แอนติบอดีต้านนิวเคลียร์ ( ANAs [ ^{2 ]}หรือที่รู้จักกันในชื่อ^{ปัจจัย}ต้านนิวเคลียร์หรือANF ) ^{[ 3 ]}เป็นออโตแอนติบอดีที่จับกับสารภายในนิวเคลียสของเซลล์ในบุคคลปกติระบบภูมิคุ้มกันจะสร้างแอนติบอดีต่อโปรตีนต่างชาติ ( แอนติเจน ) แต่ไม่สร้างแอนติบอดีต่อโปรตีนของมนุษย์ ( ออโตแอนติเจน ) ในบางกรณี จะมีการสร้างแอนติบอดีต่อแอนติเจนของมนุษย์ ซึ่งเรียกว่าออโตแอนติบอดี^{[ 4 ]}

แอนติบอดี ANA มีหลายชนิดย่อย เช่นแอนติบอดี anti-Ro , anti-La , anti-Sm , anti-nRNP , anti-Scl-70 , anti -dsDNA, anti-histone , antibodies to nuclear pore complexes , anti-centromere antibodiesและanti-sp100 แอนติบอดีแต่ละชนิดย่อยเหล่านี้จะจับกับโปรตีนหรือโปรตีนคอมเพล็กซ์ที่แตกต่างกันภายในนิวเคลียส พบแอนติบอดีเหล่านี้ในโรคต่างๆ มากมาย รวมถึงโรคภูมิต้านตนเองมะเร็งและการติดเชื้อโดยมีอัตราการพบแอนติบอดีแตกต่างกันไปตามแต่ละโรค สิ่งนี้ทำให้สามารถใช้ ANA ในการวินิจฉัยโรคภูมิต้านตนเองบางชนิด รวมถึงโรคซิสเต็มิก ลูปัส อีริธีมาโตซัส^{, กลุ่มอาการ Sjögren [ 5 ] โรคหนังแข็ง [ 6 ] โรคเนื้อเยื่อเกี่ยวพันผสม [} 7 ] ^{โรคกล้ามเนื้อ}อักเสบหลาย^มัด,โรค^{ผิวหนังอักเสบ,}โรคตับอักเสบจากภูมิต้านตนเอง^{[ 8 ]}และ โรคลูปั สที่เกิดจากยา^{[ 9 ]}

การทดสอบ ANA ตรวจจับออโตแอนติบอดีที่มีอยู่ใน ซีรั่มในเลือดของแต่ละบุคคลการทดสอบที่ใช้กันทั่วไปในการตรวจจับและวัดปริมาณ ANA คืออิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ทางอ้อมและเอนไซม์ลิงค์อิมมูโนซอร์เบนต์แอสเซย์ (ELISA) ในอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ ระดับของออโตแอนติบอดีจะถูกรายงานเป็นไทเตอร์ซึ่งเป็นการเจือจางสูงสุดของซีรั่มที่ยังคงตรวจพบออโตแอนติบอดีได้ ไทเตอร์ของออโตแอนติบอดีที่เป็นบวกที่การเจือจางเท่ากับหรือมากกว่า 1:160 มักถือว่ามีความสำคัญทางคลินิก ไทเตอร์ที่เป็นบวกที่น้อยกว่า 1:160 พบได้ในประชากรที่มีสุขภาพดีถึง 20% โดยเฉพาะผู้สูงอายุ แม้ว่าไทเตอร์ที่เป็นบวกที่ 1:160 หรือสูงกว่าจะมีความสัมพันธ์อย่างมากกับความผิดปกติของระบบภูมิคุ้มกัน แต่ก็พบได้ในบุคคลที่มีสุขภาพดี 5% เช่นกัน^{[ 10 ] [ 11 ]}การคัดกรองออโตแอนติบอดีมีประโยชน์ในการวินิจฉัยความผิดปกติของระบบภูมิคุ้มกัน และการติดตามระดับช่วยในการทำนายความคืบหน้าของโรค^{[ 9 ] [ 12 ] [ 13 ]}การทดสอบ ANA ที่เป็นบวกมักไม่มีประโยชน์หากไม่มีข้อมูลทางคลินิกหรือห้องปฏิบัติการอื่น ๆ ที่สนับสนุนการวินิจฉัย^{[ 14 ]}

ร่างกายมนุษย์มีกลไกป้องกันเชื้อโรค หลายอย่าง หนึ่งในนั้นคือภูมิคุ้มกันแบบฮิวโมรัลกลไกการป้องกันนี้สร้างแอนติบอดี ( ไกลโคโปรตีน ขนาดใหญ่ ) เพื่อตอบสนองต่อสิ่งกระตุ้นภูมิคุ้มกัน เซลล์ของระบบภูมิคุ้มกันจำนวนมากจำเป็นสำหรับกระบวนการนี้ รวมถึงลิมโฟไซต์ ( เซลล์ Tและเซลล์ B ) และเซลล์นำเสนอแอนติเจนเซลล์เหล่านี้ประสานการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันเมื่อตรวจพบโปรตีนแปลกปลอม ( แอนติเจน ) โดยสร้างแอนติบอดีที่จับกับแอนติเจนเหล่านี้ ในสรีรวิทยาปกติ ลิมโฟไซต์ที่รู้จักโปรตีนของมนุษย์ ( ออโตแอนติเจน ) จะเกิดการตายของเซลล์ตามโปรแกรม ( อะพอพโทซิส ) หรือไม่ทำงานการทนต่อตนเอง นี้ หมายความว่าลิมโฟไซต์ไม่ควรกระตุ้นการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อแอนติเจนของเซลล์มนุษย์ อย่างไรก็ตาม บางครั้งกระบวนการนี้ทำงานผิดปกติและมีการสร้างแอนติบอดีต่อแอนติเจนของมนุษย์ ซึ่งอาจนำไปสู่โรคภูมิต้านตนเองได้^{[ 4 ]}

