อ่าน 47 นาที
ดีเอ็นเอสิ่งแวดล้อม
ดีเอ็นเอสิ่งแวดล้อม หรือ eDNA คือ ดีเอ็นเอ ที่เก็บรวบรวมจากตัวอย่างสิ่งแวดล้อมที่หลากหลาย เช่น ดิน ตะกอน น้ำ จืด น้ำทะเล หิมะ หรือ อากาศ แทนที่จะเก็บตัวอย่างโดยตรงจาก สิ่งมีชีวิต...
ดีเอ็นเอสิ่งแวดล้อม

| ส่วนหนึ่งของชุดบทความเกี่ยวกับ |
| การระบุรหัสดีเอ็นเอ |
|---|
| โดยอนุกรมวิธาน |
| อื่น |
ดีเอ็นเอสิ่งแวดล้อมหรือeDNAคือดีเอ็นเอที่เก็บรวบรวมจากตัวอย่างสิ่งแวดล้อมที่หลากหลาย เช่นดินตะกอนน้ำจืดน้ำทะเลหิมะหรืออากาศแทนที่จะเก็บตัวอย่างโดยตรงจากสิ่งมีชีวิต แต่ละตัว เนื่องจากสิ่งมีชีวิตต่างๆ มีปฏิสัมพันธ์กับสิ่งแวดล้อม ดีเอ็นเอจึงถูกขับออกมาและสะสมอยู่ในสภาพแวดล้อมจากแหล่งต่างๆ[ 2 ] eDNA ดังกล่าวสามารถนำมาวิเคราะห์ลำดับโดยใช้ เทคนิค โอไมซ์สิ่งแวดล้อมเพื่อเปิดเผยข้อเท็จจริงเกี่ยวกับชนิดของสิ่งมีชีวิตที่มีอยู่ในระบบนิเวศ แม้แต่สิ่งมีชีวิตขนาดเล็กที่มองไม่เห็นหรือตรวจจับไม่ได้ก็ตาม แนวทางนี้ช่วยให้สามารถสำรวจความหลากหลายทางชีวภาพได้ในวงกว้างและมีต้นทุนต่ำ โดยไม่ส่งผลกระทบเชิงลบต่อระบบนิเวศ
ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา eDNA ถูกนำมาใช้เป็นเครื่องมือในการตรวจจับสัตว์ป่าใกล้สูญพันธุ์ซึ่งไม่สามารถมองเห็นได้ด้วยวิธีอื่น ในปี 2020 นักวิจัยด้านสุขภาพของมนุษย์เริ่มนำเทคนิค eDNA มาใช้ใหม่เพื่อติดตามการระบาดใหญ่ของ COVID-19 [ 3 ]
แหล่งที่มาของ eDNA ตัวอย่าง ได้แก่อุจจาระ เมือกเซลล์สืบพันธุ์ ผิวหนังที่ลอกซากสัตว์และเส้นผม[ 2 ] [ 4 ] ตัวอย่างสามารถวิเคราะห์ได้ด้วย วิธี การลำดับดีเอ็นเอความเร็วสูงซึ่งเรียกว่าเมตาจีโนมิกส์เมตาบาร์โค้ดดิ้งและการตรวจจับชนิดเดียว เพื่อการตรวจสอบและวัดความหลากหลายทางชีวภาพอย่างรวดเร็วเพื่อให้สามารถแยกแยะสิ่งมีชีวิตภายในตัวอย่างได้ดียิ่งขึ้น จึงใช้ดีเอ็นเอเมตาบาร์โค้ดดิ้งโดยที่ตัวอย่างจะถูกวิเคราะห์และใช้ไลบรารีดีเอ็นเอที่ศึกษาไว้ก่อนหน้านี้ เช่นBLASTเพื่อกำหนดว่ามีสิ่งมีชีวิตชนิดใดอยู่[ 5 ]
eDNA metabarcodingเป็นวิธีการใหม่ในการประเมินความหลากหลายทางชีวภาพโดยเก็บตัวอย่างจากสิ่งแวดล้อมผ่านทางน้ำ ตะกอน หรืออากาศ จากนั้นสกัด DNA และขยายโดยใช้ไพรเมอร์ทั่วไปหรือไพรเมอร์สากลในปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสและจัดลำดับโดยใช้การจัดลำดับรุ่นใหม่เพื่อสร้างข้อมูลการอ่านหลายพันถึงหลายล้านรายการ จากข้อมูลนี้ สามารถระบุการมีอยู่ของชนิดพันธุ์และประเมินความหลากหลายทางชีวภาพโดยรวมได้ เป็นวิธีการแบบสหวิทยาการที่นำเอานิเวศวิทยาภาคสนามแบบดั้งเดิมมารวมกับวิธีการทางโมเลกุลเชิง ลึก และเครื่องมือคำนวณขั้นสูง[ 6 ]
การวิเคราะห์ eDNA มีศักยภาพอย่างมาก ไม่เพียงแต่สำหรับการติดตามชนิดพันธุ์ทั่วไปเท่านั้น แต่ยังรวมถึงการตรวจจับและระบุชนิดพันธุ์ที่มีอยู่อื่นๆ ทางพันธุกรรมซึ่งอาจส่งผลต่อความพยายามในการอนุรักษ์[ 7 ]วิธีนี้ช่วยให้สามารถตรวจสอบทางชีวภาพได้โดยไม่ต้องเก็บสิ่งมีชีวิต ทำให้สามารถศึกษาสิ่งมีชีวิตที่รุกราน หลบหลีกยาก หรือใกล้สูญพันธุ์ได้โดยไม่ก่อให้เกิดความเครียดจากกิจกรรมของมนุษย์ต่อสิ่งมีชีวิต (ขึ้นอยู่กับความแข็งแกร่งของวิธีการที่ใช้ ดูด้านล่าง) การเข้าถึงข้อมูลทางพันธุกรรมนี้มีส่วนสำคัญอย่างยิ่งต่อความเข้าใจเกี่ยวกับขนาดประชากรการกระจายพันธุ์และพลวัตของประชากรสำหรับชนิดพันธุ์ที่ไม่ได้รับการบันทึกไว้อย่างดี ที่สำคัญ eDNA มักมีต้นทุนที่คุ้มค่ากว่าเมื่อเทียบกับวิธีการสุ่มตัวอย่างแบบดั้งเดิม[ 8 ]ความสมบูรณ์ของตัวอย่าง eDNA ขึ้นอยู่กับการเก็บรักษาภายในสิ่งแวดล้อม
ดินเพอร์มาฟรอสต์น้ำจืด และน้ำทะเล เป็นสภาพแวดล้อมระดับมหภาคที่ได้รับการศึกษามาอย่างดี ซึ่งมีการสกัดตัวอย่าง eDNA ออกมา โดยแต่ละสภาพแวดล้อมประกอบด้วยสภาพแวดล้อม ย่อยที่มีเงื่อนไขอีกมากมาย [ 9 ]เนื่องจากความสามารถรอบด้าน eDNA จึงถูกนำไปใช้ใน สภาพแวดล้อมย่อย หลายแห่ง เช่น การเก็บตัวอย่างน้ำจืด การเก็บตัวอย่างน้ำทะเล การเก็บตัวอย่างดินบนบก (เพอร์มาฟรอสต์ในทุนดรา) การเก็บตัวอย่างดินในน้ำ (แม่น้ำ ทะเลสาบ บ่อ และตะกอนในมหาสมุทร) [ 10 ]หรือสภาพแวดล้อมอื่นๆ ที่ขั้นตอนการเก็บตัวอย่างแบบปกติอาจกลายเป็นปัญหาได้[ 9 ]
เมื่อวันที่ 7 ธันวาคม พ.ศ. 2565 การศึกษาในวารสาร Natureรายงานการค้นพบ eDNA อายุ 2 ล้านปีในตะกอนจากกรีนแลนด์ ซึ่งปัจจุบันถือเป็น DNA ที่เก่าแก่ที่สุดที่ได้รับการจัดลำดับจนถึงปัจจุบัน[ 11 ] [ 12 ]
ดีเอ็นเอสิ่งแวดล้อม (eDNA) ถูกนำมาใช้โดยใช้โปรโตคอลการสุ่มตัวอย่างและการวิเคราะห์ที่หลากหลาย และความน่าเชื่อถือของผลลัพธ์ขึ้นอยู่กับความแข็งแกร่งของวิธีการที่ใช้ ในสภาพแวดล้อมทางน้ำ (น้ำจืดและน้ำทะเล) กลยุทธ์การสุ่มตัวอย่างเป็นปัจจัยสำคัญในการกำหนดความสำเร็จในการตรวจจับ โดยทั่วไปปริมาณน้ำที่กรองแล้วที่มากขึ้นจะให้ปริมาณดีเอ็นเอที่มากขึ้น ซึ่งเพิ่มโอกาสในการตรวจจับสิ่งมีชีวิตที่อยู่ในบริเวณนั้น เนื่องจาก eDNA มักมีความไม่สม่ำเสมอในเชิงพื้นที่และกระจายตัวในท้องถิ่น การกรองน้ำปริมาณมากตามแนวเส้นทางแบบบูรณาการจะให้ภาพรวมของความหลากหลายทางชีวภาพที่แม่นยำและเป็นตัวแทนมากขึ้น[ 13 ]
ขั้นตอนการทดลองในห้องปฏิบัติการก็มีบทบาทสำคัญเช่นกัน โดยเฉพาะอย่างยิ่งจำนวนการทำซ้ำปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR) การทำซ้ำ PCR หมายถึงการขยายสารสกัด DNA เดียวกันซ้ำๆ ในปฏิกิริยาอิสระ การเพิ่มจำนวนการทำซ้ำจะช่วยเพิ่มโอกาสในการตรวจพบ เนื่องจาก PCR มีความผันแปรแบบสุ่ม และ DNA ของสิ่งมีชีวิตชนิดเดียวกันอาจไม่ขยายในบางปฏิกิริยา แต่อาจขยายได้ในปฏิกิริยาอื่นๆ ตัวอย่างเช่น การใช้การทำซ้ำ PCR 12 ครั้ง หมายถึงการขยาย DNA ที่เก็บตัวอย่างมาในตัวอย่างย่อยอิสระ 12 ตัวอย่าง ซึ่งจะช่วยลดความเสี่ยงของผลลบเท็จ
