การตรวจนับเม็ดเลือดครบถ้วน
| การตรวจนับเม็ดเลือดครบถ้วน | |
|---|---|
 ตัวอย่าง CBC วางอยู่ด้านหน้าเอกสารที่แสดงผลการตรวจ CBC และการแยกชนิดเม็ดเลือดขาว | |
| คำพ้องความหมาย | การนับเม็ดเลือดครบถ้วน[ 1 ]การนับเม็ดเลือดทั้งหมด (FBC) [ 2 ]การนับเม็ดเลือดทั้งหมด[ 3 ]การตรวจเม็ดเลือดทั้งหมด (FBE) [ 2 ]ฮีโมแกรม[ 4 ] |
| เมช | D001772 |
| เมดไลน์พลัส | 003642 |
| โลอิงค์ | รหัสสำหรับ CBCเช่น57021-8 |
| เอชซีพีซีเอส-แอล2 | จี0306 |
การตรวจนับเม็ดเลือดครบถ้วน ( CBC ) หรือที่รู้จักกันในชื่อการตรวจนับเม็ดเลือดเต็มรูปแบบ ( FBC ) หรือฮีโมแกรมเต็ม รูปแบบ ( FHG ) คือชุด การทดสอบ ทางห้องปฏิบัติการทางการแพทย์ที่ให้ข้อมูลเกี่ยวกับเซลล์ ใน เลือดของบุคคลการตรวจ CBC จะแสดงจำนวนเม็ดเลือดขาวเม็ดเลือดแดงและเกล็ดเลือดความเข้มข้นของฮีโมโกลบินและฮีมาโตคริต (เปอร์เซ็นต์ปริมาตรของเม็ดเลือดแดง) นอกจากนี้ยังมีการรายงาน ดัชนีเม็ดเลือดแดงซึ่งบ่งชี้ขนาดเฉลี่ยและปริมาณฮีโมโกลบินของเม็ดเลือดแดง และ อาจมี การตรวจแยกประเภทเม็ดเลือดขาวซึ่งนับจำนวนเม็ดเลือดขาวชนิดต่างๆ ด้วย
การตรวจนับเม็ดเลือดครบถ้วน (CBC) มักทำเป็นส่วนหนึ่งของการตรวจสุขภาพ และสามารถใช้เพื่อติดตามสุขภาพหรือวินิจฉัยโรคได้ ผลลัพธ์จะถูกตีความโดยการเปรียบเทียบกับช่วงค่าอ้างอิงซึ่งแตกต่างกันไปตามเพศและอายุ ภาวะต่างๆ เช่นภาวะโลหิตจางและภาวะเกล็ดเลือดต่ำจะถูกกำหนดโดยผลการตรวจนับเม็ดเลือดครบถ้วนที่ผิดปกติ ดัชนีเม็ดเลือดแดงสามารถให้ข้อมูลเกี่ยวกับสาเหตุของภาวะโลหิตจาง เช่นการขาดธาตุเหล็กและการขาดวิตามินบี 12และผลการตรวจแยกชนิดเม็ดเลือดขาวสามารถช่วยวินิจฉัยการติดเชื้อไวรัสแบคทีเรียและปรสิตรวมถึงความผิดปกติของเลือดเช่นโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวไม่ใช่ทุกผลลัพธ์ที่อยู่นอกช่วงค่าอ้างอิงจะต้องได้รับการรักษาทางการแพทย์
โดยปกติแล้ว การตรวจ CBC จะดำเนินการโดยเครื่องวิเคราะห์โลหิตวิทยาอัตโนมัติซึ่งจะนับเซลล์และรวบรวมข้อมูลเกี่ยวกับขนาดและโครงสร้างของเซลล์ ความเข้มข้นของฮีโมโกลบินจะถูกวัด และดัชนีเม็ดเลือดแดงจะคำนวณจากการวัดเม็ดเลือดแดงและฮีโมโกลบิน การทดสอบด้วยตนเองสามารถใช้เพื่อยืนยันผลลัพธ์ที่ผิดปกติได้โดยอิสระ ประมาณ 10–25% ของตัวอย่างจำเป็นต้องมีการตรวจสอบสเมียร์เลือด ด้วยตนเอง [ 5 ]ซึ่งเลือดจะถูกย้อมสีและดูภายใต้กล้องจุลทรรศน์เพื่อตรวจสอบว่าผลลัพธ์ของเครื่องวิเคราะห์สอดคล้องกับลักษณะของเซลล์และเพื่อมองหาความผิดปกติ ค่าฮีมาโตคริตสามารถกำหนดได้ด้วยตนเองโดยการปั่นเหวี่ยงตัวอย่างและวัดสัดส่วนของเม็ดเลือดแดง และในห้องปฏิบัติการที่ไม่มีเครื่องมืออัตโนมัติ เซลล์เม็ดเลือดจะถูกนับภายใต้กล้องจุลทรรศน์โดยใช้ฮีโมไซโตมิเตอร์
ในปี ค.ศ. 1852 คาร์ล เวียร์ออร์ดต์ได้ตีพิมพ์วิธีการนับเม็ดเลือดเป็นครั้งแรก ซึ่งเกี่ยวข้องกับการนำเลือดปริมาณที่ทราบไปกระจายบนสไลด์กล้องจุลทรรศน์และนับเซลล์ทุกเซลล์ การประดิษฐ์เครื่องนับเม็ดเลือด (hemocytometer) ในปี ค.ศ. 1874 โดยหลุยส์-ชาร์ลส์ มาลาสเซซ์ทำให้การวิเคราะห์เซลล์เม็ดเลือดด้วยกล้องจุลทรรศน์ง่ายขึ้น และในช่วงปลายศตวรรษที่ 19 พอล เออร์ลิชและดมิทรี ลีโอนิโดวิช โรมานอฟสกี ได้พัฒนาเทคนิคการย้อมสีเม็ดเลือดขาวและเม็ดเลือดแดง ซึ่งยังคงใช้ในการตรวจสอบสเมียร์เลือดจนถึงปัจจุบัน วิธีการวัดฮีโมโกลบินแบบอัตโนมัติได้รับการพัฒนาขึ้นในช่วงทศวรรษ ค.ศ. 1920 และแม็กซ์เวลล์ วินโทรบได้แนะนำวิธีการวัดฮีมาโตคริตของวินโทรบในปี ค.ศ. 1929 ซึ่งทำให้เขาสามารถกำหนดดัชนีเม็ดเลือดแดงได้ จุดสำคัญในการนับเม็ดเลือดแบบอัตโนมัติคือหลักการของคูลเตอร์ซึ่งได้รับการจดสิทธิบัตรโดยวอลเลซ เอช. คูลเตอร์ในปี ค.ศ. 1953 หลักการของคูลเตอร์ใช้ การวัด ความต้านทานไฟฟ้าเพื่อนับเซลล์เม็ดเลือดและกำหนดขนาดของเซลล์ เป็นเทคโนโลยีที่ยังคงใช้งานอยู่ในเครื่องวิเคราะห์อัตโนมัติหลายชนิด การวิจัยเพิ่มเติมในช่วงทศวรรษ 1970 เกี่ยวข้องกับการใช้ การวัด ทางแสงเพื่อนับและระบุเซลล์ ซึ่งทำให้สามารถทำการวิเคราะห์แยกประเภทเม็ดเลือดขาวแบบอัตโนมัติได้
วัตถุประสงค์
เลือดประกอบด้วยส่วนที่เป็นของเหลวที่เรียกว่าพลาสมาและส่วนที่เป็นเซลล์ซึ่งประกอบด้วยเม็ดเลือดแดงเม็ดเลือดขาวและเกล็ดเลือด [ หมายเหตุ 1 ] [ 7 ]การตรวจนับเม็ดเลือดครบถ้วนจะประเมินส่วนประกอบของเซลล์ทั้งสามส่วนของเลือด ภาวะทางการแพทย์บางอย่าง เช่นโรคโลหิตจางหรือภาวะเกล็ดเลือดต่ำจะถูกกำหนดโดยการเพิ่มขึ้นหรือลดลงอย่างมากของจำนวนเซลล์เม็ดเลือด[ 8 ]การเปลี่ยนแปลงในระบบอวัยวะ หลาย ระบบอาจส่งผลต่อเลือด ดังนั้นผลการตรวจนับเม็ดเลือดครบถ้วนจึงมีประโยชน์สำหรับการตรวจสอบสภาวะต่างๆ มากมาย เนื่องจากปริมาณข้อมูลที่ให้ การตรวจนับเม็ดเลือดครบถ้วนจึงเป็นหนึ่งในการทดสอบทางห้องปฏิบัติการทางการแพทย์ ที่ทำกันบ่อยที่สุด [ 9 ] [ 10 ] [ 11 ]
การตรวจ CBC มักใช้เพื่อคัดกรองโรคต่างๆ ซึ่งเป็นส่วนหนึ่งของการประเมินทางการแพทย์[ 12 ]นอกจากนี้ยังจำเป็นต้องทำเมื่อผู้ให้บริการด้านการดูแลสุขภาพสงสัยว่าบุคคลนั้นมีโรคที่ส่งผลต่อเซลล์เม็ดเลือด เช่นการติดเชื้อ ความผิดปกติของ การแข็งตัวของเลือดหรือมะเร็ง บางชนิด ผู้ที่ได้รับการวินิจฉัยว่าเป็นโรคที่อาจทำให้ผลการตรวจ CBC ผิดปกติ หรือผู้ที่กำลังรับการรักษาที่อาจส่งผลต่อจำนวนเซลล์เม็ดเลือด อาจได้รับการตรวจ CBC เป็นประจำเพื่อติดตามสุขภาพ[ 4 ] [ 12 ]และมักจะทำการตรวจนี้ทุกวันกับผู้ที่เข้ารับการรักษาในโรงพยาบาล[ 13 ]ผลการตรวจอาจบ่งชี้ถึงความจำเป็นใน การถ่าย เลือดหรือเกล็ดเลือด[ 14 ]
การตรวจนับเม็ดเลือดครบถ้วนมีประโยชน์เฉพาะในหลายสาขาทางการแพทย์มักจะทำก่อนการผ่าตัดเพื่อตรวจหาภาวะโลหิตจาง ตรวจสอบให้แน่ใจว่าระดับเกล็ดเลือดเพียงพอ และคัดกรองการติดเชื้อ[ 15 ] [ 16 ]รวมถึงหลังการผ่าตัดเพื่อตรวจสอบการสูญเสียเลือด[ 12 ] [ 17 ]ในเวชศาสตร์ฉุกเฉินการตรวจนับเม็ดเลือดครบถ้วนใช้ในการตรวจสอบอาการต่างๆ เช่น ไข้ปวดท้องและหายใจถี่ [ 18 ] [ 19 ] [ 20 ] และเพื่อประเมินการตกเลือดและการบาดเจ็บ[ 21 ] [ 22 ] การตรวจนับเม็ดเลือดจะได้รับการตรวจสอบอย่างใกล้ชิดในผู้ที่เข้ารับการรักษาด้วยเคมีบำบัดหรือรังสีรักษาโรคมะเร็ง เนื่องจากวิธีการรักษาเหล่านี้จะยับยั้งการผลิตเซลล์เม็ดเลือดในไขกระดูกและอาจทำให้ระดับเม็ดเลือดขาว เกล็ดเลือด และฮีโมโกลบินลด ลงอย่างรุนแรง [ 23 ]การตรวจนับเม็ดเลือดครบถ้วน (CBC) เป็นประจำมีความจำเป็นสำหรับผู้ที่รับประทานยาทางจิตเวช บางชนิด เช่นโคลซาพีนและคาร์บามาเซพีนซึ่งในบางกรณีอาจทำให้จำนวนเม็ดเลือดขาวลดลงจนเป็นอันตรายถึงชีวิต ( ภาวะเม็ดเลือด ขาวต่ำมาก ) [ 24 ] [ 25 ]เนื่องจากภาวะโลหิตจางในระหว่างตั้งครรภ์อาจส่งผลให้ผลลัพธ์ด้านสุขภาพของมารดาและทารกแย่ลง การตรวจนับเม็ดเลือดครบถ้วนจึงเป็นส่วนหนึ่งของการดูแลก่อนคลอดตาม ปกติ [ 26 ] และในทารกแรกเกิดอาจจำเป็นต้องตรวจ CBC เพื่อตรวจสอบภาวะตัวเหลืองหรือนับจำนวนเซลล์ที่ยังไม่เจริญเต็มที่ในเม็ดเลือดขาวชนิดต่างๆซึ่งอาจเป็นตัวบ่งชี้ของภาวะติดเชื้อในกระแสเลือด[ 27 ] [ 28 ]
การตรวจนับเม็ดเลือดครบถ้วนเป็นเครื่องมือสำคัญของโลหิตวิทยาซึ่งเป็นการศึกษาเกี่ยวกับสาเหตุ การพยากรณ์โรค การรักษา และการป้องกันโรคที่เกี่ยวข้องกับเลือด[ 29 ]ผลการตรวจ CBC และการตรวจเลือดสะท้อนถึงการทำงานของระบบสร้างเม็ดเลือดซึ่งเป็นอวัยวะและเนื้อเยื่อที่เกี่ยวข้องกับการผลิตและการพัฒนาของเซลล์เม็ดเลือด โดยเฉพาะอย่างยิ่งไขกระดูก[ 9 ] [ 30 ]ตัวอย่างเช่น จำนวนเซลล์ทั้งสามชนิดต่ำ ( ภาวะเม็ดเลือด ต่ำทุกชนิด ) อาจบ่งชี้ว่าการผลิตเซลล์เม็ดเลือดได้รับผลกระทบจากความผิดปกติของไขกระดูก และการตรวจไขกระดูกสามารถตรวจสอบสาเหตุเพิ่มเติมได้[ 31 ] เซลล์ที่ ผิดปกติในฟิล์มเลือดอาจบ่งชี้ถึง โรค มะเร็งเม็ดเลือดขาวเฉียบพลันหรือมะเร็งต่อมน้ำเหลือง[ 30 ] ในขณะที่จำนวนนิวโทรฟิ ลหรือลิมโฟไซต์ที่สูงผิดปกติ ร่วมกับอาการที่บ่งชี้และผลการตรวจฟิล์มเลือด อาจทำให้สงสัยว่าเป็นโรคความผิดปกติของไขกระดูกหรือโรคความผิดปกติของระบบน้ำเหลือง การตรวจสอบผล CBC และการตรวจเลือดสามารถช่วยแยกแยะสาเหตุของโรคโลหิตจางได้ เช่นภาวะขาดสารอาหาร ความผิดปกติของไขกระดูก โรคโลหิตจางเม็ดเลือดแดงแตกที่เกิดขึ้นภายหลังและโรคทางพันธุกรรม เช่นโรคโลหิตจางเคียวและธาลัสซีเมีย[ 32 ] [ 33 ]
