กลับมาเงียบสงบอีกครั้ง ในปี 1892 เอ็ดเวิร์ด บาร์นีย์ได้ซื้อเจมส์ทาวน์ และในปีต่อมา บาร์นีย์ได้บริจาคที่ดิน 22.5 เอเคอร์ รวมทั้งหอคริสต์ที่พังทลาย ให้แก่สมาคมเพื่อการอนุรักษ์โบราณสถานเวอร์จิเนีย ซึ่งปัจจุบันรู้จักกันในชื่อPreservation Virginiaในเวลานั้น การกัดเซาะจากแม่น้ำได้กัดกร่อนชายฝั่งตะวันตกของเกาะไปมากแล้ว นักท่องเที่ยวเริ่มสรุปว่าบริเวณที่ตั้งของป้อมเจมส์นั้นจมอยู่ใต้น้ำทั้งหมด ด้วยความช่วยเหลือจากรัฐบาลกลาง กำแพงกันคลื่นจึงถูกสร้างขึ้นในปี 1900 เพื่อปกป้องพื้นที่จากการกัดเซาะเพิ่มเติม ซากโบราณสถานของป้อมเดิมที่สร้างขึ้นในปี 1607 ซึ่งได้รับการปกป้องโดยกำแพงกันคลื่นนั้น เพิ่งถูกค้นพบในปี 1996

ในปี พ.ศ. 2475 จอร์จ แคร็กเฮด เกรกอรีแห่งริชมอนด์ ได้รับการยกย่องว่าค้นพบรากฐานของอาคารรัฐสภาอิฐหลังแรก ซึ่งสร้างขึ้นราวปี พ.ศ. 2489 ที่เจมส์ทาวน์ บนที่ดินที่เป็นกรรมสิทธิ์ของ Preservation Virginia ^{[ 57 ]}ประมาณปี พ.ศ. 2479 เกรกอรี ซึ่งมีบทบาทในสมาคมประวัติศาสตร์เวอร์จิเนียได้ก่อตั้งสมาคมเจมส์ทาวน์ขึ้นสำหรับลูกหลานของผู้ถือหุ้นในบริษัทเวอร์จิเนียแห่งลอนดอนและลูกหลานของผู้ที่เป็นเจ้าของที่ดินหรือมีภูมิลำเนาอยู่ในเจมส์ทาวน์หรือบนเกาะเจมส์ทาวน์ก่อนปี พ.ศ. 2343 ^{[ 58 ]}

อุทยานแห่งชาติโคโลเนียลได้รับการอนุมัติและจัดตั้งโดยรัฐสภาสหรัฐอเมริกาในปี 1930 ในปี 1934 กรมอุทยานแห่งชาติได้กรรมสิทธิ์ในที่ดินส่วนที่เหลืออีก1,500 เอเคอร์ (610 เฮกตาร์)ของเกาะเจมส์ทาวน์ ซึ่งเคยเป็นกรรมสิทธิ์ส่วนตัวของตระกูลเวอร์มิลเลียน กรมอุทยานแห่งชาติได้ร่วมมือกับองค์กรอนุรักษ์เวอร์จิเนียเพื่ออนุรักษ์พื้นที่และนำเสนอแก่ผู้เยี่ยมชมในรูปแบบการศึกษา เมื่อวันที่ 5 มิถุนายน 1936 อุทยานแห่งชาติแห่งนี้ได้รับการกำหนดสถานะใหม่เป็นอุทยานประวัติศาสตร์แห่งชาติและเป็นที่รู้จักในชื่ออุทยานประวัติศาสตร์แห่งชาติโคโลเนียล

ตั้งแต่ปี 1936 JC Harringtonได้ทำงานขุดค้นของ NPS ที่ Jamestown ในปี 1954 John L. Cotterรับผิดชอบโครงการภาคสนามที่ Jamestown ซึ่งดำเนินการโดยคำนึงถึงวาระครบรอบ 350 ปี (1957) ของสถานที่แห่งนี้ Cotter ทำงานร่วมกับEdward B. Jelksและ Harrington เพื่อสำรวจแหล่งโบราณคดีในพื้นที่ ในปี 1957 Cotter และ J. Paul Hudson ร่วมกันเขียนหนังสือNew Discoveries at Jamestown Cotter มีส่วนร่วมกับ Jelks, Georg Neumann และ Johnny Hack ในรายงานArchaeological Excavations at Jamestownใน ปี 1958 ^{[ 59 ]}