ANA พบได้ในความผิดปกติหลายอย่าง รวมถึงในบุคคลที่มีสุขภาพดีบางราย ความผิดปกติเหล่านี้ได้แก่ โรคแพ้ภูมิตัวเองชนิดลูปัส (SLE), โรคข้อ อักเสบรูมาตอยด์ , กลุ่มอาการ Sjögren , โรคหนัง แข็ง , โรคกล้ามเนื้อ อักเสบหลายมัด, โรคผิวหนังอักเสบและกล้ามเนื้ออักเสบ, โรคตับแข็งจากท่อน้ำดี, โรคแพ้ภูมิตัวเองชนิดลูปัสที่เกิดจากยา, โรคตับอักเสบจากภูมิคุ้มกันตนเอง, โรคปลอกประสาทเสื่อมแข็ง , โรคแพ้ภูมิตัวเองชนิดลูปัสแบบ ดิสคอยด์ , โรคต่อ มไทรอยด์ , กลุ่มอาการแอนติ ฟอ สโฟลิปิด, โรคข้อ อักเสบไม่ทราบสาเหตุในเด็ก , โรคข้ออักเสบสะเก็ดเงิน , โรคผิวหนังอักเสบและกล้ามเนื้ออักเสบ ในเด็ก , โรคเกล็ดเลือดต่ำไม่ ทราบสาเหตุ , การติดเชื้อและมะเร็ง แอนติบอดี เหล่านี้สามารถแบ่งย่อยได้ตามความจำเพาะ และแต่ละกลุ่มย่อยมีแนวโน้มที่แตกต่างกันสำหรับความผิดปกติเฉพาะ^{[ 9 ] [ 15 ]}

แอนติเจนนิวเคลียร์ที่สกัดได้ (ENA) เป็นกลุ่มของออโตแอนติเจนที่ถูกระบุว่าเป็นเป้าหมายของแอนติบอดีในผู้ที่มีความผิดปกติของระบบภูมิคุ้มกัน พวกมันถูกเรียกว่า ENA เพราะสามารถสกัดได้จากนิวเคลียสของเซลล์ด้วยน้ำเกลือ^{[ 9 ] [ 16 ]} ENA ประกอบด้วยไรโบนิวคลีโอโปรตีนและโปรตีนที่ไม่ใช่ฮิสโตนซึ่งตั้งชื่อตามชื่อของผู้บริจาคที่ให้ซีรั่มต้นแบบ (Sm, Ro, La, Jo) หรือชื่อของโรคที่พบแอนติบอดี (SS-A, SS-B, Scl-70) ^{[ 17 ]}

แอนติบอดี Anti-RoและAnti-Laหรือที่รู้จักกันในชื่อ SS-A และ SS-B ตามลำดับ มักพบในโรค Sjögren's syndrome ชนิดปฐมภูมิ ซึ่งเป็นโรคภูมิต้านตนเองที่ส่งผลต่อต่อมไร้ท่อ การมีอยู่ของแอนติบอดีทั้งสองชนิดพบได้ใน 30–60% ของผู้ป่วย Sjögren's syndrome แอนติบอดี Anti-Ro เพียงอย่างเดียวพบได้ใน 50–70% ของผู้ป่วย Sjögren's syndrome และ 30% ของผู้ป่วย SLE ที่มีอาการทางผิวหนัง และแอนติบอดี Anti-La พบได้น้อยมากเมื่ออยู่เดี่ยวๆ^{[ 12 ] [ 18 ]}แอนติบอดี Anti-La ยังพบได้ใน SLE ด้วยเช่นกัน อย่างไรก็ตาม โดยปกติแล้วจะมีโรค Sjögren's syndrome ร่วมด้วย^{[ 19 ]}แอนติบอดี Anti-Ro ยังพบได้น้อยกว่าในโรคอื่นๆ รวมถึงโรคตับภูมิต้านตนเอง โรค เซลิแอค โรคไขข้ออักเสบภูมิต้าน ตนเอง โรค ลูปัสอีริธีมาโตซัสในทารกแรกเกิดที่ส่งผลต่อหัวใจและ โรคกล้ามเนื้อ อักเสบหลาย มัด ^{[ 20 ] [ 21 ]}ในระหว่างตั้งครรภ์ แอนติบอดี anti-Ro สามารถผ่านรกและทำให้เกิดภาวะหัวใจเต้นผิดจังหวะ^{[ 22 ] [ 23 ]}และโรคลูปัสในทารกแรกเกิด^{[ 24 ]}ในกลุ่มอาการ Sjögren แอนติบอดี anti-Ro และ anti-La มีความสัมพันธ์กับการเริ่มเป็นโรคเร็ว ระยะเวลาของโรคที่ยาวนานขึ้นต่อมน้ำลายพาราไทรอยด์โต โรคที่เกิดขึ้นนอกต่อม และการแทรกซึมของลิมโฟไซต์ในต่อม^{[ 13 ]}แอนติบอดี anti-Ro มีความจำเพาะต่อส่วนประกอบของคอมเพล็กซ์ Ro-RNP ซึ่งประกอบด้วยโปรตีน 45kDa, 52kDa, 54kDa และ 60kDa และRNA โปรตีนที่จับกับ DNA /RNA ขนาด 60kDa และ โปรตีนควบคุม เซลล์ T ขนาด 52kDa เป็นแอนติเจนที่มีลักษณะเฉพาะที่ดีที่สุดของแอนติบอดี anti-Ro โดยรวมแล้ว โปรตีนเหล่านี้เป็นส่วนหนึ่งของ คอมเพล็กซ์ ไรโบนิวคลีโอโปรตีน (RNP) ที่เชื่อมโยงกับRNA Y ของมนุษย์ hY1-hY5 แอนติเจน La เป็น ปัจจัยยุติ การถอดรหัส ขนาด 48 kDa ของRNA polymerase IIIซึ่งเชื่อมโยงกับคอมเพล็กซ์ Ro-RNP ^{[ 17 ] [ 18 ] [ 25 ] [ 26 ]}

