กองเรือประกอบด้วยเรือเจ็ดลำ ได้แก่ เรือ กัลเลียสไท เกอร์ (เรือธงของเกรนวิลล์ โดยมีเฟอร์นันเดสเป็นผู้นำร่อง) เรือบินโรบัก (กัปตันคือจอห์น คลาร์ก) เรดไลออน (ภายใต้การบังคับบัญชาของจอร์จ เรย์มอนด์) เอลิซาเบธ (กัปตันคือโทมัส คาเวนดิช ) โดโรธี (เรือส่วนตัวของราลีห์ ซึ่งอาจมีกัปตันคืออาร์เธอร์ บาร์โลว์) และเรือพินเนส ขนาดเล็กอีกสอง ลำ^{[ 30 ]}

เมื่อวันที่ 9 เมษายน ค.ศ. 1585 กองเรือได้ออกจากพลีมัธมุ่งหน้าลงใต้ผ่านอ่าวบิสเคย์พายุรุนแรงนอกชายฝั่งโปรตุเกสทำให้เรือไทเกอร์ พลัดหลง จากกองเรือลำอื่นและทำให้เรือพินเนสลำหนึ่งจม โชคดีที่เฟอร์นันเดสมีแผนรับมือกับเหตุการณ์เช่นนี้ โดยเรือต่างๆ จะมาพบกันที่มอสเกทัล^{[ b ]}บนชายฝั่งทางใต้ของเปอร์โตริโกเรือไทเกอร์จึงแล่นไปเพียงลำพังด้วยความเร็วสูงไปยังทะเลแคริบเบียนและมาถึงจุดนัดพบในวันที่ 11 พฤษภาคม ก่อนเรือลำอื่นๆ^{[ 34 ]}

ขณะรอเรือใหญ่ เกรนวิลล์ได้ตั้งค่ายฐานขึ้น ซึ่งลูกเรือของเขาสามารถพักผ่อนและป้องกันตนเองจากกองกำลังสเปนได้ ลูกเรือของเลนใช้โอกาสนี้เป็นการฝึกฝนการสร้างป้อมปราการที่จำเป็นในอาณานิคมใหม่ ลูกเรือยังเริ่มสร้างเรือใหม่เพื่อทดแทนเรือพินเนสที่หายไป โดยตีตะปูและเลื่อยไม้ในท้องถิ่นเพื่อสร้างเรือลำใหม่^{[ 34 ]} เรือ เอลิซาเบธมาถึงในวันที่ 19 พฤษภาคม ไม่นานหลังจากที่ป้อมและเรือพินเนสสร้างเสร็จ^{[ 35 ] [ 36 ]}

กองเรือที่เหลือไม่เคยมาถึงโมสเกทัล อย่างน้อยหนึ่งลำประสบปัญหาใกล้จาเมกาและเสบียงหมด ทำให้กัปตันต้องส่งลูกเรือ 20 คนขึ้นฝั่ง ในที่สุดโรบักเรดไลออนและโดโรธีก็เดินทางต่อไปยังเอาเตอร์แบงก์โดยมาถึงกลางเดือนมิถุนายนเรดไลออนทิ้งลูกเรือประมาณ 30 คนไว้บนเกาะโครอาโตอันและออกเดินทางไปปล้นสะดมในนิวฟาวนด์แลนด์ ในขณะเดียวกัน เกรนวิลล์ได้ติดต่อกับทางการสเปนในท้องถิ่น โดยหวังว่าจะได้รับเสบียงใหม่ เมื่อสเปนไม่ส่งมอบเสบียงตามที่สัญญาไว้ เกรนวิลล์สงสัยว่าพวกเขาจะโจมตีในไม่ช้า ดังนั้นเขาและเรือของเขาจึงละทิ้งป้อมชั่วคราว^{[ 37 ]}

เกรนวิลล์ยึดเรือสเปนได้สองลำในช่องแคบโมนาและเพิ่มเข้าไปในกองเรือของเขา เลนนำเรือลำหนึ่งไปยังอ่าวซาลินาสซึ่งเขาได้ยึดกองเกลือที่ชาวสเปนรวบรวมไว้ เลนสร้างป้อมปราการขึ้นอีกครั้งเพื่อปกป้องลูกเรือของเขาขณะที่พวกเขานำเกลือขึ้นเรือ จากนั้นเรือของเกรนวิลล์ก็แล่นไปยังลาอิซาเบลา  ซึ่งชาวสเปนได้ยุติการสู้รบเพื่อทำการค้ากับกองเรืออังกฤษที่มีอาวุธครบครัน ในวันที่ 7 มิถุนายน เกรนวิลล์ออกจาก ฮิสปานิโอลาเพื่อเดินทางต่อไปยังเอาเตอร์แบงก์ส^{[ 38 ]}

กองเรือแล่นผ่านอ่าวที่เกาะวอโคคอน (ใกล้กับ อ่าวโอคราโคกในปัจจุบัน) เมื่อวันที่ 26 มิถุนายนเรือไทเกอร์ชน กับ สันดอนทำให้เสบียงอาหารส่วนใหญ่เสียหายและเกือบจะทำลายเรือ^{[ 39 ]}มีข้อบ่งชี้ว่ากองเรือของเกรนวิลล์ควรจะใช้เวลาฤดูหนาวกับอาณานิคมใหม่ บางทีอาจจะเริ่มใช้เป็นฐานโจรสลัดทันที อย่างไรก็ตาม ซากเรือไทเกอร์ทำให้เป็นไปไม่ได้ เสบียงที่เหลืออยู่ไม่สามารถรองรับการตั้งถิ่นฐานขนาดใหญ่ตามที่วางแผนไว้ได้ ยิ่งไปกว่านั้น อ่าวตื้นๆ ของเอาเตอร์แบงก์ทำให้ภูมิภาคนี้ไม่เหมาะสมที่จะใช้เป็นฐานสำหรับเรือขนาดใหญ่ สิ่งสำคัญที่สุดของอาณานิคมในขณะนี้คือการหาท่าเรือที่ดีกว่า^{[ 40 ]}

หลังจากซ่อมแซมเสร็จไทเกอร์ก็เดินทางต่อไปยังท่าเรือเฟอร์ดินานโดพร้อมกับกองเรือที่เหลือ ซึ่งพวกเขาได้พบกับโรบักและโดโรธี อีกครั้ง คาดว่า ลูกเรือที่เรดไลออน ทิ้งไว้ ก็ถูกพบตัวในช่วงเวลานี้เช่นกัน^{[ 41 ]}ในวันที่ 5 สิงหาคม จอห์น อารันเดลล์ ได้รับคำสั่งให้บังคับบัญชาเรือลำหนึ่งที่แล่นเร็วที่สุดและออกเดินทางไปยังอังกฤษ เพื่อรายงานการมาถึงอย่างปลอดภัยของคณะสำรวจ^{[ 42 ]}

การสูญเสียเสบียงจากเรือไทเกอร์หมายความว่าอาณานิคมจะต้องรองรับผู้ตั้งถิ่นฐานน้อยกว่าที่วางแผนไว้แต่เดิมมาก เกรนวิลล์ตัดสินใจว่าจะมีเพียงประมาณ 100 คนเท่านั้นที่จะอยู่กับเลน ซึ่งน่าจะเพียงพอที่จะบรรลุเป้าหมายของอาณานิคมจนกว่ากองเรืออีกชุดหนึ่งซึ่งมีกำหนดออกจากอังกฤษในเดือนมิถุนายน ค.ศ. 1585 จะสามารถส่งมอบผู้ตั้งถิ่นฐานและเสบียงชุดที่สองได้^{[ 43 ]}อย่างไรก็ตาม เกรนวิลล์ไม่ทราบว่าการเดินทางครั้งนี้ถูกเปลี่ยนเส้นทางไปยังนิวฟาวนด์แลนด์ เพื่อแจ้งเตือนกองเรือประมงว่าชาวสเปนได้เริ่มยึดเรือพาณิชย์ของอังกฤษเพื่อตอบโต้การโจมตีของโจรสลัดอังกฤษ^{[ 44 ]}จนกว่าจะมีการจัดภารกิจส่งเสบียง อาณานิคมของเลนจะต้องพึ่งพาความเอื้อเฟื้อเผื่อแผ่ของชาวพื้นเมืองเป็นอย่างมาก^{[ 45 ]}

ขณะที่เรือไทเกอร์อยู่ระหว่างการซ่อมแซม เกรนวิลล์ได้จัดคณะสำรวจเพื่อสำรวจอ่าวแพมลิโกและหมู่บ้านเซโคตัน ได้แก่อัคสโคโกกแพมลิโกและเซโคตัน คณะของเขาได้ติดต่อกับชาวพื้นเมือง ทำให้แฮร์ริออตและไวท์มีโอกาสได้ศึกษาเกี่ยวกับสังคมของชนพื้นเมืองอเมริกันอย่างกว้างขวาง^{[ 46 ]}แม้ว่างานวิจัยส่วนใหญ่ของพวกเขาจะไม่รอดพ้นจากการอพยพออกจากอาณานิคมในปี 1586 แต่การสำรวจอย่างละเอียดของแฮร์ริออตเกี่ยวกับประชากรและทรัพยากรธรรมชาติของเวอร์จิเนียได้รับการตีพิมพ์ในปี 1588 โดยมีภาพประกอบของไวท์รวมอยู่ในฉบับปี 1590 ^{[ 47 ] [ 48 ]}

หลังจากการสำรวจเบื้องต้นนี้ มีรายงานว่าถ้วยเงินหายไป เกรนวิลล์เชื่อว่าสิ่งของนั้นถูกขโมย จึงส่งอมาดาสนำกองกำลังกลับไปยังอควาสโกโกกเพื่อเรียกร้องให้ส่งคืนทรัพย์สินที่หายไป เมื่อชาวบ้านไม่นำถ้วยออกมา ชาวอังกฤษจึงตัดสินใจว่าจำเป็นต้องมีการแก้แค้นอย่างรุนแรงเพื่อไม่ให้ดูอ่อนแอ อมาดาสและคนของเขาเผาเมืองและพืชผลทั้งหมด ทำให้ชาวพื้นเมืองต้องหนีไป^{[ 49 ] [ 50 ]}

Manteo จัดการประชุมให้ Grenville และ Lane พบกับ Granganimeo เพื่อจัดหาที่ดินสำหรับการตั้งถิ่นฐานของชาวอังกฤษบนเกาะ Roanoke ทั้งสองฝ่ายเห็นพ้องต้องกันว่าเกาะนี้ตั้งอยู่ในตำแหน่งยุทธศาสตร์ที่สามารถเข้าถึงมหาสมุทรได้ และเพื่อหลีกเลี่ยงการถูกตรวจพบจากหน่วยลาดตระเวนของสเปน Lane เริ่มก่อสร้างป้อมปราการทางด้านเหนือของเกาะ^{[ 51 ]}ไม่มีภาพวาดของป้อม Roanoke หลงเหลืออยู่ แต่คาดว่าโครงสร้างน่าจะคล้ายกับป้อมที่ Mosquetal ^{[ 52 ]}

เกรนวิลล์ออกเดินทางไปยังอังกฤษบนเรือไทเกอร์เมื่อวันที่ 25 สิงหาคม ค.ศ. 1585 ไม่กี่วันต่อมา ในเบอร์มูดา เกรนวิลล์ได้โจมตี เรือสินค้าสเปนขนาดใหญ่ชื่อซานตามาเรียเดซานวิเซนเตซึ่งพลัดหลงจากกองเรือที่เหลือ^{[ 53 ]}เรือสินค้าลำนี้ซึ่งเกรนวิลล์ยึดกลับไปอังกฤษเป็นของรางวัล บรรทุกสมบัติมากมายจนทำให้การเดินทางสำรวจโรอาโนกทั้งหมดได้กำไร สร้างความตื่นเต้นในราชสำนักของสมเด็จพระราชินีนาถเอลิซาเบธเกี่ยวกับความพยายามในการตั้งอาณานิคมของราลีห์^{[ 54 ]}

เรือโรบักออกจากโรอาโนกเมื่อวันที่ 8 กันยายน ค.ศ. 1585 โดยทิ้งเรือพินเนสลำหนึ่งไว้ภายใต้การบังคับบัญชาของอามาดาส^{[ 55 ]}บันทึกระบุว่ามีชาย 107  คนยังคงอยู่กับเลนที่อาณานิคม อย่างไรก็ตาม นักประวัติศาสตร์มีความเห็นไม่ตรงกันว่าไวท์กลับไปอังกฤษกับเกรนวิลล์หรือไม่ หรือใช้เวลาฤดูหนาวอยู่ที่โรอาโนก แม้ว่าจะไม่มีชื่อเขาอยู่ในรายชื่อผู้ตั้งถิ่นฐานก็ตาม^{[ 56 ] [ 57 ]}