ช่วงค่าอ้างอิงสำหรับการนับเม็ดเลือดครบถ้วนแสดงถึงช่วงผลลัพธ์ที่พบใน 95% ของคนที่มีสุขภาพดีอย่างเห็นได้ชัด[หมายเหตุ 2 ] [ 35 ]ตามคำจำกัดความ 5% ของผลลัพธ์จะอยู่นอกช่วงนี้เสมอ ดังนั้นผลลัพธ์ที่ผิดปกติบางอย่างอาจสะท้อนถึงความแปรปรวนตามธรรมชาติมากกว่าที่จะบ่งบอกถึงปัญหาทางการแพทย์[ 36 ]โดยเฉพาะอย่างยิ่งหากผลลัพธ์ดังกล่าวอยู่นอกช่วงค่าอ้างอิงเพียงเล็กน้อย หากสอดคล้องกับผลลัพธ์ก่อนหน้า หรือหากไม่มีความผิดปกติอื่น ๆ ที่เกี่ยวข้องแสดงโดย CBC [ 37 ]เมื่อทำการทดสอบในประชากรที่มีสุขภาพค่อนข้างดี จำนวนความผิดปกติที่ไม่สำคัญทางคลินิกอาจเกินจำนวนผลลัพธ์ที่แสดงถึงโรค[ 38 ]ด้วยเหตุนี้ องค์กรวิชาชีพในสหรัฐอเมริกา สหราชอาณาจักร และแคนาดาจึงแนะนำให้หลีกเลี่ยงการทดสอบ CBC ก่อนการผ่าตัดสำหรับการผ่าตัดที่มีความเสี่ยงต่ำในบุคคลที่ไม่มีภาวะทางการแพทย์ที่เกี่ยวข้อง[ 15 ] [ 39 ] [ 40 ]การเจาะเลือดซ้ำเพื่อการทดสอบทางโลหิตวิทยาในผู้ป่วยที่เข้ารับการรักษาในโรงพยาบาลอาจทำให้เกิดภาวะโลหิตจางที่ได้รับจากโรงพยาบาลและอาจส่งผลให้มีการถ่ายเลือดโดยไม่จำเป็น[ 38 ]
ขั้นตอน
เก็บตัวอย่างโดยการเจาะเลือดใส่หลอดที่มีสารกันเลือดแข็งตัว —โดยทั่วไปคือEDTA—เพื่อหยุดการแข็งตัว ตามธรรมชาติ [ 41 ]โดยปกติจะเจาะเลือดจากเส้นเลือดดำแต่หากทำได้ยาก อาจเจาะเลือดจากเส้นเลือดฝอยโดยการเจาะนิ้วหรือเจาะส้นเท้าในทารก[ 42 ] [ 43 ]โดยทั่วไปการทดสอบจะทำโดยใช้เครื่องวิเคราะห์อัตโนมัติ แต่สามารถใช้เทคนิคแบบแมนนวล เช่น การตรวจเลือดด้วยกล้องจุลทรรศน์ หรือการทดสอบฮีมาโตคริตแบบแมนนวล เพื่อตรวจสอบผลลัพธ์ที่ผิดปกติ[ 44 ]การนับเซลล์และการวัดฮีโมโกลบินจะทำด้วยตนเองในห้องปฏิบัติการที่ไม่มีเครื่องมืออัตโนมัติ[ 45 ]
อัตโนมัติ
บนเครื่องวิเคราะห์ ตัวอย่างจะถูกกวนเพื่อให้เซลล์กระจายตัวอย่างสม่ำเสมอ จากนั้นเจือจางและแบ่งออกเป็นอย่างน้อยสองช่อง โดยช่องหนึ่งใช้สำหรับนับเม็ดเลือดแดงและเกล็ดเลือด อีกช่องหนึ่งใช้สำหรับนับเม็ดเลือดขาวและหาความเข้มข้นของฮีโมโกลบิน เครื่องมือบางชนิดวัดฮีโมโกลบินในช่องแยกต่างหาก และอาจใช้ช่องเพิ่มเติมสำหรับการนับเม็ดเลือดขาวชนิดต่างๆ การนับเรติ คิวโลไซต์และการวัดเกล็ดเลือดแบบพิเศษ[ 46 ] [ 47 ] [ 48 ]เซลล์จะถูกแขวนลอยอยู่ในกระแสของเหลวและคุณสมบัติของเซลล์จะถูกวัดขณะที่ไหลผ่านเซ็นเซอร์ในเทคนิคที่เรียกว่าโฟลว์ไซโตเมตรี[หมายเหตุ 3 ] [ 49 ] [ 52 ] อาจใช้ การโฟกัสแบบไฮโดรไดนามิกเพื่อแยกเซลล์แต่ละเซลล์เพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่แม่นยำยิ่งขึ้น: ตัวอย่างที่เจือจางจะถูกฉีดเข้าไปในกระแสของเหลวที่มีแรงดันต่ำ ซึ่งทำให้เซลล์ในตัวอย่างเรียงตัวเป็นแถวเดียวผ่านการไหลแบบลามินาร์[ 53 ] [ 54 ]
ในการวัดความเข้มข้นของฮีโมโกลบิน จะมีการเติมสารเคมี รีเอเจนต์ลงในตัวอย่างเพื่อทำลาย ( สลาย ) เซลล์เม็ดเลือดแดงในช่องที่แยกจากช่องที่ใช้สำหรับการนับเซลล์เม็ดเลือดแดง ในเครื่องวิเคราะห์ที่ทำการนับเซลล์เม็ดเลือดขาวในช่องเดียวกันกับการวัดฮีโมโกลบิน วิธีนี้จะช่วยให้สามารถนับเซลล์เม็ดเลือดขาวได้ง่ายขึ้น[ 55 ]เครื่องวิเคราะห์โลหิตวิทยาจะวัดฮีโมโกลบินโดยใช้สเปกโทรโฟโตเมตรีและอาศัยความสัมพันธ์เชิงเส้นระหว่างการดูดกลืนแสงและปริมาณของฮีโมโกลบินที่มีอยู่ สารเคมีจะถูกใช้เพื่อแปลงฮีโมโกลบินในรูปแบบต่างๆ เช่นออกซีฮีโมโก ลบิน และ คาร์บอกซีฮี โมโกลบินให้เป็นรูปแบบที่เสถียรรูปแบบเดียว ซึ่งโดยปกติคือไซยาโนเมทฮีโมโกลบินและเพื่อสร้างการเปลี่ยนแปลงสีถาวร การดูดกลืนแสงของสีที่ได้ เมื่อวัดที่ความยาวคลื่นเฉพาะ ซึ่งโดยปกติคือ 540 นาโนเมตรจะสอดคล้องกับความเข้มข้นของฮีโมโกลบิน[ 56 ] [ 57 ]
เซนเซอร์นับและระบุเซลล์ในตัวอย่างโดยใช้หลักการหลักสองประการ ได้แก่อิมพีแดนซ์ทางไฟฟ้าและการกระเจิงของแสง [ 58 ] การนับเซลล์โดยใช้อิมพีแดนซ์ทำงานตามหลักการของคูลเตอร์ : เซลล์ถูกแขวนลอยอยู่ในของเหลวที่มีกระแสไฟฟ้าและเมื่อเซลล์ผ่านช่องเปิดเล็กๆ (ช่องเปิด) จะทำให้กระแสไฟฟ้าลดลงเนื่องจากการนำไฟฟ้า ที่ไม่ดี แอมพลิจูดของ พัลส์แรงดัน ไฟฟ้าที่เกิดขึ้นเมื่อเซลล์ผ่านช่องเปิดจะสัมพันธ์กับปริมาณของของเหลวที่ถูกแทนที่โดยเซลล์ และด้วยเหตุนี้จึงสัมพันธ์กับปริมาตรของเซลล์[ 59 ] [ 60 ]ในขณะที่จำนวนพัลส์ทั้งหมดจะสัมพันธ์กับจำนวนเซลล์ในตัวอย่าง การกระจายของปริมาตรเซลล์จะถูกพล็อตบนฮิสโตแกรมและโดยการตั้งค่าเกณฑ์ปริมาตรตามขนาดทั่วไปของเซลล์แต่ละประเภท จะสามารถระบุและนับประชากรเซลล์ที่แตกต่างกันได้[ 61 ]
ในเทคนิคการกระเจิงแสง แสงจากเลเซอร์หรือหลอดไฟทังสเตน-ฮาโลเจนจะถูกส่งไปยังกลุ่มเซลล์เพื่อรวบรวมข้อมูลเกี่ยวกับขนาดและโครงสร้างของเซลล์ เซลล์จะกระเจิงแสงในมุมต่างๆ ขณะที่ผ่านลำแสง ซึ่งจะถูกตรวจจับโดยใช้โฟโตมิเตอร์ [ 62 ] การกระเจิงไปข้างหน้า ซึ่งหมายถึงปริมาณแสงที่กระเจิงไปตามแกนของลำแสง ส่วนใหญ่เกิดจากการเลี้ยวเบนของแสงและมีความสัมพันธ์กับขนาดของเซลล์ ในขณะที่การกระเจิงด้านข้าง (แสงที่กระเจิงในมุม 90 องศา) เกิดจากการสะท้อนและการหักเหและให้ข้อมูลเกี่ยวกับความซับซ้อนของเซลล์[ 62 ] [ 63 ]
วิธีการที่ใช้คลื่น ความถี่วิทยุสามารถใช้ร่วมกับอิมพีแดนซ์ได้ เทคนิคเหล่านี้ทำงานบนหลักการเดียวกันคือการวัดการหยุดชะงักของกระแสไฟฟ้าเมื่อเซลล์ผ่านช่องเปิด แต่เนื่องจาก กระแส RF ความถี่สูงแทรกซึมเข้าไปในเซลล์ แอมพลิจูดของพัลส์ที่เกิดขึ้นจึงสัมพันธ์กับปัจจัยต่างๆ เช่น ขนาดสัมพัทธ์ของนิวเคลียสโครงสร้างของนิวเคลียส และปริมาณของเม็ดในไซโตพลาสซึม[ 64 ] [ 65 ]เซลล์เม็ดเลือดแดงขนาดเล็กและเศษเซลล์ ซึ่งมีขนาดใกล้เคียงกับเกล็ดเลือด อาจรบกวนการนับเกล็ดเลือด และเกล็ดเลือดขนาดใหญ่อาจนับไม่แม่นยำ ดังนั้นเครื่องวิเคราะห์บางชนิดจึงใช้เทคนิคเพิ่มเติมในการวัดเกล็ดเลือด เช่น การย้อม สีเรืองแสงการกระเจิงแสงหลายมุม และการติด แท็ก แอนติบอดีโมโนโคลนอ ล [ 48 ]
เครื่องวิเคราะห์ส่วนใหญ่จะวัดขนาดเฉลี่ยของเม็ดเลือดแดงโดยตรง ซึ่งเรียกว่าปริมาตรเซลล์เฉลี่ย (MCV) และคำนวณค่าฮีมาโตคริตโดยการคูณจำนวนเม็ดเลือดแดงด้วย MCV บางเครื่องวัดค่าฮีมาโตคริตโดยการเปรียบเทียบปริมาตรทั้งหมดของเม็ดเลือดแดงกับปริมาตรของเลือดที่เก็บตัวอย่าง และหาค่า MCV จากค่าฮีมาโตคริตและจำนวนเม็ดเลือดแดง[ 66 ]ความเข้มข้นของฮีโมโกลบิน จำนวนเม็ดเลือดแดง และฮีมาโตคริตถูกนำมาใช้ในการคำนวณปริมาณฮีโมโกลบินเฉลี่ยภายในเม็ดเลือดแดงแต่ละเซลล์ ซึ่งเรียกว่าฮีโมโกลบินเฉลี่ย ในเม็ดเลือดแดง (MCH) และความเข้มข้นของมัน ซึ่งเรียกว่าความเข้มข้นของฮีโมโกลบินเฉลี่ยในเม็ดเลือดแดง (MCHC) [ 67 ]การคำนวณอีกอย่างหนึ่ง คือ ความกว้างของการกระจายตัวของเม็ดเลือดแดง (RDW) ซึ่งได้มาจากค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานของปริมาตรเซลล์เฉลี่ยและสะท้อนถึงความแปรผันของขนาดเซลล์[ 68 ]
หลังจากได้รับการบำบัดด้วยรีเอเจนต์ เซลล์เม็ดเลือดขาวจะก่อตัวเป็นยอดสามยอดที่แตกต่างกันเมื่อพล็อตปริมาตรของเซลล์เหล่านั้นลงบนฮิสโตแกรม ยอดเหล่านี้สอดคล้องกับประชากรของแกรนูโลไซต์ ลิมโฟไซต์ และ เซลล์โมโนนิวเคลียร์อื่นๆ โดยประมาณ ทำให้สามารถทำการแยกแยะแบบสามส่วนได้โดยอาศัยปริมาตรของเซลล์เพียงอย่างเดียว[ 69 ] [ 70 ]เครื่องวิเคราะห์ขั้นสูงกว่าจะใช้เทคนิคเพิ่มเติมเพื่อให้ได้การแยกแยะแบบห้าถึงเจ็ดส่วน เช่น การกระเจิงของแสงหรือการวิเคราะห์คลื่นความถี่วิทยุ[ 70 ]หรือการใช้สีย้อมเพื่อย้อมสารเคมีเฉพาะภายในเซลล์ เช่นกรดนิวคลีอิกซึ่งพบในความเข้มข้นที่สูงกว่าในเซลล์ที่ยังไม่เจริญเต็มที่[ 71 ]หรือไมอีโลเปอร์ออกซิเดส ซึ่งเป็นเอนไซม์ที่พบในเซลล์ของสายพันธุ์ไมอีลอยด์[ 72 ] [ 73 ] อาจนับ เบโซฟิลในช่องแยกต่างหากซึ่งรีเอเจนต์จะทำลายเซลล์เม็ดเลือดขาวอื่นๆ และปล่อยให้เบโซฟิลคงสภาพเดิม ข้อมูลที่รวบรวมจากการวัดเหล่านี้จะถูกวิเคราะห์และพล็อตลงบนแผนภาพกระจายซึ่งจะเกิดเป็นกลุ่มที่สัมพันธ์กับเม็ดเลือดขาวแต่ละชนิด[ 70 ] [ 72 ]อีกแนวทางหนึ่งในการนับแยกประเภทโดยอัตโนมัติคือการใช้ซอฟต์แวร์กล้องจุลทรรศน์ดิจิทัล[ 74 ]ซึ่งใช้ปัญญาประดิษฐ์ในการจำแนกเม็ดเลือดขาวจากภาพถ่ายจุลทรรศน์ของสเมียร์เลือด ภาพเซลล์จะแสดงให้ผู้ปฏิบัติงานเห็น ซึ่งสามารถจำแนกเซลล์ใหม่ด้วยตนเองได้หากจำเป็น[ 75 ]