กลไกการสร้างแอนติบอดีในกลุ่มอาการ Sjögren ยังไม่เป็นที่เข้าใจอย่างสมบูรณ์ แต่ การตายของเซลล์แบบโปรแกรม ( apoptosis ) และการเลียนแบบโมเลกุลอาจมีบทบาท^{[ 13 ]}แอนติเจน Ro และ La แสดงออกบนพื้นผิวของเซลล์ที่กำลังเกิด apoptosis และอาจทำให้เกิดการอักเสบภายในต่อมน้ำลายโดยการโต้ตอบกับเซลล์ของระบบภูมิคุ้มกัน แอนติบอดีอาจถูกผลิตขึ้นผ่านการเลียนแบบโมเลกุล ซึ่งแอนติบอดีที่เกิดปฏิกิริยาข้ามสายพันธุ์จะจับกับทั้งโปรตีนของไวรัสและโปรตีนของมนุษย์ สิ่งนี้อาจเกิดขึ้นกับแอนติเจนตัวใดตัวหนึ่ง คือ Ro หรือ La และอาจผลิตแอนติบอดีต่อโปรตีนอื่นๆ ในภายหลังผ่านกระบวนการที่เรียกว่าการแพร่กระจายของเอพิโทปโปรตีน gag ของเรโทรไวรัสแสดงความคล้ายคลึงกับโปรตีน La และถูกเสนอให้เป็นตัวอย่างที่เป็นไปได้ของการเลียนแบบโมเลกุลในกลุ่มอาการ Sjögren ^{[ 13 ] [ 21 ]}

แอนติบอดี Anti-Smith (Anti-Sm) เป็นเครื่องหมายจำเพาะมากสำหรับ SLE ประมาณ 99% ของบุคคลที่ไม่มี SLE จะไม่มีแอนติบอดี Anti-Sm แต่มีเพียง 20% ของผู้ที่เป็น SLE เท่านั้นที่มีแอนติบอดี แอนติบอดีเหล่านี้เกี่ยวข้องกับการทำงานของระบบประสาทส่วนกลางโรคไต พังผืดในปอดและเยื่อ หุ้ม หัวใจอักเสบใน SLE แต่ไม่เกี่ยวข้องกับกิจกรรมของโรค แอนติเจนของแอนติบอดี Anti-Sm คือหน่วยหลักของไรโบนิวคลีโอโปรตีนนิวเคลียร์ขนาดเล็ก (snRNPs) ซึ่งเรียกว่า A ถึง G และจะจับกับ snRNPs U1, U2, U4, U5 และ U6 โดยส่วนใหญ่แล้ว แอนติบอดีจะจำเพาะต่อหน่วย B, B' และ D ^{[ 27 ] [ 28 ]}การศึกษาทางโมเลกุลและระบาดวิทยาชี้ให้เห็นว่าแอนติบอดี Anti-Sm อาจถูกเหนี่ยวนำโดยการเลียนแบบโมเลกุล เนื่องจากโปรตีนแสดงความคล้ายคลึงกับโปรตีนของไวรัส Epstein-Barr บางประการ ^{[ 29 ] [ 30 ]}

แอนติบอดีต่อไรโบนิวคลีโอโปรตีนนิวเคลียร์ (anti-nRNP)หรือที่รู้จักกันในชื่อแอนติบอดี anti-U1-RNP พบได้ในผู้ป่วย SLE ร้อยละ 30–40 มักพบร่วมกับแอนติบอดี anti-Sm แต่ก็อาจเกี่ยวข้องกับอาการทางคลินิกอื่นๆ ได้เช่นกัน นอกจาก SLE แล้ว แอนติบอดีเหล่านี้ยังมีความเกี่ยวข้องอย่างมากกับโรคเนื้อเยื่อเกี่ยวพันผสมแอนติบอดี anti-nRNP จดจำหน่วยแกน A และ C ของ snRNP และด้วยเหตุนี้จึงจับกับ U1-snRNP เป็นหลัก^{[ 27 ] [ 31 ]}การตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อ RNP อาจเกิดจากการนำเสนอส่วนประกอบนิวเคลียร์บนเยื่อหุ้มเซลล์ในถุงอะพอพโทซิส นอกจากนี้ยังมีการเสนอการเลียนแบบโมเลกุลเป็นกลไกที่เป็นไปได้สำหรับการสร้างแอนติบอดีต่อโปรตีนเหล่านี้ เนื่องจากความคล้ายคลึงกันระหว่างโพลีเปปไทด์ U1-RNP และโพลีเปปไทด์ของไวรัส Epstein-Barr ^{[ 32 ]}

แอนติบอดี Anti-Scl-70เกี่ยวข้องกับโรคหนังแข็ง [ ^{33 ] ความ}ไวของแอนติบอดีต่อโรคหนังแข็งอยู่ที่ประมาณ 34% แต่จะสูงกว่าในกรณีที่มีการเกี่ยวข้องกับผิวหนังแบบกระจาย (40%) และต่ำกว่าในกรณีที่มีการเกี่ยวข้องกับผิวหนังแบบจำกัด (10%) ความจำเพาะของแอนติบอดีอยู่ที่ 98% และ 99.6% ในโรคไขข้ออักเสบอื่นๆ และบุคคลปกติ ตามลำดับ^{[ 9 ] [ 34 ]}นอกจากโรคหนังแข็งแล้ว ยังพบแอนติบอดีเหล่านี้ในบุคคลที่เป็นโรค SLE ประมาณ 5% ^{[ 35 ]}เป้าหมายแอนติเจนของแอนติบอดี Anti-Scl-70 คือ โทโป ไอ โซเม อเรส I ^{[ 36 ]}