ชาวอาณานิคมจำนวนมากเข้าร่วมภารกิจโดยคาดหวังว่าจะค้นพบแหล่งทองคำและเงิน เมื่อไม่พบแหล่งดังกล่าว ชายเหล่านี้ก็หมดกำลังใจและตัดสินใจว่าการดำเนินการทั้งหมดเป็นการเสียเวลาเปล่า ชาวอังกฤษยังค้นคว้าว่าชาวพื้นเมืองอเมริกันในท้องถิ่นได้รับทองแดงมาจากที่ใด แต่ในที่สุดก็ไม่สามารถติดตามแหล่งที่มาของโลหะได้^{[ 58 ]}ชาวอาณานิคมใช้เวลาในฤดูใบไม้ร่วงปี 1585 ในการจัดหาข้าวโพดจากหมู่บ้านใกล้เคียงเพื่อเสริมเสบียงที่มีอยู่อย่างจำกัด ดูเหมือนว่าอาณานิคมจะได้รับข้าวโพดเพียงพอ (พร้อมกับเนื้อกวาง ปลา และหอยนางรม) เพื่อเลี้ยงชีพตลอดฤดูหนาว^{[ 59 ]}อย่างไรก็ตาม มีข้อมูลเพียงเล็กน้อยเกี่ยวกับสิ่งที่เกิดขึ้นในอาณานิคมระหว่างเดือนกันยายน 1585 ถึงเดือนมีนาคม 1586 ทำให้ไม่สามารถประเมินสถานการณ์ในฤดูหนาวได้อย่างครบถ้วน^{[ 60 ]}ชาวอาณานิคมน่าจะใช้เสบียงของอังกฤษและข้าวโพดของอเมริกาหมดภายในเดือนตุลาคม และความซ้ำซากจำเจของแหล่งอาหารที่เหลืออยู่ก็ส่งผลให้ขวัญกำลังใจของชายเหล่านั้นตกต่ำอย่างไม่ต้องสงสัย^{[ 61 ]}

อมาดาสใช้เวลาช่วงฤดูหนาวสำรวจอ่าวเชซาพีคเดินทางไกลถึงแหลมเฮนรีและแม่น้ำเจมส์ระหว่างนั้นคณะของเขาได้ติดต่อกับ หมู่บ้าน เชซาพีคได้แก่ เชเซปิอ็อกและสกีโคแอก ชาวเซโคตันได้บรรยายว่าสกีโคแอกเป็นเมืองที่ใหญ่ที่สุดในภูมิภาค ซึ่งอาจทำให้ชาวอังกฤษคาดหวังว่าจะเป็นอาณาจักรที่ร่ำรวยคล้ายกับ อาณาจักร อินคาและแอซเท็กที่ชาวสเปนเคยพบเจอ อมาดาสกลับพบว่าเป็นเพียงชุมชนเล็กๆ แม้ว่าเขาจะประทับใจกับสภาพอากาศและคุณภาพของดิน ในพื้นที่นั้น ก็ตาม^{[ 62 ]}แฮร์ริออตและแกนส์สำรวจดินแดนเวอร์จิเนีย พบปะกับชนเผ่าพื้นเมืองอเมริกัน และสำรวจทรัพยากรธรรมชาติ ระหว่างการเดินทาง แฮร์ริออตและผู้ช่วยของเขาได้รวบรวมข้อมูลที่จะนำไปใช้ในการสร้างแผนที่La Virginea Pars ของไวท์ในที่สุด ^{[ 63 ]}

แม้ว่าวิทยาศาสตร์ในศตวรรษที่ 16 จะไม่สามารถอธิบายปรากฏการณ์นี้ได้ แต่แฮร์ริออตสังเกตเห็นว่าเมืองแต่ละแห่งที่ผู้ตั้งถิ่นฐานไปเยือนนั้นประสบกับโรคระบาดร้ายแรงอย่างรวดเร็ว ซึ่งอาจเป็นไข้หวัดใหญ่หรือฝีดาษ ชาวเซโคตันบางคนสงสัยว่าโรคนี้เกิดจากพลังเหนือธรรมชาติที่ชาวอังกฤษปลดปล่อยออกมา^{[ 64 ]}เมื่อวิงกินาป่วย คนของเขาเองไม่สามารถรักษาเขาได้ แต่เขากลับหายดีหลังจากขอให้ชาวอังกฤษสวดภาวนาให้ ด้วยความประทับใจ วิงกินาจึงขอให้ผู้ตั้งถิ่นฐานแบ่งปันพลังนี้กับชุมชนอื่นๆ ที่ได้รับผลกระทบ ซึ่งกลับยิ่งเร่งให้โรคแพร่กระจาย โรคระบาดน่าจะส่งผลกระทบอย่างรุนแรงต่อการเก็บเกี่ยวในฤดูใบไม้ร่วง ในช่วงเวลาที่อาณานิคมของเลนต้องพึ่งพาเพื่อนบ้านอย่างมากเพื่อเสริมเสบียงอาหารที่มีอยู่อย่างจำกัด^{[ 65 ] [ 66 ]}

เมื่อถึงฤดูใบไม้ผลิ ความสัมพันธ์ระหว่างชาวเซโคตันและอาณานิคมก็ตึงเครียดขึ้น ซึ่งน่าจะเป็นเพราะอาณานิคมพึ่งพาอาหารจากชาวเซโคตันมากเกินไป การเสียชีวิตของกรานกานิเมโอ ผู้ซึ่งเป็นผู้สนับสนุนอาณานิคมอย่างแข็งขัน ดูเหมือนจะช่วยทำให้วิงกินาหันมาต่อต้านอังกฤษ วิงกินาเปลี่ยนชื่อเป็น "เปมิซาปัน" ("ผู้เฝ้าดู") ซึ่งบ่งบอกถึงนโยบายที่ระมัดระวังและตื่นตัวมากขึ้น และได้ก่อตั้งเมืองหลวงชั่วคราวแห่งใหม่ของชนเผ่าบนเกาะโรอาโนก ในตอนแรกอังกฤษไม่ได้ตระหนักว่าการพัฒนาเหล่านี้เป็นภัยคุกคามต่อผลประโยชน์ของพวกเขา^{[ 67 ]}

ในเดือนมีนาคม เลนได้ปรึกษากับเพมิซาปันเกี่ยวกับแผนการสำรวจแผ่นดินใหญ่ที่อยู่นอกเหนืออาณาเขตของเซโคตัน เพมิซาปันสนับสนุนแผนดังกล่าวและแนะนำเลนว่า เมนาโทนอนผู้นำ ชาวโชวาโนเกะกำลังประชุมกับพันธมิตรเพื่อวางแผนโจมตีชาวอังกฤษ และมีนักรบสามพันคนมารวมตัวกันที่โชอาโนแอค ในเวลาเดียวกัน เพมิซาปันได้ส่งข่าวไปยังเมนาโทนอนว่าชาวอังกฤษกำลังจะมา เพื่อให้แน่ใจว่าทั้งสองฝ่ายจะคาดหวังการสู้รบ เมื่อคณะของเลนซึ่งติดอาวุธครบครันมาถึงโชอาโนแอค เขาพบตัวแทนของชาวโชวาโนเกะ แมงโกแอค วีเพเมอ็อกและโมราตุค เนื่องจากกลุ่มนี้ไม่ได้วางแผนโจมตี เลนจึงโจมตีพวกเขาโดยไม่ทันตั้งตัว เขาจับเมนาโทนอนได้อย่างง่ายดาย ซึ่งเมนาโทนอนแจ้งให้เขาทราบว่าเพมิซาปันเป็นผู้ร้องขอการประชุมตั้งแต่แรก^{[ 68 ] [ 69 ] [ 70 ]}

เมนาโทนอนได้รับความไว้วางใจจากเลนอย่างรวดเร็วโดยการเสนอข้อมูลเกี่ยวกับโอกาสที่ทำกำไรได้ในดินแดนที่ชาวอังกฤษยังไม่ค้นพบ เขาบรรยายถึงกษัตริย์ผู้มั่งคั่งและทรงอำนาจทางตะวันออกเฉียงเหนือ (สันนิษฐานว่าเป็นผู้นำของชาวพาวฮาตัน ) และเตือนว่าเลนควรนำกองกำลังจำนวนมากมาด้วยหากต้องการติดต่อ เมนาโทนอนยังยืนยันข่าวลือที่เลนได้ยินเกี่ยวกับทะเลที่อยู่เลยต้นน้ำของแม่น้ำโรอาโนกซึ่งดูเหมือนจะยืนยันความหวังของชาวอังกฤษที่จะเข้าถึงมหาสมุทรแปซิฟิก ลูกชายของหัวหน้าเผ่าชื่อสกิโกบรรยายถึงสถานที่ทางตะวันตกที่เรียกว่า "เชานิส เทโมอาตัน" ซึ่งอุดมไปด้วยโลหะมีค่า ซึ่งเลนคิดว่าอาจเป็นทองแดงหรืออาจเป็นทองคำด้วยซ้ำ^{[ 71 ]}

จากข้อมูลนี้ เลนได้วางแผนอย่างละเอียดโดยแบ่งกำลังออกเป็นสองกลุ่ม กลุ่มหนึ่งเดินทางขึ้นเหนือไปตามแม่น้ำโชวัน อีกกลุ่มหนึ่งเดินทางไปตามชายฝั่งมหาสมุทรแอตแลนติกเพื่อตั้งถิ่นฐานใหม่ที่อ่าวเชซาพีค อย่างไรก็ตาม เขาตัดสินใจเลื่อนภารกิจนี้ออกไปจนกว่าอาณานิคมจะได้รับเสบียงใหม่ ซึ่งเกรนวิลล์ได้สัญญาว่าจะมาถึงภายในวันอีสเตอร์^{[ 72 ] [ 73 ]}ในระหว่างนี้ เลนได้ไถ่ตัวเมนาโทนอนและส่งสกีโกกลับไปยังโรอาโนกในฐานะตัวประกัน เขาเดินทางต่อไปพร้อมกับทหาร 40 นายเป็นระยะทางประมาณ100 ไมล์ (160 กิโลเมตร)ขึ้นไปตามแม่น้ำโรอาโนกเพื่อค้นหาเชานิส เทโมตัน แต่พวกเขาพบเพียงหมู่บ้านร้างและนักรบที่ซุ่มโจมตีอยู่^{[ 74 ]}เลนคาดหวังว่าโมราตุคจะจัดหาเสบียงให้เขาตามเส้นทาง แต่เพมิซาปันได้ส่งข่าวมาว่าชาวอังกฤษเป็นศัตรูและชาวบ้านควรถอนตัวออกจากแม่น้ำพร้อมกับอาหารของพวกเขา^{[ 75 ]} 

เลนและคณะเดินทางกลับมายังอาณานิคมไม่นานหลังจากเทศกาลอีสเตอร์ โดยอยู่ในสภาพอดอยากและมือเปล่า ในช่วงที่พวกเขาไม่อยู่ มีข่าวลือแพร่กระจายว่าพวกเขาถูกฆ่าตาย และเพมิซาปันกำลังเตรียมที่จะถอนเรือเซโคตันออกจากเกาะโรอาโนกและปล่อยให้อาณานิคมอดอยาก ไม่มีวี่แววของกองเรือส่งเสบียงของเกรนวิลล์ ซึ่งยังไม่ได้ออกจากอังกฤษเลยด้วยซ้ำ ตามคำบอกเล่าของเลน เพมิซาปันประหลาดใจมากที่เลนกลับมามีชีวิตจากภารกิจที่แม่น้ำโรอาโนก เขาจึงทบทวนแผนการของเขาใหม่ เอนเซนอร์ ผู้อาวุโสในสภาของเพมิซาปัน โต้แย้งสนับสนุนฝ่ายอังกฤษ ต่อมา ทูตจากเมนาโทนอนแจ้งให้เลนทราบว่าโอคิสโก ผู้นำวีเพเมอ็อก ได้ให้คำสัตย์ปฏิญาณต่อสมเด็จพระราชินีเอลิซาเบธและเซอร์วอลเตอร์ ราลี การเปลี่ยนแปลงดุลอำนาจในภูมิภาคนี้ทำให้เพมิซาปันล้มเลิกแผนการที่จะโจมตีอาณานิคม เขาจึงสั่งให้คนของเขาปลูกพืชและสร้างเขื่อนจับปลาสำหรับผู้ตั้งถิ่นฐาน แทน ^{[ 76 ]}

ข้อตกลงที่ต่ออายุระหว่างชาวอังกฤษและชาวเซโคตันมีอายุสั้น ในวันที่ 20 เมษายน เอนเซนอร์เสียชีวิต ทำให้สูญเสียผู้สนับสนุนคนสุดท้ายในวงในของเพมิซาปัน วานเชสได้ก้าวขึ้นมาเป็นที่ปรึกษาอาวุโส และช่วงเวลาที่เขาอยู่กับชาวอังกฤษทำให้เขามั่นใจว่าพวกเขาเป็นภัยคุกคาม เพมิซาปันจึงอพยพชาวเซโคตันออกจากโรอาโนก ทำลายเขื่อนดักปลา และสั่งห้ามไม่ให้พวกเขาขายอาหารให้กับชาวอังกฤษ เมื่อปล่อยให้ชาวอังกฤษจัดการเอง พวกเขาก็ไม่มีวิธีที่จะผลิตอาหารให้เพียงพอสำหรับเลี้ยงอาณานิคม เลนสั่งให้คนของเขาแยกออกเป็นกลุ่มเล็กๆ เพื่อหาอาหารและขอทานในบริเวณเอาเตอร์แบงก์และแผ่นดินใหญ่^{[ 77 ]}

เลนยังคงกักขังสกิโกไว้เป็นตัวประกัน แม้ว่าเพมิซาปันจะพบกับสกิโกเป็นประจำและเชื่อว่าเขามีความเห็นอกเห็นใจต่อฝ่ายต่อต้านอังกฤษ แต่สกิโกก็พยายามรักษาเจตนารมณ์ของบิดาในการรักษาความสัมพันธ์กับอาณานิคม สกิโกแจ้งเลนว่าเพมิซาปันวางแผนที่จะจัดการประชุมสภาสงครามในวันที่ 10 มิถุนายน โดยมีมหาอำนาจระดับภูมิภาคต่างๆ เข้าร่วม ด้วยทองแดงที่ชาวเซโคตันได้รับจากการค้าขายกับอาณานิคม เพมิซาปันจึงสามารถเสนอสิ่งจูงใจจำนวนมากแก่ชนเผ่าอื่นๆ ให้เข้าร่วมกับเขาในการโจมตีครั้งสุดท้ายต่ออังกฤษ อ็อกซิโกปฏิเสธที่จะเข้าร่วม แม้ว่าวีเพมีอ็อกแต่ละคนจะได้รับอนุญาตให้เข้าร่วมได้ แผนการโจมตีคือการซุ่มโจมตีเลนและผู้นำคนสำคัญคนอื่นๆ ขณะที่พวกเขานอนหลับอยู่ในอาณานิคม จากนั้นจึงส่งสัญญาณให้โจมตีคนอื่นๆ ทั้งหมด จากข้อมูลนี้ เลนจึงส่งข้อมูลเท็จไปยังชาวเซโคตันโดยระบุว่ากองเรืออังกฤษได้มาถึงแล้ว เพื่อบีบให้เพมิซาปันต้องยอมทำตาม^{[ 78 ]}