ในปัจจุบัน พื้นที่เกาะเจมส์ทาวน์ ซึ่งเป็นส่วนหนึ่งของอุทยานประวัติศาสตร์แห่งชาติโคโลเนียลเป็นที่ตั้งของแหล่งท่องเที่ยวเชิงมรดกสองแห่งที่เกี่ยวข้องกับป้อมและเมืองดั้งเดิม บริเวณใกล้เคียง มีบริการ เรือข้ามฟากเจมส์ทาวน์-สกอตแลนด์^{[ 60 ]}ซึ่งเชื่อมต่อส่วนที่สามารถเดินเรือได้ของแม่น้ำเจมส์สำหรับยานพาหนะ และให้ผู้โดยสารได้ชมทิวทัศน์ของเกาะเจมส์ทาวน์จากแม่น้ำ

ในปี พ.ศ. 2539 Historic Jamestowneกลับมามีความสำคัญอีกครั้งเมื่อ โครงการ Jamestown Rediscoveryเริ่มขุดค้นเพื่อค้นหาสถานที่ตั้งป้อม James Fort เดิม ซึ่งเดิมทีเป็นการเตรียมการสำหรับการฉลองครบรอบ 400 ปีของการก่อตั้ง Jamestown เป้าหมายหลักของการรณรงค์ทางโบราณคดีคือการค้นหาซากโบราณสถานของ "ช่วงปีแรก ๆ ของการตั้งถิ่นฐานที่ Jamestown โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมืองที่มีป้อมปราการแห่งแรกสุด[และ]การเติบโตและการพัฒนาของเมืองในเวลาต่อมา" ^{[ 61 ]}

ผู้เยี่ยมชมHistoric Jamestowneสามารถชมสถานที่ตั้งของป้อม James Fort ดั้งเดิมในปี 1607 หอคริสต์ศาสนสถานในศตวรรษที่ 17 และสถานที่ตั้งของเมืองในศตวรรษที่ 17 รวมถึงเยี่ยมชมพิพิธภัณฑ์โบราณคดีที่เรียกว่า Archaearium และชมโบราณวัตถุเกือบสองล้านชิ้นที่ค้นพบโดยโครงการ Jamestown Rediscovery นอกจากนี้ยังสามารถเข้าร่วม ทัวร์ ประวัติศาสตร์ที่มีไกด์นำทางและทัวร์โบราณคดีที่จัดโดยเจ้าหน้าที่ของ Jamestown Rediscovery ได้อีกด้วย ผู้เยี่ยมชมมักจะสามารถสังเกตเห็นนักโบราณคดีจากโครงการ Jamestown Rediscovery กำลังทำงานอยู่ เนื่องจากงานโบราณคดีในสถานที่แห่งนี้ยังคงดำเนินต่อไป (ข้อมูลณ ปี 2014)งานและการศึกษาทางโบราณคดียังคงดำเนินต่อไป^{[ 62 ]}นอกจากจดหมายข่าวและเว็บไซต์แล้ว การค้นพบใหม่ๆ ยังได้รับการรายงานบ่อยครั้งในหนังสือพิมพ์ท้องถิ่นVirginia Gazetteซึ่งตั้งอยู่ในเมืองวิลเลียมส์เบิร์กที่อยู่ใกล้เคียง และโดยสื่อข่าวอื่นๆ ซึ่งมักจะเป็นสื่อทั่วโลก^{[ 63 ]}

เจมส์ทาวน์ เซตเทิลเมนต์ เป็นอุทยานประวัติศาสตร์และพิพิธภัณฑ์ที่มีชีวิต ตั้งอยู่ห่างจากสถานที่ตั้งอาณานิคมดั้งเดิม1.25 ไมล์ (2.01 กิโลเมตร) และอยู่ติดกับเกาะเจมส์ทาวน์ เดิมทีสร้างขึ้นเพื่อเฉลิมฉลองครบรอบ 350 ปีในปี 1957 เจมส์ทาวน์ เซตเทิลเมนต์ ดำเนินการโดยมูลนิธิเจมส์ทาวน์-ยอร์กทาวน์ และได้รับการสนับสนุนหลักจาก เครือรัฐเวอร์จิเนีย ภายในพิพิธภัณฑ์มีสิ่งก่อสร้างจำลองหมู่บ้านพาวฮาตัน ป้อมเจมส์ในสมัยประมาณปี1610-1614 และแบบจำลองเรือเดินทะเลสามลำที่นำผู้ตั้งถิ่นฐานกลุ่มแรกมา ได้แก่ เรือ ซูซาน คอนสแตนต์เรือก็อดสปีดและเรือ ดิสคั ฟเวอรี 