แม้ว่าแอนติบอดีต่อ Jo-1 มักจะรวมอยู่ในกลุ่ม ANA แต่จริงๆ แล้วเป็นแอนติบอดีต่อโปรตีนในไซโตพลาสซึมHistidyl-tRNA synthetaseซึ่งเป็น aminoacyl-tRNA synthetase ที่จำเป็นสำหรับการสังเคราะห์ tRNA ที่มีฮิสติดีน^{[ 16 ]} แอนติบอดี เหล่านี้มีความเกี่ยวข้องอย่างมากกับ โรค กล้ามเนื้ออักเสบและ โรค ผิวหนังอักเสบและพบได้น้อยในโรคเนื้อเยื่อเกี่ยวพันอื่นๆ ประมาณ 20–40% ของผู้ป่วยโรคกล้ามเนื้ออักเสบจะมีผลตรวจแอนติบอดี Jo-1 เป็นบวก และส่วนใหญ่จะมีโรคปอดคั่นระหว่างเซลล์ เครื่องหมาย แอนติเจนเม็ดเลือดขาวของมนุษย์ HLA-DR3 และ HLA-DRw52 ซึ่งรวมเรียกว่ากลุ่มอาการ Jo-1 ^{[ 27 ] [ 37 ]}

แอนติบอดีต่อดีเอ็นเอสายคู่ (anti-dsDNA)มีความเกี่ยวข้องอย่างมากกับ SLE แอนติบอดีเหล่านี้เป็น เครื่องหมาย เฉพาะของโรค โดยบางการศึกษาระบุว่ามีความเฉพาะเจาะจงเกือบ 100% ^{[ 9 ]}ข้อมูลเกี่ยวกับความไวอยู่ในช่วง 25 ถึง 85% ระดับแอนติบอดี anti-dsDNA หรือที่เรียกว่าไทเตอร์ มีความสัมพันธ์กับกิจกรรมของโรคใน SLE ระดับสูงบ่งชี้ว่าลูปัสมีกิจกรรมมากขึ้น การมีอยู่ของแอนติบอดี anti-dsDNA ยังเชื่อมโยงกับโรคไตอักเสบจากลูปัสและมีหลักฐานว่าแอนติบอดีเหล่านี้เป็นสาเหตุ แอนติบอดี anti-dsDNA บางชนิดมีปฏิกิริยาข้ามกับแอนติเจนอื่นๆ ที่พบในเยื่อฐานของไต (GBM) เช่นเฮปารานซัลเฟตคอลลาเจน IV ไฟโบรเน กตินและลามินินการจับกับแอนติเจนเหล่านี้ภายในไตอาจทำให้เกิดการอักเสบและการตรึงคอมพลีเมนต์ส่งผลให้ไตเสียหาย การมีระดับการจับกับ DNA สูงและ ระดับ C3 ต่ำ แสดงให้เห็นว่ามีค่าการทำนายที่สูงมาก (94%) สำหรับการวินิจฉัย SLE ^{[ 38 ]}นอกจากนี้ยังเป็นไปได้ที่แอนติบอดี anti-dsDNA จะถูกดูดซึมเข้าสู่เซลล์เมื่อจับกับแอนติเจนของเยื่อหุ้มเซลล์แล้วจึงแสดงออกมาบนพื้นผิวเซลล์ ซึ่งอาจกระตุ้นการตอบสนองการอักเสบโดยเซลล์ T ภายในไต แอนติบอดี anti-dsDNA ไม่ได้เกี่ยวข้องกับโรคไตอักเสบจากลูปัสทั้งหมด และปัจจัยอื่นๆ อาจทำให้เกิดอาการนี้ได้แม้ไม่มีแอนติบอดี anti-dsDNA แอนติเจนของแอนติบอดี anti-dsDNA คือDNA สองสาย^{[ 39 ] [ 40 ]}

แอนติบอดีต่อฮิสโตนพบได้ในซีรั่มของผู้ป่วยโรคลูปัสที่เกิดจากยา มากถึง 75–95% และในผู้ป่วย SLE ที่ไม่ทราบสาเหตุ 75% แตกต่างจากแอนติบอดีต่อ dsDNA ใน SLE แอนติบอดีเหล่านี้ไม่จับกับคอมพลีเมนต์ แม้ว่าจะพบได้บ่อยที่สุดในโรคลูปัสที่เกิดจากยา แต่ก็พบได้ในบางกรณีของ SLE, โรคหนังแข็ง , โรคข้ออักเสบรูมาตอยด์และโรคเนื้อเยื่อเกี่ยวพันที่ไม่สามารถ จำแนกประเภทได้ ยาหลายชนิดเป็นที่ทราบกันว่าทำให้เกิดโรคลูปัสที่เกิดจากยา และสร้างเป้าหมายแอนติเจนต่างๆ ภายในนิวคลีโอโซม ซึ่งมักจะทำปฏิกิริยาข้ามกับโปรตีนฮิสโตนและ DNA หลายชนิดโปรเคนามิดทำให้เกิดโรคลูปัสที่เกิดจากยาชนิดหนึ่งที่สร้างแอนติบอดีต่อคอมเพล็กซ์ฮิสโตน H2A และ H2B ^{[ 41 ] [ 42 ]}

แอนติบอดี ต่อไกลโคโปรตีน-210 (anti-gp210) และ แอนติบอดี ต่อนิวคลีโอพอริน 62 (anti-p62) ต่างก็ เป็นแอนติบอดีต่อส่วนประกอบของเยื่อหุ้มนิวเคลียส และพบใน โรคตับแข็งท่อน้ำดีปฐมภูมิ (PBC) แอนติบอดีแต่ละชนิดมีอยู่ประมาณ 25–30% ของผู้ป่วย PBC แอนติเจนของแอนติบอดีทั้งสองชนิดเป็นส่วนประกอบของเยื่อหุ้มนิวเคลียส gp210 เป็นโปรตีนขนาด 200 kDa ที่เกี่ยวข้องกับการยึดส่วนประกอบของรูพรุนนิวเคลียสเข้ากับเยื่อหุ้มนิวเคลียส แอนติเจน p62 เป็นคอมเพล็กซ์รูพรุนนิวเคลียสขนาด 60 kDa ^{[ 43 ] [ 44 ]}