เครื่องวิเคราะห์ส่วนใหญ่ใช้เวลาน้อยกว่าหนึ่งนาทีในการดำเนินการทดสอบทั้งหมดในการนับเม็ดเลือดครบถ้วน[ 58 ]เนื่องจากเครื่องวิเคราะห์จะสุ่มตัวอย่างและนับเซลล์แต่ละเซลล์จำนวนมาก ผลลัพธ์จึงมีความแม่นยำมาก[ 76 ]อย่างไรก็ตาม เซลล์ที่ผิดปกติบางเซลล์อาจไม่ได้รับการระบุอย่างถูกต้อง จำเป็นต้องมีการตรวจสอบผลลัพธ์ของเครื่องมือด้วยตนเองและการระบุเซลล์ที่ผิดปกติที่เครื่องมือไม่สามารถจัดประเภทได้ด้วยวิธีการอื่น[ 5 ] [ 77 ]
การตรวจวินิจฉัย ณ จุดดูแลผู้ป่วย
การทดสอบ ณ จุดดูแลหมายถึง การทดสอบที่ดำเนินการนอกห้องปฏิบัติการ เช่น ที่ข้างเตียงผู้ป่วยหรือในคลินิก[ 78 ] [ 79 ]วิธีการทดสอบนี้เร็วกว่าและใช้เลือดน้อยกว่าวิธีการแบบดั้งเดิม และไม่จำเป็นต้องใช้บุคลากรที่ได้รับการฝึกฝนมาเป็นพิเศษ จึงมีประโยชน์ในสถานการณ์ฉุกเฉินและในพื้นที่ที่มีทรัพยากรจำกัด อุปกรณ์ที่ใช้กันทั่วไปสำหรับการทดสอบโลหิตวิทยา ณ จุดดูแล ได้แก่HemoCueซึ่งเป็นเครื่องวิเคราะห์แบบพกพาที่ใช้สเปกโทรโฟโตเมตรีในการวัดความเข้มข้นของฮีโมโกลบินในตัวอย่าง และi-STATซึ่งได้ค่าฮีโมโกลบินโดยการประมาณความเข้มข้นของเซลล์เม็ดเลือดแดงจากค่าการนำไฟฟ้าของเลือด[ 79 ] สามารถวัดฮีโมโกลบินและฮีมาโตคริตได้ด้วยอุปกรณ์ ณ จุดดูแลที่ออกแบบมาสำหรับการทดสอบก๊าซในเลือดแต่บางครั้งการวัดเหล่านี้มีความสัมพันธ์ที่ไม่ดีกับการวัดที่ได้จากวิธีการมาตรฐาน[ 78 ]มีเครื่องวิเคราะห์โลหิตวิทยาแบบง่ายที่ออกแบบมาสำหรับใช้ในคลินิกซึ่งสามารถให้ผลการตรวจนับเม็ดเลือดครบถ้วนและแยกประเภทได้[ 80 ]
คู่มือ
การทดสอบสามารถดำเนินการด้วยตนเองได้เมื่อไม่มีอุปกรณ์อัตโนมัติ หรือเมื่อผลการวิเคราะห์บ่งชี้ว่าจำเป็นต้องมีการตรวจสอบเพิ่มเติม[ 45 ]ผลลัพธ์อัตโนมัติจะถูกทำเครื่องหมายสำหรับการตรวจสอบสเมียร์เลือดด้วยตนเองใน 10–25% ของกรณี ซึ่งอาจเกิดจากประชากรเซลล์ที่ผิดปกติซึ่งเครื่องวิเคราะห์ไม่สามารถนับได้อย่างถูกต้อง[ 5 ]สัญญาณเตือนภายในที่สร้างขึ้นโดยเครื่องวิเคราะห์ที่บ่งชี้ว่าผลลัพธ์อาจไม่ถูกต้อง[ 81 ]หรือผลลัพธ์เชิงตัวเลขที่อยู่นอกเกณฑ์ที่กำหนด[ 77 ]เพื่อตรวจสอบปัญหาเหล่านี้ เลือดจะถูกกระจายบนสไลด์กล้องจุลทรรศน์ ย้อมด้วยสีย้อมโรมานอฟสกีและตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์[ 82 ] จะมีการประเมินลักษณะของเม็ดเลือดแดง เม็ดเลือดขาว และเกล็ดเลือด และรายงานความผิดปกติเชิงคุณภาพหากมีอยู่[ 83 ]การเปลี่ยนแปลงลักษณะของเม็ดเลือดแดงอาจมีความสำคัญต่อการวินิจฉัยอย่างมาก เช่น การมีเซลล์รูปเคียวบ่งชี้ถึงโรคโลหิตจางชนิดเซลล์เคียวและการมีเม็ดเลือดแดงแตกเป็นชิ้นเล็กๆ จำนวนมาก ( schistocytes ) จำเป็นต้องได้รับการตรวจสอบอย่างเร่งด่วน เนื่องจากอาจบ่งชี้ถึงภาวะโลหิตจางจากเม็ดเลือดแดงแตกจากหลอดเลือดฝอย [ 84 ] ในภาวะอักเสบบางอย่างและใน ความผิดปกติ ของโปรตีนเช่นมัลติเพิลไมอีโลมาระดับโปรตีนในเลือดสูงอาจทำให้เม็ดเลือดแดงปรากฏเรียงซ้อนกันบนสเมียร์ ซึ่งเรียกว่าrouleaux [ 85 ]โรคปรสิตบางชนิดเช่นมาลาเรียและบาเบซิโอซิสสามารถตรวจพบได้โดยการค้นหาเชื้อก่อโรคบนสเมียร์เลือด[ 86 ] และสามารถประมาณจำนวนเกล็ดเลือดได้จากสเมียร์เลือด ซึ่งมีประโยชน์หากการนับเกล็ดเลือดอัตโนมัติไม่แม่นยำ[ 77 ]
ในการนับแยกชนิดเม็ดเลือดขาวด้วยตนเอง นักจุลทรรศน์จะนับเซลล์ 100 เซลล์บนสไลด์เลือดและจำแนกตามลักษณะที่ปรากฏ บางครั้งอาจนับถึง 200 เซลล์[ 87 ]ซึ่งจะให้เปอร์เซ็นต์ของเม็ดเลือดขาวแต่ละชนิด และเมื่อคูณเปอร์เซ็นต์เหล่านี้ด้วยจำนวนเม็ดเลือดขาวทั้งหมด จะได้จำนวนเม็ดเลือดขาวแต่ละชนิดที่แน่นอน[ 88 ] การนับด้วยตนเองอาจมีข้อผิดพลาดจากการสุ่มตัวอย่างเนื่องจากนับเซลล์น้อยมากเมื่อเทียบกับการวิเคราะห์อัตโนมัติ[ 76 ]แต่สามารถระบุเซลล์ที่ผิดปกติซึ่งเครื่องวิเคราะห์ไม่สามารถระบุได้[ 72 ] [ 77 ]เช่นเซลล์บลาสท์ที่พบในมะเร็งเม็ดเลือดขาวเฉียบพลัน[ 89 ]ลักษณะทางคลินิกที่สำคัญ เช่นการเกิดเม็ดเลือดที่เป็นพิษและการเกิดช่องว่างสามารถตรวจสอบได้จากการตรวจเม็ดเลือดขาวด้วยกล้องจุลทรรศน์[ 90 ]
การตรวจฮีมาโตคริตสามารถทำได้ด้วยตนเองโดยการเติมเลือดลงในหลอดแคปิลลารี ปั่นเหวี่ยง และวัดเปอร์เซ็นต์ของเลือดที่ประกอบด้วยเม็ดเลือดแดง[ 66 ] วิธีนี้มีประโยชน์ในบางสภาวะที่อาจทำให้ผลการตรวจฮีมาโตคริตอัตโนมัติไม่ถูกต้อง เช่น ภาวะ เม็ดเลือดแดงมากเกินไป (จำนวนเม็ดเลือดแดงสูงมาก) [ 66 ]หรือภาวะเม็ดเลือด ขาวมากเกินไปอย่างรุนแรง (จำนวนเม็ดเลือดขาวสูงมาก ซึ่งรบกวนการวัดเม็ดเลือดแดงโดยทำให้เม็ดเลือดขาวถูกนับเป็นเม็ดเลือดแดง) [ 91 ]
สามารถนับเม็ดเลือดแดง เม็ดเลือดขาว และเกล็ดเลือดได้โดยใช้ฮีโมไซโตมิเตอร์ซึ่งเป็นแผ่นสไลด์กล้องจุลทรรศน์ที่มีช่องสำหรับบรรจุเลือดเจือจางในปริมาณที่กำหนด ช่องของฮีโมไซโตมิเตอร์มีการสลักตารางที่สอบเทียบไว้เพื่อช่วยในการนับเซลล์ เซลล์ที่เห็นในตารางจะถูกนับและหารด้วยปริมาตรของเลือดที่ตรวจสอบ ซึ่งกำหนดจากจำนวนช่องที่นับได้ในตาราง เพื่อให้ได้ความเข้มข้นของเซลล์ในตัวอย่าง[ 45 ] [ 92 ]การนับเซลล์ด้วยมือเป็นกระบวนการที่ต้องใช้แรงงานมากและไม่แม่นยำเมื่อเทียบกับวิธีการอัตโนมัติ ดังนั้นจึงไม่ค่อยได้ใช้ ยกเว้นในห้องปฏิบัติการที่ไม่มีเครื่องวิเคราะห์อัตโนมัติ[ 45 ] [ 92 ]ในการนับเม็ดเลือดขาว ตัวอย่างจะถูกเจือจางโดยใช้ของเหลวที่มีสารประกอบที่ทำลายเม็ดเลือดแดง เช่นแอมโมเนียมออกซาเลต กรดอะซิติกหรือกรดไฮโดรคลอริก[ 93 ]บางครั้งมีการเติมสีย้อมลงในสารเจือจางเพื่อเน้นนิวเคลียสของเซลล์เม็ดเลือดขาว ทำให้ระบุได้ง่ายขึ้น การนับเกล็ดเลือดด้วยมือก็ทำในลักษณะเดียวกัน แม้ว่าบางวิธีจะไม่ได้ทำให้เซลล์เม็ดเลือดแดงเสียหาย การใช้กล้องจุลทรรศน์แบบเฟสคอนทราสต์แทนกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงสามารถทำให้ระบุเกล็ดเลือดได้ง่ายขึ้น[ 94 ]การนับเซลล์เม็ดเลือดแดงด้วยมือไม่ค่อยได้ทำกัน เนื่องจากมีความไม่แม่นยำ และมีวิธีการอื่น ๆ เช่น การวัดฮีโมโกลบินและการวัดฮีมาโตคริตด้วยมือสำหรับการประเมินเซลล์เม็ดเลือดแดง แต่ถ้าจำเป็นต้องทำ เซลล์เม็ดเลือดแดงสามารถนับได้ในเลือดที่เจือจางด้วยน้ำเกลือ[ 95 ]
สามารถวัดฮีโมโกลบินด้วยตนเองโดยใช้สเปกโตรโฟโตมิเตอร์หรือคัลเลอริมิเตอร์ได้ ในการวัดฮีโมโกลบินด้วยตนเอง จะต้องเจือจางตัวอย่างโดยใช้สารเคมีที่ทำลายเซลล์เม็ดเลือดแดงเพื่อปลดปล่อยฮีโมโกลบินออกมา นอกจากนี้ยังใช้สารเคมีอื่นๆ ในการแปลงฮีโมโกลบินชนิดต่างๆ ให้เป็นรูปแบบเดียว ทำให้สามารถวัดได้ง่าย จากนั้นจึงนำสารละลายใส่ในคิวเวตต์ สำหรับวัด และวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่นเฉพาะ ซึ่งขึ้นอยู่กับชนิดของสารเคมีที่ใช้ จะใช้สารมาตรฐานอ้างอิงที่มีปริมาณฮีโมโกลบินที่ทราบแล้ว เพื่อกำหนดความสัมพันธ์ระหว่างค่าการดูดกลืนแสงและความเข้มข้นของฮีโมโกลบิน ทำให้สามารถวัดระดับฮีโมโกลบินของตัวอย่างได้[ 96 ]
ในพื้นที่ชนบทและพื้นที่ด้อยโอกาสทางเศรษฐกิจ การทดสอบที่มีอยู่จะถูกจำกัดด้วยการเข้าถึงอุปกรณ์และบุคลากร ที่ สถาน พยาบาลปฐมภูมิในภูมิภาคเหล่านี้ การทดสอบอาจจำกัดอยู่เพียงการตรวจสอบรูปร่างของเซลล์เม็ดเลือดแดงและการวัดฮีโมโกลบินด้วยตนเอง ในขณะที่เทคนิคที่ซับซ้อนกว่า เช่น การนับเซลล์ด้วยตนเองและการจำแนกประเภท และบางครั้งการนับเซลล์อัตโนมัติ จะดำเนินการที่ห้องปฏิบัติการระดับอำเภอ โรงพยาบาลระดับภูมิภาคและจังหวัด และศูนย์วิชาการมักจะสามารถเข้าถึงเครื่องวิเคราะห์อัตโนมัติได้ ในกรณีที่ไม่มีห้องปฏิบัติการ สามารถประมาณความเข้มข้นของฮีโมโกลบินได้โดยการหยดเลือดลงบนกระดาษดูดซับชนิดมาตรฐานและเปรียบเทียบกับมาตราส่วนสี[ 97 ]