การเฉลิมฉลองครบรอบ 200 ปีของเจมส์ทาวน์ในวันที่ 13-14 พฤษภาคม ค.ศ. 1807 เรียกว่างานเฉลิมฉลองระดับชาติครั้งยิ่งใหญ่^{[ 64 ]}มีผู้เข้าร่วมงานมากกว่า 3,000 คน โดยหลายคนเดินทางมาด้วยเรือที่จอดทอดสมอในแม่น้ำนอกเกาะ^{[ 64 ]}วันที่ 13 พฤษภาคมเป็นวันเปิดงานเทศกาล ซึ่งเริ่มต้นด้วยขบวนแห่ที่เดินไปยังสุสานของโบสถ์เก่า ซึ่งบาทหลวงที่เข้าร่วมงานได้กล่าวคำอธิษฐาน^{[ 64 ]}จากนั้นขบวนแห่ก็เคลื่อนไปยังคฤหาสน์ทราวิส ซึ่งผู้ร่วมงานได้ร่วมรับประทานอาหารและเต้นรำในคฤหาสน์ในเย็นวันนั้น^{[ 64 ]}ในระหว่างงานเฉลิมฉลอง นักศึกษาจากวิทยาลัยวิลเลียมแอนด์แมรีได้กล่าวสุนทรพจน์ โรงนาเก่าบนเกาะถูกใช้เป็นโรงละครชั่วคราว ซึ่งคณะนักแสดงจากนอร์ฟอล์กได้ทำการแสดง^{[ 64 ]}ผู้เข้าร่วมงานประกอบด้วยบุคคลสำคัญ นักการเมือง และนักประวัติศาสตร์จำนวนมาก การเฉลิมฉลองสิ้นสุดลงในวันที่ 14 พฤษภาคม ด้วยงานเลี้ยงอาหารค่ำและการดื่มอวยพรที่โรงเตี๊ยมราลีในวิลเลียมส์เบิร์ก^{[ 64 ]}

ในปี พ.ศ. 2390 สมาคมเจมส์ทาวน์ได้จัดงานเฉลิมฉลองครบรอบ 250 ปีของการก่อตั้งเจมส์ทาวน์^{[ 64 ]}ตามรายงานของ Richmond Enquirerสถานที่จัดงานเฉลิมฉลองอยู่บนพื้นที่10 เอเคอร์ (40,000 ^{ตาราง}เมตร)ณ จุดที่บ้านของบรรดาผู้ตั้งถิ่นฐานบางส่วนถูกสร้างขึ้นในตอนแรก^{[ 64 ]}อย่างไรก็ตาม ยังมีการคาดการณ์ว่างานเฉลิมฉลองถูกย้ายไปทางตะวันออกของเกาะใกล้กับหลุมฝังศพของทราวิสมากขึ้น เพื่อหลีกเลี่ยงการทำลายไร่ข้าวโพดของ พันตรี วิลเลียม อัลเลน^{[ 64 ]} 

คาดว่ามีผู้เข้าร่วมงานประมาณ 6,000 ถึง 8,000 คน^{[ 64 ]}เรือกลไฟขนาดใหญ่ 16 ลำจอดทอดสมออยู่นอกชายฝั่งในแม่น้ำเจมส์และประดับประดาอย่างสวยงามด้วยธงริ้ว^{[ 64 ]}อดีตประธานาธิบดีสหรัฐฯจอห์น ไทเลอร์จากไร่เชอร์วูดฟอเรสต์ ที่อยู่ใกล้เคียง ได้กล่าวสุนทรพจน์นาน 2 ชั่วโมงครึ่ง และมีการแสดงทางทหาร งานเลี้ยงเต้นรำครั้งใหญ่ และดอกไม้ไฟ^{[ 64 ]}