แอนติบอดีต่อเซนโทรเมียร์มีความเกี่ยวข้องกับโรคผิวหนังแข็งทั่วร่างกายแบบจำกัด หรือที่รู้จักกันในชื่อกลุ่มอาการ CRESTโรคตับแข็งท่อน้ำดีปฐมภูมิ และโรคผิวหนังแข็งส่วนต้น^{[ 45 ]}มีแอนติเจนที่รู้จัก 6 ชนิด ซึ่งทั้งหมดเกี่ยวข้องกับเซนโทรเมียร์ ได้แก่ CENP-A ถึง CENP-F CENP-A เป็นโปรตีนคล้าย ฮิสโตน H3ขนาด 17 kDa CENP-B เป็นโปรตีนจับกับ DNA ขนาด 80 kDa ที่เกี่ยวข้องกับการพับของเฮเทอโรโครมาติน CENP-C เป็นโปรตีนขนาด 140 kDa ที่เกี่ยวข้องกับ การประกอบ ไคเนโตคอร์ CENP-D เป็นโปรตีนขนาด 50 kDa ที่มีหน้าที่ไม่ทราบแน่ชัด แต่อาจเป็น โปรตีน ที่คล้ายคลึงกับโปรตีนอื่นที่เกี่ยวข้องกับการควบแน่นของโครมาติน RCC1 CENP -E เป็นโปรตีนขนาด 312 kDa จากตระกูลโปรตีนมอเตอร์ไคเนซิน CENP-F เป็นโปรตีนขนาด 367 kDa จากเมทริกซ์นิวเคลียร์ที่เชื่อมโยงกับไคเนโตคอร์ในช่วงปลายระยะ G2ระหว่างการแบ่งเซลล์แบบไมโทซิส แอนติบอดี CENP-A, B และ C พบได้บ่อยที่สุด (16–42% ของโรคหนังแข็งทั่วร่างกาย) และเกี่ยวข้องกับปรากฏการณ์เรย์โนด์เส้นเลือดฝอยโป่งพอง การมีส่วนร่วมของปอด และการเริ่มเป็นโรคหนังแข็งทั่วร่างกายในระยะเริ่มต้น^{[ 34 ] [ 46 ] [ 47 ]}

แอนติบอดีต่อเซนโทรเมียร์พบได้ในผู้ป่วยโรคหนังแข็งทั่วร่างกายแบบจำกัดประมาณ 60% และในผู้ป่วยโรคหนังแข็งทั่วร่างกายแบบกระจายประมาณ 15% ความจำเพาะของการทดสอบนี้มากกว่า 98% ดังนั้น การตรวจพบแอนติบอดีต่อเซนโทรเมียร์ในเชิงบวกจึงบ่งชี้อย่างชัดเจนถึงโรคหนังแข็งทั่วร่างกายแบบจำกัด แอนติบอดีต่อเซนโทรเมียร์จะปรากฏในช่วงเริ่มต้นของโรคและสามารถทำนายได้อย่างแม่นยำถึงการมีส่วนร่วมของผิวหนังในวงจำกัด และลดโอกาสการมีส่วนร่วมของอวัยวะภายในที่รุนแรง เช่น พังผืด ในปอด^{[ 48 ]}

เมื่อพบ ACA ในโรคตับแข็งท่อน้ำดีปฐมภูมิ ACA จะบ่งชี้ถึงภาวะความดันโลหิตสูงในพอร์ทัล โดยระดับ ACA ในซีรั่มจะสัมพันธ์กับความรุนแรงของภาวะความดันโลหิตสูงในพอร์ทัล^{[ 49 ]}

แอนติบอดีต่อ sp100พบได้ในผู้ป่วยโรคตับแข็งท่อน้ำดีปฐมภูมิ (PBC) ประมาณ 20–30% พบในผู้ที่ไม่เป็น PBC เพียงไม่กี่ราย ดังนั้นจึงถือเป็นเครื่องหมายบ่งชี้เฉพาะของโรคนี้ แอนติเจน sp100 พบอยู่ภายในนิวเคลียส ซึ่งเป็นโปรตีนเชิงซ้อนขนาดใหญ่ในนิวเคลียสที่อาจมีบทบาทในการเจริญเติบโตและการแบ่งเซลล์^{[ 50 ]}

แอนติบอดี Anti-PM-Scl พบได้มากถึง 50% ในกลุ่มอาการทับซ้อนของโพลีไมโอซิส/ซิสเต็มิก สเคลอโรซิส (PM/SSc)ประมาณ 80% ของบุคคลที่มีแอนติบอดีอยู่ในซีรั่มในเลือดจะมีภาวะดังกล่าว การมีอยู่ของแอนติบอดีมีความเชื่อมโยงกับการมีส่วนร่วมของผิวหนังที่จำกัดของกลุ่มอาการทับซ้อน PM/SSc เป้าหมายแอนติเจนของแอนติบอดีคือส่วนประกอบของคอมเพล็กซ์เอ็ กโซโซมที่ ประมวลผลRNAในนิวคลีโอลัส [ ^{34 ] มี}โปรตีนสิบชนิดในคอมเพล็กซ์นี้ และพบแอนติบอดีต่อแปดชนิดในความถี่ที่แตกต่างกัน ได้แก่ PM/Scl-100 (70–80%), PM/Scl-75 (46–80%), hRrp4 (50%), hRrp42 (21%), hRrp46 (18%), hCs14 (14%), hRrp41 (10%) และ hRrp40 (7%) ^{[ 51 ]}