การควบคุมคุณภาพ
เครื่องวิเคราะห์อัตโนมัติต้องได้รับการสอบเทียบ อย่างสม่ำเสมอ ผู้ผลิตส่วนใหญ่จัดหาเลือดที่เก็บรักษาไว้พร้อมพารามิเตอร์ที่กำหนดไว้ และจะปรับเครื่องวิเคราะห์หากผลลัพธ์อยู่นอกเหนือเกณฑ์ที่กำหนด[ 98 ]เพื่อให้แน่ใจว่าผลลัพธ์ยังคงแม่นยำ ตัวอย่างควบคุมคุณภาพ ซึ่งโดยทั่วไปจัดหาโดยผู้ผลิตเครื่องมือ จะได้รับการทดสอบอย่างน้อยวันละครั้ง ตัวอย่างเหล่านี้ได้รับการเตรียมเพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่เฉพาะเจาะจง และห้องปฏิบัติการจะเปรียบเทียบผลลัพธ์กับค่าที่ทราบเพื่อให้แน่ใจว่าเครื่องมือทำงานได้อย่างถูกต้อง[ 99 ] [ 100 ]สำหรับห้องปฏิบัติการที่ไม่มีวัสดุควบคุมคุณภาพเชิงพาณิชย์ องค์กรกำกับดูแลของอินเดียแนะนำให้ทำการทดสอบตัวอย่างผู้ป่วยซ้ำสองครั้งและเปรียบเทียบผลลัพธ์[ 101 ]การ วัดค่า เฉลี่ยเคลื่อนที่ซึ่งวัดค่าเฉลี่ยของผลลัพธ์สำหรับตัวอย่างผู้ป่วยในช่วงเวลาที่กำหนด สามารถใช้เป็นเทคนิคการควบคุมคุณภาพเพิ่มเติมได้ สมมติว่าลักษณะของประชากรผู้ป่วยยังคงเหมือนเดิมโดยประมาณตลอดเวลา ค่าเฉลี่ยควรคงที่ การเปลี่ยนแปลงอย่างมากในค่าเฉลี่ยอาจบ่งชี้ถึงปัญหาของเครื่องมือ[ 99 ] [ 100 ]ค่า MCHC มีประโยชน์อย่างยิ่งในเรื่องนี้[ 102 ]
นอกจากการวิเคราะห์ ตัวอย่าง ควบคุมคุณภาพ ภายใน ที่มีผลลัพธ์ที่ทราบแล้ว ห้องปฏิบัติการอาจได้รับตัวอย่างการประเมินคุณภาพภายนอก จากองค์กรกำกับดูแล ในขณะที่วัตถุประสงค์ของการควบคุมคุณภาพภายในคือเพื่อให้แน่ใจว่าผลลัพธ์ของเครื่องวิเคราะห์สามารถ ทำซ้ำได้ภายในห้องปฏิบัติการที่กำหนด การประเมินคุณภาพภายนอกจะตรวจสอบว่าผลลัพธ์จากห้องปฏิบัติการต่างๆ สอดคล้องกันและสอดคล้องกับค่าเป้าหมาย[ 103 ]ผลลัพธ์ที่คาดหวังสำหรับตัวอย่างการประเมินคุณภาพภายนอกจะไม่ถูกเปิดเผยต่อห้องปฏิบัติการ[ 104 ]โปรแกรมการประเมินคุณภาพภายนอกได้รับการนำมาใช้อย่างกว้างขวางในอเมริกาเหนือและยุโรปตะวันตก[ 99 ]และห้องปฏิบัติการมักจะต้องเข้าร่วมในโปรแกรมเหล่านี้เพื่อรักษาการรับรอง[ 105 ] ปัญหาด้านโลจิสติกส์อาจทำให้ห้องปฏิบัติการในพื้นที่ที่มีทรัพยากรจำกัดดำเนินการตามแผนการประเมินคุณภาพภายนอกได้ยาก[ 106 ]
การทดสอบที่รวมอยู่ด้วย
| สารวิเคราะห์ | ความหมาย |
|---|---|
| ดับเบิลยูบีซี | ความเข้มข้นของเม็ดเลือดขาว |
| เม็ดเลือดแดง | ความเข้มข้นของเม็ดเลือดแดง |
| เอชจีบี | ความเข้มข้นของฮีโมโกลบิน |
| เอชซีที | เศษส่วนฮีมาโตคริต |
| เอ็มซีวี | ปริมาตรเซลล์เฉลี่ย |
| เอ็มเอช | มวลฮีโมโกลบินในเม็ดเลือดแดงเฉลี่ย |
| เอ็มซีเอชซี | ความเข้มข้นของฮีโมโกลบินในเม็ดเลือดแดงเฉลี่ย |
| อาร์ดีดับบลิว-ซีวี | ความกว้างของการกระจายปริมาตรเม็ดเลือดแดงที่คำนวณเป็นเปอร์เซ็นต์ |
| อาร์ดีดับบลิว-เอสดี | ความกว้างของการกระจายปริมาตรเม็ดเลือดแดงที่ความสูงฮิสโตแกรม 20% |
| พีแอลที | ความเข้มข้นของเกล็ดเลือด |
| เอ็มพีวี | ปริมาตรเกล็ดเลือดเฉลี่ย |
| NEUT | ความเข้มข้นและ/หรือสัดส่วนของนิวโทรฟิล |
| น้ำเหลือง | ความเข้มข้นและ/หรือสัดส่วนของลิมโฟไซต์ |
| โมโน | ความเข้มข้นและ/หรือสัดส่วนของโมโนไซต์ |
| อีโอ | ความเข้มข้นและ/หรือสัดส่วนของอีโอซิโนฟิล |
| บาโซ | ความเข้มข้นและ/หรือสัดส่วนของเบโซฟิล |
| ไอจี | ความเข้มข้นและ/หรือสัดส่วนของเม็ดเลือดขาวชนิดแกรนูโลไซต์ที่ยังไม่เจริญเต็มที่ |
| NRBC | ความเข้มข้นและ/หรือสัดส่วนของเซลล์เม็ดเลือดแดงที่มีนิวเคลียส |
การตรวจ CBC จะวัดปริมาณเกล็ดเลือด เม็ดเลือดแดง และเม็ดเลือดขาว รวมถึงค่าฮีโมโกลบินและฮีมาโตคริต ดัชนีเม็ดเลือดแดง—MCV, MCH และ MCHC—ซึ่งอธิบายขนาดของเม็ดเลือดแดงและปริมาณฮีโมโกลบิน จะถูกรายงานพร้อมกับความกว้างของการกระจายตัวของเม็ดเลือดแดง (RDW) ซึ่งวัดปริมาณความแปรปรวนของขนาดเม็ดเลือดแดง อาจมีการตรวจแยกประเภทเม็ดเลือดขาว ซึ่งนับจำนวนเม็ดเลือดขาวชนิดต่างๆ และบางครั้งอาจรวมถึงการนับเม็ดเลือดแดงที่ยังไม่เจริญเต็มที่ (เรติคิวโลไซต์) ด้วย[ 4 ] [ 107 ]
เม็ดเลือดแดง ฮีโมโกลบิน และฮีมาโตคริต
| สารวิเคราะห์ | ผลลัพธ์ | ช่วงปกติ |
|---|---|---|
| จำนวนเม็ดเลือดแดง | 5.5 × 10 12 /ลิตร | 4.5–5.7 |
| จำนวนเม็ดเลือดขาว | 9.8 × 10 9 /ลิตร | 4.0–10.0 |
| เฮโมโกลบิน | 123 กรัม/ลิตร | 133–167 |
| ฮีมาโตคริต | 0.42 | 0.35–0.53 |
| เอ็มซีวี | 76 ฟล. | 77–98 |
| เอ็มเอช | 22.4 หน้า | 26–33 |
| เอ็มซีเอชซี | 293 กรัม/ลิตร | 330–370 |
| อาร์ดีดับบลิว | 14.5% | 10.3–15.3 |
เซลล์เม็ดเลือดแดงทำหน้าที่นำออกซิเจนจากปอดไปยังเนื้อเยื่อ และเมื่อกลับมาก็จะนำคาร์บอนไดออกไซด์กลับไปยังปอดเพื่อขับออกทางลมหายใจ หน้าที่เหล่านี้เกิดขึ้นโดยอาศัยฮีโมโกลบินของเซลล์[ 109 ]เครื่องวิเคราะห์จะนับเซลล์เม็ดเลือดแดง โดยรายงานผลเป็นหน่วย 10⁶ เซลล์ต่อไมโครลิตรของเลือด (× 10⁶ / μL) หรือ10¹²เซลล์ต่อลิตร (× 10¹² /L) และวัดขนาดเฉลี่ยของเซลล์ ซึ่งเรียกว่าปริมาตรเซลล์เฉลี่ยและแสดงในหน่วยเฟมโตลิตรหรือลูกบาศก์ไมโครเมตร[ 4 ]โดยการคูณปริมาตรเซลล์เฉลี่ยด้วยจำนวนเซลล์เม็ดเลือดแดง จะได้ค่าฮีมาโตคริต (HCT) หรือปริมาตรเซลล์อัดแน่น (PCV) ซึ่งเป็นการวัดเปอร์เซ็นต์ของเลือดที่ประกอบด้วยเซลล์เม็ดเลือดแดง[ 66 ]และเมื่อทำการวัดฮีมาโตคริตโดยตรง ปริมาตรเซลล์เฉลี่ยอาจคำนวณได้จากค่าฮีมาโตคริตและจำนวนเซลล์เม็ดเลือดแดง[ 110 ] [ 111 ]ฮีโมโกลบิน ซึ่งวัดหลังจากเม็ดเลือดแดงแตกตัวแล้ว มักจะรายงานเป็นหน่วยกรัมต่อลิตร (g/L) หรือกรัมต่อเดซิลิตร (g/dL) [ 112 ]สมมติว่าเม็ดเลือดแดงปกติ จะมีความสัมพันธ์คงที่ระหว่างฮีโมโกลบินและฮีมาโตคริต: เปอร์เซ็นต์ฮีมาโตคริตจะมากกว่าค่าฮีโมโกลบินในหน่วย g/dL ประมาณสามเท่า บวกหรือลบสาม ความสัมพันธ์นี้เรียกว่ากฎสามเท่าสามารถใช้เพื่อยืนยันว่าผลการตรวจ CBC ถูกต้อง[ 113 ]
มีการคำนวณการวัดอีกสองอย่างจากจำนวนเม็ดเลือดแดง ความเข้มข้นของฮีโมโกลบิน และฮีมาโตคริต ได้แก่ฮีโมโกลบินเฉลี่ยในเม็ดเลือดแดงและ ความเข้มข้น ของฮีโมโกลบินเฉลี่ยใน เม็ดเลือดแดง [ 114 ] [ 115 ]พารามิเตอร์เหล่านี้อธิบายปริมาณฮีโมโกลบินในเม็ดเลือดแดงแต่ละเซลล์ MCH และ MCHC อาจทำให้สับสนได้ โดยพื้นฐานแล้ว MCH เป็นการวัดปริมาณฮีโมโกลบินเฉลี่ยต่อเม็ดเลือดแดงหนึ่งเซลล์ ส่วน MCHC แสดงสัดส่วนเฉลี่ยของเซลล์ที่เป็นฮีโมโกลบิน MCH ไม่ได้คำนึงถึงขนาดเม็ดเลือดแดง ในขณะที่ MCHC คำนึงถึง[ 116 ]โดยรวมแล้ว MCV, MCH และ MCHC เรียกว่าดัชนีเม็ดเลือดแดง[ 114 ] [ 115 ]การเปลี่ยนแปลงของดัชนีเหล่านี้สามารถมองเห็นได้จากสเมียร์เลือด: เม็ดเลือดแดงที่มีขนาดใหญ่หรือเล็กผิดปกติสามารถระบุได้โดยการเปรียบเทียบกับขนาดของเม็ดเลือดขาว และเซลล์ที่มีความเข้มข้นของฮีโมโกลบินต่ำจะปรากฏเป็นสีซีด[ 117 ]พารามิเตอร์อีกตัวหนึ่งคำนวณจากการวัดเม็ดเลือดแดงเริ่มต้น: ความกว้างของการกระจายตัวของเม็ดเลือดแดงหรือ RDW ซึ่งสะท้อนถึงระดับความแปรผันของขนาดเซลล์[ 118 ]
ระดับฮีโมโกลบิน ฮีมาโตคริต หรือจำนวนเม็ดเลือดแดงที่ต่ำกว่าปกติ บ่งชี้ถึงภาวะโลหิตจาง[ 119 ]ภาวะโลหิตจางไม่ใช่การวินิจฉัยโรคโดยตรง แต่เป็นการชี้ให้เห็นถึงภาวะพื้นฐานที่ส่งผลต่อเม็ดเลือดแดงของผู้ป่วย[ 88 ]สาเหตุทั่วไปของภาวะโลหิตจาง ได้แก่ การสูญเสียเลือด การผลิตเม็ดเลือดแดงที่บกพร่อง ( การสร้างเม็ดเลือด แดงที่ไม่มีประสิทธิภาพ ) การผลิตเม็ดเลือดแดงลดลง (การสร้างเม็ดเลือดแดงไม่เพียงพอ) และการทำลายเม็ดเลือดแดงเพิ่มขึ้น ( ภาวะโลหิตจางจากเม็ดเลือดแดงแตก ) [ 120 ]ภาวะโลหิตจางลดความสามารถของเลือดในการขนส่งออกซิเจน ทำให้เกิดอาการต่างๆ เช่น อ่อนเพลียและหายใจถี่[ 121 ] หากระดับฮีโมโกลบินลดลงต่ำกว่าเกณฑ์ตามสภาพทางคลินิกของผู้ป่วย อาจจำเป็นต้องให้เลือด[ 122 ]