ความลึกของการจัดลำดับเป็นปัจจัยสำคัญอีกประการหนึ่งที่มีอิทธิพลต่อพลังการตรวจจับ หมายถึงจำนวนลำดับ DNA ทั้งหมด (reads) ที่สร้างและวิเคราะห์จากตัวอย่าง ความลึกของการจัดลำดับที่สูงขึ้นจะเพิ่มโอกาสในการตรวจจับชิ้นส่วน DNA ที่หายากหรือมีปริมาณน้อย การจัดลำดับ reads หลายแสนรายการในระบบน้ำจืด (มากถึง 500,000 รายการ) หรือ reads ประมาณหนึ่งล้านรายการในระบบทะเลสามารถเพิ่มประสิทธิภาพการตรวจจับได้อย่างมากเมื่อเทียบกับโปรโตคอลที่มีความลึกน้อยกว่า โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับสายพันธุ์ที่มีความเข้มข้นต่ำ[ 14 ]
เมื่อนำกลยุทธ์การสุ่มตัวอย่าง การทำซ้ำ และการจัดลำดับที่มีประสิทธิภาพมาใช้ วิธีการทางดีเอ็นเอจากสิ่งแวดล้อม (eDNA) จะมีประสิทธิภาพเป็นพิเศษในการตรวจจับชนิดพันธุ์ที่หายาก หลบซ่อนตัวได้ยาก หรือซ่อนเร้น รวมถึงชนิดพันธุ์ที่ได้รับการคุ้มครอง ถูกคุกคาม และรุกราน
ภาพรวม
- การตรวจสอบระบบนิเวศและความหลากหลายทางชีวภาพทั่วโลกด้วยเมตาบาร์โค้ดดีเอ็นเอสิ่งแวดล้อม [ 6 ]
ดีเอ็นเอสิ่งแวดล้อมหรือ eDNA หมายถึงสารพันธุกรรมที่มีอยู่ในตัวอย่างสิ่งแวดล้อม เช่น ตะกอน น้ำ และอากาศ ซึ่งรวมถึงเซลล์ทั้งหมด ดีเอ็นเอภายนอกเซลล์ และอาจรวมถึงสิ่งมีชีวิตทั้งหมดด้วย[ 15 ] [ 16 ]การวิเคราะห์ eDNA เริ่มต้นด้วยการเก็บตัวอย่างสิ่งแวดล้อมที่สนใจ จากนั้นจึงสกัดและทำให้บริสุทธิ์ ดีเอ็นเอในตัวอย่าง ดีเอ็นเอที่บริสุทธิ์แล้วจะถูกขยายให้ได้ตามเป้าหมายยีนที่เฉพาะเจาะจง เพื่อให้สามารถจัดลำดับและจำแนกประเภทตามลำดับได้[ 17 ]จากข้อมูลนี้ ทำให้สามารถตรวจจับและจำแนกชนิดของสิ่งมีชีวิตได้[ 6 ]
eDNA สามารถมาจากผิวหนัง เมือก น้ำลาย อสุจิ สารคัดหลั่ง ไข่ อุจจาระ ปัสสาวะ เลือด ราก ใบ ผลไม้ ละอองเกสร และซากเน่าเปื่อยของสิ่งมีชีวิตขนาดใหญ่ ในขณะที่จุลินทรีย์อาจได้รับมาทั้งตัว[ 18 ] [ 7 ] [ 16 ]การผลิต eDNA ขึ้นอยู่กับชีวมวล อายุ และกิจกรรมการกินอาหารของสิ่งมีชีวิต รวมถึงสรีรวิทยา ประวัติชีวิต และการใช้พื้นที่[ 2 ] [ 19 ] [ 16 ] [ 20 ] [ 21 ] [ 6 ]
eDNA สามารถเสริมแต่ไม่สามารถแทนที่วิธีการแบบดั้งเดิมได้ โดยการกำหนดเป้าหมายและสุ่มตัวอย่างความหลากหลายที่แตกต่างกัน และอาจเพิ่มความละเอียดทางอนุกรม วิธาน ได้[ 22 ] [ 23 ]นอกจากนี้ eDNA ยังสามารถตรวจจับชนิดพันธุ์ที่หายากได้ [ 24 ] [ 19 ]แต่ไม่สามารถกำหนดข้อมูลคุณภาพประชากร เช่น อัตราส่วนเพศและสภาพร่างกายได้ ดังนั้นจึงเหมาะอย่างยิ่งสำหรับการเสริมการศึกษาแบบดั้งเดิม[ 20 ] [ 22 ] อย่างไรก็ตาม eDNA มีประโยชน์ในการตรวจจับการปรากฏตัวครั้งแรกของชนิดพันธุ์รุกราน การคงอยู่ของชนิดพันธุ์พื้นเมืองที่คิดว่าสูญพันธุ์หรือถูกคุกคาม และชนิดพันธุ์ที่หลบซ่อนตัวอื่นๆ ที่เกิดขึ้นในความหนาแน่นต่ำซึ่งยากต่อการตรวจจับด้วยวิธีการแบบดั้งเดิม[ 6 ]
สิ่งสำคัญที่ควรทราบคือ การวัดปริมาณความอุดมสมบูรณ์ของชนิดพันธุ์อย่างแม่นยำนั้นทำได้เฉพาะในเงื่อนไขที่เฉพาะเจาะจงมากเท่านั้น ในทางปฏิบัติ วิธีนี้ส่วนใหญ่จำกัดอยู่เฉพาะแม่น้ำที่สามารถเดินลุยได้ ซึ่งมีพารามิเตอร์ด้านสิ่งแวดล้อมที่ควบคุมได้จำกัด และสามารถใช้วิธีการอ้างอิง เช่น การจับปลาด้วยไฟฟ้าได้ นอกเหนือจากบริบทที่จำกัดเหล่านี้ ทั้งเทคนิคการสำรวจทางนิเวศวิทยาแบบดั้งเดิมและวิธีการใช้ดีเอ็นเอสิ่งแวดล้อม (eDNA) โดยทั่วไปจะให้ข้อมูลแบบกึ่งปริมาณเท่านั้น ในกรอบการทำงานแบบกึ่งปริมาณ วิธีการ eDNA มักมีประสิทธิภาพดีกว่าเทคนิคการตรวจสอบแบบดั้งเดิม พวกมันให้ข้อมูลทางนิเวศวิทยาที่น่าเชื่อถือ เช่น การมีอยู่หรือไม่มีอยู่ของชนิดพันธุ์ รูปแบบความอุดมสมบูรณ์สัมพัทธ์ และแนวโน้มเชิงพื้นที่และเวลา ข้อมูลประเภทนี้ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการประเมินความหลากหลายทางชีวภาพและการตรวจสอบระยะยาว วิธีการใช้ดีเอ็นเอสิ่งแวดล้อมยังมีข้อดีในทางปฏิบัติหลายประการเหนือวิธีการแบบดั้งเดิมหลายวิธี ซึ่งรวมถึงความสามารถในการตรวจจับที่สูงขึ้น โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับชนิดพันธุ์ที่หายาก ซ่อนเร้น หรือมีความหนาแน่นต่ำ การสร้างมาตรฐานที่ดีขึ้นในสถานที่ ฤดูกาล และผู้ปฏิบัติงาน ต้นทุนการดำเนินงานโดยรวมที่ต่ำกว่า และการสุ่มตัวอย่างแบบไม่รุกรานซึ่งหลีกเลี่ยงการรบกวนหรือการตายของสิ่งมีชีวิตเป้าหมาย
การเสื่อมสภาพของ eDNA ในสิ่งแวดล้อมจำกัดขอบเขตของการศึกษา eDNA เนื่องจากมักจะเหลือเพียงส่วนเล็ก ๆ ของสารพันธุกรรม โดยเฉพาะอย่างยิ่งในภูมิภาคเขตร้อนที่มีอากาศอบอุ่น[ 25 ]นอกจากนี้ ระยะเวลาที่แตกต่างกันในการเสื่อมสภาพตามสภาพแวดล้อมและศักยภาพของ DNA ในการเดินทางผ่านสื่อต่าง ๆ เช่น น้ำ อาจส่งผลต่อการอนุมานแนวโน้มเชิงพื้นที่และเวลาในระดับละเอียดของสายพันธุ์และชุมชน[ 19 ] [ 26 ] [ 18 ] [ 27 ] [ 20 ] [ 22 ] [ 21 ]
การศึกษาแสดงให้เห็นว่าในทั้งแหล่งน้ำจืดและมหาสมุทร ร่องรอย DNA จะคงอยู่เพียงไม่กี่วัน บางครั้งนานถึงหนึ่งสัปดาห์ นั่นเป็นเหตุผลที่ eDNA เปรียบเสมือนภาพถ่าย: มันบันทึกว่ามีสายพันธุ์ใดอยู่ในบริเวณนั้น ณ เวลาใด[ 13 ]
แม้จะมีข้อเสียเหล่านี้ eDNA ก็ยังมีศักยภาพในการกำหนดความอุดมสมบูรณ์สัมพัทธ์หรือลำดับชั้นได้ เนื่องจากงานวิจัยบางชิ้นพบว่าสอดคล้องกับชีวมวล แม้ว่าความแปรปรวนที่มีอยู่ในตัวอย่างสิ่งแวดล้อมจะทำให้ยากต่อการวัดปริมาณก็ตาม[ 7 ] [ 16 ]ในขณะที่ eDNA มีการใช้งานมากมายในการอนุรักษ์ การเฝ้าระวัง และการประเมินระบบนิเวศ รวมถึงการใช้งานอื่นๆ ที่ยังไม่ได้อธิบาย ความเข้มข้นของ eDNA ที่แปรผันสูงและความไม่สม่ำเสมอที่อาจเกิดขึ้นในแหล่งน้ำทำให้จำเป็นต้องปรับกระบวนการให้เหมาะสม โดยควรมีการศึกษานำร่องสำหรับการใช้งานใหม่แต่ละครั้งเพื่อให้แน่ใจว่าการออกแบบการสุ่มตัวอย่างเหมาะสมสำหรับการตรวจจับเป้าหมาย[ 28 ] [ 20 ] [ 22 ] [ 6 ]