แอนติบอดี Anti-DFS70 สร้างรูปแบบจุดละเอียดหนาแน่นในการตรวจภูมิคุ้มกันทางอ้อม และพบได้ในคนปกติและในภาวะต่างๆ แต่ไม่เกี่ยวข้องกับพยาธิสภาพภูมิคุ้มกันอัตโนมัติแบบทั่วร่างกาย ดังนั้นจึงสามารถใช้เพื่อช่วยในการตัดภาวะดังกล่าวออกไปในบุคคลที่มีผล ANA เป็นบวก ผู้ป่วยจำนวนมากได้รับการวินิจฉัยว่าเป็นโรคแพ้ภูมิตัวเองชนิดทั่วร่างกายหรือโรคเนื้อเยื่อเกี่ยวพันที่ไม่สามารถจำแนกประเภทได้ โดยส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับผล ANA ที่เป็นบวก ในกรณีที่ไม่สามารถตรวจพบออโตแอนติบอดีที่กำหนดได้ (เช่น แอนติบอดี anti-ENA) แนะนำให้ทำการทดสอบแอนติบอดี anti-DFS70 เพื่อยืนยันการวินิจฉัย การทดสอบแอนติบอดี anti-DFS70 มีให้บริการในรูปแบบการทดสอบที่ได้รับการรับรอง CE จนถึงขณะนี้ยังไม่มีการทดสอบใดที่ได้รับการรับรองจาก FDA ^{[ 52 ]}

การตรวจพบ ANA ในเลือดสามารถยืนยันได้ด้วยการทดสอบคัดกรอง แม้ว่าจะมีการทดสอบมากมายสำหรับการตรวจหา ANA แต่การทดสอบที่ใช้กันทั่วไปสำหรับการคัดกรองคือการตรวจภูมิคุ้มกันทางอ้อมและการตรวจภูมิคุ้มกันแบบเอนไซม์เชื่อมโยง (ELISA) ^{[ 53 ]}หลังจากตรวจพบ ANA แล้ว จะมีการกำหนดชนิดย่อยต่างๆ^{[ 9 ]}

การตรวจ ภูมิคุ้มกันแบบทางอ้อม (Indirect immunofluorescence)เป็นหนึ่งในวิธีการทดสอบ ANA ที่ใช้กันทั่วไป โดยทั่วไปจะใช้เซลล์ HEp-2 เป็นสารตั้งต้นในการตรวจหาแอนติบอดีในซีรั่มของมนุษย์ เซลล์ HEp-2 จะเคลือบลงบนสไลด์กล้องจุลทรรศน์ และซีรั่มจะถูกบ่มกับเซลล์ หากมีแอนติบอดีเป้าหมายอยู่ แอนติบอดีเหล่านั้นจะจับกับแอนติเจนบนเซลล์ ในกรณีของ ANA แอนติบอดีจะจับกับนิวเคลียส สามารถมองเห็นได้โดยการเพิ่มแอนติบอดีต่อต้านมนุษย์ที่ติดแท็กเรืองแสง (โดยปกติคือFITCหรือ rhodopsin B) ซึ่งจะจับกับแอนติบอดี โมเลกุลจะเรืองแสงเมื่อแสงที่มีความยาวคลื่นเฉพาะส่องกระทบ ซึ่งสามารถมองเห็นได้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ ขึ้นอยู่กับแอนติบอดีที่มีอยู่ในซีรั่มของมนุษย์และตำแหน่งของแอนติเจนในเซลล์ จะเห็นรูปแบบการเรืองแสงที่แตกต่างกันบนเซลล์ HEp-2 ^{[ 54 ] [ 55 ]}ระดับของแอนติบอดีจะถูกวิเคราะห์โดยการเจือจางซีรั่มในเลือด การทดสอบ ANA ถือว่าให้ผลบวกหากตรวจพบการเรืองแสงที่ระดับ 1:40/1:80 ระดับที่สูงกว่าจะมีความสำคัญทางคลินิกมากกว่า เนื่องจากพบผลบวกต่ำ (≤1:160) ได้ถึง 20% ของผู้ที่มีสุขภาพดี โดยเฉพาะผู้สูงอายุ มีเพียงประมาณ 5% ของประชากรที่มีสุขภาพดีเท่านั้นที่มีระดับ ANA 1:160 หรือสูงกว่า^{[ 9 ] [ 56 ]}

จนกระทั่งราวปี 1975 เมื่อมีการนำเซลล์ HEp-2 มาใช้ เนื้อเยื่อสัตว์ถูกใช้เป็นสารตั้งต้นมาตรฐานสำหรับการตรวจภูมิคุ้มกันด้วยฟลูออเรสเซนซ์^{[ 12 ]}ปัจจุบันเซลล์ HEp-2 เป็นหนึ่งในสารตั้งต้นที่ใช้กันทั่วไปที่สุดสำหรับการตรวจจับ ANA ด้วยการตรวจภูมิคุ้มกันด้วยฟลูออเรสเซนซ์^{[ 57 ]}

เดิมทีเซลล์สายพันธุ์มะเร็งกล่องเสียงถูกปนเปื้อนและถูกแทนที่ด้วย เซลล์ HeLaและตอนนี้ได้รับการระบุว่าเป็นเซลล์ HeLa จริงๆ^{[ 58 ]}

เซลล์เหล่านี้มีประสิทธิภาพเหนือกว่าเนื้อเยื่อสัตว์ที่เคยใช้มาก่อน เนื่องจากมีขนาดใหญ่และมีอัตราการแบ่งเซลล์ (ไมโทซิส) สูงในสายเซลล์ทำให้สามารถตรวจจับแอนติบอดีต่อแอนติเจนเฉพาะไมโทซิส เช่น แอนติบอดีเซนโทรเมียร์ นอกจากนี้ยังช่วยให้สามารถระบุแอนติบอดีต่อ Ro ได้ เนื่องจากใช้อะซิโตน ใน การตรึงเซลล์ (สารตรึงอื่นๆ อาจชะล้างแอนติเจนออกไป) ^{[ 59 ]}