ภาวะเม็ดเลือดแดงเพิ่มขึ้น ส่งผลให้ฮีโมโกลบินและฮีมาโตคริตเพิ่มขึ้น[หมายเหตุ 4 ]เรียกว่า ภาวะเม็ดเลือดแดงมากเกินไป (polycythemia ) [ 126 ]ภาวะขาดน้ำหรือการใช้ยาขับปัสสาวะอาจทำให้เกิดภาวะเม็ดเลือดแดงมากเกินไปแบบ "สัมพัทธ์" โดยลดปริมาณพลาสมาเมื่อเทียบกับเม็ดเลือดแดง การเพิ่มขึ้นของจำนวนเม็ดเลือดแดงอย่างแท้จริง เรียกว่าภาวะเม็ดเลือดแดงมากเกินไปแบบสัมบูรณ์ (absolute polycythemia) สามารถเกิดขึ้นได้เมื่อร่างกายผลิตเม็ดเลือดแดงมากขึ้นเพื่อชดเชยระดับออกซิเจนที่ต่ำ เรื้อรัง ในภาวะต่างๆ เช่นโรคปอดหรือโรคหัวใจหรือเมื่อบุคคลมีระดับฮอร์โมนอิริโทรโปเอติน สูงผิดปกติ ซึ่งเป็นฮอร์โมนที่กระตุ้นการผลิตเม็ดเลือดแดง ในภาวะเม็ดเลือดแดงมากเกินไปชนิดเวรา (polycythemia vera)ไขกระดูกจะผลิตเม็ดเลือดแดงและเซลล์เม็ดเลือดอื่นๆ ในอัตราที่สูงเกินไป[ 127 ]
การประเมินดัชนีเม็ดเลือดแดงมีประโยชน์ในการพิจารณาสาเหตุของภาวะโลหิตจาง หากค่า MCV ต่ำ ภาวะโลหิตจางจะเรียกว่า ภาวะโลหิต จางไมโครไซติกในขณะที่ภาวะโลหิตจางที่มีค่า MCV สูงจะเรียกว่าภาวะโลหิตจางแมโครไซติกภาวะโลหิตจางที่มีค่า MCHC ต่ำจะเรียกว่าภาวะโลหิตจางไฮโปโคร มิก หากมีภาวะโลหิตจางแต่ดัชนีเม็ดเลือดแดงปกติ ภาวะโลหิตจางนั้นจะถือว่าเป็นภาวะโลหิตจางนอร์โมโครมิกและนอร์โมไซติก [ 117 ] โดย ทั่วไปแล้วจะไม่นิยมใช้ คำว่าไฮเปอร์โครเมีย ซึ่งหมายถึงค่า MCHC สูง การที่ค่า MCHC สูงกว่าค่าอ้างอิงสูงสุดนั้นพบได้ยาก ส่วนใหญ่เกิดขึ้นในภาวะต่างๆ เช่นสเฟอโรไซโตซิส โรคโลหิตจางเคียว และโรคฮีโมโกลบินซี[ 115 ] [ 128 ]ค่า MCHC ที่สูงขึ้นอาจเป็นผลลัพธ์ที่ผิดพลาดจากสภาวะต่างๆ เช่นการจับกลุ่มของเม็ดเลือดแดง (ซึ่งทำให้จำนวนเม็ดเลือดแดงลดลงอย่างผิดพลาด ส่งผลให้ค่า MCHC สูงขึ้น) [ 129 ] [ 130 ]หรือปริมาณไขมันในเลือดที่สูงมาก (ซึ่งทำให้ผลการตรวจฮีโมโกลบินเพิ่มขึ้นอย่างผิดพลาด) [ 128 ] [ 131 ]
ภาวะโลหิตจางชนิดไมโครไซติกมักเกี่ยวข้องกับการขาดธาตุเหล็ก โรคธาลัสซีเมีย และ ภาวะโลหิตจางจากโรคเรื้อรังในขณะที่ภาวะโลหิตจางชนิดแมโครไซติกเกี่ยวข้องกับ โรค พิษสุราเรื้อรัง การขาด โฟเลตและวิตามินบี 12การใช้ยาบางชนิด และโรคไขกระดูกบางชนิด การสูญเสียเลือดเฉียบพลัน ภาวะโลหิตจางจากเม็ดเลือดแดงแตก ความผิดปกติของไขกระดูก และโรคเรื้อรังต่างๆ สามารถทำให้เกิดภาวะโลหิตจางที่มีภาพเม็ดเลือดปกติได้[ 115 ] [ 132 ]ค่า MCV มีประโยชน์เพิ่มเติมในการควบคุมคุณภาพของห้องปฏิบัติการ ค่านี้ค่อนข้างคงที่เมื่อเวลาผ่านไปเมื่อเทียบกับพารามิเตอร์ CBC อื่นๆ ดังนั้นการเปลี่ยนแปลงอย่างมากในค่า MCV อาจบ่งชี้ว่าตัวอย่างถูกเก็บจากผู้ป่วยผิดคน[ 133 ]
ค่า RDW ที่ต่ำไม่มีความสำคัญทางคลินิก แต่ค่า RDW ที่สูงขึ้นแสดงถึงความแปรปรวนที่เพิ่มขึ้นของขนาดเม็ดเลือดแดง ซึ่งเป็นภาวะที่เรียกว่าanisocytosis [ 118 ] Anisocytosisพบได้บ่อยในภาวะโลหิตจางจากภาวะขาดสารอาหาร เช่นภาวะโลหิตจางจากการขาดธาตุเหล็กและภาวะโลหิตจางเนื่องจากการขาดวิตามินบี 12 หรือโฟเลต ในขณะที่ผู้ที่เป็นโรคธาลัสซีเมียอาจมีค่า RDW ปกติ[ 118 ]จากผลการตรวจ CBC สามารถดำเนินการเพิ่มเติมเพื่อตรวจสอบภาวะโลหิตจางได้ เช่น การทดสอบ เฟอร์ริตินเพื่อยืนยันการขาดธาตุเหล็ก หรือการตรวจวิเคราะห์ฮีโมโกลบินด้วยวิธีอิเล็กโทรโฟเรซิสเพื่อวินิจฉัย โรค ฮีโมโกลบินเช่น โรคธาลัสซีเมียหรือโรคโลหิตจางเคียว[ 134 ]
เม็ดเลือดขาว
|
|
เม็ดเลือดขาวทำหน้าที่ป้องกันการติดเชื้อและมีส่วนเกี่ยวข้องกับ การตอบสนองต่อ การอักเสบ[ 136 ]จำนวนเม็ดเลือดขาวสูง ซึ่งเรียกว่าภาวะเม็ดเลือดขาวสูง มักเกิดขึ้นในการติดเชื้อ การอักเสบ และภาวะความเครียดทางสรีรวิทยานอกจากนี้ยังอาจเกิดจากโรคที่เกี่ยวข้องกับการผลิตเซลล์เม็ดเลือดที่ผิดปกติ เช่นโรคไมอีโลโพร ลิเฟอเรทีฟ และ ลิมโฟโพรลิเฟอเรที ฟ[ 137 ]จำนวนเม็ดเลือดขาวลดลง ซึ่งเรียกว่าภาวะเม็ดเลือดขาวต่ำอาจนำไปสู่ความเสี่ยงที่เพิ่มขึ้นของการติดเชื้อ[ 138 ]และเกิดขึ้นในการรักษา เช่น เคมีบำบัดและรังสีบำบัด และหลายสภาวะที่ยับยั้งการผลิตเซลล์เม็ดเลือด[ 139 ] ภาวะติดเชื้อในกระแสเลือด มีความเกี่ยวข้องกับทั้งภาวะเม็ดเลือดขาวสูงและภาวะเม็ดเลือดขาวต่ำ[ 140 ]โดยปกติแล้วจำนวนเม็ดเลือดขาวทั้งหมดจะรายงานเป็นเซลล์ต่อไมโครลิตรของเลือด (μL) หรือ 10⁹ เซลล์ต่อลิตร (× 10⁹ /L) [ 4 ]
ในการตรวจแยกชนิดเม็ดเลือดขาว จะมีการระบุและนับชนิดเม็ดเลือดขาวที่แตกต่างกัน ผลลัพธ์จะถูกรายงานเป็นเปอร์เซ็นต์และเป็นจำนวนสัมบูรณ์ต่อหน่วยปริมาตรโดยทั่วไปจะวัด เม็ดเลือดขาว 5 ชนิด ได้แก่ นิวโทรฟิล ลิมโฟไซต์โมโนไซต์ อีโอซิโนฟิลและเบโซฟิล[ 141 ]เครื่องมือบางชนิดรายงานจำนวนแกรนูโลไซต์ที่ยังไม่เจริญเต็มที่ ซึ่งเป็นการจำแนกประเภทที่ประกอบด้วยสารตั้งต้นของนิวโทรฟิล ได้แก่โปรไมอีโลไซต์ไมอีโลไซต์และเมตาไมอีโลไซต์ [ หมายเหตุ 5 ] [ 144 ]เซลล์ชนิดอื่นๆ จะถูกรายงานหากมีการระบุในการตรวจแยกชนิดด้วยตนเอง[ 145 ]
ผลการตรวจแยกชนิดมีประโยชน์ในการวินิจฉัยและติดตามอาการทางการแพทย์หลายอย่าง ตัวอย่างเช่น จำนวนนิวโทรฟิลที่สูงขึ้น (ภาวะนิวโทรฟิเลีย ) เกี่ยวข้องกับการติดเชื้อแบคทีเรีย การอักเสบ และความผิดปกติของไขกระดูก[ 146 ] [ 147 ]ในขณะที่จำนวนที่ลดลง ( ภาวะนิวโทรพีเนีย ) อาจเกิดขึ้นในผู้ที่กำลังรับเคมีบำบัดหรือรับประทานยาบางชนิด หรือผู้ที่มีโรคที่ส่งผลต่อไขกระดูก[ 148 ] [ 149 ]ภาวะนิวโทรพีเนียยังอาจเกิดจากความผิดปกติแต่กำเนิด บางอย่าง และอาจเกิดขึ้นชั่วคราวหลังจากการติดเชื้อไวรัสหรือแบคทีเรียในเด็ก[ 150 ]ผู้ที่มีภาวะนิวโทรพีเนียรุนแรงและมีอาการทางคลินิกของการติดเชื้อจะได้รับการรักษาด้วยยาปฏิชีวนะเพื่อป้องกันโรคที่อาจเป็นอันตรายถึงชีวิต[ 151 ]
จำนวนนิวโทรฟิลแบนด์ ที่เพิ่มขึ้น —นิวโทรฟิลอายุน้อยที่ไม่มีนิวเคลียสแบบแบ่งส่วน—หรือแกรนูโลไซต์ที่ยังไม่เจริญเต็มที่ เรียกว่า การเปลี่ยนแปลงไปทางซ้าย ( left shift ) และเกิดขึ้นในภาวะติดเชื้อในกระแสเลือดและความผิดปกติของเลือดบางชนิด แต่เป็นเรื่องปกติในระหว่างตั้งครรภ์[ 152 ] [ 153 ]จำนวนลิมโฟไซต์ที่สูงขึ้น ( lymphocytosis ) เกี่ยวข้องกับการติดเชื้อไวรัส[ 6 ] และความผิดปกติของระบบน้ำเหลือง เช่นมะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดเรื้อรัง[ 154 ] จำนวน โมโนไซต์ที่สูงขึ้น ( monocytosis ) เกี่ยวข้องกับภาวะอักเสบ เรื้อรัง [ 155 ]และจำนวนอีโอซิโนฟิลมักจะเพิ่มขึ้น ( eosinophilia ) ในการติดเชื้อปรสิตและภาวะภูมิแพ้[ 156 ]จำนวนเบโซฟิลที่เพิ่มขึ้น เรียกว่าbasophiliaสามารถเกิดขึ้นได้ในความผิดปกติของระบบเม็ดเลือด เช่นมะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดเรื้อรังและ polycythemia vera [ 147 ]การมีอยู่ของเซลล์ผิดปกติบางประเภท เช่น เซลล์บลาสท์หรือลิมโฟไซต์ที่มี ลักษณะ เนื้องอก บ่งชี้ถึงมะเร็งเม็ดเลือด[ 89 ] [ 157 ]
เกล็ดเลือด
เกล็ดเลือดมีบทบาทสำคัญในการแข็งตัวของเลือด เมื่อผนังหลอดเลือดได้รับความเสียหาย เกล็ดเลือดจะเกาะติดกับพื้นผิวที่เปิดออก ณ บริเวณที่ได้รับบาดเจ็บและอุดช่องว่าง การกระตุ้นพร้อมกันของกระบวนการแข็งตัวของเลือดส่งผลให้เกิดการสร้างไฟบรินซึ่งเสริมความแข็งแรงให้กับเกล็ดเลือดที่อุดอยู่ ทำให้เกิดลิ่มเลือดที่มั่นคง[ 158 ]จำนวนเกล็ด เลือดต่ำ หรือที่เรียกว่าภาวะเกล็ดเลือดต่ำ อาจทำให้เกิดเลือดออกได้หากรุนแรง[ 159 ]ภาวะนี้สามารถเกิดขึ้นได้ในผู้ที่กำลังรับการรักษาที่กดการทำงานของไขกระดูก เช่น เคมีบำบัดหรือรังสีบำบัด หรือผู้ที่รับประทานยาบางชนิด เช่น เฮปาริน ซึ่งสามารถกระตุ้นระบบภูมิคุ้มกันให้ทำลายเกล็ดเลือดได้ ภาวะเกล็ดเลือดต่ำเป็นลักษณะเฉพาะของความผิดปกติของเลือดหลายชนิด เช่น มะเร็งเม็ดเลือดขาวเฉียบพลันและโรคโลหิตจางชนิดอะพลาสติกรวมถึงโรคภูมิต้านตนเองบาง ชนิด [ 160 ] [ 161 ]หากจำนวนเกล็ดเลือดต่ำมาก อาจต้องทำการถ่ายเกล็ดเลือด[ 162 ]ภาวะเกล็ดเลือดสูง หมายถึงจำนวนเกล็ดเลือดที่สูง อาจเกิดขึ้นในภาวะอักเสบหรือการบาดเจ็บ[ 163 ]เช่นเดียวกับในภาวะขาดธาตุเหล็ก[ 164 ]และจำนวนเกล็ดเลือดอาจสูงเป็นพิเศษในผู้ที่เป็นโรคเกล็ดเลือดสูงชนิดไม่ทราบสาเหตุ ซึ่งเป็นโรคเลือดที่หายาก[ 163 ]สามารถรายงานจำนวนเกล็ดเลือดได้ในหน่วยเซลล์ต่อไมโครลิตรของเลือด (/μL) [ 165 ] 10 3เซลล์ต่อไมโครลิตร(× 10 3 /μL)หรือ 10 9เซลล์ต่อลิตร(× 10 9 /L) [ 4 ]