เนื่องจากมีความเป็นไปได้ที่จะมีการเสริมกำลังจากอังกฤษ เพมิซาปันจึงเร่งกำหนดการของเขาและรวบรวมพันธมิตรให้ได้มากที่สุดเท่าที่จะทำได้เพื่อการประชุมในวันที่ 31 พฤษภาคมที่ดาซามองกูปองเก ในเย็นวันนั้น เลนได้โจมตีนักรบที่ประจำการอยู่ที่โรอาโนก โดยหวังว่าจะป้องกันไม่ให้พวกเขาแจ้งเตือนแผ่นดินใหญ่ในเช้าวันรุ่งขึ้น ในวันที่ 1 มิถุนายน เลน นายทหารระดับสูงของเขา และทหารอีก 25 นายได้ไปเยือนดาซามองกูปองเกโดยอ้างว่าจะหารือเกี่ยวกับการพยายามปลดปล่อยสกิโกของชาวเซโคตัน เมื่อพวกเขาได้รับอนุญาตให้เข้าไปในสภา เลนได้ให้สัญญาณให้คนของเขาโจมตี เพมิซาปันถูกยิงและหนีเข้าไปในป่า แต่คนของเลนก็ไล่ตามเขาทันและนำศีรษะที่ถูกตัดของเขากลับมา^{[ 79 ]}ศีรษะถูกเสียบไว้ด้านนอกป้อมของอาณานิคม^{[ 80 ]}

ในเดือนมิถุนายน ชาวอาณานิคมได้ติดต่อกับกองเรือของเซอร์ฟรานซิส เดรกซึ่งกำลังเดินทางกลับอังกฤษหลังจากประสบความสำเร็จในการรบที่ซานโตโดมิงโกการ์ตาเฮนาและเซนต์ออกัสติน [ ^{81 ] ระหว่าง}การโจมตีเหล่านี้ เดรกได้รวบรวมผู้ลี้ภัย ทาส และเครื่องมือต่างๆ โดยมีเจตนาที่จะส่งมอบให้กับอาณานิคมของราลีห์ เมื่อทราบถึงความโชคร้ายของอาณานิคม เดรกจึงตกลงที่จะทิ้งเสบียงไว้สี่เดือนและเรือลำหนึ่งของเขาคือเรือฟรานซิสอย่างไรก็ตามพายุเฮอ ริเคน ได้พัดถล่มเอาเตอร์แบงก์ ทำให้เรือฟรานซิส ถูกพัด ออกสู่ทะเล^{[ 82 ]}

หลังพายุสงบ เลนได้ชักชวนให้คนของเขาอพยพออกจากอาณานิคม และเดรกตกลงที่จะพาพวกเขากลับไปยังอังกฤษ แมนทีโอและเพื่อนร่วมงานของเขา โทเวย์ ได้เข้าร่วมกับพวกเขาด้วย อาณานิคมของเลนสามคนถูกทิ้งไว้ข้างหลังและไม่มีใครได้ยินข่าวคราวของพวกเขาอีกเลย เนื่องจากอาณานิคมถูกทิ้งร้าง จึงไม่ชัดเจนว่าเกิดอะไรขึ้นกับทาสและผู้ลี้ภัยที่เดรกตั้งใจจะนำไปไว้ที่นั่น ไม่มีบันทึกว่าพวกเขาเดินทางมาถึงอังกฤษพร้อมกับกองเรือ และเป็นไปได้ว่าเดรกอาจทิ้งพวกเขาไว้ที่โรอาโนกพร้อมกับสินค้าบางส่วนที่เขาเคยเตรียมไว้ให้เลนก่อนหน้านี้[ ^{83 ] กอง}เรือของเดรกพร้อมกับอาณานิคมของเลนเดินทางถึงอังกฤษในเดือนกรกฎาคม ค.ศ. 1586 ^{[ 84 ]}เมื่อมาถึง อาณานิคมได้นำยาสูบข้าวโพดและมันฝรั่งมาสู่อังกฤษ^{[ 85 ]}

เรือเสบียงเพียงลำเดียวที่ส่งโดยราลีห์มาถึงโรอาโนกเพียงไม่กี่วันหลังจากที่เดรกอพยพออกจากอาณานิคม ลูกเรือไม่พบร่องรอยของชาวอาณานิคมและจึงจากไป สองสัปดาห์ต่อมา กองเรือบรรเทาทุกข์ของเกรนวิลล์ก็มาถึงพร้อมเสบียงเพียงพอสำหรับหนึ่งปีและกำลังเสริม 400 นาย เกรนวิลล์ทำการค้นหาอย่างกว้างขวางและสอบปากคำชาวพื้นเมืองสามคน ซึ่งในที่สุดหนึ่งในนั้นก็เล่าเรื่องราวการอพยพ^{[ 86 ]}กองเรือกลับไปยังอังกฤษ โดยทิ้งกองกำลังเล็กๆ จำนวน 15 นายไว้เพื่อรักษาการปรากฏตัวของอังกฤษและเพื่อปกป้องการอ้างสิทธิ์ของราลีห์ในเกาะโรอาโนก^{[ 87 ]}

ตามบันทึกของชาวโครอาตัน กองกำลังนี้ถูกโจมตีโดยพันธมิตรของชนเผ่าบนแผ่นดินใหญ่ไม่นานหลังจากที่กองเรือของเกรนวิลล์ออกไป ชาวอังกฤษ 5 คนออกไปเก็บหอยนางรม เมื่อผู้โจมตี 2 คนซึ่งดูเหมือนจะไม่มีอาวุธ เข้ามาใกล้ค่ายพักแรมและขอพบกับชาวอังกฤษ 2 คนอย่างสันติ ชาวพื้นเมืองอเมริกันคนหนึ่งซ่อนดาบไม้ไว้ ซึ่งเขาใช้มันฆ่าชาวอังกฤษคนหนึ่ง ผู้โจมตีอีก 28 คนเปิดเผยตัว แต่ชาวอังกฤษอีกคนหนึ่งหนีรอดไปได้เพื่อเตือนหน่วยของเขา ชาวพื้นเมืองจุดไฟเผาบ้านที่ชาวอังกฤษเก็บเสบียงอาหาร ทำให้ผู้ชายต้องหยิบอาวุธใดๆ ก็ตามที่อยู่ใกล้ตัว ชาวอังกฤษคนที่สองถูกฆ่าตาย ส่วนอีก 9 คนที่เหลือถอยกลับไปที่ชายฝั่งและหนีออกจากเกาะด้วยเรือ พวกเขาพบเพื่อนร่วมชาติ 4 คนที่กำลังกลับมาจากลำคลอง จึงรับพวกเขาขึ้นเรือและเดินทางต่อไปยังเกาะเล็กๆ ใกล้ทางเข้าท่าเรือแฮทเทอรัส ผู้รอดชีวิตทั้ง 13 คนไม่เคยถูกพบเห็นอีกเลย^{[ 88 ]}

หลังจากการเดินทางที่ยากลำบาก ไวท์กลับมาถึงอังกฤษในวันที่ 5 พฤศจิกายน ค.ศ. 1587 ^{[ 109 ]}ในเวลานั้น มีรายงานเกี่ยวกับการระดมพลของกองเรือสเปนเพื่อโจมตีมาถึงลอนดอน และสมเด็จพระราชินีเอลิซาเบธทรงห้ามเรือที่สามารถออกจากอังกฤษได้ เพื่อที่พวกเขาจะได้เข้าร่วมในการรบที่จะเกิดขึ้น^{[ 110 ] [ 106 ]}

ในช่วงฤดูหนาว เกรนวิลล์ได้รับอนุญาตให้นำกองเรือเข้าสู่ทะเลแคริบเบียนเพื่อโจมตีสเปน และไวท์ได้รับอนุญาตให้ร่วมเดินทางไปกับเขาในเรือส่งเสบียง กองเรือมีกำหนดออกเดินทางในเดือนมีนาคม ค.ศ. 1588 แต่ลมที่ไม่เอื้ออำนวยทำให้พวกเขาต้องจอดอยู่ที่ท่าเรือจนกระทั่งเกรนวิลล์ได้รับคำสั่งใหม่ให้อยู่และป้องกันอังกฤษ เรือขนาดเล็กสองลำในกองเรือของเกรนวิลล์ คือ เรือเบรฟและเรือโรถูกพิจารณาว่าไม่เหมาะสมสำหรับการรบ และไวท์ได้รับอนุญาตให้นำเรือเหล่านั้นไปยังโรอาโนก เรือออกเดินทางในวันที่ 22 เมษายน แต่กัปตันเรือพยายามยึดเรือสเปนหลายลำระหว่างการเดินทางขาออก (เพื่อเพิ่มผลกำไร) ^{[ 111 ] [ 112 ]}ในวันที่ 6 พฤษภาคม พวกเขาถูกโจมตีโดย กะลาสีเรือ ชาวฝรั่งเศส (หรือโจรสลัด ) ใกล้กับโมร็อกโก ลูกเรือเกือบสองโหลถูกฆ่า และเสบียงที่มุ่งหน้าไปยังโรอาโนกถูกปล้น ทำให้เรือต้องกลับไปยังอังกฤษ^{[ 113 ]}

หลังจากการพ่ายแพ้ของกองเรืออาร์มาดาสเปนในเดือนสิงหาคม อังกฤษยังคงห้ามการเดินเรือเพื่อมุ่งเน้นความพยายามในการจัดตั้งกองเรือตอบโต้เพื่อโจมตีสเปนในปี 1589 ไวท์จะไม่ได้รับอนุญาตให้พยายามส่งเสบียงอีกครั้งจนกระทั่งปี 1590 ^{[ 114 ]}

จักรวรรดิสเปนได้รวบรวมข้อมูลข่าวกรองเกี่ยวกับอาณานิคมโรอาโนกมาตั้งแต่เกรนวิลล์ยึดซานตามาเรียเดซานวิเซนเตได้ในปี 1585 พวกเขากลัวว่าอังกฤษจะสร้างที่หลบภัยของโจรสลัดในอเมริกาเหนือ แต่ไม่สามารถหาฐานดังกล่าวได้^{[ 115 ]}พวกเขาไม่มีเหตุผลที่จะสันนิษฐานว่าอาณานิคมของเลนถูกทิ้งร้าง หรือว่าอาณานิคมของไวท์จะตั้งอยู่ในตำแหน่งเดียวกัน^{[ 93 ]}อันที่จริง สเปนประเมินความสำเร็จของอังกฤษในเวอร์จิเนียสูงเกินไป มีข่าวลือว่าอังกฤษค้นพบภูเขาที่ทำจากเพชรและเส้นทางไปยังมหาสมุทรแปซิฟิก^{[ 116 ]}

หลังจากภารกิจลาดตระเวนล้มเหลวในปี 1587 พระเจ้าฟิลิปที่ 2 แห่งสเปนทรงมีพระราชดำรัสให้วิเซนเต กอนซาเลซค้นหาอ่าวเชซาพีคในปี 1588 กอนซาเลซไม่พบอะไรในเชซาพีค แต่ระหว่างทางกลับ เขาบังเอิญไปพบท่าเรือเฟอร์ดินานโดตามแนวชายฝั่งเอาเตอร์แบงก์ ท่าเรือดูเหมือนจะถูกทิ้งร้าง กอนซาเลซจึงจากไปโดยไม่ได้ทำการตรวจสอบอย่างละเอียด แม้ว่าชาวสเปนจะเชื่อว่ากอนซาเลซได้พบฐานลับของอังกฤษแล้ว แต่การพ่ายแพ้ของกองเรืออาร์มาดาของสเปนทำให้พระเจ้าฟิลิปไม่สามารถสั่งโจมตีฐานนั้นได้ทันที ในปี 1590 มีรายงานว่ามีการวางแผนที่จะทำลายอาณานิคมโรอาโนกและตั้งอาณานิคมของสเปนในอ่าวเชซาพีค แต่เป็นเพียงข้อมูลเท็จที่ออกแบบมาเพื่อเบี่ยงเบนความสนใจของหน่วยข่าวกรองอังกฤษ^{[ 117 ]}

ในที่สุด ราลีห์ก็จัดการให้ไวท์เดินทางไปกับเรือโจรสลัดที่จัดโดยจอห์น วัตต์ส กองเรือหกลำจะใช้เวลาในช่วงฤดูร้อนปี 1590 โจมตีฐานที่มั่นของสเปนในทะเลแคริบเบียน แต่เรือธงโฮปเวลล์และมูนไลท์จะแยกตัวออกไปเพื่อพาไวท์ไปยังอาณานิคมของเขา^{[ 114 ]}ในขณะเดียวกัน ราลีห์ก็กำลังดำเนินการโอนกิจการให้กับนักลงทุนรายใหม่^{[ 118 ]}