เมื่อเปรียบเทียบผลลัพธ์ที่ได้จากการใช้ตัวกรองที่แตกต่างกัน (ตัวอย่างน้ำ) หรือเมื่อติดตามการเปลี่ยนแปลงความหลากหลายทางชีวภาพเมื่อเวลาผ่านไป ในแต่ละฤดูกาล หรือระหว่างปี จำเป็นต้องมีการกำหนดมาตรฐานข้อมูล การกำหนดมาตรฐานจะแก้ไขความคลาดเคลื่อนทางระเบียบวิธีที่เกิดขึ้นตลอดกระบวนการวิเคราะห์ เนื่องจากดีเอ็นเอจากสิ่งมีชีวิตต่างชนิดกันสามารถเพิ่มจำนวนและเรียงลำดับได้ด้วยประสิทธิภาพที่แตกต่างกัน การปรับเทียบนี้โดยทั่วไปจะขึ้นอยู่กับการประมาณจำนวนโมเลกุลดีเอ็นเอเริ่มต้นที่มีอยู่ในตัวอย่างก่อนการเพิ่มจำนวน ซึ่งมักเรียกว่าจำนวนสำเนาดีเอ็นเอ รวมกับเมตริกความอุดมสมบูรณ์สัมพัทธ์ที่ได้จากข้อมูลการเรียงลำดับ ชุดข้อมูลที่เป็นมาตรฐานช่วยให้สามารถเปรียบเทียบได้อย่างน่าเชื่อถือมากขึ้นระหว่างตัวอย่าง สถานที่ และช่วงเวลาต่างๆ
ดีเอ็นเอของชุมชน
แม้ว่าคำจำกัดความของ eDNA ดูเหมือนจะตรงไปตรงมา แต่เส้นแบ่งระหว่าง DNA รูปแบบต่างๆ กลับไม่ชัดเจน โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อเปรียบเทียบกับDNA ของชุมชนซึ่งถูกอธิบายว่าเป็นตัวอย่างสิ่งมีชีวิตจำนวนมาก[ 22 ]มีคำถามเกิดขึ้นเกี่ยวกับจุลินทรีย์ทั้งหมดที่ถูกจับได้ในตัวอย่าง eDNA: สิ่งมีชีวิตเหล่านี้เปลี่ยนแปลงการจำแนกประเภทของตัวอย่างให้เป็นตัวอย่าง DNA ของชุมชนหรือไม่? นอกจากนี้ การจำแนกประเภทของสารพันธุกรรมจากอุจจาระยังเป็นปัญหาและมักถูกเรียกว่า eDNA [ 22 ]การแยกแยะระหว่างทั้งสองมีความสำคัญ เนื่องจาก DNA ของชุมชนบ่งชี้ถึงการมีอยู่ของสิ่งมีชีวิตในเวลาและสถานที่ที่เฉพาะเจาะจง ในขณะที่ eDNA อาจมาจากสถานที่ที่แตกต่างกัน จากอุจจาระของสัตว์ผู้ล่า หรือจากการมีอยู่ในอดีต อย่างไรก็ตาม การแยกแยะนี้มักเป็นไปไม่ได้[ 29 ] [ 22 ]อย่างไรก็ตาม eDNA สามารถจำแนกได้อย่างคร่าวๆ ว่ารวมถึงหลายภาคส่วนของการวิจัยความหลากหลายทางชีวภาพของ DNA รวมถึงการวิเคราะห์อุจจาระและตัวอย่างจำนวนมากเมื่อสามารถนำไปใช้กับการวิจัยความหลากหลายทางชีวภาพและการวิเคราะห์ระบบนิเวศได้[ 6 ]
ดีเอ็นเอของตัวเอง
แนวคิดของ selfDNA มาจากการค้นพบของนักวิทยาศาสตร์จากมหาวิทยาลัยเนเปิลส์ เฟเดริโกที่ 2 ซึ่งรายงานไว้ในวารสารNew Phytologist ในปี 2015 [ 30 ]เกี่ยวกับผลยับยั้งตัวเองของDNA นอกเซลล์ในพืช[ 31 ]แต่ยังรวมถึงในแบคทีเรีย เชื้อรา สาหร่าย พืชโปรโตซัวและแมลง ด้วย [ 32 ]แหล่งที่มาของ DNA นอกเซลล์ดังกล่าวในสิ่งแวดล้อมนั้นคาดว่าจะเป็นเศษซากพืชแต่ยังรวมถึงแหล่งอื่นๆ ในระบบนิเวศและสิ่งมีชีวิตต่างๆ ด้วย โดยขนาดของชิ้นส่วน DNA ที่แสดงให้เห็นในการทดลองว่ามีผลยับยั้งต่อสิ่งมีชีวิตชนิดเดียวกันนั้นโดยทั่วไปจะมีขนาดระหว่าง 200 ถึง 500 คู่เบส ปรากฏการณ์ selfDNA ถูกตั้งสมมติฐานว่าขับเคลื่อนปฏิสัมพันธ์ทางนิเวศวิทยาและถูกควบคุมโดยกลไกของรูปแบบโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับความเสียหาย (DAMPs) [ 33 ] [ 34 ]และมีศักยภาพในการพัฒนาการใช้งานด้านการฆ่าเชื้อ[ 35 ]
เมตาบาร์โค้ดดิ้ง eDNA
- การประยุกต์ใช้เมตาบาร์โค้ดดีเอ็นเอสิ่งแวดล้อมในระบบนิเวศทางน้ำและทางบก [ 6 ]
ภายในปี 2019 วิธีการวิจัย eDNA ได้ขยายขอบเขตออกไปเพื่อให้สามารถประเมินชุมชนทั้งหมดจากตัวอย่างเดียวได้ กระบวนการนี้เกี่ยวข้องกับการทำเมตาบาร์โค้ดดิ้งซึ่งสามารถกำหนดได้อย่างแม่นยำว่าเป็นการใช้ ไพรเมอร์ ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR) ทั่วไปหรือสากลกับตัวอย่าง DNA ผสมจากแหล่งกำเนิดใดๆ ตามด้วยการจัดลำดับรุ่นต่อไปที่มีความเร็วสูง (NGS) เพื่อกำหนดองค์ประกอบของสปี ชีส์ ในตัวอย่าง วิธีนี้เป็นที่นิยมในจุลชีววิทยามานานหลายปีแล้ว แต่เพิ่งจะเริ่มเป็นที่ยอมรับในการประเมินสิ่งมีชีวิตขนาด ใหญ่ [ 36 ] [ 26 ] [ 29 ] [ 22 ]การประยุกต์ใช้เมตาบาร์โค้ดดิ้ง eDNA ในระบบนิเวศโดยรวมมีศักยภาพไม่เพียงแต่จะอธิบายชุมชนและความหลากหลายทางชีวภาพเท่านั้น แต่ยังสามารถตรวจจับปฏิสัมพันธ์และนิเวศวิทยาเชิงหน้าที่ในระดับพื้นที่ขนาดใหญ่ได้อีกด้วย[ 37 ]แม้ว่าอาจมีข้อจำกัดจากการอ่านค่าผิดพลาดเนื่องจากการปนเปื้อนหรือข้อผิดพลาดอื่นๆ[ 36 ] [ 7 ] [ 38 ] [ 29 ] [ 21 ]โดยรวมแล้ว eDNA metabarcoding ช่วยเพิ่มความเร็ว ความแม่นยำ และการระบุตัวตนได้ดีกว่า barcoding แบบดั้งเดิม และลดต้นทุน แต่จำเป็นต้องมีการกำหนดมาตรฐานและรวมเข้าด้วยกัน โดยบูรณาการอนุกรมวิธานและวิธีการทางโมเลกุลสำหรับการศึกษาเชิงนิเวศวิทยาอย่างเต็มรูปแบบ[ 26 ] [ 39 ] [ 40 ] [ 41 ] [ 21 ] [ 6 ] [ 42 ]
eDNA metabarcoding มีการประยุกต์ใช้ในการตรวจสอบความหลากหลายทางชีวภาพในทุกแหล่งที่อยู่อาศัยและกลุ่มอนุกรมวิธาน การสร้างระบบนิเวศโบราณขึ้นใหม่ปฏิสัมพันธ์ระหว่างพืชและแมลงผสมเกสรการวิเคราะห์อาหาร การตรวจจับชนิดพันธุ์รุกราน การตอบสนองต่อมลพิษ และการตรวจสอบคุณภาพอากาศ eDNA metabarcoding เป็นวิธีการเฉพาะที่ยังอยู่ระหว่างการพัฒนาและน่าจะยังคงมีการเปลี่ยนแปลงต่อไปอีกระยะหนึ่งเนื่องจากเทคโนโลยีมีความก้าวหน้าและขั้นตอนต่างๆ ได้รับการกำหนดมาตรฐาน อย่างไรก็ตาม เมื่อ metabarcoding ได้รับการปรับปรุงให้เหมาะสมและมีการใช้งานอย่างแพร่หลายมากขึ้น ก็มีแนวโน้มที่จะกลายเป็นเครื่องมือสำคัญสำหรับการตรวจสอบทางนิเวศวิทยาและการศึกษาการอนุรักษ์ระดับโลก[ 6 ]
ดีเอ็นเอภายนอกเซลล์และดีเอ็นเอที่หลงเหลืออยู่
- พลวัตของดีเอ็นเอโบราณ[ 43 ]
ดีเอ็นเอภายนอกเซลล์ บางครั้งเรียกว่าดีเอ็นเอตกค้าง คือดีเอ็นเอจากจุลินทรีย์ที่ตายแล้ว ดีเอ็นเอภายนอกเซลล์เปลือย (eDNA) ซึ่งส่วนใหญ่ถูกปล่อยออกมาจากการตายของเซลล์นั้น มีอยู่ทั่วไปในสิ่งแวดล้อม ความเข้มข้นในดินอาจสูงถึง 2 μg/L และความเข้มข้นในสภาพแวดล้อมทางน้ำตามธรรมชาติอาจสูงถึง 88 μg/L [ 44 ]มีการเสนอหน้าที่ที่เป็นไปได้ต่างๆ ของ eDNA ได้แก่ อาจเกี่ยวข้องกับการถ่ายทอดยีนในแนวนอน[ 45 ]อาจให้สารอาหาร[ 46 ]และอาจทำหน้าที่เป็นบัฟเฟอร์เพื่อดึงดูดหรือปรับสมดุลไอออนหรือยาปฏิชีวนะ[ 47 ] ดีเอ็นเอภายนอกเซลล์ ทำหน้าที่เป็นส่วนประกอบของเมทริกซ์ภายนอกเซลล์ที่มีฟังก์ชันในไบโอฟิล์มของแบคทีเรียหลายชนิด อาจทำหน้าที่เป็นปัจจัยการรับรู้เพื่อควบคุมการยึดเกาะและการกระจายตัวของเซลล์ชนิดเฉพาะในไบโอฟิล์ม[ 48 ]อาจมีส่วนช่วยในการสร้างไบโอฟิล์ม[ 49 ]และอาจมีส่วนช่วยในความแข็งแรงทางกายภาพและความต้านทานต่อความเครียดทางชีวภาพของไบโอฟิล์ม[ 50 ]