ปริมาตรเกล็ดเลือดเฉลี่ย (MPV) วัดขนาดเฉลี่ยของเกล็ดเลือดในหน่วยเฟมโตลิตร ซึ่งสามารถช่วยในการระบุสาเหตุของภาวะเกล็ดเลือดต่ำได้ โดยค่า MPV ที่สูงขึ้นอาจเกิดขึ้นเมื่อเกล็ดเลือดอายุน้อยถูกปล่อยเข้าสู่กระแสเลือดเพื่อชดเชยการทำลายเกล็ดเลือดที่เพิ่มขึ้น ในขณะที่การผลิตเกล็ดเลือดลดลงเนื่องจากความผิดปกติของไขกระดูกอาจส่งผลให้ค่า MPV ต่ำลง นอกจากนี้ MPV ยังมีประโยชน์ในการแยกแยะความแตกต่างระหว่างโรคแต่กำเนิดที่ทำให้เกิดภาวะเกล็ดเลือดต่ำ[ 118 ] [ 166 ]เศษส่วนเกล็ดเลือดที่ยังไม่เจริญเต็มที่ (IPF) หรือจำนวนเกล็ดเลือดที่ยังไม่เจริญเต็มที่นั้น มีรายงานโดยเครื่องวิเคราะห์บางชนิด และให้ข้อมูลเกี่ยวกับอัตราการผลิตเกล็ดเลือดโดยการวัดจำนวนเกล็ดเลือดที่ยังไม่เจริญเต็มที่ในเลือด[ 167 ]
การทดสอบอื่นๆ
จำนวนเรติคิวโลไซต์
เรติคิวโลไซต์เป็นเซลล์เม็ดเลือดแดงที่ยังไม่เจริญเต็มที่ ซึ่งแตกต่างจากเซลล์ที่เจริญเต็มที่ตรงที่มีRNAบางครั้งมีการนับเรติคิวโลไซต์เป็นส่วนหนึ่งของการตรวจนับเม็ดเลือดครบถ้วน โดยปกติเพื่อตรวจสอบสาเหตุของภาวะโลหิตจางหรือประเมินการตอบสนองต่อการรักษา ภาวะโลหิตจางที่มีจำนวนเรติคิวโลไซต์สูงอาจบ่งชี้ว่าไขกระดูกกำลังผลิตเซลล์เม็ดเลือดแดงในอัตราที่สูงขึ้นเพื่อชดเชยการสูญเสียเลือดหรือการแตกตัวของเม็ดเลือดแดง[ 74 ]ในขณะที่ภาวะโลหิตจางที่มีจำนวนเรติคิวโลไซต์ต่ำอาจบ่งชี้ว่าบุคคลนั้นมีภาวะที่ลดความสามารถของร่างกายในการผลิตเซลล์เม็ดเลือดแดง[ 168 ] เมื่อผู้ที่มีภาวะโลหิตจางจากภาวะขาดสารอาหารได้รับสารอาหารเสริม การเพิ่มขึ้นของจำนวนเรติคิวโลไซต์บ่งชี้ว่าร่างกายของพวกเขากำลังตอบสนองต่อการรักษาโดยการผลิตเซลล์เม็ดเลือดแดงมากขึ้น[ 169 ]เครื่องวิเคราะห์โลหิตวิทยาจะทำการนับเรติคิวโลไซต์โดยการย้อมเซลล์เม็ดเลือดแดงด้วยสีย้อมที่จับกับ RNA และวัดจำนวนเรติคิวโลไซต์ผ่านการกระเจิงของแสงหรือการวิเคราะห์ฟลูออเรสเซนซ์ การทดสอบสามารถทำได้ด้วยตนเองโดยการย้อมเลือดด้วยนิวเมทิลีนบลูและนับเปอร์เซ็นต์ของเซลล์เม็ดเลือดแดงที่มี RNA ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ จำนวนเรติคิวโลไซต์จะแสดงเป็นจำนวนสัมบูรณ์[ 168 ]หรือเป็นเปอร์เซ็นต์ของเซลล์เม็ดเลือดแดง[ 170 ]
เครื่องมือบางชนิดวัดปริมาณฮีโมโกลบินเฉลี่ยในเรติคิวโลไซต์แต่ละเซลล์ ซึ่งเป็นพารามิเตอร์ที่ได้รับการศึกษาเพื่อใช้เป็นตัวบ่งชี้ภาวะขาดธาตุเหล็กในผู้ที่มีภาวะที่รบกวนการทดสอบมาตรฐาน[ 171 ]เศษส่วนเรติคิวโลไซต์ที่ยังไม่เจริญเต็มที่ (IRF) เป็นการวัดอีกอย่างหนึ่งที่ได้จากเครื่องวิเคราะห์บางชนิด ซึ่งวัดปริมาณความเจริญของเรติคิวโลไซต์: เซลล์ที่ยังไม่เจริญเต็มที่จะมี RNA มากกว่า จึงทำให้เกิดสัญญาณเรืองแสงที่แรงกว่า ข้อมูลนี้มีประโยชน์ในการวินิจฉัยโรคโลหิตจางและประเมินการผลิตเม็ดเลือดแดงหลังจากการรักษาโรคโลหิตจางหรือ การปลูก ถ่ายไขกระดูก[ 172 ]
เซลล์เม็ดเลือดแดงที่มีนิวเคลียส
ระหว่างการก่อตัวในไขกระดูก และในตับและม้ามในทารกในครรภ์[ 173 ]เซลล์เม็ดเลือดแดงจะมีนิวเคลียส ซึ่งโดยปกติจะไม่มีในเซลล์ที่เจริญเต็มที่ซึ่งไหลเวียนอยู่ในกระแสเลือด เซลล์เม็ดเลือดแดงที่มีนิวเคลียสเป็นเรื่องปกติในทารกแรกเกิด[ 174 ]แต่เมื่อตรวจพบในเด็กและผู้ใหญ่ จะบ่งชี้ถึงความต้องการเซลล์เม็ดเลือดแดงที่เพิ่มขึ้น ซึ่งอาจเกิดจากการตกเลือด มะเร็งบางชนิด และภาวะโลหิตจาง[ 118 ]เครื่องวิเคราะห์ส่วนใหญ่สามารถตรวจจับเซลล์เหล่านี้ได้เป็นส่วนหนึ่งของการนับเซลล์ที่แตกต่างกัน จำนวนเซลล์เม็ดเลือดแดงที่มีนิวเคลียสสูงอาจทำให้จำนวนเม็ดเลือดขาวสูงเกินจริง ซึ่งจะต้องมีการปรับแก้ไข[ 175 ]
พารามิเตอร์อื่นๆ
เครื่องวิเคราะห์โลหิตวิทยาขั้นสูงสร้างการวัดเซลล์เม็ดเลือดแบบใหม่ซึ่งแสดงให้เห็นถึงความสำคัญในการวินิจฉัยในงานวิจัย แต่ยังไม่พบการใช้งานทางคลินิกอย่างแพร่หลาย[ 171 ]ตัวอย่างเช่น เครื่องวิเคราะห์บางประเภทสร้าง การอ่านค่า พิกัดที่ระบุขนาดและตำแหน่งของกลุ่มเซลล์เม็ดเลือดขาวแต่ละกลุ่ม พารามิเตอร์เหล่านี้ (เรียกว่าข้อมูลประชากรเซลล์) [ 176 ]ได้รับการศึกษาในฐานะตัวบ่งชี้ศักยภาพสำหรับความผิดปกติของเลือด การติดเชื้อแบคทีเรีย และมาลาเรีย เครื่องวิเคราะห์ที่ใช้การ ย้อมสี ไมอีโลเปอร์ออก ซิเดส เพื่อสร้างการนับแยกประเภทสามารถวัดการแสดงออกของเอนไซม์ในเซลล์เม็ดเลือดขาว ซึ่งมีการเปลี่ยนแปลงในความผิดปกติต่างๆ[ 75 ]เครื่องมือบางชนิดสามารถรายงานเปอร์เซ็นต์ของเซลล์เม็ดเลือดแดงที่มีสีซีดจาง นอกเหนือจากการรายงานค่าเฉลี่ย MCHC หรือให้จำนวนเซลล์เม็ดเลือดแดงที่แตก ( ชิสโตไซต์ ) [ 171 ]ซึ่งเกิดขึ้นในโรคโลหิตจางชนิดฮีโมไลติกบางประเภท[ 177 ]เนื่องจากพารามิเตอร์เหล่านี้มักจะเฉพาะเจาะจงกับยี่ห้อของเครื่องวิเคราะห์บางยี่ห้อ จึงเป็นเรื่องยากสำหรับห้องปฏิบัติการในการตีความและเปรียบเทียบผลลัพธ์[ 171 ]
ช่วงค่าอ้างอิง
| ทดสอบ | หน่วย | ผู้ใหญ่ | กุมารเวชศาสตร์ (อายุ 4–7 ปี) | ทารกแรกเกิด (อายุ 0-1 วัน) |
|---|---|---|---|---|
| ดับเบิลยูบีซี | × 10 9 /ลิตร | 3.6–10.6 | 5.0–17.0 | 9.0–37.0 |
| เม็ดเลือดแดง | × 10 12 /ลิตร |
| 4.00–5.20 | 4.10–6.10 |
| เอชจีบี | กรัม/ลิตร |
| 102–152 | 165–215 |
| เอชซีที | ล/ล |
| 0.36–0.46 | 0.48–0.68 |
| เอ็มซีวี | เอฟแอล | 80–100 | 78–94 | 95–125 |
| เอ็มเอช | หน้า | 26–34 | 23–31 | 30–42 |
| เอ็มซีเอชซี | กรัม/ลิตร | 320–360 | 320–360 | 300–340 |
| อาร์ดีดับบลิว | % | 11.5–14.5 | 11.5–14.5 | สูงขึ้น[หมายเหตุ 6 ] |
| พีแอลที | × 10 9 /ลิตร | 150–450 | 150–450 | 150–450 |
| นิวโทรฟิล | × 10 9 /ลิตร | 1.7–7.5 | 1.5–11.0 | 3.7–30.0 |
| ลิมโฟไซต์ | × 10 9 /ลิตร | 1.0–3.2 | 1.5–11.1 | 1.6–14.1 |
| โมโนไซต์ | × 10 9 /ลิตร | 0.1–1.3 | 0.1–1.9 | 0.1–4.4 |
| อีโอซิโนฟิล | × 10 9 /ลิตร | 0.0–0.3 | 0.0–0.7 | 0.0–1.5 |
| เบโซฟิล | × 10 9 /ลิตร | 0.0–0.2 | 0.0–0.3 | 0.0–0.7 |
การตรวจนับเม็ดเลือดครบถ้วนจะถูกตีความโดยการเปรียบเทียบผลลัพธ์กับช่วงค่าอ้างอิง ซึ่งแสดงถึงผลลัพธ์ที่พบใน 95% ของคนที่มีสุขภาพดีอย่างเห็นได้ชัด[ 35 ]โดยอิงตามการกระจายแบบปกติ ทางสถิติ ช่วงของตัวอย่างที่ทดสอบจะแตกต่างกันไปตามเพศและอายุ[ 179 ]
โดยเฉลี่ยแล้ว ผู้หญิงวัยผู้ใหญ่จะมีค่าฮีโมโกลบิน ฮีมาโตคริต และจำนวนเม็ดเลือดแดงต่ำกว่าผู้ชาย ความแตกต่างนี้จะลดลง แต่ยังคงมีอยู่หลัง วัย หมดประจำเดือน[ 179 ]ผลการตรวจ CBC ของเด็กและทารกแรกเกิดจะแตกต่างจากของผู้ใหญ่ ฮีโมโกลบิน ฮีมาโตคริต และจำนวนเม็ดเลือดแดงของทารกแรกเกิดจะสูงมากเพื่อชดเชยระดับออกซิเจนต่ำในครรภ์และสัดส่วนของฮีโมโกลบินของทารกในครรภ์ซึ่งมีประสิทธิภาพในการส่งออกซิเจนไปยังเนื้อเยื่อน้อยกว่าฮีโมโกลบินในรูปแบบที่สมบูรณ์ภายในเม็ดเลือดแดงของพวกเขา[ 180 ] [ 181 ]ค่า MCV ก็เพิ่มขึ้นเช่นกัน และจำนวนเม็ดเลือดขาวก็สูงขึ้นโดยมีนิวโทรฟิลเป็นจำนวนมาก[ 180 ] [ 182 ]จำนวนเม็ดเลือดแดงและค่าที่เกี่ยวข้องจะเริ่มลดลงไม่นานหลังจากเกิด โดยจะลดลงต่ำสุดเมื่ออายุประมาณสองเดือนและเพิ่มขึ้นหลังจากนั้น[ 183 ] [ 184 ]เซลล์เม็ดเลือดแดงของทารกและเด็กโตมีขนาดเล็กกว่าและมีค่า MCH ต่ำกว่าของผู้ใหญ่ ในการตรวจแยกชนิดเม็ดเลือดขาวในเด็ก ลิมโฟไซต์มักมีจำนวนมากกว่านิวโทรฟิล ในขณะที่ในผู้ใหญ่ นิวโทรฟิลจะมีจำนวนมากกว่า[ 180 ]
ความแตกต่างอื่นๆ ระหว่างประชากรอาจส่งผลต่อช่วงค่าอ้างอิง เช่น ผู้ที่อาศัยอยู่ในพื้นที่ที่มีระดับความสูงมากกว่าจะมีค่าฮีโมโกลบิน ฮีมาโตคริต และ RBC สูงกว่า และผู้ที่มีเชื้อสายแอฟริกันจะมีจำนวนเม็ดเลือดขาวโดยเฉลี่ยต่ำกว่า[ 185 ]ประเภทของเครื่องวิเคราะห์ที่ใช้ในการตรวจ CBC ก็ส่งผลต่อช่วงค่าอ้างอิงเช่นกัน ดังนั้น ช่วงค่าอ้างอิงจึงถูกกำหนดโดยห้องปฏิบัติการแต่ละแห่งโดยพิจารณาจากประชากรผู้ป่วยและอุปกรณ์ของตนเอง[ 186 ] [ 187 ]