เรือโฮปเวลล์และมูนไลท์จอดทอดสมอที่เกาะโครอาโตอันในวัน ที่ 12 สิงหาคม แต่ไม่มีหลักฐานบ่งชี้ว่าไวท์ใช้เวลาดังกล่าวติดต่อกับชาวโครอาโตอันเพื่อขอข้อมูล ในช่วงเย็นของวันที่ 15 สิงหาคม ขณะที่จอดทอดสมออยู่ที่ปลายด้านเหนือของเกาะโครอาโตอัน ลูกเรือมองเห็นกลุ่มควันบนเกาะโรอาโนก เช้าวันรุ่งขึ้น พวกเขาตรวจสอบกลุ่มควันอีกกลุ่มหนึ่งที่ปลายด้านใต้ของเกาะโครอาโตอัน แต่ไม่พบอะไร^{[ 118 ]}คณะสำรวจของไวท์ใช้เวลาสองวันถัดมาพยายามข้ามช่องแคบแพมลิโกด้วยความยากลำบากและมีผู้เสียชีวิตจำนวนมาก ในวันที่ 17 สิงหาคม พวกเขามองเห็นไฟที่ปลายด้านเหนือของเกาะโรอาโนกและพายเรือไปทางนั้น แต่พวกเขาไปถึงเกาะหลังจากพลบค่ำและตัดสินใจที่จะไม่เสี่ยงขึ้นฝั่ง พวกเขาใช้เวลาทั้งคืนอยู่ในเรือที่จอดทอดสมอ ร้องเพลงภาษาอังกฤษด้วยความหวังว่าชาวอาณานิคมจะได้ยิน^{[ 119 ]}

ไวท์และคนอื่นๆ ขึ้นฝั่งในเช้าวันที่ 18 สิงหาคม (วันเกิดครบรอบ 3 ขวบของหลานสาวของเขา) คณะเดินทางพบรอยเท้าใหม่บนพื้นทราย แต่ไม่มีใครติดต่อมา พวกเขายังพบตัวอักษร "CRO" แกะสลักอยู่บนต้นไม้ เมื่อไปถึงบริเวณที่ตั้งอาณานิคม ไวท์สังเกตเห็นว่าบริเวณนั้นได้รับการเสริมความแข็งแกร่งด้วยรั้วไม้ใกล้ทางเข้าของรั้ว มีคำว่า "CROATOAN" แกะสลักอยู่บนเสาต้นหนึ่ง^{[ 120 ]}ไวท์มั่นใจว่าจารึกทั้งสองนี้หมายความว่าผู้ตั้งถิ่นฐานได้ย้ายไปอยู่ที่เกาะโครอาโตอันอย่างสันติ เนื่องจากพวกเขาตกลงกันไว้ในปี 1587 ว่าผู้ตั้งถิ่นฐานจะทิ้ง "สัญลักษณ์ลับ" ไว้เพื่อระบุจุดหมายปลายทาง หรือกากบาทปาเต้เป็นรหัสลับ^{[ 121 ] [ 122 ]}

ภายในรั้วไม้ คณะค้นหาพบว่าบ้านเรือนถูกรื้อถอน และสิ่งของใดๆ ที่สามารถขนย้ายได้ก็ถูกนำออกไป หีบขนาดใหญ่หลายใบ (รวมถึงหีบสามใบที่เป็นของไวท์ ซึ่งบรรจุสิ่งของที่เขาทิ้งไว้ในปี 1587) ถูกขุดขึ้นมาและถูกปล้นไป ไม่พบเรือลำใดของอาณานิคมตามแนวชายฝั่ง^{[ 123 ]}คณะค้นหากลับไปยังโฮปเวลล์ในเย็นวันนั้น และวางแผนที่จะกลับไปยังโครอาโตอันในวันรุ่งขึ้น อย่างไรก็ตาม สายสมอ ของโฮปเวลล์ขาด ทำให้เรือเหลือเพียงสายสมอและสมอที่ใช้งานได้เพียงเส้นเดียว ภารกิจค้นหาไม่สามารถดำเนินต่อไปได้เนื่องจากมีความเสี่ยงสูงที่จะเกิดเรืออับปาง มูนไลท์จึงออกเดินทางไปยังอังกฤษ แต่ลูกเรือของโฮปเวลล์ได้เสนอข้อตกลงกับไวท์ โดยที่พวกเขาจะใช้เวลาฤดูหนาวในทะเลแคริบเบียนและกลับไปยังเอาเตอร์แบงก์ในฤดูใบไม้ผลิปี 1591 อย่างไรก็ตาม แผนนี้ล้มเหลวเมื่อโฮปเวลล์ถูกพัดออกนอกเส้นทาง ทำให้พวกเขาต้องหยุดเพื่อเติมเสบียงในอะโซเรส เมื่อลมพัดจนไม่สามารถขึ้นฝั่งได้ เรือจึงถูกบังคับให้เปลี่ยนเส้นทางไปยังอังกฤษอีกครั้ง และมาถึงในวันที่ 24 ตุลาคม พ.ศ. 2433 ^{[ 124 ]}

แม้ว่าไวท์จะหาผู้ตั้งถิ่นฐานของเขาไม่พบในปี 1590 แต่รายงานของเขากลับชี้ให้เห็นว่าพวกเขาอาจย้ายที่อยู่และอาจยังมีชีวิตอยู่ อย่างไรก็ตาม การทำให้เรื่องนี้ยังคงเป็นที่สงสัยนั้นเป็นประโยชน์ต่อราลี ตราบใดที่พิสูจน์ไม่ได้ว่าผู้ตั้งถิ่นฐานเสียชีวิตแล้ว เขาก็สามารถรักษาสิทธิในการอ้างสิทธิ์ในเวอร์จิเนียได้ตามกฎหมาย^{[ 125 ]}ถึงกระนั้น ในปี 1594 มีการยื่นคำร้องเพื่อประกาศว่าอนาเนียส แดร์เสียชีวิตตามกฎหมายเพื่อให้จอห์น แดร์ บุตรชายของเขาสามารถรับมรดกได้ คำร้องดังกล่าวได้รับการอนุมัติในปี 1597 ^{[ 126 ]}

ระหว่างการเดินทางข้ามมหาสมุทรแอตแลนติกครั้งแรกของราลีในปี 1595 เขาอ้างว่ากำลังตามหาผู้ตั้งถิ่นฐานที่หายไป แม้ว่าต่อมาเขาจะยอมรับว่านี่เป็นข้อมูลที่ผิดพลาดเพื่อปกปิดการค้นหาเอลโดราโดของเขาในการเดินทางกลับ เขาแล่นเรือผ่านเอาเตอร์แบงก์ และต่อมาอ้างว่าสภาพอากาศทำให้เขาไม่สามารถขึ้นฝั่งได้^{[ 125 ]}

ต่อมา ราลีห์พยายามบังคับใช้การผูกขาด ของเขา ในเวอร์จิเนีย โดยอาศัยความเป็นไปได้ที่ชาวอาณานิคมโรอาโนกจะรอดชีวิต เมื่อราคาซัสซาฟราสพุ่งสูงขึ้น เขาให้ทุนสนับสนุนภารกิจในปี 1602 ไปยังเอาเตอร์แบงก์ โดยมีเป้าหมายที่ระบุไว้คือการค้นหาต่อไป^{[ 127 ]}การเดินทางครั้งนี้ นำโดยซามูเอล เมซ แตกต่างจากการเดินทางครั้งก่อนๆ ตรงที่ราลีห์ซื้อเรือของตัวเองและรับประกันค่าจ้างของลูกเรือ เพื่อไม่ให้พวกเขาเสียสมาธิไปกับการปล้นสะดม^{[ 128 ]}อย่างไรก็ตาม กำหนดการเดินทางและบัญชีรายชื่อสินค้าของเรือบ่งชี้ว่าลำดับความสำคัญสูงสุดของราลีห์คือการเก็บเกี่ยวซัสซาฟราสทางใต้ของเกาะโครอาโตอัน เมื่อเมซเข้าใกล้แฮตเทอรัส สภาพอากาศเลวร้ายทำให้พวกเขาไม่สามารถอยู่ในพื้นที่นั้นได้นาน^{[ 129 ]}ในปี 1603 ราลีห์ถูกกล่าวหาว่ามีส่วนเกี่ยวข้องกับแผนการหลักและถูกจับกุมในข้อหากบฏต่อพระเจ้าเจมส์ซึ่งเป็นการสิ้นสุดกฎบัตรเวอร์จิเนียของเขาอย่างมีประสิทธิภาพ^{[ 130 ]}

ในปี ค.ศ. 1603 มีการเดินทางสำรวจครั้งสุดท้ายโดยมีจุดประสงค์เพื่อค้นหาผู้ตั้งถิ่นฐานโรอาโนก นำโดยบาร์โธโลมิว กิลเบิร์ตจุดหมายปลายทางที่ตั้งใจไว้คืออ่าวเชซาพีค แต่สภาพอากาศเลวร้ายทำให้พวกเขาต้องขึ้นฝั่งในสถานที่ที่ไม่ระบุแน่ชัดใกล้ๆ บริเวณนั้น ทีมที่ขึ้นฝั่ง รวมทั้งกิลเบิร์ตเอง ถูกกลุ่มชนพื้นเมืองอเมริกันฆ่าตายด้วยเหตุผลที่ไม่ทราบสาเหตุในวันที่ 29 กรกฎาคม ลูกเรือที่เหลือจึงต้องเดินทางกลับอังกฤษมือเปล่า^{[ 131 ]}

หลังจากการก่อตั้ง ถิ่นฐาน เจมส์ทาวน์ในปี 1607 จอห์น สมิธถูกจับโดยชาวพาวฮาตันและได้พบกับผู้นำของพวกเขา คือ วาฮุนเซ นาคาว (มักถูกเรียกว่า "หัวหน้าพาวฮาตัน") และโอเปชันคาโนห์ น้องชายของเขา พวกเขาบรรยายถึงสถานที่แห่งหนึ่งชื่อ "โอคานาโฮนัน" ซึ่งผู้ชายสวมเสื้อผ้าสไตล์ยุโรป และ "อะโนน" ซึ่งมีบ้านที่มีกำแพงล้อมรอบ ต่อมาหลังจากที่สมิธกลับไปยังอาณานิคม เขาได้ติดต่อกับวาวินโชพังค์ กษัตริย์แห่งปาสปาเฮกเพื่อสำรวจ "พานาวิก" ซึ่งเป็นอีกสถานที่หนึ่งที่มีรายงานว่ามีผู้ชายสวมชุดแบบยุโรปอาศัยอยู่ อาณานิคมได้จัดทำแผนที่อย่างง่ายของภูมิภาคนี้พร้อมป้ายกำกับสำหรับหมู่บ้านเหล่านี้ แผนที่ยังแสดงสถานที่แห่งหนึ่งชื่อ "ปาครานิก" พร้อมหมายเหตุระบุว่า "ที่นี่มีชายสี่คนสวมเสื้อผ้าที่มาจากรูน็อคไปยังโอคานาโฮนัน" ^{[ 132 ]}

ในฤดูร้อนปี ค.ศ. 1608 สมิธได้ส่งจดหมายเกี่ยวกับข้อมูลนี้พร้อมกับแผนที่กลับไปยังอังกฤษ แผนที่ต้นฉบับสูญหายไปแล้ว แต่เปโดร เด ซูญิกา ทูตสเปนประจำอังกฤษ ได้รับสำเนามาและส่งต่อให้กับฟิลิปที่ 3 แห่งสเปนสำเนานี้ซึ่งปัจจุบันเรียกกันทั่วไปว่า "แผนที่ซูญิกา" ถูกค้นพบอีกครั้งในปี ค.ศ. 1890 ^{[ 133 ]}

สมิธวางแผนที่จะสำรวจปาคราคานิก แต่ข้อพิพาทกับปาสปาเฮกทำให้ภารกิจต้องยุติลงก่อนที่จะเริ่มต้น เขายังส่งคณะค้นหาสองคณะออกไป ซึ่งอาจเพื่อค้นหาหมู่บ้านอื่นๆ ที่มีรายงานมาถึงเขา โดยมีคำสั่งให้ค้นหา "คณะที่หายสาบสูญของเซอร์วอลเตอร์ รอว์ลีย์" ทั้งสองกลุ่มไม่พบร่องรอยใดๆ ของชาวอาณานิคมโรอาโนกที่อาศัยอยู่ในพื้นที่นั้น^{[ 134 ]}

ภายในเดือนพฤษภาคม ค.ศ. 1609 ข่าวได้ไปถึงสภาหลวงแห่งอังกฤษประจำเวอร์จิเนียว่าชาวอาณานิคม 1587 คนถูกสังหารหมู่โดยวาฮุนเซนาคาว^{[ 135 ]}ไม่ทราบที่มาของข้อกล่าวหานี้ แมคฮัมป์ส น้องเขยของวาฮุนเซนาคาว เป็นที่ทราบกันว่าได้ให้ข้อมูลเกี่ยวกับเวอร์จิเนีย และเขาเพิ่งเดินทางมาถึงอังกฤษ^{[ 136 ]}มีการคาดเดาว่าการเดินทางครั้งเดียวกันนี้อาจนำจดหมายจากสมิธมาด้วย แม้ว่าจะไม่มีหลักฐานใด ๆ สำหรับเรื่องนี้ก็ตาม^{[ 137 ]}