เซลล์ HEp-2 สามารถพบรูปแบบการย้อมสีนิวเคลียสได้หลายแบบ ได้แก่ แบบเอกรูป (homogeneous), แบบจุด (speckled), แบบนิวคลีโอลัส (nucleolar), แบบเยื่อหุ้มนิวเคลียส (nuclear membranous), แบบเซน โทร เมียร์ (centromeric), แบบจุดนิวเคลียส (nuclear dot) และแบบหลายรูปร่าง (pleomorphic) รูปแบบเอกรูปจะพบเมื่อ โครโมโซม ที่ควบแน่น และโครมาตินในระยะอินเตอร์เฟส ถูกย้อมสี รูปแบบนี้สัมพันธ์กับแอนติบอดีต่อ dsDNA , แอนติบอดีต่อส่วนประกอบของนิวคลีโอโซม และแอนติบอดีต่อฮิสโตน รูปแบบจุดมีสองแบบ คือ แบบละเอียดและแบบหยาบ รูปแบบจุดละเอียดมีการย้อมสีนิวเคลียสแบบละเอียดโดยที่โครมาตินในระยะเมตาเฟสไม่ถูกย้อมสี ซึ่งสัมพันธ์กับแอนติบอดีต่อ Ro และแอนติบอดีต่อ La รูปแบบการย้อมสีแบบหยาบมีการย้อมสีนิวเคลียสแบบเม็ดหยาบ เกิดจากแอนติบอดีต่อ U1-RNP และแอนติบอดีต่อ Sm รูปแบบการย้อมสีนิวคลีโอลัสสัมพันธ์กับแอนติบอดีหลายชนิด ได้แก่ แอนติบอดีต่อ Scl-70, แอนติบอดีต่อ PM-Scl, แอนติบอดีต่อไฟบริลลาริน และแอนติบอดีต่อ Th/To การย้อมเยื่อหุ้มนิวเคลียสปรากฏเป็นวงแหวนเรืองแสงรอบนิวเคลียสของเซลล์ และเกิดจากแอนติบอดี anti-gp210 และ anti-p62 รูปแบบเซนโทรเมียร์แสดงจุดนิวเคลียส หลายจุด ในเซลล์ระยะอินเตอร์เฟสและไมโทซิส ซึ่งสอดคล้องกับจำนวนโครโมโซมในเซลล์ รูปแบบจุดนิวเคลียสแสดงจุดนิวเคลียสระหว่าง 13 ถึง 25 จุดใน เซลล์ ระยะอินเตอร์เฟสและเกิดจากแอนติบอดี anti- sp100รูปแบบพลีโอโมฟิกเกิดจากแอนติบอดีต่อแอนติเจนนิวเคลียสของเซลล์ที่กำลังแบ่งตัว^{[ 27 ] [ 56 ] [ 60 ] [ 61 ]}พบว่าการตรวจภูมิคุ้มกันเรืองแสงทางอ้อมมีประสิทธิภาพเหนือกว่า ELISA เล็กน้อยในการตรวจจับ ANA จากเซลล์ HEp-2 ^{[ 57 ]}

Crithidia luciliaeเป็นโปรติสต์เซลล์เดียวที่มี แฟลกเจลเลต (haemoflaggelate ) พวกมันถูกใช้เป็นสารตั้งต้นในการตรวจภูมิคุ้มกันด้วยฟลูออเรสเซนซ์เพื่อตรวจหาแอนติบอดีต่อ dsDNA พวกมันมีออร์แกเนลล์ที่เรียกว่า คิเนโตพ ลาสต์ (kinetoplast)ซึ่งเป็นไมโทคอนเดรีย ขนาดใหญ่ ที่มีเครือข่ายของโมเลกุล dsDNA วงกลมที่เชื่อมต่อกัน หลังจากบ่มกับซีรั่มที่มีแอนติบอดีต่อ dsDNA และแอนติบอดีต่อมนุษย์ที่ติดฉลากด้วยฟลูออเรสเซนซ์ คิเนโตพลาสต์จะเรืองแสง การที่ไม่มีแอนติเจนนิวเคลียร์อื่น ๆ ในออร์แกเนลล์นี้หมายความว่าการใช้ C. luciliaeเป็นสารตั้งต้นจะช่วยให้สามารถตรวจจับแอนติบอดีต่อ dsDNA ได้อย่างจำเพาะเจาะจง ^{[ 9 ] [ 62 ] [ 63 ]}

การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนต์แบบเชื่อมโยงเอนไซม์ (ELISA) ใช้แผ่นไมโครไทเทอร์ ที่เคลือบด้วยแอนติเจน สำหรับการตรวจจับ ANA ^{[ 64 ]}แต่ละหลุมของแผ่นไมโครไทเทอร์จะถูกเคลือบด้วยแอนติเจนเดี่ยวหรือแอนติเจนหลายชนิดเพื่อตรวจจับแอนติบอดีจำเพาะหรือเพื่อคัดกรอง ANA ตามลำดับ แอนติเจนมาจากสารสกัดจากเซลล์หรือรีคอมบิแนนท์ เซรั่มเลือดจะถูกบ่มในหลุมของแผ่นและล้างออก หากมีแอนติบอดีที่จับกับแอนติเจนอยู่ แอนติบอดีเหล่านั้นจะยังคงอยู่หลังจากการล้าง แอนติบอดีรองต่อต้านมนุษย์ที่เชื่อมต่อกับเอนไซม์ เช่นฮอร์สแรดิชเพอร์ออกซิเดส จะถูกเติมลงไป ปฏิกิริยาของเอนไซม์จะทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงสีของสารละลายซึ่งเป็นสัดส่วนกับปริมาณของแอนติบอดีที่จับกับแอนติเจน^{[ 12 ] [ 55 ] [ 65 ]}มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในการตรวจจับ ANA โดยอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์และชุด ELISA ที่แตกต่างกัน และมีความสอดคล้องกันเพียงเล็กน้อยระหว่างสิ่งเหล่านี้ แพทย์จะต้องคุ้นเคยกับความแตกต่างเหล่านี้เพื่อประเมินผลลัพธ์ของการทดสอบต่างๆ^{[ 64 ]}