ข้อจำกัด
ภาวะทางการแพทย์บางอย่างหรือปัญหาเกี่ยวกับตัวอย่างเลือดอาจทำให้ได้ผลลัพธ์ที่ไม่ถูกต้อง หากตัวอย่างเลือดจับตัวเป็นก้อนอย่างเห็นได้ชัด ซึ่งอาจเกิดจาก เทคนิค การเจาะเลือด ที่ไม่ดี ตัวอย่างนั้นจะไม่เหมาะสมสำหรับการทดสอบ เนื่องจากจำนวนเกล็ดเลือดจะลดลงอย่างผิดพลาด และผลลัพธ์อื่นๆ อาจผิดปกติ[ 188 ] [ 189 ]ตัวอย่างที่เก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลาหลายชั่วโมงอาจให้ค่า MCV ( ปริมาตรเม็ดเลือดแดงเฉลี่ย ) สูงเกินจริง [ 190 ]เนื่องจากเม็ดเลือดแดงจะบวมเมื่อดูดซับน้ำจากพลาสมา และผลการนับเกล็ดเลือดและเม็ดเลือดขาวอาจไม่ถูกต้องในตัวอย่างที่เก็บไว้นาน เนื่องจากเซลล์เสื่อมสภาพไปตามเวลา[ 91 ]
ตัวอย่างที่เก็บจากบุคคลที่มีระดับ บิลิรูบินหรือไขมัน ในพลาสมา สูงมาก(เรียกว่าตัวอย่างดีซ่านหรือตัวอย่างไขมันสูง ตามลำดับ) [ 191 ]อาจแสดงค่าฮีโมโกลบินสูงเกินจริง เนื่องจากสารเหล่านี้เปลี่ยนสีและความทึบของตัวอย่าง ซึ่งรบกวนการวัดฮีโมโกลบิน[ 192 ]ผลกระทบนี้สามารถบรรเทาได้โดยการแทนที่พลาสมาด้วยน้ำเกลือ[ 91 ]
บางคนสร้างแอนติบอดีที่ทำให้เกล็ดเลือดจับตัวเป็นก้อนเมื่อเลือดถูกดูดเข้าไปในหลอดที่มี EDTA ซึ่งเป็นสารกันเลือดแข็งที่ใช้กันทั่วไปในการเก็บตัวอย่าง CBC ก้อนเกล็ดเลือดอาจถูกนับเป็นเกล็ดเลือดเดี่ยวโดยเครื่องวิเคราะห์อัตโนมัติ ทำให้จำนวนเกล็ดเลือดลดลงอย่างผิดพลาด สามารถหลีกเลี่ยงปัญหานี้ได้โดยการใช้สารกันเลือดแข็งชนิดอื่น เช่นโซเดียมซิเตรตหรือเฮปาริน[ 193 ] [ 194 ]
Another antibody-mediated condition that can affect complete blood count results is red blood cell agglutination. This phenomenon causes red blood cells to clump together because of antibodies bound to the cell surface.[195] Red blood cell aggregates are counted as single cells by the analyzer, leading to a markedly decreased red blood cell count and hematocrit, and markedly elevated MCV and MCHC (mean corpuscular hemoglobin concentration).[53] Often, these antibodies are only active at room temperature (in which case they are called cold agglutinins), and the agglutination can be reversed by heating the sample to 37 °C (99 °F). Samples from people with warm autoimmune hemolytic anemia may exhibit red cell agglutination that does not resolve on warming.[130]
While blast and lymphoma cells can be identified in the manual differential, microscopic examination cannot reliably determine the cells' hematopoietic lineage. This information is often necessary for diagnosing blood cancers. After abnormal cells are identified, additional techniques such as immunophenotyping by flow cytometry can be used to identify markers that provide additional information about the cells.[196][197]
History
Before automated cell counters were introduced, complete blood count tests were performed manually: white and red blood cells and platelets were counted using microscopes.[199] The first person to publish microscopic observations of blood cells was Antonie van Leeuwenhoek,[200] who reported on the appearance of red cells in a 1674 letter to the Proceedings of the Royal Society of London.[201]Jan Swammerdam had described red blood cells some years earlier, but did not publish his findings at the time. Throughout the 18th and 19th centuries, improvements in microscope technology such as achromatic lenses allowed white blood cells and platelets to be counted in unstained samples.[202]
นักสรีรวิทยาKarl Vierordtได้รับการยกย่องว่าเป็นผู้ทำการนับเม็ดเลือดครั้งแรก[ 8 ] [ 203 ] [ 204 ] เทคนิคของเขาซึ่งตีพิมพ์ในปี 1852 เกี่ยวข้องกับการดูดเลือดปริมาณที่วัดอย่างระมัดระวังเข้าไปในหลอดเส้นเลือดฝอยและกระจายลงบนสไลด์กล้องจุลทรรศน์ที่เคลือบด้วยไข่ขาวหลังจากที่เลือดแห้งแล้ว เขาจะนับเซลล์ทุกเซลล์บนสไลด์ กระบวนการนี้อาจใช้เวลานานกว่าสามชั่วโมงจึงจะเสร็จสมบูรณ์[ 205 ]เครื่องนับเม็ดเลือด (hemocytometer) ซึ่งLouis-Charles Malassez นำเสนอในปี 1874 ได้ ทำให้การนับเม็ดเลือดด้วยกล้องจุลทรรศน์ง่ายขึ้น[ 206 ]เครื่องนับเม็ดเลือดของ Malassez ประกอบด้วยสไลด์กล้องจุลทรรศน์ที่มีหลอดเส้นเลือดฝอยแบน เลือดที่เจือจางจะถูกนำเข้าไปในห้องเส้นเลือดฝอยโดยใช้ท่อยางที่ติดอยู่กับปลายด้านหนึ่ง และเลนส์ใกล้ตาที่มีตารางมาตราส่วนจะติดอยู่กับกล้องจุลทรรศน์ ทำให้ผู้ใช้กล้องจุลทรรศน์สามารถนับจำนวนเซลล์ต่อปริมาตรของเลือดได้ ในปี พ.ศ. 2420 วิลเลียม โกเวอร์สได้ประดิษฐ์ฮีโมไซโตมิเตอร์ที่มีตารางนับในตัว ซึ่งช่วยขจัดความจำเป็นในการผลิตเลนส์ตาที่ปรับเทียบเป็นพิเศษสำหรับกล้องจุลทรรศน์แต่ละตัว[ 207 ]
ในช่วงทศวรรษ 1870 Paul Ehrlichได้พัฒนาเทคนิคการย้อมสีโดยใช้สีย้อมที่เป็นกรดและเบสผสมกัน ซึ่งสามารถแยกแยะเซลล์เม็ดเลือดขาวชนิดต่างๆ และช่วยให้สามารถตรวจสอบรูปร่างของ เซลล์เม็ดเลือดแดงได้ [ 202 ] Dmitri Leonidovich Romanowskyได้ปรับปรุงเทคนิคนี้ในช่วงทศวรรษ 1890 โดยใช้ส่วนผสมของอีโอซินและเมทิลีนบลู ที่บ่มแล้ว เพื่อให้ได้เฉดสีที่หลากหลาย ซึ่งไม่ปรากฏในการใช้สีย้อมชนิดใดชนิดหนึ่งเพียงอย่างเดียว เทคนิคนี้จึงกลายเป็นพื้นฐานของการย้อมสีแบบ Romanowsky ซึ่งเป็นเทคนิคที่ยังคงใช้ในการย้อมสไลด์เลือดเพื่อการตรวจสอบด้วยตนเอง[ 208 ]
เทคนิคแรกในการวัดฮีโมโกลบินถูกคิดค้นขึ้นในช่วงปลายศตวรรษที่ 19 โดยเกี่ยวข้องกับการเปรียบเทียบสีของเลือดที่เจือจางกับมาตรฐานที่ทราบ[ 204 ]ความพยายามที่จะทำให้กระบวนการนี้เป็นไปโดยอัตโนมัติโดยใช้สเปกโตรโฟโตเมตรีและคัลเลอริเมตรี นั้น มีข้อจำกัด เนื่องจากฮีโมโกลบินมีอยู่ในเลือดในหลายรูปแบบที่แตกต่างกัน ซึ่งหมายความว่าไม่สามารถวัดได้ที่ความยาวคลื่น เดียว ในปี 1920 ได้มีการนำวิธีการแปลงฮีโมโกลบินในรูปแบบต่างๆ ให้เป็นรูปแบบที่เสถียรรูปแบบเดียว (ไซยาโนเมทฮีโมโกลบินหรือเฮมิโกลบินไซยาไนด์) มาใช้ ทำให้สามารถวัดระดับฮีโมโกลบินได้โดยอัตโนมัติ วิธีการไซยาโนเมทฮีโมโกลบินยังคงเป็นวิธีการอ้างอิงสำหรับการวัดฮีโมโกลบินและยังคงใช้ในเครื่องวิเคราะห์โลหิตวิทยาอัตโนมัติหลายเครื่อง[ 57 ] [ 209 ] [ 210 ]
Maxwell Wintrobeได้รับการยกย่องว่าเป็นผู้คิดค้นการทดสอบฮีมาโตคริต[ 66 ] [ 211 ]ในปี พ.ศ. 2462 เขาได้ทำโครงการปริญญาเอกที่มหาวิทยาลัยทูเลนเพื่อกำหนดช่วงปกติของพารามิเตอร์เม็ดเลือดแดง และคิดค้นวิธีการที่เรียกว่าฮีมาโตคริตของวินโทรบ การวัดฮีมาโตคริตได้รับการอธิบายไว้ในเอกสารก่อนหน้านี้แล้ว แต่วิธีของวินโทรบแตกต่างออกไปตรงที่ใช้หลอดขนาดใหญ่ที่สามารถผลิตได้จำนวนมากตามข้อกำหนดที่แม่นยำ พร้อมเครื่องชั่งในตัว เศษส่วนของเม็ดเลือดแดงในหลอดจะถูกวัดหลังจากการปั่นเหวี่ยงเพื่อกำหนดค่าฮีมาโตคริต การคิดค้นวิธีการที่สามารถทำซ้ำได้สำหรับการกำหนดค่าฮีมาโตคริตทำให้วินโทรบสามารถกำหนดดัชนีเม็ดเลือดแดงได้[ 204 ]