จากข้อมูลข่าวกรองนี้ รวมถึงรายงานก่อนหน้านี้ของสมิธ สภาได้ร่างคำสั่งให้ย้ายอาณานิคมเจมส์ทาวน์ คำสั่งเหล่านี้แนะนำ "โอโฮนาฮอร์น" (หรือ "โอโคนาโฮเอน") ใกล้ปากแม่น้ำโชวันเป็นฐานที่มั่นใหม่ ข้อดีที่กล่าวอ้างของสถานที่นี้คือความใกล้ชิดกับ "เหมืองทองแดงริทาน็อกที่อุดมสมบูรณ์" และ "เพคคาเรคามิค" ซึ่งเชื่อกันว่าอาณานิคมของราลีห์สี่คนถูกกักขังโดยหัวหน้าเผ่าชื่อ "เกปาโนคอน" ^{[ 138 ]}คำสั่งเหล่านี้พร้อมกับผู้ว่าการรักษาการคนใหม่โทมัส เกตส์ถูกเลื่อนออกไปเนื่องจากเรือซีเวนเจอร์อับปางที่เบอร์มูดา เกตส์มาถึงเจมส์ทาวน์ในเดือนพฤษภาคม ค.ศ. 1610 หลายเดือนหลังจากเกิดภาวะอดอยากวิกฤตการณ์นี้อาจทำให้ผู้ตั้งถิ่นฐานลังเลที่จะพยายามย้ายที่ตั้งตามที่เสนอ มีการส่งคณะสำรวจไปยังแม่น้ำโชวัน แต่ไม่มีบันทึกเกี่ยวกับสิ่งที่ค้นพบ^{[ 139 ]}

วิลเลียม สแตรชีเดินทางมาถึงเจมส์ทาวน์พร้อมกับเกตส์และมาชัมป์สในเดือนพฤษภาคม ค.ศ. 1610 ภายในปี ค.ศ. 1612 เขาได้กลับไปยังอังกฤษ ซึ่งเขาได้เขียนหนังสือThe Historie of Travaile into Virginia Britanniaซึ่งเป็นภาพรวมของดินแดนเวอร์จิเนีย^{[ 139 ]}เขาได้บรรยายถึง "Peccarecamek", "Ochanahoen", "Anoeg" และ "Ritanoe" ในลักษณะที่สอดคล้องกับแผนที่ของสมิธและคำสั่งของสภาเวอร์จิเนียที่มอบให้แก่เกตส์ อย่างไรก็ตาม สแตรชีได้เพิ่มรายละเอียดเพิ่มเติมเกี่ยวกับ "การสังหารหมู่ที่โรอาโนค" ^{[ 140 ]}

Strachey แนะนำว่าผู้ตั้งถิ่นฐานที่หายสาบสูญได้ใช้ชีวิตอย่างสงบสุขกับชนเผ่าที่อยู่นอกอาณาเขตของ Powhatan เป็นเวลา 20 ปี เขาอ้างว่า Wahunsenacawh ได้ทำการโจมตีโดยไม่มีเหตุจูงใจตามคำแนะนำของนักบวชของเขา ไม่นานก่อนที่ผู้ตั้งถิ่นฐานจาก Jamestown จะมาถึง จากเรื่องราวนี้ ชาวอังกฤษ 7 คน – ชาย 4 คน เด็กชาย 2 คน และหญิง 1 คน – รอดชีวิตจากการโจมตีและหนีขึ้นไปตามแม่น้ำ Chowan ต่อมาพวกเขาได้รับการคุ้มครองจากหัวหน้าเผ่าชื่อ "Eyanoco" ซึ่งพวกเขาตีทองแดงเพื่อเขาที่ "Ritanoe" ^{[ 141 ]}

หนังสือ Historie of Travaileไม่ได้ระบุชื่อชนเผ่าที่เชื่อกันว่าให้ที่พักพิงแก่ผู้ตั้งถิ่นฐานชาวโรอาโนกโดยตรง อย่างไรก็ตาม สแตรชีได้บรรยายถึงการโจมตีชาวเชเซเปียน ซึ่งนักบวชของวาฮุนเซนาคาวได้เตือนเขาว่าจะมีชนชาติหนึ่งเกิดขึ้นในอ่าวเชซาพีคเพื่อคุกคามอาณาจักรของเขา^{[ 142 ]}มีการสันนิษฐานว่าผู้ตั้งถิ่นฐานได้ย้ายไปอยู่ที่เชซาพีค และทั้งสองกลุ่มถูกสังหารหมู่ในการโจมตีเดียวกัน^{[ 143 ]}

สแตรชีเชื่อว่าศาสนาของชาวพาวฮาตันนั้นเกี่ยวข้องกับซาตาน โดยเนื้อแท้ และนักบวชอาจติดต่อกับซาตาน โดยตรง เขาจึงสนับสนุนให้อังกฤษอำนวยความสะดวกในการเปลี่ยนศาสนาของชาวพาวฮาตันไปเป็นคริสต์ศาสนา ด้วยเหตุนี้ เขาจึงแนะนำแผนการที่กษัตริย์เจมส์จะทรงเมตตาต่อชาวพาวฮาตันสำหรับการสังหารหมู่ชาวอาณานิคมโรอาโนก แต่จะทรงเรียกร้องให้มีการแก้แค้นนักบวช^{[ 144 ]}อย่างไรก็ตาม บริษัทลอนดอนไม่ได้ตีพิมพ์The Historie of Travaileซึ่งตกอยู่ในความไม่ชัดเจนจนกระทั่งปี 1849 ^{[ 145 ]}ไม่มีข้อบ่งชี้ว่ามีการดำเนินการใดๆ ต่อวาฮุนเซนาคาวหรือนักบวชของเขาเพื่อตอบโต้การสังหารหมู่ที่ถูกกล่าวหา^{[ 146 ]}

หลังจากที่ชาวพาวฮาตันโจมตีเจมส์ทาวน์ในปี 1622 ความคิดเห็นของชาวอังกฤษเกี่ยวกับชนพื้นเมืองอเมริกันก็เปลี่ยนไปอย่างมาก เนื่องจากนักเขียนตั้งคำถามถึงความเป็นมนุษย์ของพวกเขามากขึ้นเรื่อยๆบริษัทลอนดอนสนับสนุนการโฆษณาชวนเชื่อโดยอ้างว่าการสังหารหมู่ครั้งนี้เป็นการแก้แค้นด้วย การ ฆ่าล้างเผ่าพันธุ์เพื่อสร้างความมั่นใจให้กับผู้สนับสนุนว่าการลงทุนในอาณานิคมของพวกเขาจะปลอดภัย^{[ 147 ] [ 148 ]}

ในบริบทนี้ซามูเอล เพอร์ชาสได้เขียนหนังสือVirginia's Vergerในปี ค.ศ. 1625 โดยยืนยันสิทธิของอังกฤษในการครอบครองและแสวงหาประโยชน์จากดินแดนอเมริกาเหนือ เขาโต้แย้งว่าชนพื้นเมืองในฐานะเผ่าพันธุ์ได้สูญเสียสิทธิในดินแดนไปเนื่องจากการนองเลือด โดยอ้างถึงการซุ่มโจมตีทหารรักษาการณ์ของเกรนวิลล์ในปี ค.ศ. 1586 ซึ่งเป็นการโจมตีอาณานิคมของไวท์ที่ถูกกล่าวหา และการสังหารหมู่ที่เจมส์ทาวน์ในปี ค.ศ. 1622 เพอร์ชาสไม่ได้เสนอหลักฐานใด ๆ สำหรับข้ออ้างของเขาเกี่ยวกับอาณานิคมในปี ค.ศ. 1587 นอกจากการกล่าวว่า "โพวาตันสารภาพกับกัปตันสมิธว่าเขาอยู่ในเหตุการณ์สังหารหมู่ และมีเครื่องใช้ต่าง ๆ ของพวกเขามาแสดง" ^{[ 149 ]}

เป็นไปได้ที่สมิธจะเล่าเรื่องการสารภาพของวาฮุนเซนาคาวห์ให้เพอร์ชาสฟัง เนื่องจากเป็นที่ทราบกันว่าทั้งสองเคยพูดคุยกัน อย่างไรก็ตาม งานเขียนของสมิธเองไม่เคยกล่าวถึงการสารภาพนี้ ทำให้คำกล่าวอ้างของเพอร์ชาสเป็นเพียงเรื่องเดียวที่นักประวัติศาสตร์เฮเลน รอนทรีมองว่าเป็น "การโต้แย้งต่อต้านชาวอินเดียนแดง" [ ^{150 ] แม้}จะนำมาพิจารณาตามความเป็นจริง การสารภาพที่กล่าวอ้างก็ไม่น่าเชื่อถือ เนื่องจากวาฮุนเซนาคาวห์อาจแต่งเรื่องขึ้นมาเพื่อข่มขู่สมิธ วัตถุโบราณของชาวยุโรปที่อ้างว่าเป็น "หลักฐาน" ของการโจมตีอาณานิคมโรอาโนกนั้น อาจได้มาจากแหล่งอื่นได้เช่นกัน เช่นอายาคาน^{[ 151 ]}

การจราจรทางทะเลผ่านเกาะโรอาโนกเริ่มลดลงในศตวรรษที่ 17 เนื่องจากน่านน้ำอันตรายของเอาเตอร์แบงก์^{[ 152 ]}ในปี ค.ศ. 1672 ทางเข้าระหว่างเกาะฮาโตราสค์และเกาะโครอาโตอันปิดลง และแผ่นดินที่เกิดขึ้นจึงกลายเป็นที่รู้จักในชื่อเกาะแฮตเทอรัส^{[ 153 ]}

ระหว่าง การสำรวจนอร์ท แคโรไลนาของจอห์น ลอว์สัน ในปี 1701–1709 เขาได้ไปเยือนเกาะแฮทเทอรัสและได้พบกับชาวแฮทเทอ รัส ^{[ 154 ]}แม้ว่าจะมีหลักฐานกิจกรรมของชาวยุโรปในบริเวณเอาเตอร์แบงก์ตลอดศตวรรษที่ 17 แต่ลอว์สันเป็นนักประวัติศาสตร์คนแรกที่สำรวจภูมิภาคนี้ตั้งแต่ไวท์จากไปในปี 1590 ^{[ 155 ]}ลอว์สันประทับใจกับอิทธิพลของวัฒนธรรมอังกฤษที่มีต่อชาวแฮทเทอรัส พวกเขารายงานว่าบรรพบุรุษหลายคนของพวกเขามีผิวขาว และบางคนมีดวงตาสีเทา ซึ่งสนับสนุนข้อกล่าวอ้างนี้ ลอว์สันตั้งทฤษฎีว่าสมาชิกของอาณานิคมปี 1587 ได้กลืนเข้ากับชุมชนนี้หลังจากที่พวกเขาหมดหวังที่จะติดต่อกับอังกฤษอีกครั้ง^{[ 156 ]}ขณะที่ไปเยือนเกาะโรอาโนก ลอว์สันรายงานว่าพบซากป้อมปราการ รวมถึงเหรียญอังกฤษ อาวุธปืน และกระบอกใส่ดินปืน^{[ 157 ]}

ซากปรักหักพังที่ลอว์สันพบในปี 1701 ในที่สุดก็กลายเป็นสถานที่ท่องเที่ยวประธานาธิบดีสหรัฐฯเจมส์ มอนโรเยี่ยมชมสถานที่แห่งนี้เมื่อวันที่ 7 เมษายน 1819 ในช่วงทศวรรษ 1860 ผู้เยี่ยมชมบรรยายถึง "ป้อม" ที่เสื่อมโทรมว่าเป็นเพียงเนินดินรูปทรงป้อมปราการ ขนาดเล็ก และรายงานว่ามีการขุดหลุมในบริเวณใกล้เคียงเพื่อค้นหาโบราณวัตถุที่มีค่า การผลิตภาพยนตร์เงียบเรื่อง The Lost Colony ในปี 1921 และการพัฒนาถนนทำให้สถานที่แห่งนี้เสียหายมากขึ้น ในช่วงทศวรรษ 1930 เจซี แฮร์ริงตันสนับสนุนการบูรณะและอนุรักษ์เนินดิน^{[ 158 ]}กรมอุทยานแห่งชาติเริ่มบริหารจัดการพื้นที่ในปี 1941 โดยกำหนดให้เป็นFort Raleigh National Historic Siteในปี 1950 เนินดินได้รับการสร้างขึ้นใหม่เพื่อพยายามฟื้นฟูขนาดและรูปร่างดั้งเดิม^{[ 159 ]}

ในปี พ.ศ. 2541 ทีมงานที่นำโดยนักภูมิอากาศวิทยา David W. Stahle (จากมหาวิทยาลัยอาร์คันซอ ) และนักโบราณคดี Dennis B. Blanton (จากวิทยาลัยวิลเลียมแอนด์แมรี ) สรุปว่าเกิดภัยแล้งอย่างรุนแรงในTidewaterระหว่างปี พ.ศ. 2520 ถึง พ.ศ. 2532 การศึกษาของพวกเขาได้วัดวงปีการเจริญเติบโตจากเครือข่ายต้นสนไซเปรสหัวโล้นทำให้ได้ข้อมูลตั้งแต่ปี พ.ศ. 2528 ถึง พ.ศ. 2527 โดยเฉพาะอย่างยิ่ง ปี พ.ศ. 2520 ถูกวัดว่าเป็นฤดูการเจริญเติบโตที่แย่ที่สุดในรอบ 800 ปี ผลการค้นพบนี้ถือว่าสอดคล้องกับความกังวลที่ชาว Croatan แสดงออกเกี่ยวกับแหล่งอาหารของพวกเขา^{[ 160 ]}