ภายใต้ชื่อ DNA สิ่งแวดล้อม eDNA ได้รับการใช้งานเพิ่มมากขึ้นในวิทยาศาสตร์ธรรมชาติในฐานะเครื่องมือสำรวจทางนิเวศวิทยาการติดตามการเคลื่อนไหวและการปรากฏตัวของสายพันธุ์ในน้ำ อากาศ หรือบนบก และการประเมินความหลากหลายทางชีวภาพของพื้นที่[ 51 ] [ 52 ]
ในแผนภาพด้านขวา ปริมาณ DNA ที่เหลืออยู่ในสภาพแวดล้อมของจุลินทรีย์ถูกกำหนดโดยปัจจัยนำเข้าที่เกี่ยวข้องกับการตายของสิ่งมีชีวิตที่มีชีวิตซึ่งมี DNA ที่สมบูรณ์ และโดยการสูญเสียที่เกี่ยวข้องกับการเสื่อมสภาพของ DNA ที่เหลืออยู่ หากความหลากหลายของลำดับที่อยู่ในกลุ่ม DNA ที่เหลืออยู่แตกต่างจากกลุ่ม DNA ที่สมบูรณ์มากพอ DNA ที่เหลืออยู่อาจทำให้การประมาณค่าความหลากหลายทางชีวภาพของจุลินทรีย์คลาดเคลื่อน (ดังที่แสดงโดยกล่องสีต่างๆ) เมื่อสุ่มตัวอย่างจากกลุ่ม DNA ทั้งหมด (สมบูรณ์ + ที่เหลืออยู่) [ 43 ]ข้อมูลมาตรฐานเกี่ยวกับโครงการริเริ่ม (STARDIT) ได้รับการเสนอให้เป็นวิธีหนึ่งในการกำหนดมาตรฐานทั้งข้อมูลเกี่ยวกับการสุ่มตัวอย่างและวิธีการวิเคราะห์ ตลอดจนความสัมพันธ์ทางอนุกรมวิธานและออนโทโลยี[ 53 ]
ของสะสม
ตะกอนบนบก
- วิธีการทางจีโนมิกส์ทางทะเลทั้งในยุคปัจจุบันและยุคโบราณ
- (a) เมตาบาร์โค้ดดิ้งคือการขยายและการวิเคราะห์ชิ้นส่วน DNA ที่มีขนาดเท่ากันจากสารสกัด DNA ทั้งหมด (b) เมตาจีโนมิกส์คือการสกัด การขยาย และการวิเคราะห์ชิ้นส่วน DNA ทั้งหมดโดยไม่คำนึงถึงขนาด (c) การจับเป้าหมาย อธิบายถึงการเพิ่มความเข้มข้นและการวิเคราะห์ชิ้นส่วน DNA เฉพาะ (ที่เลือก) โดยไม่คำนึงถึงขนาดจากสารสกัด DNA ทั้งหมด[ 54 ]
ความสำคัญของการวิเคราะห์ eDNA มาจากการตระหนักถึงข้อจำกัดของการศึกษา โดยใช้ การเพาะเลี้ยง[ 7 ]สิ่งมีชีวิตได้ปรับตัวให้เจริญเติบโตได้ในสภาพแวดล้อมทางธรรมชาติที่เฉพาะเจาะจง แม้ว่านักวิทยาศาสตร์จะพยายามจำลองสภาพแวดล้อมเหล่านี้ แต่จุลินทรีย์หลายชนิดไม่สามารถแยกออกมาเพาะเลี้ยงในห้องปฏิบัติการได้[ 9 ]การวิเคราะห์เวอร์ชันแรกสุดเริ่มต้นด้วย ribosomal RNA ( rRNA ) ในจุลินทรีย์เพื่อทำความเข้าใจจุลินทรีย์ที่อาศัยอยู่ในสภาพแวดล้อมที่ไม่เอื้ออำนวยได้ดียิ่งขึ้น[ 55 ]องค์ประกอบทางพันธุกรรมของจุลินทรีย์บางชนิดสามารถเข้าถึงได้ผ่านการวิเคราะห์ eDNA เท่านั้น เทคนิคการวิเคราะห์ eDNA ถูกนำมาใช้ครั้งแรกกับตะกอนบนบกทำให้ได้ DNA จากสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม นก แมลง และพืชทั้งที่สูญพันธุ์ไปแล้วและที่ยังมีชีวิตอยู่[ 56 ]ตัวอย่างที่สกัดจากตะกอนบนบกเหล่านี้มักถูกเรียกว่า 'DNA โบราณจากตะกอน' ( seda DNA หรือdirt DNA) [ 57 ]การวิเคราะห์ eDNA ยังสามารถใช้เพื่อศึกษาชุมชนป่าในปัจจุบัน ซึ่งรวมถึงทุกสิ่งตั้งแต่ นกและสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม ไปจนถึง เชื้อรา และ หนอน[ 9 ]สามารถเก็บตัวอย่างได้จากดิน อุจจาระ 'DNA จากการกัด' จากใบไม้ที่ถูกกัด พืชและใบไม้ที่สัตว์เคยอาศัยอยู่ และจากเลือดที่ยุงที่ถูกจับกิน ซึ่งอาจกินเลือดจากสัตว์ใดๆ ในบริเวณนั้น[ 58 ]บางวิธีอาจพยายามจับเซลล์ด้วยกับดักขนและกระดาษทรายในพื้นที่ที่สัตว์เป้าหมายมักผ่านไป
ตะกอนในน้ำ
ต่อมา sedaDNA ถูกนำมาใช้เพื่อศึกษาความหลากหลายของสัตว์โบราณและได้รับการยืนยันโดยใช้บันทึกฟอสซิลที่รู้จักในตะกอนน้ำ[ 9 ] ตะกอนน้ำขาดออกซิเจนจึงช่วยปกป้อง DNA จากการเสื่อมสภาพ[ 9 ]นอกเหนือจากการศึกษาโบราณแล้ว วิธีนี้ยังสามารถใช้ในการทำความเข้าใจความหลากหลายของสัตว์ในปัจจุบันด้วยความไวที่ค่อนข้างสูง ในขณะที่ตัวอย่างน้ำทั่วไปอาจมี DNA เสื่อมสภาพค่อนข้างเร็ว แต่ตัวอย่างตะกอนน้ำอาจมี DNA ที่มีประโยชน์ได้นานถึงสองเดือนหลังจากที่สายพันธุ์นั้นปรากฏอยู่[ 59 ]ปัญหาหนึ่งของตะกอนน้ำคือไม่ทราบว่าสิ่งมีชีวิตฝาก eDNA ไว้ที่ใด เนื่องจากมันอาจเคลื่อนที่ไปในคอลัมน์น้ำ
- เรือขุดเจาะเก็บแกนตะกอนเพื่อวิเคราะห์ sedaDNA และองค์ประกอบชุมชนทางทะเลในอดีตตามสมมติฐาน [ 54 ]
- การเจาะแกนตะกอนน้ำใต้ธารน้ำแข็งอย่างต่อเนื่อง [ 60 ]
สิ่งมีชีวิตในน้ำ (มวลน้ำ)
การศึกษา eDNA ในมวลน้ำสามารถบ่งชี้องค์ประกอบของชุมชนในแหล่งน้ำได้ ก่อนที่จะมี eDNA วิธีหลักในการศึกษาความหลากหลายของแหล่งน้ำเปิดคือการใช้การจับปลาด้วยไฟฟ้า การใช้อวน และการดักจับ[ 10 ]วิธีนี้มีประสิทธิภาพเนื่องจากค่า pHของน้ำไม่ส่งผลกระทบต่อ DNA มากเท่าที่เคยคิดไว้ และความไวสามารถเพิ่มขึ้นได้ค่อนข้างง่าย[ 10 ] [ 61 ]ความไวคือความน่าจะเป็นที่เครื่องหมาย DNA จะปรากฏอยู่ในน้ำที่เก็บตัวอย่าง และสามารถเพิ่มได้ง่ายๆ โดยการเก็บตัวอย่างมากขึ้น มีตัวอย่างขนาดใหญ่ขึ้น และเพิ่มPCR [ 61 ] eDNA เสื่อมสภาพค่อนข้างเร็วในมวลน้ำ ซึ่งเป็นประโยชน์อย่างมากในการศึกษาการอนุรักษ์ระยะสั้น เช่น การระบุชนิดของสิ่งมีชีวิตที่มีอยู่[ 9 ]
นักวิจัยที่Experimental Lakes Areaในออนแทรีโอ ประเทศแคนาดาและมหาวิทยาลัย McGillพบว่าการกระจายตัวของ eDNA สะท้อนถึงการแบ่งชั้นของทะเลสาบ[ 62 ]เมื่อฤดูกาลและอุณหภูมิน้ำเปลี่ยนแปลงความหนาแน่นของน้ำก็เปลี่ยนแปลงไปด้วย ทำให้เกิดชั้นที่แตกต่างกันในทะเลสาบ ขนาดเล็ก ในเขตหนาว ในช่วงฤดูร้อนและฤดูหนาว ชั้นเหล่านี้จะ ผสมกันในช่วงฤดูใบไม้ผลิและฤดูใบไม้ร่วง[ 63 ] การใช้ แหล่งที่อยู่อาศัยของปลาสัมพันธ์กับการแบ่งชั้น (เช่น ปลาที่อาศัยอยู่ในน้ำเย็นอย่างปลาเทราต์ทะเลสาบจะอยู่ในน้ำเย็น) และการกระจายตัวของ eDNA ก็เช่นกัน ดังที่นักวิจัยเหล่านี้พบ[ 62 ]