การครบรอบ 100 ปีของการยอมจำนนที่ยอร์กทาวน์ในปี 1781 ได้ก่อให้เกิดความสนใจใหม่ในความสำคัญทางประวัติศาสตร์ของแหล่งโบราณสถานในคาบสมุทรวิลเลียมส์เบิร์ก เมืองที่เงียบสงบแต่มีผู้คนพลุกพล่านไปด้วยร้านค้าและบ้านเรือน ยังคงเฉลิมฉลองเหตุการณ์สงครามกลางเมือง อย่างไรก็ตาม เมื่อศตวรรษใหม่เริ่มต้นขึ้น ความคิดก็หันไปสู่การครบรอบ 300 ปีของการก่อตั้งเจมส์ทาวน์ที่กำลังจะมาถึง สมาคมเพื่อการอนุรักษ์โบราณสถานเวอร์จิเนีย (ปัจจุบันรู้จักกันในชื่อPreservation Virginia ) ได้เริ่มการเคลื่อนไหวในปี 1900 โดยเรียกร้องให้มีการเฉลิมฉลองเพื่อเป็นเกียรติแก่การก่อตั้งอาณานิคมอังกฤษถาวรแห่งแรกในโลกใหม่ที่เจมส์ทาวน์ในวันครบรอบ 300 ปีในปี 1907 ^{[ 65 ]}

เนื่องจากมีการวางแผนจัดงานเฉลิมฉลอง แทบไม่มีใครคิดว่าสถานที่ตั้งดั้งเดิมของเจมส์ทาวน์ซึ่งโดดเดี่ยวและถูกทิ้งร้างมานานจะเหมาะสมสำหรับงานใหญ่ เพราะเกาะเจมส์ทาวน์ไม่มีสิ่งอำนวยความสะดวกสำหรับฝูงชนจำนวนมาก ป้อมปราการดั้งเดิมที่ชาวเจมส์ทาวน์อาศัยอยู่เชื่อกันว่าถูกแม่น้ำเจมส์ กลืนหายไปนานแล้ว พื้นที่โดยทั่วไปในเขตเจมส์ซิตี้ใกล้กับเจมส์ทาวน์ก็ถูกพิจารณาว่าไม่เหมาะสมเช่นกัน เนื่องจากเข้าถึงได้ยากในยุคของการเดินทางด้วยรถไฟก่อนที่รถยนต์จะแพร่หลาย

เมื่อใกล้ถึงวาระครบรอบ 300 ปีของการก่อตั้งเมืองเจมส์ทาวน์ในปี 1607 ประมาณปี 1904 แม้ว่าบางส่วนจะคาดการณ์ว่าริชมอนด์จะเป็นสถานที่ที่เหมาะสมกว่า แต่ผู้นำในนอร์ฟอล์กก็เริ่มรณรงค์ให้จัดงานเฉลิมฉลองที่นั่น ในที่สุดก็ตัดสินใจเลือกสถานที่จัดงานนิทรรศการนานาชาติบนพื้นที่ริมน้ำยาวหนึ่งไมล์ที่เซเวลล์สพอยต์ใกล้ปากอ่าวแฮมป์ตันโรดส์ซึ่งอยู่ห่างจากเจมส์ทาวน์ไปทางใต้ประมาณ30 ไมล์ (48 กิโลเมตร)ในเขตชนบทของเทศมณฑลนอร์ฟอล์ก เป็นสถานที่ที่สามารถเข้าถึงได้ทั้งทางรถไฟโดยสารระยะไกลและรถรางท้องถิ่น อีกทั้งยังมีพื้นที่ริมน้ำติดกับท่าเรือแฮมป์ตันโรดส์อย่างกว้างขวาง คุณลักษณะข้อหลังนี้พิสูจน์แล้วว่าเหมาะสมอย่างยิ่งสำหรับคณะผู้แทนกองทัพเรือที่มาจากทั่วทุกมุมโลก 

งานนิทรรศการเจมส์ทาวน์ปี 1907 เป็นหนึ่งในงานแสดงสินค้าและนิทรรศการระดับโลก มากมาย ที่ได้รับความนิยมในช่วงต้นศตวรรษที่ 20 จัดขึ้นตั้งแต่วันที่ 26 เมษายน 1907 ถึง 1 ธันวาคม 1907 ผู้เข้าร่วมงานประกอบด้วยประธานาธิบดีธีโอดอร์ รูสเวลต์แห่ง สหรัฐอเมริกา จักรพรรดิวิลเฮล์ม ที่2แห่งเยอรมนี เจ้าชายแห่งสวีเดนมาร์ค ทเวนเฮนรี เอช. โรเจอร์ส และบุคคลสำคัญและบุคคลที่มีชื่อเสียงอีกหลายสิบคน การแสดงทางเรือครั้งสำคัญซึ่งมี กองเรือเกรทไวท์ฟลีทของสหรัฐอเมริกาเป็นไฮไลท์สำคัญ เจ้าหน้าที่และผู้นำทางทหารของสหรัฐฯ ประทับใจกับสถานที่จัดงาน และต่อมาสถานที่จัดงานนิทรรศการได้กลายเป็นส่วนแรกของสถานีทหารเรือนอร์ฟอล์ก ขนาดใหญ่ของสหรัฐฯ ในปี 1918 ระหว่างสงครามโลกครั้งที่ 1 ^{[ 66 ] [ 65 ] [ 67 ]}