ตั้งแต่ปี 2005 นักวิทยาศาสตร์คอมพิวเตอร์ Roberta Estes ได้ก่อตั้งองค์กรหลายแห่งเพื่อ การวิเคราะห์ DNAและการวิจัยทางสายเลือด ความสนใจของเธอในการหายสาบสูญของอาณานิคมในปี 1587 เป็นแรงบันดาลใจให้เกิดโครงการต่างๆ เพื่อสร้างความเชื่อมโยงทางพันธุกรรมระหว่างผู้ตั้งถิ่นฐานและลูกหลานชาวอเมริกันพื้นเมืองที่เป็นไปได้ การตรวจสอบDNA ออโตโซมเพื่อจุดประสงค์นี้ไม่น่าเชื่อถือ เนื่องจากจะมีสารพันธุกรรมของผู้ตั้งถิ่นฐานเหลือน้อยมากหลังจากผ่านไปห้าหรือหกชั่วอายุคน อย่างไรก็ตาม การทดสอบโครโมโซม YและDNA ไมโทคอนเดรียมีความน่าเชื่อถือมากกว่าในช่วงเวลาที่ยาวนาน ความท้าทายหลักของงานนี้คือการหาจุดเปรียบเทียบทางพันธุกรรม ไม่ว่าจะเป็นจากซากของผู้ตั้งถิ่นฐานที่หายสาบสูญหรือจากลูกหลานของพวกเขา แม้ว่าจะเป็นไปได้ที่จะจัดลำดับ DNA จากกระดูกอายุ 430 ปี แต่ยังไม่มีกระดูกจากอาณานิคมที่หายสาบสูญให้ทำงานด้วย และ ณ ปี 2019 โครงการยังไม่สามารถระบุลูกหลานที่ยังมีชีวิตอยู่ได้^{[ 161 ]}

การวิจัยทางโบราณคดีบนเกาะโรอาโนกเริ่มขึ้นเมื่อทัลคอตต์ วิลเลียมส์ค้นพบแหล่งฝังศพของชาวพื้นเมืองอเมริกันในปี 1887 เขากลับมาขุดค้นป้อมปราการอีกครั้งในปี 1895 แต่ไม่พบสิ่งใดที่มีนัยสำคัญ ต่อ มาไอวอร์ โนเอล ฮูมได้ค้นพบสิ่งที่น่าสนใจหลายอย่างในช่วงทศวรรษ 1990 แต่ไม่มีสิ่งใดที่สามารถเชื่อมโยงกับอาณานิคมในปี 1587 ได้อย่างชัดเจน ตรงกันข้ามกับด่านหน้าในปี 1585 ^{[ 162 ]}

หลังจากพายุเฮอริเคนเอมิลีพัดถล่มจนเผยให้เห็นโบราณวัตถุของชนพื้นเมืองอเมริกันจำนวนมากตามแนวลำธารเคปครีกในเมืองบัคซ์ตัน รัฐ น อร์ ทแคโรไลนานักมานุษยวิทยาเดวิด ซัตตัน เฟลป์ส จู เนียร์ ได้จัดการขุดค้นขึ้นในปี 1995 เฟลป์สและทีมงานของเขาค้นพบแหวนวงหนึ่งในปี 1998 ซึ่งในตอนแรกดูเหมือนจะเป็นแหวนตราประทับ ทองคำ ที่มีตราประจำตระกูลเคนดัลในศตวรรษที่ 16 ^{[ 163 ] [ 164 ]}การค้นพบนี้ได้รับการยกย่องว่าเป็นการค้นพบครั้งสำคัญ แต่เฟลป์สไม่เคยตีพิมพ์บทความเกี่ยวกับการค้นพบของเขา และละเลยที่จะนำแหวนไปทดสอบอย่างถูกต้อง การวิเคราะห์ด้วยรังสีเอกซ์ในปี 2017 พิสูจน์แล้วว่าแหวนเป็นทองเหลือง ไม่ใช่ทองคำ และผู้เชี่ยวชาญไม่สามารถยืนยันความเชื่อมโยงที่กล่าวอ้างกับตราประจำตระกูลเคนดัลได้ มูลค่าที่ต่ำและความไม่เป็นที่รู้จักของแหวนทำให้ยากที่จะระบุได้อย่างแน่ชัดว่าแหวนนี้เกี่ยวข้องกับบุคคลใดบุคคลหนึ่งจากการเดินทางของโรอาโนก ซึ่งส่งผลให้มีโอกาสมากขึ้นที่แหวนนี้อาจถูกนำมายังโลกใหม่ในภายหลัง^{[ 165 ] [ 166 ]}

ความท้าทายที่สำคัญสำหรับนักโบราณคดีที่ต้องการข้อมูลเกี่ยวกับผู้ตั้งถิ่นฐานในปี 1587 คือ สิ่งประดิษฐ์ทั่วไปจำนวนมากอาจมีต้นกำเนิดมาจากอาณานิคมในปี 1585 หรือจากชาวพื้นเมืองอเมริกันที่ทำการค้ากับชุมชนชาวยุโรปอื่นๆ ในยุคเดียวกันแอนดรูว์ ลอว์เลอร์เสนอแนะว่าตัวอย่างของการค้นพบที่แน่ชัดคือ ซากศพของผู้หญิง (เนื่องจากอาณานิคมในปี 1585 มีแต่ผู้ชาย) ที่ถูกฝังตามประเพณีคริสเตียน ( นอนหงายในทิศตะวันออก-ตะวันตก) ซึ่งสามารถกำหนดอายุได้ก่อนปี 1650 (ซึ่งในเวลานั้นชาวยุโรปน่าจะแพร่กระจายไปทั่วภูมิภาคแล้ว) ^{[ 167 ]}อย่างไรก็ตาม มีการค้นพบซากศพมนุษย์เพียงเล็กน้อยในสถานที่ที่เกี่ยวข้องกับอาณานิคมที่สาบสูญ^{[ 168 ]}

คำอธิบายที่เป็นไปได้ประการหนึ่งสำหรับความขาดแคลนอย่างมากของหลักฐานทางโบราณคดีคือการกัดเซาะชายฝั่ง ชายฝั่งทางเหนือของเกาะโรอาโนก ซึ่งเป็นที่ตั้งของอาณานิคมเลนและไวท์ สูญเสียพื้นที่ไป 928  ฟุต (283 เมตร) ระหว่างปี 1851 ถึง 1970 เมื่อพิจารณาแนวโน้มนี้ย้อนกลับไปในช่วงทศวรรษ 1580 เป็นไปได้ว่าบางส่วนของชุมชนอาจจมอยู่ใต้น้ำแล้ว พร้อมกับสิ่งประดิษฐ์หรือร่องรอยของชีวิตใดๆ^{[ 169 ]}

ในเดือนพฤศจิกายน พ.ศ. 2554 นักวิจัยจาก First Colony Foundation สังเกตเห็นรอยปะแก้ไขสองจุดบนแผนที่La Virginea Pars ของ White ปี พ.ศ. 2528 ตามคำขอของพวกเขา พิพิธภัณฑ์บริติชได้ตรวจสอบแผนที่ต้นฉบับด้วยโต๊ะไฟหนึ่งในรอยปะที่จุดบรรจบกันของแม่น้ำ Roanoke และ Chowan พบว่าปิดบังสัญลักษณ์ที่แสดงถึงป้อมปราการที่ต้นน้ำของ Albemarle Sound นอกจากนี้ยังพบโครงร่างจางๆ ของป้อมปราการที่วาดด้วยหมึกที่อาจมองไม่เห็นบนรอยปะนั้นด้วย^{[ 170 ] [ 171 ] [ 172 ]}ทฤษฎีหนึ่งคือ White อาจพยายามซ่อนป้อมปราการจากชาวสเปน ซึ่งมองว่าอาณานิคมเป็นภัยคุกคาม ชาวสเปนได้ส่งกองกำลังไปปราบปรามอาณานิคม แต่ไม่พบผู้ตั้งถิ่นฐาน^{[ 172 ]}

เนื่องจากสัญลักษณ์ไม่ได้แสดงตามมาตราส่วน จึงครอบคลุมพื้นที่บนแผนที่ซึ่งแสดงถึงพื้นที่หลายพันเอเคอร์ในBertie County รัฐนอร์ทแคโรไลนาอย่างไรก็ตาม สันนิษฐานว่าสถานที่ดังกล่าวอยู่ในหรือใกล้กับ หมู่บ้าน Mettaquem ซึ่งเป็นหมู่บ้าน Weapemeoc ขนาดใหญ่ในศตวรรษที่ 16 ในปี 2012 เมื่อทีมงานเตรียมที่จะขุดค้นในบริเวณที่สัญลักษณ์ระบุ นักโบราณคดี Nicholas Luccketti แนะนำให้ตั้งชื่อสถานที่นั้นว่า "Site X" ดังเช่น " X marks the spot " ^{[ 173 ]}ในปี 2015 ทีมงานได้ขุดค้นสถานที่ดังกล่าว^{[ 172 ]}

ในแถลงการณ์เมื่อเดือนตุลาคม 2560 มูลนิธิ First Colony Foundation รายงานว่าพบเศษ เครื่องปั้นดินเผาและอาวุธ สมัยทิวดอร์ที่ Site X และสรุปว่าสิ่งเหล่านี้บ่งชี้ว่ามีกลุ่มผู้ตั้งถิ่นฐานกลุ่มเล็กๆ อาศัยอยู่อย่างสงบสุขในพื้นที่^{[ 174 ]}ความท้าทายสำหรับการวิจัยนี้คือการพิสูจน์ให้เห็นอย่างชัดเจนว่าการค้นพบดังกล่าวไม่ได้ถูกนำมายังพื้นที่โดยอาณานิคม Lane ในปี 1585 หรือสถานีการค้าที่ก่อตั้งโดยNathaniel Battsในช่วงทศวรรษ 1650 ^{[ 175 ]}ในปี 2562 มูลนิธิได้ประกาศแผนการขยายการวิจัยไปยังที่ดินที่บริจาคให้กับรัฐนอร์ทแคโรไลนาเป็นพื้นที่ธรรมชาติ Salmon Creek State Natural Area ^{[ 176 ] [ 177 ]}

ในปี 2020 มีการค้นพบสิ่งประดิษฐ์ใหม่ในนอร์ทแคโรไลนา ซึ่งนักวิจัยเชื่อว่าอาจมาจากอาณานิคมของผู้รอดชีวิตจากอาณานิคมที่สาบสูญ สิ่งประดิษฐ์เหล่านี้ถูกค้นพบในสถานที่ที่อยู่ห่างจากเกาะโรอาโนกไปทางตะวันตกประมาณ 50 ไมล์ การวิเคราะห์สิ่งประดิษฐ์มุ่งเน้นไปที่การพิจารณาว่าสิ่งเหล่านี้อาจมาจากอาณานิคมที่สาบสูญหรือไม่ เนื่องจากผู้ตั้งถิ่นฐานในภายหลังจากอาณานิคมอื่นๆ เช่น เจมส์ทาวน์ จะมีสิ่งของและวัสดุที่แตกต่างจากผู้ตั้งถิ่นฐานในอาณานิคมที่สาบสูญ เช่น ท่อดินเหนียว ซึ่งถูกประดิษฐ์ขึ้นในภายหลัง^{[ 172 ]} นักวิจัยอีกคนหนึ่งพบสิ่งของในสถานที่ที่อยู่ห่างจากเกาะโรอาโนกไปทางใต้ประมาณ 50 ไมล์^{[ 172 ]}

การขุดค้นอีกครั้งโดยมาร์ค ฮอร์ตันนักโบราณคดีจากมหาวิทยาลัยบริสตอลพบสิ่งประดิษฐ์ของชาวยุโรปในบริเวณหมู่บ้านของชนพื้นเมืองอเมริกันบนเกาะแฮทเทอรัส ซึ่งรวมถึงส่วนหนึ่งของดาบและส่วนหนึ่งของปืน นี่อาจเป็นหลักฐานว่าผู้ตั้งถิ่นฐานได้ผสมผสานเข้ากับชนพื้นเมืองอเมริกันในท้องถิ่นจริง ๆ^{[ 172 ] [ 178 ]}

ในปี 2020 หนังสือของ Scott Dawson ชื่อThe Lost Colony and Hatteras Island ได้รับการตีพิมพ์ โดยบรรยายถึงความพยายามของเขาร่วมกับ Horton ในการค้นหาวัตถุโบราณที่เกี่ยวข้องกับอาณานิคม เขายังเขียนบทความในสิ่งพิมพ์ต่างๆ รวมถึงบทความในนิตยสารAmerican Heritageซึ่งบรรยายถึงวัตถุโบราณที่สำคัญหลายชิ้น ซึ่งรวมถึงวัตถุหลายชิ้นที่ดูเหมือนจะผลิตโดยชาวยุโรป เช่นโถใส่น้ำมันมะกอกแก้ว และสิ่งของที่ผลิตขึ้นต่างๆ^{[ 179 ] [ 180 ]}

ในปี 2025 ดอว์สันและฮอร์ตันประกาศว่าการขุดค้นอีกครั้งบนเกาะแฮทเทอรัสได้ค้นพบเศษโลหะ จากการตีเหล็กจำนวนมาก ซึ่งเป็นเศษโลหะขนาดเล็กที่เป็นผลพลอยได้จากการตีเหล็ก ในชั้นดินที่คาดว่ามีอายุตั้งแต่ปลายศตวรรษที่ 16 ^{[ 181 ] [ 182 ]}ดอว์สันและฮอร์ตันตั้งสมมติฐานว่า เนื่องจากของเสียอย่างเศษโลหะจากการตีเหล็กจะไม่ถูกนำไปค้าขาย และชาวพื้นเมืองอเมริกันจะไม่รู้จักวิธีการตีเหล็ก นี่จึงพิสูจน์ได้ว่ามีผู้ตั้งถิ่นฐานอยู่บนเกาะ อย่างไรก็ตาม ผู้ที่สงสัยชี้ให้เห็นถึงการไม่มีเตาไฟที่เกี่ยวข้อง และความเป็นไปได้ที่เศษโลหะจากการตีเหล็กอาจเป็นผลมาจากกระบวนการอื่น^{[ 181 ]}ผลการขุดค้นยังไม่ได้รับการตรวจสอบโดยผู้เชี่ยวชาญ^{[ 181 ]}