การติดตามชนิดพันธุ์
eDNA สามารถใช้ในการตรวจสอบสายพันธุ์ได้ตลอดทั้งปีและมีประโยชน์อย่างมากในการตรวจสอบการอนุรักษ์[ 19 ] [ 64 ] [ 65 ]การวิเคราะห์ eDNA ประสบความสำเร็จในการระบุอนุกรมวิธานที่แตกต่างกันมากมายจากพืชน้ำ[ 66 ]สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมในน้ำ[ 24 ] [ 19 ]ปลา[ 36 ] [ 65 ]หอยแมลงภู่[ 64 ] เชื้อรา[ 67 ] [ 68 ]และแม้แต่ปรสิต[ 69 ] [ 55 ] eDNA ถูกนำมาใช้เพื่อศึกษาสายพันธุ์โดยลดปฏิสัมพันธ์ของมนุษย์ที่ก่อให้เกิดความเครียดให้น้อยที่สุด ทำให้นักวิจัยสามารถตรวจสอบการปรากฏตัวของสายพันธุ์ในระดับพื้นที่ขนาดใหญ่ได้อย่างมีประสิทธิภาพมากขึ้น[ 70 ] [ 71 ]การใช้งานที่แพร่หลายที่สุดในการวิจัยในปัจจุบันคือการใช้ eDNA เพื่อศึกษาตำแหน่งของสายพันธุ์ที่เสี่ยงต่อการสูญพันธุ์ สายพันธุ์รุกราน และสายพันธุ์สำคัญในทุกสภาพแวดล้อม[ 70 ] eDNA มีประโยชน์อย่างยิ่งสำหรับการศึกษาสายพันธุ์ที่มีประชากรน้อย เนื่องจาก eDNA มีความไวเพียงพอที่จะยืนยันการมีอยู่ของสายพันธุ์โดยใช้ความพยายามในการเก็บข้อมูลค่อนข้างน้อย ซึ่งมักจะทำได้ด้วยตัวอย่างดินหรือตัวอย่างน้ำ[ 7 ] [ 70 ] eDNA อาศัยประสิทธิภาพของการจัดลำดับและการวิเคราะห์จีโนม รวมถึงวิธีการสำรวจที่ใช้ ซึ่งมีประสิทธิภาพและราคาถูกลงเรื่อยๆ[ 72 ]การศึกษาบางชิ้นแสดงให้เห็นว่า eDNA ที่เก็บตัวอย่างจากลำธารและสภาพแวดล้อมชายฝั่งจะสลายตัวจนตรวจไม่พบภายในเวลาประมาณ 48 ชั่วโมง[ 73 ] [ 74 ]
ดีเอ็นเอสิ่งแวดล้อมสามารถนำมาใช้เป็นเครื่องมือในการตรวจจับสิ่งมีชีวิตที่มีจำนวนน้อยได้ทั้งในรูปแบบแอคทีฟและพาสซีฟ การสำรวจ eDNA แบบแอคทีฟมุ่งเป้าไปที่สิ่งมีชีวิตแต่ละชนิดหรือกลุ่มของสิ่งมีชีวิตเพื่อการตรวจจับโดยใช้PCR แบบเรียลไทม์เชิงปริมาณที่มีความไวสูงและจำเพาะต่อสิ่งมีชีวิต [ 75 ] [ 76 ]หรือเครื่องหมายPCR แบบหยดดิจิทัล[ 77 ]วิธีการ CRISPR-Cas ยังถูกนำมาใช้ในการตรวจจับสิ่งมีชีวิตชนิดเดียวจาก eDNA [ 78 ] โดยใช้ เอนไซม์ Cas12a และช่วยให้มีความจำเพาะมากขึ้นในการตรวจจับสิ่งมีชีวิตที่อยู่ร่วมกัน การสำรวจ eDNA แบบพาสซีฟใช้การจัดลำดับดีเอ็นเอแบบขนานจำนวนมากเพื่อขยายโมเลกุล eDNA ทั้งหมดในตัวอย่างโดยไม่มีเป้าหมายที่กำหนดไว้ล่วงหน้า ทำให้ได้หลักฐานดีเอ็นเอที่ครอบคลุมเกี่ยวกับองค์ประกอบของชุมชนสิ่งมีชีวิต[ 79 ]
การลดลงของสัตว์ขาปล้องบนบก
- ความแตกต่างของกลุ่มแมลงและสัตว์ขาปล้องตามชนิดของพืช
- แผนภาพสองส่วนสำหรับยีน COIแสดงให้เห็นว่าแต่ละวงศ์ของอาร์โทรพอดได้มาจากพืชชนิดใด ชื่อพืช: Angeli ( Angelica archangelica ), Centau ( Centaurea jacea ), Daucus ( Daucus carota ), Echium ( Echium vulgare ), Eupato ( Eupatorium cannabinum ), Solida ( Solidago canadensis ), Tanace ( Tanacetum vulgare ) [ 1 ]
สัตว์ขาปล้องบนบกกำลังประสบกับภาวะลดจำนวนลงอย่างมากในยุโรปและทั่วโลก[ 80 ] [ 81 ] [ 82 ] [ 83 ]แม้ว่าจะมีเพียงส่วนน้อยของสายพันธุ์เท่านั้นที่ได้รับการประเมิน และแมลงส่วนใหญ่ยังไม่ได้รับการอธิบายทางวิทยาศาสตร์[ 84 ]ตัวอย่างเช่น ระบบนิเวศทุ่งหญ้าเป็นที่อยู่อาศัยของกลุ่มอนุกรมวิธานและหน้าที่ที่หลากหลายของสัตว์ขาปล้อง บนบก เช่นแมลงผสมเกสร แมลง กินพืชและสัตว์นักล่า ซึ่งใช้น้ำหวานและละอองเกสรเป็นแหล่งอาหาร และใช้เนื้อเยื่อลำต้นและใบเป็นอาหารและการเจริญเติบโต ชุมชนเหล่านี้เป็นที่อยู่อาศัยของสายพันธุ์ที่ใกล้สูญพันธุ์เนื่องจากแหล่งที่อยู่อาศัย หลายแห่ง ได้หายไปหรือกำลังถูกคุกคามอย่างมาก[ 85 ] [ 86 ]ดังนั้นจึงมีความพยายามอย่างกว้างขวางในการฟื้นฟูระบบนิเวศทุ่งหญ้าของยุโรปและอนุรักษ์ความหลากหลายทางชีวภาพ [ 87 ] ตัวอย่างเช่น แมลงผสมเกสร เช่น ผึ้งและผีเสื้อ เป็นกลุ่มนิเวศวิทยาที่สำคัญซึ่งประสบกับภาวะลดจำนวนลงอย่างรุนแรงในยุโรป ซึ่งบ่งชี้ถึงการสูญเสียความหลากหลายทางชีวภาพของทุ่งหญ้าอย่างมาก[ 88 ] [ 89 ] [ 90 ] [ 91 ]พืชดอกส่วนใหญ่ได้รับการผสมเกสรโดยแมลงและสัตว์อื่นๆ ทั้งในเขตอบอุ่นและเขตร้อน[ 92 ]แมลงส่วนใหญ่เป็นสัตว์กินพืช กินส่วนต่างๆ ของพืช และส่วนใหญ่เป็นผู้เชี่ยวชาญ โดยอาศัยพืชเพียงชนิดเดียวหรือสองสามชนิดเป็นแหล่งอาหารหลัก[ 93 ]อย่างไรก็ตาม เมื่อพิจารณาจากช่องว่างของความรู้เกี่ยวกับแมลงที่มีอยู่ และข้อเท็จจริงที่ว่าแมลงส่วนใหญ่ยังไม่ได้รับการอธิบาย จึงเห็นได้ชัดว่าสำหรับพืชส่วนใหญ่ในโลก มีความรู้จำกัดเกี่ยวกับชุมชนสัตว์ขาปล้องที่อาศัยอยู่และมีปฏิสัมพันธ์กับพืชเหล่านั้น[ 1 ]
โดยทั่วไปแล้ว ชุมชนสัตว์ขาปล้องบนบกจะถูกเก็บรวบรวมและศึกษาโดยใช้วิธีการต่างๆ เช่น กับดักมาเลสและกับดักหลุมซึ่งมีประสิทธิภาพสูงแต่ค่อนข้างยุ่งยากและอาจเป็นการรุกราน ในบางกรณี เทคนิคเหล่านี้ไม่สามารถทำการสำรวจที่มีประสิทธิภาพและได้มาตรฐานได้ เนื่องจากตัวอย่างเช่นความยืดหยุ่นของฟีโนไทป์ชนิดพันธุ์ที่ใกล้เคียงกัน และความยากลำบากในการระบุระยะตัวอ่อน นอกจากนี้ การระบุ ทางสัณฐานวิทยายังขึ้นอยู่กับ ความเชี่ยวชาญ ทางอนุกรมวิธาน โดยตรง ซึ่งกำลังลดลง[ 94 ] [ 95 ] [ 96 ]ข้อจำกัดทั้งหมดของการตรวจสอบความหลากหลายทางชีวภาพแบบดั้งเดิมได้สร้างความต้องการวิธีการทางเลือก ในขณะเดียวกัน ความก้าวหน้าใน เทคโนโลยี การจัดลำดับดีเอ็นเอได้ให้วิธีการใหม่ๆ ในการได้มาซึ่งข้อมูลทางชีวภาพอย่างต่อเนื่อง[ 7 ] [ 97 ] [ 29 ] [ 9 ]ดังนั้น จึงมีการเสนอวิธีการทางโมเลกุลใหม่ๆ หลายวิธีเมื่อเร็วๆ นี้ เพื่อให้ได้ข้อมูลที่รวดเร็วและมีประสิทธิภาพเกี่ยวกับชุมชนสัตว์ขาปล้องและปฏิสัมพันธ์ของพวกมันผ่านเทคนิคทางพันธุกรรมที่ไม่รุกราน ซึ่งรวมถึงการสกัด DNA จากแหล่งต่างๆ เช่น ตัวอย่างจำนวนมากหรือซุปแมลง[ 98 ] [ 99 ] [ 100 ] [ 101 ]ร่องรอยการกัดกินใบไม้[ 102 ]ใยแมงมุม[ 103 ] ของเหลวจากพืชหม้อข้าวหม้อแกงลิง[ 104 ]ตัวอย่างสิ่งแวดล้อม เช่น ดิน น้ำ อากาศ และแม้แต่ดอกไม้ทั้งดอก (DNA สิ่งแวดล้อม [eDNA]) [ 105 ] [ 106 ] [ 107 ] [ 9 ] [ 108 ]การระบุพืชอาศัยและอาหารของสัตว์ผู้ล่าจากสารสกัด DNA ของแมลง[ 109 ] [ 110 ]และมูลของสัตว์ผู้ล่าจากค้างคาว[ 111 ] [ 112 ]เมื่อเร็วๆ นี้ DNA จากละอองเรณูที่ติดอยู่กับแมลงยังถูกนำมาใช้เพื่อดึงข้อมูลเกี่ยวกับปฏิสัมพันธ์ระหว่างพืชและแมลงผสมเกสรอีกด้วย[ 113 ] [ 114 ]การศึกษาล่าสุดจำนวนมากอาศัยเมตาบาร์โค้ดดีเอ็นเอ ซึ่งเป็นการจัดลำดับแอมพลิคอนPCR ที่มีความเร็วสูง โดยใช้ไพรเมอร์ทั่วไป[ 115 ] [ 106 ] [ 1 ]
สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม
- แมวป่าลิงซ์แคนาดา
- รอยเท้าของแมวป่าแคนาดาบนหิมะ
ร่องรอยหิมะ
นักวิจัยสัตว์ป่าในพื้นที่ที่มีหิมะยังใช้ตัวอย่างหิมะเพื่อรวบรวมและสกัดข้อมูลทางพันธุกรรมเกี่ยวกับสายพันธุ์ที่สนใจ ดีเอ็นเอจากตัวอย่างรอยเท้าบนหิมะถูกนำมาใช้เพื่อยืนยันการมีอยู่ของสายพันธุ์ที่หายากและหลบซ่อนตัวได้ยาก เช่น หมีขั้วโลก สุนัขจิ้งจอกอาร์กติก ลิงซ์ วูล์ฟเวอรีน และฟิชเชอร์[ 116 ] [ 117 ] [ 118 ] [ 119 ]
ดีเอ็นเอจากอากาศ
ในปี 2021 นักวิจัยได้แสดงให้เห็นว่าสามารถเก็บ eDNA จากอากาศและใช้ในการระบุสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมได้[ 120 ] [ 121 ] [ 122 ] [ 123 ]ในปี 2023 นักวิทยาศาสตร์ได้พัฒนาโพรบเก็บตัวอย่างเฉพาะและสำรวจทางอากาศเพื่อประเมินความหลากหลายทางชีวภาพของสิ่งมีชีวิตหลายกลุ่ม รวมถึงสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม โดยใช้ eDNA จากอากาศ[ 124 ]
ดีเอ็นเอสิ่งแวดล้อมในอากาศ (airDNA) ได้รับการพิสูจน์แล้วว่าเป็นเครื่องมือที่ใช้งานได้จริงสำหรับการสำรวจสัตว์มีกระดูกสันหลังบนบก แม้ในสภาพแวดล้อมป่าเขตร้อนที่ซับซ้อน การศึกษาในปี 2026 ในมาดากัสการ์แสดงให้เห็นว่าการเก็บตัวอย่าง airDNA โดยใช้ปั๊มที่ใช้พลังงานแบตเตอรี่เพื่อกรองอากาศปริมาณมาก สามารถตรวจพบสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมได้อย่างสม่ำเสมอทั่วภูมิทัศน์ป่าที่แตกเป็นส่วน ๆ และแสดงให้เห็นถึงการลดลงของความหลากหลายที่คาดไว้ตามระดับการแตกเป็นส่วน ๆ[ 125 ]แม้ว่า airDNA จะตรวจพบกลุ่มสิ่งมีชีวิตได้น้อยกว่าดีเอ็นเอที่ได้จากสัตว์ไม่มีกระดูกสันหลัง (iDNA) แต่ก็พิสูจน์แล้วว่ามีความน่าเชื่อถือในการใช้งานมากกว่าในสภาพสนาม และสามารถระบุชนิดพันธุ์เฉพาะถิ่นและชนิดพันธุ์ที่ใกล้สูญพันธุ์ได้สำเร็จ ซึ่งเน้นย้ำถึงคุณค่าที่เพิ่มขึ้นในฐานะวิธีการที่ไม่รุกรานสำหรับการตรวจสอบสัตว์ป่าในถิ่นที่อยู่อาศัยที่ห่างไกลหรือเข้าถึงยาก[ 125 ]
การจัดการประมง


การจัดการ ประมงเชิงพาณิชย์ ที่ประสบความสำเร็จนั้นอาศัยการสำรวจที่เป็นมาตรฐานเพื่อประเมินปริมาณและการกระจายตัวของประชากรปลา ปลาค็อดแอตแลนติก ( Gadus morhua ) เป็นตัวอย่างที่โดดเด่นที่แสดงให้เห็นว่าข้อมูลที่จำกัดไม่ดีและการตัดสินใจที่ขาดข้อมูลสามารถส่งผลให้ประชากรปลาลดลงอย่างร้ายแรงและก่อให้เกิดปัญหาทางเศรษฐกิจและสังคมตามมา[ 127 ] การประเมินประชากร ปลาหน้าดินแบบดั้งเดิมส่วนใหญ่อาศัย การสำรวจ ด้วยอวนลากซึ่งให้ข้อมูลที่มีค่าแก่ผู้มีอำนาจตัดสินใจ[ 128 ]อย่างไรก็ตาม การสำรวจด้วยอวนลากหน้าดินมีข้อเสียที่สำคัญบางประการ ได้แก่ ต้นทุน[ 129 ]การเลือกจับ/ความสามารถในการจับของอุปกรณ์[ 130 ]การทำลายถิ่นที่อยู่[ 131 ]และพื้นที่ครอบคลุมที่จำกัด (เช่น สภาพแวดล้อมพื้นทะเลที่เป็นพื้นผิวแข็ง พื้นที่คุ้มครองทางทะเล) [ 132 ]
ดีเอ็นเอสิ่งแวดล้อม (eDNA) ได้กลายเป็นทางเลือกที่มีศักยภาพในการศึกษาพลวัตของระบบนิเวศ การสูญเสียและการหลุดร่วงของสารพันธุกรรมจากสิ่งมีชีวิตขนาดใหญ่อย่างต่อเนื่องทำให้เกิดร่องรอยโมเลกุลในตัวอย่างสิ่งแวดล้อม ซึ่งสามารถนำมาวิเคราะห์เพื่อระบุการมีอยู่ของสายพันธุ์เป้าหมายที่เฉพาะเจาะจง [ 15 ] [ 133 ]หรือเพื่อจำแนกลักษณะความหลากหลายทางชีวภาพ[ 134 ] [ 135 ]การผสมผสานระหว่างการจัดลำดับรุ่นต่อไปและการสุ่มตัวอย่าง eDNA ได้ถูกนำไปใช้ในระบบน้ำอย่างประสบความสำเร็จเพื่อบันทึกรูปแบบเชิงพื้นที่และเวลาในความหลากหลายของสัตว์น้ำ[ 136 ] [ 137 ] [ 138 ] [ 139 ]เพื่อพัฒนาประโยชน์ของ eDNA สำหรับการจัดการประมงต่อไป การทำความเข้าใจความสามารถของปริมาณ eDNA ในการสะท้อนมวลชีวภาพของปลาในมหาสมุทรเป็นขั้นตอนสำคัญต่อไป[ 132 ]
ความสัมพันธ์เชิงบวกระหว่างปริมาณ eDNA และชีวมวลและความอุดมสมบูรณ์ของปลาได้รับการพิสูจน์แล้วในระบบทดลอง[ 140 ] [ 141 ] [ 142 ]อย่างไรก็ตาม คาดว่าความแปรผันที่ทราบกันดีระหว่างอัตราการผลิต eDNA [ 143 ] [ 144 ]และการย่อยสลาย [ 145 ] [ 146 ] [ 147 ] [ 148 ]จะทำให้ความสัมพันธ์เหล่านี้ซับซ้อนขึ้นในระบบธรรมชาติ ยิ่งไปกว่านั้น ในระบบมหาสมุทร ปริมาณที่อยู่อาศัยขนาดใหญ่และกระแสน้ำที่แรงมีแนวโน้มที่จะส่งผลให้เกิดการกระจายตัวทางกายภาพของชิ้นส่วน DNA ออกไปจากสิ่งมีชีวิตเป้าหมาย[ 149 ]ปัจจัยรบกวนเหล่านี้ได้รับการพิจารณาก่อนหน้านี้ว่าเป็นข้อจำกัดในการประยุกต์ใช้การตรวจสอบ eDNA เชิงปริมาณในสภาพแวดล้อมทางทะเล[ 149 ] [ 132 ]
แม้จะมีข้อจำกัดที่อาจเกิดขึ้นเหล่านี้ การศึกษาจำนวนมากในสภาพแวดล้อมทางทะเลพบความสัมพันธ์เชิงบวกระหว่างปริมาณ eDNA และความพยายามในการสำรวจเสริม รวมถึงการติดแท็กวิทยุ[ 150 ]การสำรวจด้วยสายตา[ 139 ] [ 151 ]การวัดความลึกด้วยคลื่นเสียง [ 152 ]และการสำรวจด้วยอวนลาก[ 138 ] [ 153 ]อย่างไรก็ตาม การศึกษาที่วัดปริมาณความเข้มข้นของ eDNA เป้าหมายของปลาเชิงพาณิชย์ด้วยการสำรวจด้วยอวนลากแบบมาตรฐานในสภาพแวดล้อมทางทะเลนั้นมีน้อยมาก[ 153 ]