ด้วยการเข้าถึงรถยนต์ที่เพิ่มมากขึ้นในอเมริกา และด้วยถนนและการขนส่งที่ได้รับการปรับปรุง ทำให้สามารถจัดงานฉลองครบรอบ 350 ปีขึ้นที่เจมส์ทาวน์ได้ในปี 1957 แม้ว่าการกัดเซาะจะทำให้สะพานเชื่อมระหว่างเกาะเจมส์ทาวน์กับแผ่นดินใหญ่ขาดตอนไป แต่คอคอดก็ได้รับการบูรณะและมีการสร้างทางเข้าใหม่โดยการสร้างColonial Parkway ของ National Park Service ซึ่งนำไปสู่วิลเลียมส์เบิร์กและยอร์กทาวน์ ซึ่งเป็นอีกสองส่วนของ สามเหลี่ยมประวัติศาสตร์ของเวอร์จิเนียในยุคอาณานิคม นอกจากนี้ยังมีการปรับปรุงทางหลวงของรัฐด้วย ท่าเรือทางเหนือของ เรือข้ามฟากเจมส์ทาวน์ยอดนิยมและส่วนหนึ่งของทางหลวงหมายเลข 31 ของรัฐก็ได้รับการย้ายที่ตั้ง^{[ 64 ]}

โครงการสำคัญ ๆ ได้รับการพัฒนาโดยหน่วยงานที่ไม่แสวงหาผลกำไร หน่วยงานของรัฐ และหน่วยงานของรัฐบาลกลางสวนสาธารณะเทศกาลเจมส์ทาวน์ก่อตั้งขึ้นโดยเครือรัฐเวอร์จิเนียติดกับทางเข้าเกาะเจมส์ทาวน์ เรือจำลองขนาดเท่าของจริงของเรือสามลำที่นำผู้ตั้งถิ่นฐานมา ได้แก่Susan Constant , GodspeedและDiscoveryถูกสร้างขึ้นที่อู่ต่อเรือใน พอร์ต สมัธรัฐเวอร์จิเนียและจัดแสดงที่ท่าเรือแห่งใหม่ในเจมส์ทาวน์ ซึ่งเรือSusan Constant ที่ใหญ่ที่สุดนั้น นักท่องเที่ยวสามารถขึ้นไปชมได้ บนเกาะเจมส์ทาวน์เรือนกระจกเจมส์ทาวน์ ที่สร้างขึ้นใหม่ อนุสรณ์ไม้กางเขน และศูนย์บริการนักท่องเที่ยวก็สร้างเสร็จและเปิดใช้งาน^{[ 64 ]}มีการสร้างถนนวงรอบรอบเกาะ

กิจกรรมพิเศษต่างๆ ได้แก่ การตรวจแถวของกองทัพบกและกองทัพเรือ การบินโฉบของกองทัพอากาศ การตั้งชื่อเรือและเครื่องบิน และแม้แต่การแสดงละครกลางแจ้งที่แหลมเฮนรีซึ่งเป็นสถานที่ขึ้นฝั่งครั้งแรกของผู้ตั้งถิ่นฐาน^{[ 64 ]}การเฉลิมฉลองนี้ดำเนินต่อไปตั้งแต่วันที่ 1 เมษายนถึง 30 พฤศจิกายน โดยมีผู้เข้าร่วมกว่าล้านคน รวมถึงบุคคลสำคัญและนักการเมือง เช่น เอกอัครราชทูตอังกฤษและรองประธานาธิบดีสหรัฐฯริชาร์ด นิกสัน^{[ 64 ]}ไฮไลท์สำหรับผู้คนเกือบ 25,000 คนที่ Festival Park ในวันที่ 16 ตุลาคม พ.ศ. 2490 คือการเสด็จเยือนและพระราชดำรัสของสมเด็จพระราชินีนาถเอลิซาเบธที่ 2 แห่งสหราชอาณาจักรและพระสวามีเจ้าชายฟิลิป [ ^{64 ] สมเด็จ}พระราชินีนาถเอลิซาเบธที่ 2 ทรงให้ยืมสำเนาของMagna Cartaเพื่อจัดแสดง นับเป็นการเสด็จเยือนสหรัฐอเมริกาครั้งแรกของพระองค์นับตั้งแต่ขึ้นครองราชย์