เดวิด เบียร์ส ควินน์สรุปว่ากลุ่มผู้ตั้งถิ่นฐานในปี 1587 พยายามย้ายกลับไปยังจุดหมายปลายทางเดิมของพวกเขา คือ อ่าวเชซาพีค โดยใช้เรือพินเนสและเรือเล็กอื่นๆ ในการขนส่งตนเองและทรัพย์สิน กลุ่มเล็กๆ กลุ่มหนึ่งจะประจำอยู่ที่โครอาโตอัน เพื่อรอการกลับมาของไวท์และนำทางเขาไปยังอาณานิคมที่ย้ายมาใหม่ หลังจากที่ไวท์ไม่พบผู้ตั้งถิ่นฐานคนใดเลย กลุ่มผู้ตั้งถิ่นฐานส่วนใหญ่ก็จะกลืนเข้ากับชาวเชซาพีค อย่างรวดเร็ว ในขณะที่ผู้เฝ้าระวังที่โครอาโตอันก็จะกลมกลืนไปกับชนเผ่าโครอาตัน

ควินน์เสนอว่า การเดินทางของซามูเอล เมซในปี 1602 อาจแล่นเรือเข้าไปในอ่าวเชซาพีคและลักพาตัวชาวเผ่าพาวฮาตันกลับไปยังอังกฤษ จากนั้นผู้ถูกลักพาตัวเหล่านี้จะสามารถติดต่อสื่อสารกับโทมัส แฮร์ริออต และอาจเปิดเผยว่ามีชาวยุโรปอาศัยอยู่ในภูมิภาคนี้ ควินน์เชื่อว่าสถานการณ์เช่นนี้จำเป็นต่อการอธิบายถึงความหวังในความอยู่รอดของผู้ตั้งถิ่นฐานหลังปี 1603

แม้ว่า Strachey จะกล่าวหาว่า Wahunsenacawh สังหารชาวอาณานิคมและชาว Chesepian ในเหตุการณ์ที่แยกจากกัน แต่ Quinn ตัดสินใจว่าเหตุการณ์เหล่านี้เกิดขึ้นในการโจมตีชุมชนที่รวมกันเพียงครั้งเดียวในเดือนเมษายน ค.ศ.  1607 เขาตั้งสมมติฐานว่า Wahunsenacawh อาจกำลังแก้แค้นสำหรับการลักพาตัวที่คาดเดาโดย Mace ตามความเห็นของ Quinn John Smith เป็นคนแรกที่รู้เรื่องการสังหารหมู่ แต่ด้วยเหตุผลทางการเมือง เขาจึงรายงานเรื่องนี้โดยตรงต่อกษัตริย์เจมส์อย่างเงียบๆ แทนที่จะเปิดเผยในงานเขียนที่ตีพิมพ์ของเขา^{[ 186 ]}แม้ว่า Quinn จะมีชื่อเสียงในเรื่องนี้ แต่เพื่อนร่วมงานของเขาก็ยังมีข้อสงสัยเกี่ยวกับทฤษฎีของเขา ซึ่งอาศัยบันทึกของ Strachey และ Purchas เป็นอย่างมาก^{[ 187 ]}

ความเป็นไปได้ที่ผู้ตั้งถิ่นฐานที่หายไปอาจกลืนเข้ากับชนเผ่าพื้นเมืองอเมริกันที่อยู่ใกล้เคียงนั้นได้รับการเสนอแนะมาตั้งแต่ปี ค.ศ. 1605 เป็นอย่างน้อย^{[ 129 ]}หากการผสมผสานนี้ประสบความสำเร็จ ผู้ตั้งถิ่นฐานที่กลืนเข้ากับวัฒนธรรมจะค่อยๆ ใช้เสบียงของยุโรป (กระสุน เสื้อผ้า) จนหมด และละทิ้งวัฒนธรรมยุโรป (ภาษา รูปแบบการแต่งกาย การเกษตร) เมื่อวิถีชีวิตแบบอัลกอนควินสะดวกสบายมากขึ้น^{[ 188 ]}ชาวยุโรปในยุคอาณานิคมสังเกตว่าผู้คนจำนวนมากที่ถูกชนพื้นเมืองอเมริกันขับไล่ออกจากสังคมยุโรปเป็นเวลานาน – แม้ว่าจะถูกจับหรือตกเป็นทาส – ก็ไม่เต็มใจที่จะกลับมา ในทางกลับกันนั้นเกิดขึ้นได้ยาก^{[ 189 ]}ดังนั้น จึงเป็นเรื่องสมเหตุสมผลที่จะตั้งสมมติฐานว่า หากผู้ตั้งถิ่นฐานกลืนเข้ากับวัฒนธรรมแล้ว พวกเขาหรือลูกหลานของพวกเขาจะไม่แสวงหาการรวมตัวกับผู้ตั้งถิ่นฐานชาวอังกฤษในภายหลัง^{[ 190 ]}

สิ่งนี้ยังคงเปิดคำถามว่าชาวอาณานิคมได้กลืนเข้ากับชนเผ่าใดหรือหลายชนเผ่า เป็นที่ยอมรับกันโดยทั่วไปว่าชาวโครอาตันเป็นบรรพบุรุษของชาวแฮทเทอรัส ในศตวรรษที่ 18 แม้ว่าหลักฐานในเรื่องนี้จะเป็นเพียงหลักฐานแวดล้อมก็ตาม^{[ 153 ] [ 191 ]} ชนเผ่า ลัมบีในปัจจุบันระบุว่าตนเองเป็นลูกหลานของทั้งชาวโครอาตันและชาวอาณานิคมที่สาบสูญโดยผ่านทางชาวแฮทเทอรัส^{[ 192 ]}

แผนที่บางฉบับในศตวรรษที่ 17 ใช้คำว่า "Croatoan" เพื่ออธิบายตำแหน่งบนแผ่นดินใหญ่ ข้ามช่องแคบแพมลิโกจากโรอาโนกและแฮทเทอรัส ภายในปี 1700 พื้นที่เหล่านี้มีความเกี่ยวข้องกับชาวมาชาปุงกา^{[ 193 ]}ประเพณีปากเปล่าและตำนานเกี่ยวกับการอพยพของชาวโครอาตันผ่านแผ่นดินใหญ่แพร่หลายในนอร์ทแคโรไลนาตะวันออก^{[ 194 ]}ตัวอย่างเช่น "ตำนานของชาวโคฮารี " ในเทศมณฑลแซมป์สันได้รับการถอดความโดยเออร์เนสต์ เอ็ม. บุลลาร์ดในปี 1950 ^{[ 195 ]}

ที่มีชื่อเสียงยิ่งกว่านั้น ในช่วงทศวรรษ 1880 สมาชิกสภานิติบัญญัติแห่งรัฐ แฮมิลตัน แมคมิลแลน เสนอให้ชุมชนชาวอเมริกันพื้นเมืองในเทศมณฑลโรเบสัน (ซึ่งในขณะนั้นถือว่าเป็นคนผิวสีอิสระ ) รักษาชื่อสกุลและลักษณะทางภาษาจากผู้ตั้งถิ่นฐานในปี 1587 ไว้^{[ 196 ]}ความพยายามของเขาโน้มน้าวให้สภานิติบัญญัติแห่งรัฐนอร์ทแคโรไลนาให้การรับรองสถานะชนเผ่าแก่ชุมชนในปี 1885 โดยใช้ชื่อใหม่ว่า "โครอาตัน" ชนเผ่าได้ยื่นคำร้องขอเปลี่ยนชื่อในปี 1911 และในที่สุดก็ตกลงใช้ชื่อลัมบีในปี 1956 ^{[ 197 ]}

ชนเผ่าอื่นๆ ที่กล่าวกันว่ามีความเชื่อมโยงกับผู้ตั้งถิ่นฐานในโรอาโนก ได้แก่คาตาบาและโครี^{[ 198 ]}เอส. เอซี. แอชเชื่อมั่นว่าผู้ตั้งถิ่นฐานได้ย้ายไปทางทิศตะวันตกไปยังริมฝั่งแม่น้ำโชวันในเคาน์ตีเบอร์ตี และคอนเวย์ วิทเทิล แซมส์อ้างว่าหลังจากถูกโจมตีโดยแวนเชสและวาฮุนเซนาคาว พวกเขากระจัดกระจายไปยังหลายสถานที่ ได้แก่ แม่น้ำโชวัน และทางใต้ไปยังแม่น้ำแพมลิโกและแม่น้ำนีอุส^{[ 199 ]}

รายงานการพบเห็นผู้คนผิวขาวผมสีบลอนด์ในหมู่ชนเผ่าพื้นเมืองอเมริกันต่างๆ ปรากฏขึ้นตั้งแต่ปี ค.ศ. 1607 แม้ว่าเรื่องนี้มักจะถูกระบุว่าเป็นผลมาจากกลุ่มผู้ตั้งถิ่นฐานที่สูญหายซึ่งถูกกลืนเข้ากับวัฒนธรรมยุโรป แต่ก็อาจอธิบายได้ง่ายกว่าด้วยอัตราการเกิดภาวะผิวเผือก ที่สูงกว่าอย่างมาก ในชนพื้นเมืองอเมริกันเมื่อเทียบกับผู้คนเชื้อสายยุโรป^{[ 200 ]}ดอว์สัน (2020) ^{[ 201 ]}เสนอว่าผู้ตั้งถิ่นฐานได้รวมเข้ากับชนเผ่าโครอาตันเขาอ้างว่า "พวกเขาไม่เคยสูญหาย มันถูกสร้างขึ้นมา ปริศนาจบลงแล้ว" ^{[ 202 ] [ 203 ]}อย่างไรก็ตาม ข้อสรุปนี้ถูกตั้งคำถาม อลัน เอาท์ลอว์ นักโบราณคดีและอาจารย์ประจำมหาวิทยาลัยคริสโตเฟอร์ นิวพอร์ตเรียกข้อสรุปของดอว์สันว่า "การเล่าเรื่อง ไม่ใช่ข้อมูลที่อิงตามหลักฐาน" ในขณะที่นักโบราณคดี นิค ลัคเค็ตติ เขียนว่า "ผมไม่เห็นหลักฐานใดๆ ที่โครอาตันเกี่ยวกับสิ่งประดิษฐ์ที่บ่งชี้ว่าชาวอังกฤษอาศัยอยู่ที่นั่น" นอกจากนี้ เนื้อหาจริงของหนังสือThe Lost Colony and Hatteras Island ของ Dawson ในปี 2020 ยังยอมรับว่าไม่มีหลักฐานที่แน่ชัดว่าผู้ตั้งถิ่นฐานได้ผสมผสานเข้ากับชนเผ่า หนังสือเล่มนี้ยังไม่ได้รับการตรวจสอบโดยผู้ทรงคุณวุฒิ ทำให้คำถามยังคงเปิดอยู่แม้จะมีพาดหัวข่าวที่น่าตื่นเต้นซึ่งมาพร้อมกับการตีพิมพ์^{[ 204 ]}

การขุดค้นทางโบราณคดีโดยมาร์ค ฮอร์ตัน นักโบราณคดีจากมหาวิทยาลัยบริสตอล พบสิ่งประดิษฐ์ของชาวยุโรปในบริเวณหมู่บ้านของชนพื้นเมืองอเมริกันบนเกาะแฮทเทอรัส ซึ่งรวมถึงส่วนหนึ่งของดาบและส่วนหนึ่งของปืน นี่อาจเป็นหลักฐานที่แน่ชัดว่าผู้ตั้งถิ่นฐานได้ผสมผสานเข้ากับชนพื้นเมืองอเมริกันในท้องถิ่นจริง ๆ^{[ 172 ]}

ผู้ตั้งถิ่นฐานอาจตัดสินใจช่วยเหลือตัวเองโดยการแล่นเรือไปยังอังกฤษด้วยเรือพินเนซที่ถูกทิ้งไว้โดยคณะสำรวจในปี 1587 หากมีการพยายามเช่นนั้น เรืออาจสูญหายไปพร้อมกับลูกเรือทั้งหมดกลางทะเล ซึ่งอธิบายถึงการไม่มีทั้งเรือและร่องรอยของผู้ตั้งถิ่นฐาน^{[ 205 ]}เป็นไปได้ว่าอาณานิคมมีลูกเรือที่มีคุณสมบัติเหมาะสมที่จะพยายามเดินทางกลับ มีข้อมูลเพียงเล็กน้อยเกี่ยวกับเรือพินเนซ แต่เรือที่มีขนาดเท่านี้สามารถเดินทางได้ แม้ว่าโดยทั่วไปแล้วพวกเขาจะเดินทางพร้อมกับเรือลำอื่น ๆ^{[ 206 ]}

ผู้ตั้งถิ่นฐานอาจเกรงว่าการใช้เส้นทางมาตรฐานข้ามมหาสมุทรแอตแลนติกโดยแวะพักที่ทะเลแคริบเบียนจะทำให้พวกเขาเสี่ยงต่อการโจมตีของสเปน ดังนั้นจึงเลือกที่จะพยายามเดินทางตรงไปยังอังกฤษแทน การเดินทางเช่นนี้ไม่ใช่เรื่องที่เป็นไปไม่ได้–ในปี 1563 ผู้ตั้งถิ่นฐานชาวฝรั่งเศสที่ อาณานิคม ชาร์ลส์ฟอร์ต ที่ล้มเหลวบนเกาะแพร์ริส ในปัจจุบันรัฐเซาท์แคโรไลนาได้สร้างเรืออย่างง่ายๆ และเดินทางกลับยุโรปได้สำเร็จ (แม้ว่าจะอย่างสิ้นหวังก็ตาม) ^{[ 207 ]}หรืออีกทางหนึ่ง ผู้ตั้งถิ่นฐานโรอาโนกอาจแล่นเรือไปทางเหนือตามแนวชายฝั่ง โดยหวังว่าจะติดต่อกับกองเรือประมงของอังกฤษใน^อ่าวเมน [ ^{208 ]} 