ในบริบทนี้ การเปรียบเทียบโดยตรงระหว่างความเข้มข้นของ eDNA กับชีวมวลและตัวชี้วัดการประเมินสต็อก เช่น ปริมาณการจับต่อหน่วยความพยายาม (CPUE) เป็นสิ่งจำเป็นเพื่อทำความเข้าใจถึงการประยุกต์ใช้การตรวจสอบ eDNA เพื่อสนับสนุนความพยายามในการจัดการประมง[ 132 ]การศึกษาล่าสุดได้ขยายการประยุกต์ใช้เหล่านี้ โดยแสดงให้เห็นว่า eDNA สามารถบูรณาการเข้ากับดัชนีปลาในเขตปากแม่น้ำเพื่อการประเมินทางนิเวศวิทยา[ 154 ]และใช้ในการจัดการประมงในสภาพแวดล้อมเขตร้อนซึ่งข้อมูลแบบดั้งเดิมมักมีจำกัด[ 25 ]
ตะกอนใต้ทะเลลึก
- เครือข่าย OTU (หน่วยอนุกรมวิธานปฏิบัติการ) ของกลุ่ม DNA นอกเซลล์จากตะกอนของขอบทวีปต่างๆ[ 155 ]
ดีเอ็นเอภายนอกเซลล์ในตะกอนใต้ทะเลลึกเป็นแหล่งกักเก็บดีเอ็นเอที่ใหญ่ที่สุดในมหาสมุทรทั่วโลก[ 156 ]แหล่งที่มาหลักของดีเอ็นเอภายนอกเซลล์ในระบบนิเวศดังกล่าว ได้แก่ การปล่อยดีเอ็นเอจากสิ่งมีชีวิตที่อาศัยอยู่บนพื้นทะเลที่ตายแล้ว และ/หรือกระบวนการอื่นๆ รวมถึงการแตกตัวของเซลล์เนื่องจากการติดเชื้อไวรัส การหลั่งและการขับถ่ายของเซลล์ที่มีชีวิต การสลายตัวของไวรัส และการป้อนจากแหล่งภายนอกในมวลน้ำ[ 156 ] [ 157 ] [ 158 ] [ 159 ]การศึกษาก่อนหน้านี้ได้ให้หลักฐานว่าดีเอ็นเอภายนอกเซลล์ส่วนสำคัญสามารถหลีกเลี่ยงกระบวนการย่อยสลายและยังคงถูกเก็บรักษาไว้ในตะกอน[ 160 ] [ 161 ]ดีเอ็นเอนี้อาจเป็นแหล่งเก็บข้อมูลทางพันธุกรรมที่บันทึกกระบวนการทางชีวภาพที่เกิดขึ้นตลอดเวลา[ 162 ] [ 163 ] [ 155 ]
การตรวจสอบล่าสุดพบว่า DNA ที่ถูกเก็บรักษาไว้ในตะกอนทะเลมีลักษณะเฉพาะคือมีลำดับยีนที่หลากหลายจำนวนมาก[ 162 ] [ 163 ] [ 164 ]โดยเฉพาะอย่างยิ่ง DNA นอกเซลล์ถูกนำมาใช้เพื่อสร้างความหลากหลายของโปรคาริโอตและยูคาริโอตในอดีตในระบบนิเวศใต้ทะเลที่มีอุณหภูมิต่ำและ/หรือสภาวะขาดออกซิเจนอย่างถาวร[ 164 ] [ 165 ] [ 166 ] [ 167 ] [ 168 ] [ 155 ]
แผนภาพทางด้านขวาแสดงเครือข่าย OTU ( หน่วยอนุกรมวิธานปฏิบัติการ ) ของกลุ่ม DNA นอกเซลล์จากตะกอนของขอบทวีปต่างๆ ขนาดของจุดภายในเครือข่ายเป็นสัดส่วนกับความอุดมสมบูรณ์ของลำดับสำหรับแต่ละ OTU จุดที่วงกลมสีแดงแสดงถึง OTU หลักนอกเซลล์ จุดที่วงกลมสีเหลืองแสดงถึง OTU ที่ใช้ร่วมกันบางส่วน (ระหว่างสองกลุ่มขึ้นไป) จุดที่วงกลมสีดำแสดงถึง OTU ที่เป็นเอกสิทธิ์เฉพาะของแต่ละกลุ่ม แสดง OTU หลักที่มีส่วนร่วมอย่างน้อย 20 ลำดับ ตัวเลขในวงเล็บแสดงถึงจำนวนการเชื่อมต่อระหว่าง OTU และตัวอย่าง: 1 สำหรับ OTU ที่เป็นเอกสิทธิ์เฉพาะ 2–3 สำหรับ OTU ที่ใช้ร่วมกันบางส่วน และ 4 สำหรับ OTU หลัก[ 155 ]
การศึกษาก่อนหน้านี้ชี้ให้เห็นว่าการรักษา DNA อาจได้รับการสนับสนุนในระบบเบนทิกที่มีลักษณะเฉพาะคือการป้อนสารอินทรีย์และอัตราการตกตะกอนสูง เช่น ขอบทวีป[ 169 ] [ 170 ]ระบบเหล่านี้ซึ่งคิดเป็นประมาณ 15% ของพื้นทะเลทั่วโลก ยังเป็นแหล่งรวมความหลากหลายของโปรคาริโอตเบนทิก[ 171 ] [ 172 ] [ 173 ]ดังนั้นจึงอาจเป็นสถานที่ที่เหมาะสมที่สุดในการตรวจสอบความหลากหลายของโปรคาริโอตที่เก็บรักษาไว้ใน DNA นอกเซลล์[ 155 ]
การกระจายตัวเชิงพื้นที่ของความหลากหลายของโปรคาริโอตได้รับการศึกษาอย่างเข้มข้นในระบบนิเวศใต้ทะเลลึก [ 174 ] [ 175 ] [ 176 ] [ 177 ]ผ่านการวิเคราะห์ "ดีเอ็นเอสิ่งแวดล้อม" (เช่น วัสดุพันธุกรรมที่ได้มาโดยตรงจากตัวอย่างสิ่งแวดล้อมโดยไม่มีสัญญาณที่ชัดเจนของวัสดุต้นกำเนิดทางชีวภาพ) [ 9 ]อย่างไรก็ตาม ขอบเขตที่ลำดับยีนที่อยู่ในดีเอ็นเอภายนอกเซลล์สามารถเปลี่ยนแปลงการประมาณค่าความหลากหลายของกลุ่มโปรคาริโอตในปัจจุบันยังไม่เป็นที่ทราบแน่ชัด[ 178 ] [ 155 ]
ดีเอ็นเอโบราณในตะกอน
การวิเคราะห์ดีเอ็นเอโบราณที่เก็บรักษาไว้ในแหล่งเก็บข้อมูลต่างๆ ได้เปลี่ยนแปลงความเข้าใจเกี่ยวกับวิวัฒนาการของสายพันธุ์และระบบนิเวศ ในขณะที่การศึกษาก่อนหน้านี้มุ่งเน้นไปที่ดีเอ็นเอที่สกัดจากตัวอย่างที่มีข้อจำกัดทางอนุกรมวิธาน (เช่น กระดูกหรือเนื้อเยื่อแช่แข็ง) ความก้าวหน้าในการจัดลำดับแบบความเร็วสูงและชีวสารสนเทศศาสตร์ในปัจจุบันทำให้สามารถวิเคราะห์ดีเอ็นเอโบราณที่สกัดจากแหล่งเก็บข้อมูลตะกอนได้[ 179 ]ซึ่งเรียกว่า sedaDNA การสะสมและการเก็บรักษา sedaDNA ที่ฝังอยู่ในตะกอนบนบกและในทะเลสาบได้รับการวิจัยและตีความอย่างจริงจัง[ 180 ]อย่างไรก็ตาม การศึกษาการสะสมของดีเอ็นเอที่พื้นมหาสมุทรและการเก็บรักษาในตะกอนทางทะเลมีความซับซ้อนมากขึ้น เนื่องจากดีเอ็นเอต้องเดินทางผ่านคอลัมน์น้ำเป็นระยะทางหลายกิโลเมตร[ 181 ]แตกต่างจากในสภาพแวดล้อมบนบกที่มีการขนส่งชีวมวลซากดึกดำบรรพ์จากแผ่นดินอย่างแพร่หลาย sedaDNA ในทะเลส่วนใหญ่มาจาก ชุมชน แพลงก์ตอนซึ่งส่วนใหญ่เป็นจุลินทรีย์ในทะเลและ โปรติ สต์ในทะเล[ 182 ]หลังจากแพลงก์ตอนบนผิวน้ำตายลง ดีเอ็นเอของมันจะถูกขนส่งผ่านมวลน้ำ ซึ่งในระหว่างนั้นสารอินทรีย์ที่เกี่ยวข้องส่วนใหญ่จะถูกบริโภคและหายใจออกไป [ 183 ] การขนส่งนี้อาจใช้เวลา 3 ถึง 12 วัน ขึ้นอยู่กับขนาดและรูปร่างของเปลือก[ 184 ]อย่างไรก็ตาม ยังไม่ชัดเจนว่าดีเอ็นเอของแพลงก์ตอน (eDNA) ซึ่งนิยามว่าเป็นดีเอ็นเอทั้งหมดที่มีอยู่ในสิ่งแวดล้อมหลังจาก[ 185 ]รอดพ้นจากการขนส่งนี้ได้อย่างไร การย่อยสลายหรือการขนส่งเกี่ยวข้องกับการคัดแยกหรือการเคลื่อนที่ ด้านข้าง หรือไม่ และสุดท้าย ดีเอ็นเอของแพลงก์ตอนที่มาถึงพื้นทะเลจะถูกเก็บรักษาไว้ในตะกอนทะเลโดยไม่เกิดการเปลี่ยนแปลงองค์ประกอบเพิ่มเติมหรือไม่[ 186 ]