ตารางต่อไปนี้แสดงความไวของแอนติบอดีต้านไวรัส (ANA) ชนิดต่างๆ ต่อโรคต่างๆ

ANA บางชนิดปรากฏในโรคหลายประเภท ส่งผลให้ความจำเพาะของการทดสอบลดลง ตัวอย่างเช่นปัจจัยรูมาตอยด์ IgM (IgM-RF) พบว่ามีปฏิกิริยาข้ามกับ ANA ทำให้ผลการตรวจภูมิคุ้มกัน เรืองแสง เป็น บวกเท็จ ^{[ 67 ]}มีรายงานว่าพบ ANA เป็นบวก รวมถึงแอนติบอดีต่อ DNA ในผู้ป่วยที่เป็นโรคไทรอยด์ที่เกิดจากภูมิคุ้มกันบกพร่อง^{[ 68 ] [ 69 ]} ANA อาจให้ผลการทดสอบเป็นบวกได้ถึง 45% ในผู้ป่วยที่มีภาวะไทรอยด์ที่เกิดจากภูมิคุ้มกันบกพร่องหรือโรคข้ออักเสบรูมาตอยด์และมากถึง 15% ในผู้ป่วยที่มีเชื้อHIVหรือไวรัสตับอักเสบซี^{[ 69 ] [ 70 ] [ 71 ] [ 72 ]}ตามข้อมูลจากมูลนิธิโรคแพ้ภูมิตัวเองแห่งอเมริกา "ประมาณ 5% ของประชากรทั่วไปจะมีผลตรวจ ANA เป็นบวก อย่างไรก็ตาม อย่างน้อย 95% ของผู้ที่มีผลตรวจ ANA เป็นบวกไม่ได้เป็นโรคแพ้ภูมิตัวเอง ผลตรวจ ANA เป็นบวกบางครั้งอาจถ่ายทอดทางพันธุกรรมได้ แม้ว่าสมาชิกในครอบครัวจะไม่มีหลักฐานของโรคแพ้ภูมิตัวเองก็ตาม" ^{[ 11 ]}ในทางกลับกัน พวกเขากล่าวว่า แม้ว่า 95% ของผู้ป่วยที่เป็นโรคแพ้ภูมิตัวเองจะมีผลตรวจ ANA เป็นบวก "มีเพียงเปอร์เซ็นต์เล็กน้อยเท่านั้นที่มีผลตรวจ ANA เป็นลบ และหลายคนในกลุ่มนั้นมีแอนติบอดีอื่นๆ (เช่นแอนติบอดีต่อฟอสโฟลิปิด , แอนตี้-Ro, แอนตี้-SSA) หรือผลตรวจ ANA เปลี่ยนจากบวกเป็นลบเนื่องจากสเตียรอยด์ยาเคมีบำบัดหรือภาวะยูเรเมีย (ไตวาย)" ^{[ 11 ]}

เซลล์LEถูกค้นพบในไขกระดูกในปี พ.ศ. 2491 โดย Hargraves และคณะ^{[ 73 ]}ในปี พ.ศ. 2490 Holborow และคณะได้แสดงให้เห็น ANA เป็นครั้งแรกโดยใช้อิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ทางอ้อม^{[ 74 ]}นี่เป็นข้อบ่งชี้แรกว่ากระบวนการที่ส่งผลต่อเซลล์นิวเคลียสเป็นสาเหตุของ SLE ในปี พ.ศ. 2492 มีการค้นพบว่าซีรั่มจากผู้ป่วย SLE มีแอนติบอดีที่ตกตะกอนกับสารสกัดจากนิวเคลียสในน้ำเกลือ ซึ่งเรียกว่าแอนติเจนนิวเคลียสที่สกัดได้ (ENAs) สิ่งนี้นำไปสู่การจำแนกลักษณะของแอนติเจน ENA และแอนติบอดีที่เกี่ยวข้อง ดังนั้น แอนติบอดี anti-Sm และ anti-RNP จึงถูกค้นพบในปี พ.ศ. 2509 และ พ.ศ. 2514 ตามลำดับ ในช่วงปี พ.ศ. 2513 แอนติบอดี anti-Ro/anti-SS-A และ anti-La/anti-SS-B ก็ถูกค้นพบเช่นกัน แอนติบอดี Scl-70 เป็นที่ทราบกันว่าเป็นแอนติบอดีจำเพาะต่อโรคหนังแข็งในปี 1979 อย่างไรก็ตาม แอนติเจน (topoisomerase-I) ยังไม่ได้รับการระบุลักษณะจนกระทั่งปี 1986 แอนติเจนและแอนติบอดี Jo-1 ได้รับการระบุลักษณะในปี 1980 ^{[ 9 ] [ 21 ]}

• แอนติบอดีต่อต้านนิวโทรฟิลไซโตพลาสมิก (ANCA)
• ปัจจัยรูมาตอยด์

• Autoimmunityblog – สรุปผล ANA ของ HEp-2 เก็บถาวรเมื่อ 2024-04-25 ที่Wayback Machine
• Antinuclear+antibodiesที่ US National Library of Medicine Medical Subject Headings (MeSH)
• Greidinger EL, Hoffman, DO, Robert W. (31 มกราคม 2546). "การอัปเดต CE [เคมี | ภูมิคุ้มกันวิทยา]: การทดสอบแอนติบอดีต้านนิวเคลียร์: วิธีการ ข้อบ่งชี้ และการตีความ"เวชศาสตร์ห้องปฏิบัติการ 34 ( 2): 113– 117. doi : 10.1309/VUB90VTPMEWV3W0F .