การวิจัยเกี่ยวกับการนับเซลล์อัตโนมัติเริ่มขึ้นในช่วงต้นศตวรรษที่ 20 [ 210 ]วิธีการที่พัฒนาขึ้นในปี 1928 ใช้ปริมาณแสงที่ส่งผ่านตัวอย่างเลือดที่เจือจาง ซึ่งวัดโดยการวัดแสง เพื่อประมาณจำนวนเม็ดเลือดแดง แต่วิธีนี้พิสูจน์แล้วว่าไม่แม่นยำสำหรับตัวอย่างที่มีเม็ดเลือดแดงผิดปกติ[ 8 ]ความพยายามอื่นๆ ที่ไม่ประสบความสำเร็จในช่วงทศวรรษที่ 1930 และ 1940 เกี่ยวข้องกับเครื่องตรวจจับโฟโตอิเล็กทริกที่ติดอยู่กับกล้องจุลทรรศน์ ซึ่งจะนับเซลล์ขณะที่สแกน[ 210 ]ในช่วงปลายทศวรรษที่ 1940 วอลเลซ เอช. โคลเตอร์ได้รับแรงบันดาลใจจากความต้องการวิธีการนับเม็ดเลือดแดงที่ดีขึ้นหลังจากการทิ้งระเบิดที่ฮิโรชิมาและนางาซากิ [ 212 ]พยายามปรับปรุงเทคนิคการนับเซลล์ด้วยโฟโตอิเล็กทริก[ หมายเหตุ 7 ] การวิจัยของเขาได้รับความช่วยเหลือจากโจเซฟ อาร์. โคลเตอร์ น้องชายของเขา ในห้องปฏิบัติการใต้ดินในชิคาโก[ 60 ]ผลลัพธ์ที่ได้จากการใช้วิธีการโฟโตอิเล็กทริกนั้นน่าผิดหวัง และในปี พ.ศ. 2491 หลังจากอ่านบทความที่เชื่อมโยงการนำไฟฟ้าของเลือดกับความเข้มข้นของเซลล์เม็ดเลือดแดง วอลเลซจึงคิดค้นหลักการของคูลเตอร์ขึ้นมา ซึ่งเป็นทฤษฎีที่ว่าเซลล์ที่แขวนลอยอยู่ในตัวกลางนำไฟฟ้าจะสร้างกระแสไฟฟ้าลดลงตามสัดส่วนของขนาดเซลล์เมื่อผ่านช่องเปิด[ 212 ]
ในเดือนตุลาคมนั้น วอลเลซได้สร้างเครื่องนับเพื่อสาธิตหลักการ เนื่องจากข้อจำกัดทางการเงิน ช่องเปิดจึงถูกสร้างขึ้นโดยการเผารูผ่านแผ่นเซลโลเฟนจากซองบุหรี่[ 60 ] [ 212 ]วอลเลซยื่นจดสิทธิบัตรสำหรับเทคนิคนี้ในปี 1949 และในปี 1951 ได้ยื่นขอทุนจากสำนักงานวิจัยกองทัพเรือเพื่อพัฒนาเครื่องนับคูลเตอร์ [ 212 ] คำขอจดสิทธิบัตรของวอลเลซได้รับการอนุมัติในปี 1953 และหลังจากปรับปรุงช่องเปิดและนำมาโนมิเตอร์ ปรอทมา ใช้เพื่อให้ควบคุมขนาดตัวอย่างได้อย่างแม่นยำ พี่น้องทั้งสองจึงก่อตั้งบริษัท Coulter Electronics Inc. ในปี 1958 เพื่อทำการตลาดเครื่องมือของพวกเขา เครื่องนับคูลเตอร์ได้รับการออกแบบมาเพื่อนับเม็ดเลือดแดงในตอนแรก แต่ด้วยการดัดแปลงในภายหลังก็พิสูจน์แล้วว่ามีประสิทธิภาพในการนับเม็ดเลือดขาว[ 60 ]เครื่องนับคูลเตอร์ได้รับการนำไปใช้อย่างกว้างขวางในห้องปฏิบัติการทางการแพทย์[ 210 ]
เครื่องวิเคราะห์เครื่องแรกที่สามารถนับเซลล์หลายชนิดพร้อมกันได้คือTechnicon SMA 4A−7Aซึ่งวางจำหน่ายในปี 1965 โดยทำได้โดยการแบ่งตัวอย่างเลือดออกเป็นสองช่อง คือ ช่องหนึ่งสำหรับนับเม็ดเลือดแดงและเม็ดเลือดขาว และอีกช่องหนึ่งสำหรับวัดฮีโมโกลบิน อย่างไรก็ตาม เครื่องมือนี้ไม่น่าเชื่อถือและบำรุงรักษายาก ในปี 1968 เครื่องวิเคราะห์ Coulter Model S ได้ถูกวางจำหน่ายและใช้งานอย่างแพร่หลาย เช่นเดียวกับเครื่องมือ Technicon มันใช้ห้องปฏิกิริยาสองห้องที่แตกต่างกัน โดยห้องหนึ่งใช้สำหรับการนับเม็ดเลือดแดง และอีกห้องหนึ่งใช้สำหรับการนับเม็ดเลือดขาวและการหาค่าฮีโมโกลบิน Model S ยังกำหนดปริมาตรเซลล์เฉลี่ยโดยใช้การวัดอิมพีแดนซ์ ซึ่งทำให้สามารถคำนวณดัชนีเม็ดเลือดแดงและฮีมาโตคริตได้ การนับเกล็ดเลือดอัตโนมัติได้รับการแนะนำในปี 1970 ด้วยเครื่องมือ Hemalog-8 ของ Technicon และถูกนำมาใช้ใน เครื่องวิเคราะห์ซีรี่ส์ S Plus ของ Coulter ในปี 1980 [ 213 ]
หลังจากที่การนับเซลล์พื้นฐานได้รับการทำให้เป็นอัตโนมัติแล้ว การนับแยกชนิดเม็ดเลือดขาวก็ยังคงเป็นความท้าทาย ตลอดช่วงทศวรรษ 1970 นักวิจัยได้สำรวจสองวิธีในการทำให้การนับแยกชนิดเป็นอัตโนมัติ ได้แก่ การประมวลผลภาพดิจิทัลและโฟลว์ไซโตเมทรี โดยใช้เทคโนโลยีที่พัฒนาขึ้นในช่วงทศวรรษ 1950 และ 1960 เพื่อทำให้การอ่านสเมียร์ Pap เป็นอัตโนมัติ ได้ มีการผลิตเครื่องวิเคราะห์การประมวลผลภาพหลายรุ่น[ 214 ]เครื่องมือเหล่านี้จะสแกนสเมียร์เลือดที่ย้อมสีเพื่อค้นหานิวเคลียสของเซลล์ จากนั้นถ่ายภาพเซลล์ที่มีความละเอียดสูงขึ้นเพื่อวิเคราะห์ผ่าน การ วัดความหนาแน่น[ 215 ]เครื่องมือเหล่านี้มีราคาแพง ทำงานช้า และแทบไม่ได้ช่วยลดภาระงานในห้องปฏิบัติการ เนื่องจากยังคงต้องเตรียมและย้อมสีสเมียร์เลือด ดังนั้นระบบที่ใช้โฟลว์ไซโตเมทรีจึงได้รับความนิยมมากขึ้น[ 216 ] [ 217 ]และภายในปี 1990 ไม่มีเครื่องวิเคราะห์ภาพดิจิทัลใดวางจำหน่ายในเชิงพาณิชย์ในสหรัฐอเมริกาหรือยุโรปตะวันตก[ 218 ]เทคนิคเหล่านี้กลับมาได้รับความนิยมอีกครั้งในช่วงทศวรรษ 2000 ด้วยการนำแพลตฟอร์มการวิเคราะห์ภาพขั้นสูงที่ใช้เครือข่ายประสาทเทียมมา ใช้ [ 219 ] [ 220 ] [ 221 ]
อุปกรณ์ตรวจวัดการไหลของเซลล์ในยุคแรกๆ จะยิงลำแสงไปที่เซลล์ด้วยความยาวคลื่นเฉพาะ และวัดการดูดกลืนแสง การเรืองแสง หรือการกระเจิงของแสงที่เกิดขึ้น โดยรวบรวมข้อมูลเกี่ยวกับลักษณะของเซลล์และช่วยให้สามารถวัด ปริมาณสารภายในเซลล์ เช่น DNA ได้ [ 222 ]เครื่องมือชนิดหนึ่งดังกล่าว—เครื่องวัดสเปกตรัมเซลล์แบบรวดเร็ว (Rapid Cell Spectrophotometer) ซึ่งพัฒนาโดย Louis Kamentsky ในปี 1965 เพื่อทำให้การตรวจเซลล์ปากมดลูกเป็นไปโดยอัตโนมัติ—สามารถสร้างแผนภาพการกระเจิงของเซลล์เม็ดเลือดโดยใช้เทคนิคการย้อมสีทางเคมีของเซลล์ Leonard Ornstein ผู้ซึ่งมีส่วนช่วยในการพัฒนาระบบการย้อมสีบนเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ Rapid Cell และเพื่อนร่วมงานของเขาได้สร้างเครื่องวิเคราะห์การแยกประเภทเม็ดเลือดขาวแบบโฟลว์ไซโตเมตริกเชิงพาณิชย์เครื่องแรก คือ Hemalog D [ 223 ] [ 224 ] เครื่องวิเคราะห์นี้ เปิดตัวในปี 1974 [ 225 ] [ 226 ]โดยใช้การกระเจิงของแสง การดูดกลืนแสง และการย้อมสีเซลล์เพื่อระบุประเภทเม็ดเลือดขาวปกติทั้งห้าประเภท นอกเหนือจาก "เซลล์ขนาดใหญ่ที่ไม่สามารถระบุได้" ซึ่งโดยปกติแล้วจะเป็นเซลล์ลิมโฟไซต์หรือเซลล์บลาสต์ที่ผิดปกติ Hemalog D สามารถนับเซลล์ได้ 10,000 เซลล์ในการทำงานครั้งเดียว ซึ่งเป็นการพัฒนาที่โดดเด่นกว่าการนับแยกประเภทด้วยมือ[ 224 ] [ 227 ]ในปี 1981 Technicon ได้รวม Hemalog D เข้ากับเครื่องวิเคราะห์ Hemalog-8 เพื่อผลิต Technicon H6000 ซึ่งเป็นเครื่องวิเคราะห์การนับเม็ดเลือดครบถ้วนและการแยกประเภทแบบรวมกันเครื่องแรก เครื่องวิเคราะห์นี้ไม่เป็นที่นิยมในห้องปฏิบัติการโลหิตวิทยาเนื่องจากต้องใช้แรงงานมากในการใช้งาน แต่ในช่วงปลายทศวรรษ 1980 ถึงต้นทศวรรษ 1990 ระบบที่คล้ายกันนี้ถูกผลิตอย่างแพร่หลายโดยผู้ผลิตรายอื่น เช่นSysmex , Abbott , RocheและBeckman Coulter [ 228 ]
หมายเหตุอธิบาย
- ↑แม้ว่าโดยทั่วไปจะเรียกเช่นนั้น แต่เกล็ดเลือดไม่ใช่เซลล์ในทางเทคนิค: พวกมันเป็นชิ้นส่วนของเซลล์ที่ก่อตัวขึ้นจากไซโตพลาซึมของเมกะคาริโอไซต์ในไขกระดูก [ 6 ]
- ↑ข้อมูลที่ใช้ในการสร้างช่วงอ้างอิงมักจะได้มาจากบุคคล "ปกติ" แต่เป็นไปได้ที่บุคคลเหล่านี้จะมีโรคที่ไม่แสดงอาการ [ 34 ]
- ↑ในความหมายที่กว้างที่สุด คำว่า flow cytometryหมายถึงการวัดคุณสมบัติของเซลล์แต่ละเซลล์ในกระแสของเหลว [ 49 ] [ 50 ]และในแง่นี้ เครื่องวิเคราะห์โลหิตวิทยา (ยกเว้นเครื่องที่ใช้การประมวลผลภาพดิจิทัล) ถือเป็น flow cytometer อย่างไรก็ตาม คำนี้มักใช้ในการอ้างอิงถึงวิธีการกระเจิงแสงและฟลูออเรสเซนซ์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งวิธีการที่เกี่ยวข้องกับการระบุเซลล์โดยใช้แอนติบอดีที่มีฉลากซึ่งจับกับเครื่องหมายบนพื้นผิวเซลล์ ( immunophenotyping ) [ 49 ] [ 51 ]
- ↑นี่ไม่ใช่กรณีเสมอไป ตัวอย่างเช่น ในธาลัสซีเมียบางประเภท จำนวนเม็ดเลือดแดงสูงเกิดขึ้นควบคู่ไปกับฮีโมโกลบินต่ำหรือปกติ เนื่องจากเม็ดเลือดแดงมีขนาดเล็กมาก [ 123 ] [ 124 ]ดัชนีเมนเซอร์ซึ่งเปรียบเทียบ MCV กับจำนวนเม็ดเลือดแดง สามารถใช้เพื่อแยกแยะระหว่างภาวะโลหิตจางจากการขาดธาตุเหล็กและธาลัสซีเมียได้ [ 125 ]
- ↑เครื่องมืออัตโนมัติจัดกลุ่มเซลล์ทั้งสามประเภทนี้ไว้ด้วยกันภายใต้การจำแนกประเภท "แกรนูโลไซต์ที่ยังไม่เจริญเต็มที่" [ 142 ]แต่จะนับแยกกันในการนับแยกประเภทแบบแมนนวล [ 143 ]
- ↑ค่า RDW จะสูงมากเมื่อแรกเกิดและค่อยๆ ลดลงจนถึงอายุประมาณหกเดือน [ 178 ]
- ↑เรื่องเล่าที่ไม่ได้รับการยืนยันระบุว่า วอลเลซประดิษฐ์เครื่องนับคูลเตอร์ขึ้นเพื่อศึกษาอนุภาคในสีที่ใช้กับ เรือของ กองทัพเรือสหรัฐฯเรื่องเล่าอื่นๆ อ้างว่าเดิมทีเครื่องนี้ได้รับการออกแบบในช่วงสงครามโลกครั้งที่สองเพื่อใช้ในการนับแพลงก์ตอน อย่างไรก็ตาม วอลเลซไม่เคยทำงานให้กับกองทัพเรือ และงานเขียนแรกๆ ของเขาเกี่ยวกับอุปกรณ์นี้ระบุว่ามันถูกใช้เพื่อวิเคราะห์เลือดเป็นครั้งแรก เรื่องราวเกี่ยวกับสีถูกถอนออกจากเอกสารที่จัดทำโดยมูลนิธิวอลเลซ เอช. คูลเตอร์ในที่สุด [ 212 ]