เทศกาลเจมส์ทาวน์ปี 1957 ประสบความสำเร็จอย่างมาก จนนักท่องเที่ยวยังคงหลั่งไหลเข้ามาอย่างต่อเนื่องแม้หลังจากงานอย่างเป็นทางการสิ้นสุดลงแล้ว เจมส์ทาวน์จึงกลายเป็นแหล่งท่องเที่ยวถาวรของสามเหลี่ยมประวัติศาสตร์และมีครอบครัว กลุ่มนักเรียน ทัวร์ และผู้คนอีกหลายพันคนมาเยี่ยมชมอย่างต่อเนื่องนับตั้งแต่นั้นเป็นต้นมา

ควอเตอร์รัฐเวอร์จิเนีย(ด้านหลัง)

ด้านหน้าของเหรียญทองคำห้าดอลลาร์ครบรอบ 400 ปีเจมส์ทาวน์

เหรียญกษาปณ์ที่ออกจำหน่ายเพื่อเป็นที่ระลึกถึงวาระครบรอบ 400 ปี

ในช่วงต้นศตวรรษที่ 21 มีการวางแผนที่พักใหม่ สิ่งอำนวยความสะดวกด้านการขนส่ง และสถานที่ท่องเที่ยวต่างๆ เพื่อเตรียมพร้อมสำหรับการฉลองครบรอบ 400 ปีของการก่อตั้งเมืองเจมส์ทาวน์ มีการจัดกิจกรรมมากมายภายใต้หัวข้อ "การฉลองครบรอบ 400 ปีของอเมริกา"และได้รับการสนับสนุนจากคณะกรรมการเจมส์ทาวน์ 2007 การเฉลิมฉลองนี้ครอบคลุมระยะเวลา 18 เดือน ทั้งในระดับรัฐ ระดับชาติ และระดับนานาชาติ ซึ่งเริ่มต้นในเดือนเมษายน 2006 ด้วยการเยี่ยมชมเรือจำลองGodspeed ลำ ใหม่

ในเดือนมกราคม พ.ศ. 2550 สภานิติบัญญัติแห่งรัฐเวอร์จิเนียได้จัดการประชุมที่เจมส์ทาวน์ เมื่อวันที่ 4 พฤษภาคม พ.ศ. 2550 สมเด็จพระราชินีนาถเอลิซาเบธที่ 2แห่งสหราชอาณาจักรและเจ้าชายฟิลิปเสด็จพระราชดำเนินเข้าร่วมพิธีรำลึกครบรอบ 400 ปีของการมาถึงของการตั้งถิ่นฐาน โดยทรงแสดงความเคารพเช่นเดียวกับที่เคยเสด็จพระราชดำเนินในปี พ.ศ. 2490 ^{[ 68 ]}

นอกจากเหรียญรัฐเวอร์จิเนียแล้ว เจมส์ทาวน์ยังเป็นหัวเรื่องของเหรียญที่ระลึกของสหรัฐอเมริกา อีกสองเหรียญ เพื่อเฉลิมฉลองครบรอบ 400 ปีของการก่อตั้งเมืองโดยเหรียญเงิน หนึ่งดอลลาร์ และเหรียญทองห้าดอลลาร์ออกจำหน่ายในปี 2007

ในปี 2019 เมืองเจมส์ทาวน์ร่วมกับวิลเลียมส์เบิร์กจัดงานรำลึกครบรอบ 400 ปีของเหตุการณ์สำคัญ 3 เหตุการณ์ในประวัติศาสตร์อเมริกา ได้แก่ การประชุมครั้งแรกของสมัชชาใหญ่ การมาถึงของชาวแอฟริกันกลุ่มแรกในอเมริกาเหนือของอังกฤษ และวันขอบคุณพระเจ้าครั้งแรก^{[ 69 ] [ 70 ]}