เรือพินเนสคงไม่ใหญ่พอที่จะบรรทุกผู้ตั้งถิ่นฐานทั้งหมดได้ นอกจากนี้ เสบียงที่จำเป็นสำหรับการเดินทางข้ามมหาสมุทรแอตแลนติกจะจำกัดจำนวนผู้โดยสารอีกด้วย ผู้ตั้งถิ่นฐานอาจมีทรัพยากรที่จะสร้างเรือที่สามารถแล่นในทะเลได้อีกลำ โดยใช้ไม้ในท้องถิ่นและอะไหล่จากเรือพินเนส เมื่อพิจารณาว่าเรือถูกสร้างขึ้นในภายหลังโดยผู้รอดชีวิตจาก เหตุการณ์เรือ Sea Venture อับปางในปี 1609 จึงเป็นไปได้ที่ผู้ตั้งถิ่นฐานที่สาบสูญจะสามารถสร้างเรือลำที่สองซึ่งเมื่อรวมกับเรือพินเนสแล้วจะสามารถขนส่งคนส่วนใหญ่ในกลุ่มของพวกเขาได้^{[ 209 ]}อย่างไรก็ตาม แม้ในสภาวะที่เหมาะสมเช่นนี้ ผู้ตั้งถิ่นฐานอย่างน้อยบางส่วนก็จะยังคงอยู่ในเวอร์จิเนีย ทำให้เกิดคำถามว่าเกิดอะไรขึ้นกับพวกเขา^{[ 210 ]}

นักมานุษยวิทยา ลี มิลเลอร์ เสนอว่า เซอร์ฟรานซิส วอลซิงแฮม , ไซมอน เฟอร์นันเดส, เอ็ดเวิร์ด สแตรฟฟอร์ด และคนอื่นๆ มีส่วนร่วมในการสมคบคิดเพื่อกักขังผู้ตั้งถิ่นฐานในปี 1587 ที่โรอาโนก จุดประสงค์ของแผนการนี้ เธอโต้แย้งว่า คือการบ่อนทำลายวอลเตอร์ ราลีห์ ซึ่งกิจกรรมของเขาถูกกล่าวหาว่าขัดขวางแผนการลับของวอลซิงแฮมในการทำให้ประเทศอังกฤษเป็นมหาอำนาจโปรเตสแตนต์ของโลก โดยแลกกับสเปนและประเทศคาทอลิกอื่นๆ การสมคบคิดนี้จะขัดขวางไม่ให้ราลีห์และไวท์ส่งคณะช่วยเหลือไปจนกระทั่งวอลซิงแฮมเสียชีวิตในปี 1590 ^{[ 211 ]}มิลเลอร์ยังเสนอแนะว่าผู้ตั้งถิ่นฐานอาจเป็นพวกแบ่งแยกดินแดนที่แสวงหาที่ลี้ภัยในอเมริกาจากการถูกกดขี่ทางศาสนาในอังกฤษ ราลีห์แสดงความเห็นอกเห็นใจพวกแบ่งแยกดินแดน ในขณะที่วอลซิงแฮมถือว่าพวกเขาเป็นภัยคุกคามที่ต้องกำจัด^{[ 212 ]}

ตามที่มิลเลอร์กล่าว ผู้ตั้งถิ่นฐานได้แยกย้ายกันไป โดยกลุ่มเล็กๆ ย้ายไปอยู่ที่โครอาโตอัน ในขณะที่กลุ่มใหญ่ไปหาที่หลบภัยกับชาวโชวาโนเกะอย่างไรก็ตาม ผู้ตั้งถิ่นฐานได้แพร่โรคระบาดจากยุโรปไปยังเจ้าบ้านอย่างรวดเร็ว ทำให้ชาวโชวาโนเกะลดจำนวนลง และทำให้สมดุลอำนาจในภูมิภาคไม่มั่นคง จากนั้นมิลเลอร์จึงสรุปว่าชาวโชวาโนเกะถูกโจมตี และผู้รอดชีวิตถูกจับเป็นเชลยโดย "แมนโดแอก" ซึ่งเป็นชนชาติที่มีอำนาจทางตะวันตกที่ผู้ตั้งถิ่นฐานในเจมส์ทาวน์รู้จักเพียงจากคำบอกเล่าที่ไม่ชัดเจนของเพื่อนบ้าน^{[ 213 ]}เธอสรุปว่า "แมนโดแอก" คือชาวอีโนซึ่งค้าขายผู้ตั้งถิ่นฐานที่รอดชีวิตจากการถูกจับเป็นทาส และกระจายพวกเขาไปทั่วภูมิภาค^{[ 214 ]}

ทฤษฎีของมิลเลอร์ถูกท้าทายโดยอาศัยการสนับสนุนทางการเงินจำนวนมากของวอลซิงแฮมต่อคณะสำรวจของราลีห์ และความเต็มใจของเฟอร์นันเดสที่จะพาจอห์น ไวท์กลับไปอังกฤษ แทนที่จะทิ้งเขาไว้กับผู้ตั้งถิ่นฐานคนอื่นๆ^{[ 215 ]}

ตำนานท้องถิ่นใน Dare County กล่าวถึงชุมชนร้างที่ชื่อว่า "Beechland" ซึ่งตั้งอยู่ภายในพื้นที่ซึ่งปัจจุบันเป็นเขตรักษาพันธุ์สัตว์ป่าแห่งชาติ Alligator Riverมีรายงานเกี่ยวกับโลงศพขนาดเล็กในพื้นที่ดังกล่าว บางโลงมีเครื่องหมายทางศาสนาคริสต์ ทำให้เกิดการคาดเดาถึงความเชื่อมโยงกับอาณานิคมที่สาบสูญ^{[ 216 ]}จากตำนานเหล่านี้ วิศวกร Phillip McMullan และนักโบราณคดีสมัครเล่น Fred Willard สรุปว่า Walter Raleigh ได้ส่งผู้ตั้งถิ่นฐานในปี 1587 ไปเก็บเกี่ยว ต้น ซัสซาฟราสตามแม่น้ำ Alligator บันทึกทั้งหมดที่บ่งชี้ว่าจุดหมายปลายทางที่ตั้งใจไว้ของอาณานิคมคืออ่าว Chesapeake และว่าอังกฤษได้ขาดการติดต่อกับอาณานิคมนั้น ถูกกล่าวหาว่าถูกปลอมแปลงเพื่อปกปิดการปฏิบัติการจากเจ้าหน้าที่ชาวสเปนและคู่แข่งที่มีศักยภาพรายอื่น ๆ^{[ 217 ] [ 218 ]}

ตามที่ McMullan กล่าว^{[ 217 ]} Raleigh ได้ติดต่อกับอาณานิคมอีกครั้งอย่างเงียบๆ ในปี 1597 และการเดินทางสำรวจต้นซัสซาฟราสของเขาเป็นเพียงการเก็บเกี่ยวผลผลิตของชาวอาณานิคม ในมุมมองนี้ อาณานิคมไม่ได้ถูกทิ้งร้างอย่างแท้จริงจนกระทั่งความลับเกี่ยวกับที่ตั้งของอาณานิคมสิ้นสุดลงพร้อมกับ Raleigh ในปี 1618 หลังจากนั้น McMullan โต้แย้งว่าชาวอาณานิคมน่าจะเริ่มผสมผสานกับชาว Croatan ที่ Beechland ^{[ 217 ]}

สมมติฐานนี้ส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับประเพณีปากเปล่าและรายงานที่ไม่มีหลักฐานยืนยันเกี่ยวกับ Beechland รวมถึงแผนที่ปี 1651 ที่แสดงต้นซัสซาฟราสใกล้กับแม่น้ำ Alligator ปัญหาสำคัญของสมมติฐานนี้คือ Raleigh วางแผนที่จะสร้างฟาร์มซัสซาฟราสในปี 1587 เพื่อใช้ประโยชน์จากราคาพืชผลที่เพิ่มสูงขึ้นอย่างมาก เพื่อที่เขาจะสามารถชดเชยค่าใช้จ่ายจำนวนมากของอาณานิคมที่ล้มเหลวในปี 1585 ได้อย่างรวดเร็ว^{[ 217 ]}แรงจูงใจทางการเงินที่เสนอมานั้นมองข้ามข้อเท็จจริงที่ว่าการปล้นสะดมของ Richard Grenville ได้ชดเชยค่าใช้จ่ายของการเดินทางในปี 1585 แล้ว^{[ 115 ]}นอกจากนี้ ราคาซัสซาฟราสไม่ได้พุ่งสูงขึ้นจนกระทั่งปลายทศวรรษ 1590 ซึ่งเป็นเวลานานหลังจากมีการก่อตั้งอาณานิคมในปี 1587 ^{[ 219 ]}

พอล กรีนขณะรวบรวมข้อมูลสำหรับบทละครเวทีในปี 1937สังเกตเห็นว่าบันทึกของสเปนในช่วงเวลานั้นมีการอ้างอิงถึงราลีและการตั้งถิ่นฐานของเขามากมาย^{[ 220 ]}กองกำลังสเปนรู้ถึงแผนการของอังกฤษที่จะจัดตั้งฐานทัพใหม่ในเวอร์จิเนียในปี 1587 และกำลังค้นหาฐานทัพนั้นก่อนที่ผู้ตั้งถิ่นฐานของไวท์จะมาถึงเสียอีก จักรวรรดิสเปนได้รวมดินแดนส่วนใหญ่ของอเมริกาเหนือไว้ในข้อเรียกร้องฟลอริดาของตน และไม่ยอมรับสิทธิ์ของอังกฤษในการตั้งอาณานิคมที่โรอาโนกหรืออ่าวเชซาพีค เมื่อพิจารณาจากการที่สเปนปล้นป้อมแคโรไลน์ในปี 1565 ผู้ตั้งถิ่นฐานน่าจะตระหนักถึงภัยคุกคามที่สเปนเป็นตัวแทน^{[ c ] [ 222 ]}อย่างไรก็ตาม สเปนยังคงค้นหาอาณานิคมในอ่าวเชซาพีคจนถึงปี 1600 ซึ่งแสดงให้เห็นว่าพวกเขาเองก็ยังไม่ทราบชะตากรรมของอาณานิคมนั้นเช่นกัน^{[ 223 ]}

ในปี 2006 นักเขียน Scott Dawson เสนอว่าต้นโอ๊กสดทางใต้บนเกาะ Hatteras ซึ่งมีจารึกจางๆ ว่า "CORA" บนเปลือกไม้ อาจเชื่อมโยงกับอาณานิคมที่สาบสูญ ต้นไม้ CORA เคยเป็นหัวข้อของตำนานท้องถิ่น โดยเฉพาะอย่างยิ่งเรื่องราวเกี่ยวกับแม่มดชื่อ "Cora" ซึ่งได้รับความนิยมในหนังสือปี 1989 โดยCharles H. Whedbeeอย่างไรก็ตาม Dawson โต้แย้งว่าจารึกนี้อาจเป็นข้อความอื่นจากผู้ตั้งถิ่นฐาน คล้ายกับจารึก "CROATOAN" ที่ Roanoke ^{[ 224 ]}ถ้าเป็นเช่นนั้น "CORA" อาจบ่งชี้ว่าผู้ตั้งถิ่นฐานออกจากเกาะ Croatoan ไปตั้งรกรากกับCoree (หรือที่รู้จักกันในชื่อ Coranine) บนแผ่นดินใหญ่ใกล้ทะเลสาบ Mattamuskeet ^{[ 198 ]}

การศึกษาในปี 2009 เพื่อกำหนดอายุของต้นไม้ CORA นั้นไม่สามารถสรุปได้ ความเสียหายของต้นไม้ที่เกิดจากฟ้าผ่าและการผุพังทำให้ไม่สามารถเก็บตัวอย่างแก่นไม้ที่ถูกต้องเพื่อใช้ในการหาอายุจากวงปีได้ แม้ว่าต้นไม้จะมีอายุย้อนไปถึง ศตวรรษที่ 16 การกำหนดอายุของจารึกก็จะเป็นอีกเรื่องหนึ่ง^{[ 225 ]}

ระหว่างปี พ.ศ. 2480 ถึง พ.ศ. 2484 มีการค้นพบ ศิลาจารึกหลายชิ้นที่อ้างว่าเขียนโดยเอลีนอร์ แดร์แม่ของเวอร์จิเนีย แดร์ ศิลาจารึกเหล่านั้นบอกเล่าเรื่องราวการเดินทางของเหล่าผู้ตั้งถิ่นฐานและจุดจบของพวกเขา นักประวัติศาสตร์ส่วนใหญ่ในปัจจุบันเชื่อว่าศิลาจารึกเหล่านั้นเป็นของปลอม เพราะการตรวจสอบพบว่าศิลาจารึกทั้งหมด ยกเว้นชิ้นเดียว เชื่อมโยงกับบิล เอเบอร์ฮาร์ด ช่างแกะสลักหิน^{[ 226 ]}บางครั้งศิลาจารึกชิ้นแรกก็ถูกมองว่าแตกต่างจากชิ้นอื่นๆ โดยอาศัยการวิเคราะห์ทางภาษาศาสตร์และเคมี และอาจเป็นของแท้^{[ 227 ]}