แม้ว่าจะสัมผัสกับการเสื่อมสภาพเป็นเวลานานภายใต้ สภาวะที่ มีออกซิเจนในระหว่างการขนส่งในมวลน้ำ และความเข้มข้นของสารอินทรีย์บนพื้นทะเลที่ต่ำกว่ามาก แต่ก็มีหลักฐานว่า eDNA ของแพลงก์ตอนได้รับการเก็บรักษาไว้ในตะกอนทะเลและมีสัญญาณทางนิเวศวิทยาที่สามารถนำมาใช้ประโยชน์ได้[ 187 ]การศึกษาก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นถึงการเก็บรักษา sedaDNA ในตะกอนทะเลที่สะสมภายใต้สภาวะไร้ออกซิเจนโดยมีปริมาณสารอินทรีย์ที่เก็บรักษาไว้สูงผิดปกติ[ 188 ]แต่การตรวจสอบในภายหลังบ่งชี้ว่า sedaDNA สามารถสกัดได้จากตะกอนทะเลปกติซึ่งส่วนใหญ่ประกอบด้วยเศษหินหรือแร่ธาตุชีวภาพ[ 189 ] [ 190 ] [ 191 ]นอกจากนี้ อุณหภูมิต่ำของน้ำทะเลลึก (0–4 °C) ยังช่วยให้ sedaDNA ได้รับการเก็บรักษาไว้อย่างดี[ 185 ] [ 187 ]การใช้ฟอรามินิเฟอรา แพลงก์ตอน เป็น "ศิลาโรเซตตา" ซึ่งช่วยให้สามารถเปรียบเทียบลายเซ็น sedaDNA โดยใช้ซากดึกดำบรรพ์ของสิ่งมีชีวิตเหล่านี้ที่เกิดขึ้นร่วมกัน Morard และคณะได้แสดงให้เห็นในปี 2017 ว่าลายนิ้วมือของ eDNA แพลงก์ตอนที่มาถึงพื้นทะเลจะรักษาลายเซ็นทางนิเวศวิทยาของสิ่งมีชีวิตเหล่านี้ไว้ในระดับทางภูมิศาสตร์ขนาดใหญ่[ 188 ]สิ่งนี้บ่งชี้ว่า eDNA ของชุมชนแพลงก์ตอนถูกสะสมลงบนพื้นทะเลด้านล่าง พร้อมกับกลุ่มก้อน โครงกระดูก และวัสดุแพลงก์ตอนอื่นๆ ที่จมลง หากเป็นเช่นนั้น sedaDNA ควรจะสามารถบันทึกลายเซ็นของอุทกศาสตร์ของมหาสมุทรผิวน้ำ ซึ่งส่งผลต่อองค์ประกอบของชุมชนแพลงก์ตอน ด้วยความละเอียดเชิงพื้นที่เดียวกันกับซากโครงกระดูกของแพลงก์ตอน นอกจากนี้ หาก eDNA ของแพลงก์ตอนมาถึงพื้นทะเลโดยเกี่ยวข้องกับกลุ่มก้อนหรือเปลือกหอย ก็เป็นไปได้ว่ามันจะทนต่อการขนส่งผ่านมวลน้ำโดยการยึดติดบนพื้นผิวแร่ธาตุ กลไกเดียวกันนี้ได้รับการเสนอเพื่ออธิบายการเก็บรักษา sedaDNA ในตะกอน[ 189 ] [ 190 ] [ 191 ]ซึ่งหมายความว่าการไหลของ eDNA ของแพลงก์ตอนที่ถูกห่อหุ้มด้วยเปลือกแคลไซต์ ที่มาถึงพื้นทะเลนั้นมีเงื่อนไขสำหรับการเก็บรักษาเมื่อถูกฝัง[ 186 ]
ดีเอ็นเอในตะกอนของฟอรามินิเฟอราแพลงก์ตอนเป็นตัวบ่งชี้ที่เหมาะสมทั้งในเชิง "แนวนอน" เพื่อประเมินความละเอียดเชิงพื้นที่ของการสร้างภาพลักษณะทางอุทกศาสตร์ของมหาสมุทรผิวน้ำในอดีต และในเชิง "แนวตั้ง" เพื่อติดตามการฝังตัวของสัญญาณอย่างชัดเจนตลอดทั้งชั้นตะกอน ที่จริงแล้ว การไหลของดีเอ็นเอในตะกอนของฟอรามินิเฟอราแพลงก์ตอนควรเป็นสัดส่วนกับการไหลของเปลือกฟอรามินิเฟอราที่ตายแล้วจมลงสู่ก้นทะเล ทำให้สามารถเปรียบเทียบสัญญาณดีเอ็นเอในตะกอนได้อย่างอิสระ ดีเอ็นเอในตะกอนเป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพในการศึกษาระบบนิเวศ เนื่องจากไม่จำเป็นต้องมีความรู้ทางอนุกรมวิธานโดยตรง ทำให้สามารถรวบรวมข้อมูลเกี่ยวกับสิ่งมีชีวิตทุกชนิดที่มีอยู่ในตัวอย่างได้ แม้ในระดับที่ซ่อนเร้นอย่างไรก็ตาม การกำหนดลำดับดีเอ็นเอในตะกอนให้กับสิ่งมีชีวิตที่รู้จักนั้นทำได้โดยการเปรียบเทียบกับลำดับอ้างอิง (หรือบาร์โค้ด ) ที่มีอยู่ในคลังข้อมูลสาธารณะหรือฐานข้อมูลที่ได้รับการดูแลจัดการ[ 192 ]อนุกรมวิธานของฟอรามินิเฟอราแพลงก์ตอนเป็นที่เข้าใจกันดี[ 193 ]และมีบาร์โค้ดที่ช่วยให้สามารถทำแผนที่แอมพลิคอน eDNA บนอนุกรมวิธานโดยอิงจากสัณฐานวิทยาของเปลือกฟอรามินิเฟอราได้เกือบสมบูรณ์[ 194 ] [ 195 ]ที่สำคัญ องค์ประกอบของชุมชนฟอรามินิเฟอราแพลงก์ตอนมีความเชื่อมโยงอย่างใกล้ชิดกับอุทกวิทยาของพื้นผิว และสัญญาณนี้ได้รับการเก็บรักษาไว้โดยเปลือกฟอสซิลที่สะสมอยู่บนพื้นทะเล[ 196 ] [ 197 ]เนื่องจากสามารถกู้คืน eDNA ของฟอรามินิเฟอราที่สะสมอยู่ในตะกอนมหาสมุทรได้ จึงสามารถนำมาใช้ในการวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงในชุมชนแพลงก์ตอนและเบนทิกเมื่อเวลาผ่านไป[ 198 ] [ 199 ] [ 200 ] [ 201 ] [ 186 ]
ในปี 2022 มีการค้นพบและจัดลำดับสารพันธุกรรม eDNA อายุสองล้านปีในกรีนแลนด์ และปัจจุบันถือเป็น DNA ที่เก่าแก่ที่สุดที่ค้นพบจนถึงปัจจุบัน[ 11 ] [ 12 ]
การวิจัยแบบมีส่วนร่วมและวิทยาศาสตร์ภาคประชาชน
ความเรียบง่ายของการสุ่มตัวอย่าง eDNA เอื้อต่อโครงการที่ต้องการให้ชุมชนท้องถิ่นมีส่วนร่วมในโครงการวิจัย รวมถึงการเก็บรวบรวมและวิเคราะห์ตัวอย่าง DNA ซึ่งสามารถเสริมสร้างศักยภาพให้ชุมชนท้องถิ่น (รวมถึงชนพื้นเมือง) มีส่วนร่วมอย่างแข็งขันในการตรวจสอบสายพันธุ์ในสภาพแวดล้อม และช่วยในการตัดสินใจอย่างรอบรู้ในฐานะส่วนหนึ่งของแบบจำลองการวิจัยเชิงปฏิบัติการแบบมีส่วนร่วม ตัวอย่างของโครงการดังกล่าวได้รับการแสดงให้เห็นโดยองค์กรการกุศล Science for All ด้วยโครงการ 'Wild DNA' [ 202 ]
ดูเพิ่มเติม
- ดีเอ็นเออิสระที่ไหลเวียน
- ดีเอ็นเอจากภายนอก
- อาร์เอ็นเอภายนอกเซลล์
- อาร์เอ็นเอที่พบในตัวอย่างสิ่งแวดล้อม
- ผลกระทบจากเงามืด (พันธุกรรม)
เอกสารอ้างอิงเพิ่มเติม
- Schallenberg, Lena; Wood, Susie A.; Pochon, Xavier; Pearman, John K. (2020). "ดีเอ็นเอในสิ่งแวดล้อมบอกอะไรเราได้บ้างเกี่ยวกับระบบนิเวศ?" . Frontiers for Young Minds . 7 150. doi : 10.3389/frym.2019.00150 . hdl : 2292/50690 . S2CID 210714520 .
ลิงก์ภายนอก
- ระเบิด
สรุปเนื้อหา
ข้อมูลสำคัญจากบทความ
ข้อมูลสำคัญเกี่ยวกับ ดีเอ็นเอสิ่งแวดล้อม
ดีเอ็นเอสิ่งแวดล้อม หรือ eDNA คือ ดีเอ็นเอ ที่เก็บรวบรวมจากตัวอย่างสิ่งแวดล้อมที่หลากหลาย เช่น ดิน ตะกอน น้ำ จืด น้ำทะเล หิมะ หรือ อากาศ แทนที่จะเก็บตัวอย่างโดยตรงจาก สิ่งมีชีวิต...
ภาพรวม
ดีเอ็นเอสิ่งแวดล้อมหรือ eDNA หมายถึงสารพันธุกรรมที่มีอยู่ในตัวอย่างสิ่งแวดล้อม เช่น ตะกอน น้ำ และอากาศ ซึ่งรวมถึงเซลล์ทั้งหมด ดีเอ็นเอภายนอกเซลล์ และอาจรวมถึงสิ่งมีชีวิตทั้งหมดด้วย [ 15 ] [ 16 ] การวิเคราะห์ eDNA เริ่มต้นด้วยการเก็บตัวอย่างสิ่งแวดล้อมที่สนใจ...
ดีเอ็นเอของชุมชน
แม้ว่าคำจำกัดความของ eDNA ดูเหมือนจะตรงไปตรงมา แต่เส้นแบ่งระหว่าง DNA รูปแบบต่างๆ กลับไม่ชัดเจน โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อเปรียบเทียบกับ DNA ของชุมชน ซึ่งถูกอธิบายว่าเป็นตัวอย่างสิ่งมีชีวิตจำนวนมาก [ 22 ]...
ดีเอ็นเอของตัวเอง
แนวคิดของ selfDNA มาจากการค้นพบของนักวิทยาศาสตร์จาก มหาวิทยาลัยเนเปิลส์ เฟเดริโกที่ 2 ซึ่ง รายงานไว้ในวารสาร New Phytologist ในปี 2015 [ 30 ] เกี่ยวกับผลยับยั้งตัวเองของ DNA นอกเซลล์ ในพืช [ 31 ] แต่ยังรวมถึงในแบคทีเรีย เชื้อรา สาหร่าย พืช โปรโตซัว และแมลง...